支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识(2023)

支气管肺泡灌洗液细胞学检测是临床常用的检验项目之一,在肺部疾病的诊断、鉴别诊断、指导临床治疗中具有重要意义。该文通过介绍支气管肺泡灌洗液细胞学检验目的、标本采集、检验程序、报告模式、临床意义等内容,使其操作规范化、标准化,更好地发挥临床检验价值。

咯利普兰对大鼠哮喘模型肺组织磷酸二酯酶及IL-4的影响

目的为阐明大鼠哮喘模型肺组织cAMP-PDE活性升高的相关原因和意义,研究了咯利普兰(rolipram,Rol)对大鼠哮喘模型的肺功能、肺组织中磷酸二酯酶(PDE)活性和IL-4含量的影响。方法采用卵白蛋白致敏后重复抗原攻击制备哮喘模型,测定肺功能,肺组织cAMP-PDE活性、PDE4的活性和IL-4含量,分类计数外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞。结果哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性与正常对照组相比均升高(P<0·05),致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE活性中PDE4活性比例较高,约占70%。Rol剂量依赖性增加哮喘大鼠肺顺应性,降低肺阻力,抑制增加的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE和PDE4活性,降低肺组织IL-4含量。以Rol(1mg·kg-1,po)作用最明显。哮喘大鼠的肺组织cAMP-PDE和PDE4活性与IL-4存在相关性(P<0·05)。此外,Rol还能明显抑制哮喘大鼠BALF中和外周血炎症细胞数目,明显抑制BALF中多形核细胞及血中EOS的比例(P<0·05)。结论致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺功能明显恶化,肺组织IL-4含量、cAMP-PDE活性明显升高,其中cAMP-PDE活性中以PDE4为主,且cAMP-PDE活性、PDE4活性与肺组织中IL-4密切相关。Rol能有效抑制哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性的升高,降低IL-4含量,改善肺功能。

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病氧化应激、沉默信息调节因子1表达的影响

目的探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠氧化应激及沉默信息调节因子(Sirt)1表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味20、10、5 g/kg剂量组,10只/组。香烟烟熏加脂多糖制备COPD动物模型,造模30 d。第31天起,对正常组、模型组灌胃(ig)生理盐水10 ml/kg,3个二陈汤加味组分别以20、10、5 g/kg剂量ig,连续14 d。检测肺功能、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量;酶联免疫法(ELISA)测定外周血单个核细胞中Sirt1浓度,酶联免疫荧光法测定外周血单个核细胞中Sirt1活性,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中Sirt1 mRNA表达,光镜观察炎细胞及肺组织病理形态。结果与正常组比较,模型组肺匀浆中SOD和GSH-Px活性均显著降低(均P<0.01),MDA含量显著增加(P<0.05),支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎细胞总数和中性粒细胞数均显著增高(均P<0.01),模型组外周血单个核细胞中Sirt1 mRNA表达,Sirt1含量及其活性均显著减低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味10、20 g/kg剂量组BALF中炎细胞计数、中性粒细胞和巨噬细胞数显著减少(P<0.05或P<0.01);GSH-Px和SOD活性均显著增高,MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),二陈汤加味10、20 g/kg剂量组外周血单个核细胞中Sirt1 mRNA表达,Sirt1含量及其活性均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论二陈汤加味有抗氧化损伤作用,其可能通过增加SOD和GSH-Px活性,减少MDA生成,增强Sirt1基因的表达,提高Sirt1活性,发挥抗氧化损伤而保护肺的结构与功能。

微支气管肺泡灌洗液可溶性髓细胞触发受体对呼吸机相关性肺炎早期诊断价值

目的探讨采用微支气管肺泡灌洗技术获得支气管肺泡灌洗液中可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）表达对呼吸机相关性肺炎早期诊断价值。方法对112例在机械通气前无肺部感染，行机械通气48h后出现发热、气管支气管内分泌物增多脓性，临床疑诊VAP患者，通过微支气管肺泡灌洗技术获取BALF液体，测定BALF中sTREM-1、血清CRP水平及临床肺部感染积分（cPIS）。应用受试者工作特征（ROC）曲线来分析上述指标对VAP的诊断价值。结果与非VAP患者比较，VAP患者在临床疑诊当天BALF中sTREM-1、血清CRP水平及CPIS评分明显升高（P〈0．01）。行ROC曲线分析，显示BALF中sTREM-1水平153．18pg／mL时诊断VAP有最佳的敏感性和特异性，分别为86．49％和84．21％，ROC曲线下面积为0．882，诊断价值优于血清CRP和CPIS（ROC曲线下面积分别为0．723和0．823）。结论BALF中sTREM-1水平〉153．18pg／mL时，有利于早期诊断VAP。

杂种犬急性呼吸窘迫综合征模型的建立

目的 建立杂种犬肺内源性、外源性急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)模型。方法 健康雄性杂种犬 12只随机分为肺内源性ARDS模型组和肺外源性ARDS模型组 ,每组 6只。采用静脉注射油酸形成肺外源性ARDS模型 ,应用十六烷磺基丁二酸钠盐气管内吸入形成肺内源性ARDS模型。动态观察ARDS模型犬气体交换指标和肺不同部位 (肺尖叶、肺心叶和肺膈叶 )支气管肺泡灌洗液 (BALF)中部分炎性介质 (TNF α ,IL 1β,IL 6 )的变化。 结果 肺损伤后模型犬氧合指数明显恶化 ,肺内源性ARDS模型肺尖叶和肺心叶BALF中炎性介质水平明显高于肺外源性ARDS模型。结论 本实验成功建立了肺内 /肺外不同源性ARDS模型 。

间质性肺疾病支气管肺泡灌洗液中内皮素的检测及其意义

目的 探讨内皮素 ( ET)在间质性肺疾病 ( ILD)发生发展中的作用及其诊断价值。方法 利用放射免疫直接测定法 ,检测 1 0例肺结节病和 8例特发性肺纤维化 ( IPF)患者外周血和支气管肺泡灌洗液 ( BALF)中内皮素的含量 ,并与 8例健康非吸烟者对照。结果 肺结节病和 IPF患者血浆和 BAL F中 ET的含量分别为 62 .1 4± 2 9.2 2 ng/L ,1 7.4 0± 2 .4 1 ng/L和 76.92± 71 .90 ng/L,1 0 .4 0± 3.1 3ng/L,均明显高于正常对照组 ( 2 0 .0 8± 8.37ng/L 和 4 .0 4± 0 .5 5 ng/L) ,P <0 .0 1 ;研究组 BALF中 ET与 Pa O2 呈负相关 ( r=- 0 .5 38,P<0 .0 1 ) ,与细胞总数呈正相关 ( r =0 .64 9,P <0 .0 1 )。其中结节病和 IPF的 BAL F中 ET水平分别与淋巴细胞和中性粒细胞呈明显正相关 ( r =0 .71 2 ,P <0 .0 1 ;r =0 .81 3,P <0 .0 1 )。结论 ET在肺结节病和 IPF发生发展中起重要作用 ,并可做为判断疾病活动性的一项参考指标。

基质金属蛋白酶-9抑制剂对犬体外循环肺损伤的影响

目的研究外源性基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)抑制剂多西环素(Doxycycline)对体外循环(CPB)引起肺损伤的保护作用。方法将20只健康杂种幼犬(体重10～12kg),采用随机数字表法随机分为对照组(n=10)和实验组(n=10);对照组:CPB前后不采取任何肺保护措施;实验组:CPB术前3d每天饲料拌食多西环素(30mg/kg体重)。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆MMP-9浓度;监测两组犬血流动力学和呼吸参数,计算术前和术后肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)和呼吸指数(RI);比色法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)髓过氧化物酶(MPO)活性;考马斯亮蓝G-250法测定BALF总蛋白。CPB后,在光学显微镜和电子显微镜下观察肺组织形态学改变;计算肺组织干湿重系数(W/D)。结果两组犬血浆MMP-9浓度随CPB时间延长而显著增高,CBP150min和270min时实验组血浆中MMP-9含量较对照组显著下降(9.45±5.29ng/mlvs.18.66±5.90ng/ml,t=3.664,P=0.005;16.63±2.90ng/mlvs.26.17±5.96ng/ml,t=5.216,P=0.001)。实验组MPO活性,BALF中总蛋白浓度,肺组织W/D,术后A-aDO2和RI均较对照组均明显减低,差异有统计学意义(t=5.622,P=0.000;t=5.081,P=0.001;t=2.266,P=0.050;t=4.927,P=0.001;t=6.679,P=0.000)。肺组织病理和电子显微镜显示实验组损伤明显减轻。结论多西环素通过抑制MMP-9的分泌,降低细胞基底膜的降解,减轻肺泡白细胞浸润和肺水肿,可起到对肺的保护作用。