不同光照强度对1 a生木榄苗木生理特征的影响

为探究1 a年生木榄[Bruguiera gymnorhiza(L.)Lam.]苗木对光照适应能力,采用光照强度模拟控制试验对木榄苗木进行处理,经20%,40%,60%,80%,100%光照强度处理后,测定木榄苗木株高、基径、叶绿素总含量、净光合速率、丙二醛含量、脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性,通过相关性和主成分分析木榄苗木受光照影响情况。结果表明:1)60%光照强度环境木榄苗木株高生长最快,100%光照强度环境木榄苗木基径生长最快;2)在遮阴环境下,叶绿素总含量随光照强度增大而减少,但净光合速率随光照强度增大,表现为先增大再减少,且60%光照强度与80%,100%光照强度叶绿素总含量、净光合速率没有显著差异;3)60%光照强度环境下,木榄丙二醛含量、脯氨酸含量均显著低于20%光照强度环境,但超氧化物歧化酶活性显著高于20%光照强度环境;4)60%光照强度环境下,净光合速率、丙二醛含量、脯氨酸含量与100%光照强度相比均无显著差异,但超氧化物歧化酶活性显著高于100%光照强度环境;5)通过相关性和主成分分析发现,60%光照强度环境木榄苗木生长最佳。因此,1 a生木榄苗木对60%光照强度环境适应性较其他光照环境强,100%光照强度对1 a生木榄苗木具有一定光抑制作用,而20%和40%光照强度却不能满足1 a生木榄苗木对光照的需求。研究结果可为木榄苗木在生态修复过程中适当的进行遮阴处理提供数值参考。

红树木榄生境中可培养细菌物种多样性及其体外抗乙肝病毒活性研究

红树生境中微生物菌群丰富,其次生代谢产物结构新颖,是挖掘新型药物的重要来源。该研究利用纯培养技术和16S rRNA分子生物学技术确定细菌种属,并进行物种多样性分析;以HepG2.2.15细胞株为模型,通过MTT和PCR技术测试细菌代谢产物的抗乙肝病毒活性;使用LC-HRMS技术对活性菌株代谢产物进行初步分析,初步评价木榄沉积物、根、叶以及胚轴的可培养细菌多样性以及细菌代谢物生物活性,寻找抗乙肝病毒的药源菌株。结果表明:(1)共获得细菌59种,分属于4门5纲14目23科36属,其中芽孢杆菌为优势菌属;菌株GXIMD07402、GXIMD07665、GXIMD07384分别为Pseudooceanicola属、Thioclava属和Aestuariibaculum属的潜在新种。(2)抗乙肝病毒活性结果显示GXIMD07366、GXIMD07616、GXIMD07384、GXIMD07550、GXIMD07445X提取物能显著降低HepG2.2.15细胞上清液中HBV DNA水平(P<0.05),抑制率分别为51%、47%、63%、52%、47%。(3)初步鉴定强活性菌株GXIMD07384的4个主要代谢产物有adenosine、cyclo(L-Pro-L-OMet)、acremine G和7,8-dimethylbenzo[g]pteridine-2,4(1H,3H)-dione。综上认为,木榄生境中可培养细菌物种多样性丰富且含有能产生抗乙肝病毒活性化合物的菌株。该研究结果为后续海洋微生物资源的应用提供了基础。

药用红树木榄胚轴抗HBV化学成分的研究

红树木榄(Bruguiera gymnorhiza)胚轴为京族常用治疗乙肝中草药。为研究木榄胚轴中化学成分及其抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)活性,该文采用MTT法和实时荧光定量PCR方法测定木榄胚轴不同萃取部位抗HBV活性,使用现代色谱和波谱方法对活性萃取部位的化学成分进行分离鉴定,并测试获得的化学成分抗HBV活性。结果表明:(1)红树木榄胚轴的正丁醇萃取部位具有抗HBV活性;(2)从中分离了11个化合物,分别鉴定为尿嘧啶(1)、胸腺嘧啶(2)、腺嘌呤核苷(3)、oryzalactam (4)、正丁基-O-D-吡喃果糖苷(5)、nortetillapyrone (6)、(4R,6S)-4-methoxyl-2,3-dihydroaquilegiolide (7)、(4R,6S)-2-dihydromenisdaurilide (8)、没食子儿茶素(9)、1-(4-hydroxy-3-methoxy)-phenyl-2-[4-(1,2,3-trihydroxypropyl)-2-methoxy]-phenoxy-1,3-propandiol (10)和(-)-南烛木树脂酚-9-O-β-D-木吡喃糖苷(11),其中化合物4、5、7和8为首次从药用红树木榄中获得,化合物4具有抗HBV活性,其抑制率为23.59%。该研究结果丰富了木榄胚轴抗HBV化学成分。

海南东寨港木榄种群结构与数量动态变化特征

于2021年,以海南东寨港国家级红树林保护区内建设的固定样地(1 hm^(2))中的木榄种群作为研究对象,采用生态学中径级代替龄级方法对其种群的结构特征和种群的数量动态变化特征进行分析研究。结果表明:①此区域的木榄种群径级结构呈纺锤型,Ⅰ—Ⅳ龄级的个体数量之和占种群个体总数的75.4%,Ⅳ龄级后植株个体数量降低趋势明显。②数量动态变化指数反映出该区域的木榄种群为增长型的种群,但种群较为不稳定,外界干扰下种群数量增长趋势不显著。③此区域的木榄种群的存活曲线属于Deevey-Ⅲ类型,意味着其种群的低龄级阶段个体的死亡率相对较高,高龄级阶段个体死亡率趋于平稳。④此区域木榄种群的静态生命表、死亡率曲线、消失率曲线以及生存分析反映出该区域的木榄种群在低龄级阶段的动态变化相对较为剧烈,发展到高龄级阶段种群的动态变化相对平稳。⑤该区域木榄种群数量的时间序列分析也反映出,低龄级个体数量经历2~3个龄级时间后种群数量均逐渐下降,中龄级的个体数量在经历2~9个龄级时间的种群发育过程中,种群个体数量呈现先增加后降低。种群总体个体数量随着龄级时间的增加呈现逐渐降低的趋势。

外来红树植物拉关木对木榄的化感作用

探讨外来速生红树植物拉关木(Laguncularia racemosa)扩张过程中潜在的化感作用,为其入侵风险评估提供参考.通过室内栽培实验测定拉关木根、枝、叶、果的水浸液在不同质量浓度(0.1,0.2,0.3,0.4,0.5g/mL)下对木榄(Bruguiera gymnorhiza)幼苗生长的化感作用.结果表明,各器官水浸液对木榄幼苗生长的影响表现为"低促高抑",质量浓度为0.5g/mL时,抑制作用最强.各器官水浸液对木榄幼苗生长的抑制作用强弱顺序为:枝>果>根>叶.各器官水浸液对木榄幼苗叶绿素含量均表现为"低促高抑";木榄幼苗根系活力随拉关木根、叶、果的水浸液浓度的升高呈先升后降的变化趋势,而随枝水浸液浓度的升高,木榄幼苗的根系活力呈下降的变化趋势;丙二醛含量、游离脯氨酸含量和相对电导率大小均随各器官水浸液浓度的升高呈先降后升的变化趋势.

红树植物木榄叶中挥发油的化学成分

以正己烷为溶剂,采用回流提取法提取红树植物木榄叶中的挥发油,运用毛细管气相色谱—质谱联用技术分离检测得到40个峰,鉴定了其中的32种成分,被鉴定成分占挥发油总量的91.92%,其主要成分为烷烃类(30.31%)、萜类化合物(25.22%)、芳香化合物(14.07%)、酸(10.60%)、酯(5.36%)和烯(3.49%)。

红树植物木榄胚轴中的挥发性成分和脂肪酸成分分析

应用毛细管气相色谱-质谱联用技术对红树植物木榄胚轴中挥发性成分和脂肪酸成分进行了分析检测,检测到挥发性成分30个,鉴定了其中的27种成分,占所检测挥发性成分总量的97.01%,以烷烃类为主,占鉴定成分的67.43%,还有酸、酯及萜类化合物等;检测到脂肪酸组分23种,确定了其中的19种,脂肪酸检出量为97.81%,其中饱和脂肪酸占64.87%,不饱和脂肪酸占35.13%。

红树植物木榄的活性成分研究概况

长链脂肪酸、二萜、三萜、甾醇、黄酮、二硫化合物及鞣质是红树植物木榄的主要化学活性成分。为了得到这些化合物,研究了该红树植物的不同部位,如花、果、叶、根、皮及木部。一些化学成分的药理活性检测结果显示了良好的抗炎、抗真菌、抗白蚁、杀虫和抑制肿瘤生长等作用。

影响木榄叶片总黄酮含量的主因素分析

对中国南部3省6个红树群落中木榄叶片的总黄酮含量和影响总黄酮含量变化的环境因子进行了分析。结果显示：不同红树群落中木榄叶片总黄酮含量（y）与环境中的年均气温（鄹呈现明显的负相关（y=350．191-13．435X,r=-0．903，P=0．014），而与盐度、相对湿度、采样温度、年降雨量、年日照时间以及土壤pH等环境因子无显著的相关性。对海南东寨港和文昌2个红树群落中木榄叶片总黄酮含量的季节性变化规律分析结果表明这两个红树群落中的木榄叶片总黄酮含量在12月份左右最高，3-9月份相对偏低，这种变化可能与低温有利于黄酮生物合成有关。上述研究结果表明环境中的年均气温是影响木榄叶片中黄酮类化合物生物合成的主要因素，低温有利于加强黄酮类化合物的生物合成途径。

木榄种源引种深圳湾后幼苗生理生态研究

将海南琼山、文昌、三亚 ,广西防城 ,雷州海康 ,廉江高桥及深圳福田本地的木榄胚轴 ,培育在深圳福田相同生境中 ,对其一龄幼苗的形态、生长和含水量、叶绿素、游离脯氨酸、过氧化氢酶、电导率、光合作用及蒸腾作用等生理指标进行定量分析 ,结果表明 :不同来源的幼苗存活率、地径生长和生理生态指标存在显著差异 ,其中高桥、琼山、三亚的种源存活率较高、生长较好 ;光合速率和蒸腾速率以琼山、三亚种源的较高 ;福田种源的过氧化氢酶活性最高 ,高桥种源的游离脯氨酸含量最高。结合深圳福田实际生境条件 ,应用坐标综合评定法 。

Pestalotiopsis adusta次级代谢产物对HeLa细胞抑制作用

目的研究木榄枝内生真菌的次级代谢产物,探讨其抗肿瘤活性。方法应用正相硅胶柱色谱、薄层色谱、羟丙基葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和重结晶等方法等多种方法分离纯化,用NMR和MS等波谱技术解析化合物的结构,采用MTT法筛选具有抑制肿瘤细胞生长活性的化合物。结果共分离鉴定出12个化合物,分别为5-甲氧基-4,6-二甲基-7-O-α-L-鼠李糖基-异苯并呋喃酮(1)、7-羟基-5-甲氧基-4,6-二甲基-异苯并呋喃酮(2)、海绵尿苷(3)、1-(2-脱氧-D-呋喃核糖基)胸腺嘧啶(4)、2-苯乙基-α-D-吡喃甘露糖苷(5)、2,3-二羟基苯乙醇(6)、4-羟基苯乙基乙酸酯(7)、4,3'-二羟基苯乙基丙酸酯(8)、N-(4-羟基苯乙基)乙酰胺(9)、3-丙基-吲哚(10)、3β,5α,9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6酮(11)、(5S,1'R)-4,5-二氢-5-(1'-羟基)乙基-2-(3H)-呋喃酮(12)。结论 12个化合物均为首次从该内生真菌中分离得到,化合物2、7、8、11对子宫颈癌细胞(HeLa)均有抑制作用。

盐度和光因子对大亚湾木榄种胚萌根的影响

探讨了不同盐度、砂培和水培条件下木揽（Ｂｒｕｇｕｉｅｒａ ｇｙｍｎｏｒｈｉｚａ）种胚萌根的情况。结果表明：砂培（黑暗）７～２８ｄ，木榄种胚的各盐度处理组均能萌根展叶；水培（昼夜交替）下的木榄种胚只能在淡水和低盐度处理中萌根；水培（全光照）下所有盐度处理均无法萌根。提示光因子对木榄种胚萌根有抑制作用，低盐度对其萌根有利。

红树林植物木榄水通道基因的克隆和表达

根据植物水通道基因保守区设计简并引物,采用RT-PCR方法,从木榄树叶中分离出水通道基因的cDNA片段;3′RACE获得3′端cDNA序列;再经5′RACE获得5′端部分cDNA序列,命名为PIP2,GenBank登录号为EF126757。该基因全长843个碱基,编码281个氨基酸,具有典型的植物水通道基因结构。该基因编码的蛋白质与含羞草(PIP2;5)、欧洲葡萄(PIP)、拟南芥(PIP3)等水通道蛋白的同源性分别为90%、91%、88%。Northern杂交分析表明,该基因在木榄树不同器官中的表达差异明显:根部有较高的表达水平,茎部较弱,而在叶中只能检测到微弱的信号。

从木榄叶片超微结构所受的影响评估外来种拉关木的化感作用

探讨外来速生红树植物拉关木(Laguncularia racemosa)扩张过程中潜在的化感作用,为其入侵风险评估提供参考。通过室内栽培试验测定拉关木根、枝、叶、果的水浸液不同质量浓度(0.1 g·mL^(-1)、0.5 g·mL^(-1))对我国乡土红树植物木榄(Bruguiera gymnorhiza)幼苗叶片超微结构的影响。结果表明,在拉关木根、叶、果的水浸液低浓度(0.1 g·mL^(-1))处理下,木榄幼苗的叶肉细胞内的叶绿体紧密排列在细胞壁周围,线粒体结构保持完好;而在拉关木枝的水浸液低浓度(0.1 g·mL^(-1))处理下,木榄幼苗叶肉细胞内的液泡轻微皱缩,出现轻微的质壁分离现象。拉关木枝、果水浸液高浓度(0.5 g·mL^(-1))处理下,木榄幼苗叶片叶肉细胞的叶绿体内的淀粉粒变多,变大,线粒体内部结构出现降解;拉关木根的水浸液高浓度(0.5 g·mL^(-1))处理下,部分叶绿体结构受到破坏,但线粒体结构基本保持较好;而在拉关木叶的水浸液高浓度(0.5 g·mL^(-1))处理下,木榄叶片叶肉细胞的超微结构基本保持完好,表明拉关木叶水浸液对木榄幼苗的化感抑制作用弱。本研究中拉关木各器官高浓度(0.5 g·mL^(-1))水浸液对木榄幼苗叶片超微结构的化感作用强弱顺序为:枝>果>根>叶。

木榄细胞膜Na^+/H^+逆向运输蛋白BgSOS1功能的初步验证

根据木榄BgSOS1的序列信息从木榄中克隆到了全长的BgSOS1基因,该片段包含1个3 462 bp的开放阅读框,可编码1 153个氨基酸的多肽.生物信息学的分析结果表明:该氨基酸序列所编码的蛋白与拟南芥、番茄、水稻、小麦、盐芥和杨树的SOS1蛋白高度同源,同源性分别为63.86%,66.61%,62.18%,60.19%,63.97%和75.97%;BgSOS1蛋白的N端含有12个跨膜的结构域,C端为1个较长的胞内结构域.尽管单个BgSOS1的表达并不能提高转基因酵母的抗盐性,但SOS1,SOS2和SOS3共表达的酵母,其抗盐性明显提高,这表明SOS2/SOS3蛋白激酶复合体可能通过调控BgSOS1的Na+/H+交换功能来提高木榄的抗盐机理.

珠海淇澳岛几种红树植物引种的初步研究

将红树植物正红树（Rhizophora apiculata）、海莲（Bruguiera sexangula）和木榄（B．gymnorhiza）从海南岛引种到珠海淇澳·担杆岛省级自然保护区，苗期生长正常。1a生的正红树、海莲和木榄平均苗高分别为45．3cm、28．7cm和56．7cm，平均地径分别为1．34cm、0．64cm和1．60cm，保存率分别为40．9％、59．5％和70．5％。3种红树植物苗期抗寒性大小依次为木榄〉海莲〉正红树。正红树、海莲和木榄3种红树植物能基本适应引种地的自然条件，对其生长发育特性尚需进行跟踪调查。

人工海水对秋茄、木榄幼苗蛋白质含量与SOD活性的影响

利用人工海水（浓度为２４‰和３３‰）处理红树植物秋茄、木榄幼苗，测定其营养器官蛋白质含量及超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）活性。结果表明：①随着人工海水浓度增加，秋茄幼苗根、叶的蛋白质含量均有升高，茎的蛋白质含量变化不明显；木榄幼苗各营养器官的蛋白质含量均显著升高；２种植物叶中蛋白质含量都较根、茎增加明显。②随着人工海水浓度增高，秋茄幼苗各营养器官中ＳＯＤ活性都呈先下降后上升的变化趋势；木榄茎、叶中ＳＯＤ活性显著下降，根中ＳＯＤ活性则先升后降。

秋茄和木榄耐盐内生细菌筛选及鉴定

为了改良和利用盐碱地,以秋茄(Kandelia obovata)和木榄(Bruguiera gymnorhiza)为原材料,对耐盐内生细菌进行分离并鉴定。结果表明:从2种植物的根、茎、叶中初步分离出耐盐的内生细菌96株,均为革兰氏阳性菌;提取各菌株的DNA并扩增其16S rDNA序列,以HinfⅠ、HaeⅢ、MspⅠ和TaqⅠ4种酶进行酶切,并统计遗传型,选取不同组合类型的代表菌株进行16S rDNA序列测定,通过BLAST比对分析并利用MEGA软件建立发育树等分子鉴定手段初步推断,所分离的内生细菌分别为越南芽孢杆菌(Bacillus vietnamensis)、阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、白翎芽孢杆菌(Bacillus baekryungensis)和巴氏葡萄球菌(Staphylococcus pasteuri);对这5种菌的脱氨酶活性进行测定,越南芽孢杆菌的值最高。

木榄耐盐内生细菌分离及其16S rDNA鉴定

[目的]从木榄根茎叶中分离筛选鉴定耐盐碱菌株。[方法]以不同盐浓度的LB培养基分离筛选木榄根茎叶中耐盐内生细菌,对其进行生理生化分析和分子鉴定。[结果]从根茎叶中初步分离出耐盐的内生细菌24株,经革兰氏染色、过氧化氢试验、吲哚试验与甲基红试验均为阳性,淀粉水解酶有1株细菌为阴性。提取各菌株的DNA并扩增其16S rDNA序列,以HinfⅠ等4种酶进行酶切,选择不同类型酶切结果的代表菌株测序,BLAST比对分析并利用MEGA软件建立发育树,初步推断出,所分离的内生细菌分别为越南芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、白翎芽孢杆菌和巴氏葡萄球菌。[结论]该研究为培育耐盐农作物提供了行之有效的技术理论基础。

海南木榄叶的蛋白鉴定及在Pb^(2+)、Cd^(2+)胁迫下差异蛋白的分析

木榄(Bruguiera gymnorhiza(L.)Lam.)是海南红树药用植物之一,为深入研究开发木榄叶的价值和功能,采用优化条件下BPP+酚抽提法的双向电泳技术,获得海南木榄叶的蛋白指纹图谱,并筛选出高表达蛋白;利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定高表达蛋白的酶水解产物及确定蛋白名称,并进行初步功能分析;另外,对重金属Pd^(2+)和Cd^(2+)胁迫木榄叶条件下的差异蛋白进行分离提取及鉴定。结果表明,海南木榄叶有60个高表达的蛋白,包括差向异构酶、DNA连接酶等42个蛋白,涉及木榄叶生长、发育、遗传及植物抗逆等多种功能;重金属Pd^(2+)和Cd^(2+)胁迫的差异蛋白分别有4个和6个,与植物生长、遗传及高效光合作用等植物功能有关。本研究不仅为进一步开发利用海南产木榄叶中的植物蛋白提供理论依据,也对发现木榄叶与重金属Pd^(2+)、Cd^(2+)胁迫相关的关键蛋白、理解海南岛的生态系统服务和生态效益具有一定的理论和实际意义。