基于NF-κB/NLRP3炎症小体探讨黄芪甲苷Ⅳ对系统性红斑狼疮模型小鼠免疫功能的影响

【目的】探讨黄芪甲苷Ⅳ对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠的治疗作用及机制。【方法】将40只雌性自发性MRL/lpr SLE模型小鼠随机分为5组,模型组、泼尼松组、黄芪甲苷Ⅳ组、黄芪甲苷Ⅳ+CHPG[核因子KappaB(NF-κB)通路激活剂]组和黄芪甲苷Ⅳ+尼日利亚菌素[NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)激活剂]组,每组8只。以8只雌性MRL/MpJ小鼠作为正常组。给药期间,称量体质量。给药结束后,称量脾脏、胸腺、肾脏质量,计算脏器指数,检测尿液样本中的24 h尿蛋白水平,血液样本中生化指标肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN),自身抗体[抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗snRNP/Sm抗体],炎症介质[白细胞介素(IL)-1β、IL-18]水平,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理损伤,Masson染色观察肾组织纤维化,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肾脏和脾脏组织中NF-κB/NLRP3炎症小体通路相关蛋白表达。【结果】与模型组比较,泼尼松组和黄芪甲苷Ⅳ组小鼠体质量增加,脾脏指数、胸腺指数和肾脏指数降低,血清ANA抗体、抗dsDNA抗体、抗snRNP/Sm抗体水平降低,SCr、BUN、24 h尿蛋白水平降低,IL-1β、IL-18水平降低,肾脏和脾脏组织中p-p65/p65、p-IκBα/IκBα、cleaved caspase-1/pro caspase-1比值及NLRP3蛋白相对表达量降低(均P<0.05),肾组织病理损伤和纤维化减轻,且2个给药组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。NF-κB激活剂和NLRP3炎症小体激活剂能够在一定程度上消除黄芪甲苷Ⅳ对SLE小鼠上述指标的改善作用。【结论】黄芪甲苷Ⅳ能够改善SLE小鼠的免疫功能,减轻肾损伤和炎症反应,其作用机制可能与其抑制NF-κB/NLRP3炎症小体途径的活化有关。

PLA2G4C通过p38/MAPK信号通路介导线粒体自噬促进DLBCL进展的实验研究

目的研究磷脂酶A2ⅣC组(phospholipase A2 groupⅣC,PLA2G4C)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的作用及其可能调节机制。方法通过免疫印迹法(Western blot)检测PLA2G4C在DLBCL组织和细胞中的表达。构建PLA2G4C过表达或敲低表达的DLBCL细胞系,后用自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)或p38抑制剂SB203580处理细胞24h。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PLA2G4C转染效率;Western blot检测PLA2G4C蛋白、线粒体自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ/Ⅰ,MAP1 LC3Ⅱ/Ⅰ),Beclin1,p62,PTEN诱导激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)和Parkin],p38/丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)通路相关蛋白[磷酸化p38/MAPK(phosphorylated-p38/MAPK,p-p38/MAPK)]表达水平;CCK-8法、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞增殖、侵袭和凋亡能力。进一步构建异种移植瘤裸鼠模型,观察PLA2G4C对裸鼠体内肿瘤生长及线粒体自噬的影响。结果DLBCL患者淋巴瘤组织中PLA2G4C蛋白表达显著高于反应性增生淋巴结组织(3.47±0.42 vs 1.01±0.02),差异具有统计学意义(t=-37.002,P<0.001);DLBCL细胞中PLA2G4C蛋白水平显著高于人淋巴母细胞样细胞系和B细胞淋巴瘤细胞系,差异具有统计学意义(F=73.771,P<0.001)。沉默PLA2G4C显著降低DLBCL细胞活力和侵袭能力,诱导细胞凋亡(t=6.909~11.390);过表达PLA2G4C后结果与之相反(t=2.392~19.778),差异具有统计学意义(均P<0.001)。且过表达PLA2G4C显著促进线粒体自噬的发生,而CQ或SB203580处理则可显著逆转PLA2G4C过表达对DLBCL细胞生物学行为及线粒体自噬的作用。体内裸鼠实验显示,敲低PLA2G4C显著抑制移植瘤裸鼠体内肿瘤生长及线粒体自噬相关蛋白表达,差异具有统计学意义(t=13.816~25.926,均P<0.001)。结论PLA2G4C在DLBCL中表达显著上调,可能通过促进p38/MAPK信号通路介导的线粒体自噬,促进肿瘤细胞增殖和侵袭,抑制细胞凋亡,参与DLBCL的发生发展。

VB12负载纳米零价镍固定地下水中U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)的效能研究

本研究用液相还原法制备了VB12负载纳米零价镍(VB12@nZVNi)复合材料,通过动态试验探讨了复合材料原位固定地下水中U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)的固定效果.运用Thomas、Yoon-Nelson模型对所得试验数据进行拟合,讨论VB_(12)@nZVNi固定U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)的性能.结果表明,VB_(12)@nZVNi材料对模拟U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)污染地下水有着较好的固定效果,对U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)的最大吸附量分别为106.96 mg·g^(-1)、103.92 mg·g^(-1).Yoon-Nelson、Thomas模型符合其动态吸附过程,且理论吸附量和半穿透率与实际值比较接近.因此,VB_(12)@nZVNi可以作为一种有前景的固定材料,用于含U(Ⅵ)/Se(Ⅳ)地下水的固定和净化处理.

培美曲塞联合顺铂或卡铂一线治疗ⅢB/Ⅳ期非小细胞肺癌临床观察

目的:观察培美曲塞联合铂类一线治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及不良反应。方法:69例经病理学或细胞学确诊的ⅢB/Ⅳ期初治非小细胞肺癌患者,予以培美曲塞联合顺铂或卡铂方案全身化疗。培美曲塞:500 mg/m2,第1天静脉滴注,顺铂:75 mg/m2,第1天静脉滴注,卡铂剂量AUC=5,第1天静脉滴注,每21 d为1个周期,连用2～6个周期。进行疗效评价、不良反应分级及无进展生存期(progression-free survival,PFS)分析。结果:69例患者中非鳞癌56例,鳞癌13例,无完全缓解(CR)病例,部分缓解(PR)27例,稳定(SD)24例,进展(PD)18例,总有效率(CR+PR)为39.1%,疾病控制率(CR+PR+SD)为73.9%;非鳞癌患者有效率及疾病控制率均高于鳞癌患者(41.1%vs 30.8%和75.0%vs 69.2%),但差异无统计学意义(P>0.05);不同年龄、不同性别、ⅢB/Ⅳ期及培美曲塞联合顺铂或卡铂治疗组之间在有效率和疾病控制率方面差异无统计学意义。所有患者PFS为5.3个月,非鳞癌患者PFS优于鳞癌患者(5.4个月vs 4.5个月),但两者之间差异无显著性(P>0.05),腺癌患者PFS为5.6个月,与鳞癌患者相比差异有统计学意义(P=0.03);Cox回归多因素生存分析显示病理组织学类型对PFS有影响(P<0.05)。全组患者不良反应较轻,主要是骨髓抑制、消化道反应及乏力,多为Ⅰ～Ⅱ级。结论:培美曲塞联合联合顺铂或卡铂一线治疗晚期非小细胞肺癌不良反应轻、耐受性好,尤其对非鳞癌患者疗效可能更好。

SPE-HPLC测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定断血流胶囊中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法:色谱柱:Dikma Kromasil C_(18)柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相:甲醇-水(80:20);流速:0.8 mL·min^(-1);检测波长:250 nm;柱温:40℃。结果:醉鱼草皂苷Ⅳb在0.15～1.2μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),总平均加样回收率为98.8%(n=9)。结论:该方法简便、快速、有效、灵敏、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的定量分析方法。

HPLC测定FKⅣ号颗粒中芍药苷、绿原酸、虎杖苷及丹酚酸B的含量

目的:建立同时检测FKⅣ号颗粒中芍药苷、绿原酸、虎杖苷及丹酚酸B的HPLC含量测定方法。方法:采用HPLC含量测定法,色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,芍药苷检测波长为230 nm,绿原酸、虎杖苷、丹酚酸B检测波长为306 nm;柱温30℃,进样量10μL。结果:芍药在7.539-482.470μg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系(r=1.000),平均回收率为101.10%;绿原酸在2.003-128.166μg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系(r=1.000),平均回收率为100.76%;虎杖苷4.503-288.200μg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系(r=1.000),平均回收率为100.74%;丹酚酸B在4.621-295.752μg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.91%(r=0.999 8)。结论:该方法简便可靠,重复性好,可作为FKⅣ号颗粒中芍药苷、绿原酸、虎杖苷及丹酚酸B的含量测定方法。

在用国Ⅳ公交车燃用B5生物柴油的排放特性

以一辆满足国Ⅳ排放的柴油公交车为试验样车,在重型底盘测功机上分别进行燃用柴油和B5生物柴油的中国典型城市公交车循环（CCBC）排放特性试验,分析了该车燃用B5生物柴油CCBC循环的气态物和颗粒物排放特性.结果表明：CCBC循环的发动机工况主要集中在900~1 100r·min-1和200~500N·m,呈明显的低速、中低负荷特征;该车燃用柴油和B5低速行驶的总碳氢（THC）和NO_X、颗粒质量（PM）和颗粒数量（PN）单位里程排放因子较高,高速行驶的CO单位里程排放因子较高.与柴油比较,该车燃用B5的THC和NOX排放增加,CO和PM排放降低,PN排放基本相当.其中,车辆怠速、中低速加速行驶的THC排放率较高,中低速加速行驶的NO_X排放率相对较高,中高速加速、高速匀速行驶的PN较多是导致该车燃用B5的THC,NO_X和PN增加的主要原因.除低、中速加速CO排放较高,低速加速/减速/匀速PM排放率较高之外,其他工况的CO和PM排放降低是导致该车燃用B5的CO和PM降低的主要原因.

碲(Ⅳ)-碘化钾-罗丹明-B-聚乙烯醇体系高灵敏显色反应的研究

基于在聚乙烯醇存在下[Tel8]4-络阴离子与罗丹明B形成离子缔合络合物,发展了1个高灵敏分光光度测定碲的方法。显色反应的适宜介质是0.64~1.28mol/L的磷酸溶液。用平衡移动法和连续变化法确定离子缔合物的组成是(RhB)4·[TeI8]。此反应具有非常高的灵敏度,摩尔吸光系数ε600=1.65×106 L·mol-1·cm-1。方法有较好的选择性,可用于钢铁、硫磺及某些其它样品中痕量碲的分光光度测定。

贝伐珠单抗联合化疗对Ⅲb/Ⅳ期非鳞非小细胞肺癌患者疾病控制率及血清T细胞亚群水平的影响

目的分析贝伐珠单抗联合化疗对Ⅲb/Ⅳ期非鳞非小细胞肺癌(NSNSCLC)患者疾病控制率及血清T细胞亚群水平的影响。方法选取2015年1月~2017年2月我院收治的72例Ⅲb/Ⅳ期NSNSCLC患者,随机数字表法分为两组,各36例,对照组给予多西紫杉醇联合顺铂化疗,观察组给予贝伐珠单抗联合多西紫杉醇、顺铂治疗,比较两组治疗3个周期后客观有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)、肿瘤标志物[细胞角蛋白19片段(CK-19)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、癌抗原50(CA50)、癌胚抗原(CEA)]水平、血清T细胞亚群(CD+3、CD+4、CD+8)水平、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路[蛋白酶C(PKC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子kB(NF-kB)]mRNA表达、中位总生存期(mOS)、中位无进展生存期(mPFS)、毒副反应发生情况。结果观察组ORR、DCR(58.33%、86.11%)高于对照组(27.78%、61.11%)(P<0.05);观察组治疗3个周期后CK-19、TSGF、CA50、CEA低于对照组(P<0.05);观察组治疗后CD+3、CD+4与治疗前相比无显著差异(P>0.05),但高于对照组(P<0.05);观察组治疗3个周期后PKC、MAPK、NF-kB mRNA低于对照组(P<0.05);观察组mPFS、mOS长于对照组(P<0.05);两组胃肠道反应、粒细胞降低、血小板减少、贫血、白细胞下降毒副反应发生率比较无显著差异(P>0.05)。结论贝伐珠单抗联合化疗应用于Ⅲb/Ⅳ期NSNSCLC,可有效控制患者病情,延长患者mPFS、mOS,疗效显著,且能减小化疗对机体免疫功能影响,安全性较高,其机制可能与抑制PKC、MAPK、NF-kB通路有关。

重楼对膜性肾病大鼠肾脏核转录因子-κB活化及Ⅳ型胶原表达的影响

目的:探讨重楼对膜性肾病(membranous nephropathy,MN)大鼠肾脏核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活性及Ⅳ型胶原表达的影响。方法:采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制大鼠MN模型。随机分为模型对照组、重楼治疗组、雷公藤多苷治疗组(阳性对照组)及正常对照组。应用免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织内NF-κBp65及Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达水平;应用RT-PCR法检测各组大鼠肾组织NF-κB mRNA水平。结果:与模型组相比,重楼能明显抑制肾小球NF-κB活化(P<0.05)及ColⅣ分泌(P<0.01);两治疗组的NF-κB的mRNA表达明显低于模型组(P<0.05)。以上指标两治疗组间无统计学差异。结论:NF-κB的活化参与了MN的肾小球的病理损害过程,重楼对MN大鼠肾脏的保护作用可能与其抑制NF-κB活化有关。

新发现的伤寒杆菌ⅣB型菌毛致病性研究

目的 :研究伤寒杆菌菌株ⅣB型菌毛的致病特性。方法 :本研究将表达ⅣB型菌毛的的伤寒杆菌J341及另一插有强启动子Tac并表达ⅣB型菌毛的重组伤寒杆菌菌株TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别攻击人的THP 1细胞和小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ) ,利用细胞毒检测试剂盒检测细胞受到伤寒杆菌攻击后 ,伤寒杆菌对细胞的毒性作用 ;同时进一步采用实时荧光定量PCR法检测伤寒杆菌毒力岛上的ⅣB菌毛对人单核细胞的侵袭作用 ,分析表达ⅣB菌毛的伤寒杆菌菌株J341及TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别对THP 1细胞的侵袭作用 ,通过对细胞内侵入的伤寒杆菌的ⅣB菌毛基因 (pilS)和伤寒杆菌O抗原的聚合酶基因 (rfc)DNA的含量的检测 ,来比较进入胞内细菌含量的差别。结果 :比较发现J341及TyphiA2 1 6比TyphipilS∶∶kmr 对人的细胞有更强的毒性以及侵袭性 ,而对鼠的细胞毒性和侵袭性没有明显差异。结论 :说明伤寒杆菌ⅣB型菌毛与细菌侵入人体细胞的毒性和侵袭性密切相关 ;并且伤寒杆菌ⅣB型菌毛的侵袭性和细胞毒性具有种属特异性 ,即对人的单核细胞等细胞有致病性 ,而对鼠的巨噬细胞无致病性。

第ⅣB族非茂金属烯烃聚合催化剂研究进展

按配体类型,综述了近年来第ⅣB族非茂金属烯烃聚合催化剂研究进展,其配体类型包括:胺基类、酮亚胺类、吡唑类、苯氧亚胺类等。讨论了配体结构和电子效应对催化剂聚合活性及聚合物结构、分子量等的影响;概括了高活性第ⅣB族非茂金属烯烃聚合催化剂应具备的条件。

几种检查对Borrmann Ⅳ型胃癌术前诊断的意义

目的 寻找Borrmann Ⅳ型胃癌即皮革胃的有效诊断方法。方法 对30例皮革胃的诊断方法进行对比研究。结果 胃镜的诊断率为36％,X线钡透的诊断率为67％。B超的诊断率为100％。结论 B超检查对BorrmannⅣ型胃癌诊断有重要价值。

慈仁胶囊治疗Ⅲ_b、Ⅳ期非小细胞肺癌近期疗效观察

目的:观察慈仁胶囊治疗Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌的近期疗效。方法:60例符合标准的Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组和对照组,分别服慈仁胶囊和接受NP方案[即NVB(诺维本)+DDP(顺铂)]化疗4周期。测定两组治疗前和治疗后实体瘤疗效、症状积分、免疫状况、生存质量和不良反应等指标。结果:治疗组的瘤体缓解总有效率(CR+PR)为0,对照组为26.7%,有显著性差异(P<0.05);治疗组病灶稳定率为(CR+PR+SD)为86.7%,对照组的病灶稳定率为80%,无显著性差异(P>0.05)。治疗组和对照组均可改善症状,但前者明显优于后者(P<0.01)。治疗后治疗组CD3+、CD4+和NK细胞升高,对照组的CD3+和CD4+降低。治疗后两组的体质量和体力状况评分变化均无显著性差异(P>0.05),生活质量评分均升高,但治疗组优于对照组,有显著性差异(P<0.05)。治疗组没有发生不良反应,对照组白细胞减少发生率为53.3%,恶心呕吐发生率为66.7%,肝功能损害发生率为20%,偶见脱发、神经系统损害等不良反应。结论:慈仁胶囊治疗Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌,可稳定瘤体,有效改善肺癌症状和提高生活质量,提高机体细胞免疫力,无明显不良反应。

烯基环戊二烯基ⅣB族金属衍生物的合成和^(1)HNMR谱

6,6-二烷基富烯与烯丙基氯化镁发生环外双键的加成反应,形成1,1-二烷基-3-丁烯基环戊二烯基氯化镁,同苯乙炔基钠则和6-位碳上甲基或亚甲基的c:-H反应,环外双键移位得到乙烯基环戊二烯基钠。这些阴离子与ⅣB族金属氯化物反应合成了一系列新的烯基取代环戊二烯基金属衍生物。

60例ⅢB期和Ⅳ期肺癌的外科治疗

目的 :总结我院 1989年 1月 - 2 0 0 2年 4月 6 0例ⅢB期或Ⅳ期肺癌的手术治疗经验。方法 :6 0例中 ,属于ⅢB期的有 4 5例 ,Ⅳ期 15例。行全肺切除术 2 4例 (左全肺 10例 ,右全肺 14例 ) ,其中 16例经心包内处理肺血管 ;肺叶切除术 31例 ,包括 3例袖状切除加气管隆突重建术 ;剖胸探查 5例。同时行胸膜剥除、心包部分切除、部分上腔静脉切除再吻合、部分肋骨切除、纵隔淋巴结及锁骨上淋巴结清除或膈肌部分切除 4 2例 ,有 5例术前行化疗 1个疗程。术后随访 5 2例。结果 :术后早期死亡 2例。术后生存率 1年为 78 3% ,2年为 4 1 7% ,3年为 18 3%。结论

SPE-HPLC测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定断血流片中醉鱼草皂苷Ⅳb的含量。方法:色谱柱Dikma Kromasil C18柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相甲醇–水(80∶20),流速0.8ml/min,检测波长250nm,柱温40℃。结果:醉鱼草皂苷Ⅳb在0.7715～6.136μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.57%,RSD为0.56%(n=9)。结论:该方法简便、快速、有效、灵敏、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的定量分析方法。