与黄独(Dioscorea bulbifera)性别相关的RAPD-SCAR标记研究

对黄独(Dioscorea bulbiferaL.)14个居群42个单株的总DNA进行RAPD分析,并根据测序结果合成1对特异的SCAR引物,即5′-GGCTTCTGTCACTACATGGG-3′和5′-GGCTTCTGTCCAGTGCATCT-3′,对42个单株的总DNA进行检测,扩增到1条长681 bp的与雄性相关的特异片段。除形态上有一定变异的4个单株外,这个与雄性相关的RAPD-SCAR标记在黄独原变种的29个单株中验证准确,在可能为其变种的9个单株中部分验证准确,表明该RAPD-SCAR标记能够准确标记黄独的原变种及一些变种的雄性性别。

HPLC法测定黄药子中黄独乙素的含量

目的建立测定中药黄药子中黄独乙素含量的高效液相色谱方法。方法甲醇提取药材,氯仿萃取,高效液相色谱法测定,采用Symmetry C18(150 mm×3.9mm,5μm),以甲醇-水-磷酸(40∶60∶0.08)为流动相,流速0.8ml.min-1,检测波长为215nm。结果黄独乙素溶液在4.92～396.00mg.L-1时与其吸收值呈良好线性关系(r=0.9998),平均加样回收率99.80%,RSD=0.57%。结论本方法操作简便、快捷,结果准确、可靠,适用于黄药子中黄独乙素的含量测定。

黄药子水煎液HPLC指纹图谱研究

目的:建立湖南长沙黄药子水煎液HPLC指纹图谱。方法:应用Kromasil C18柱,0.1%乙酸水与纯色谱甲醇进行梯度洗脱,流速为0.8mL.min-1,检测波长280 nm,柱温为30℃。结果:精密度、重现性、稳定性试验中共有峰相对峰面积、相对保留时间的RSD均小于5.0%;不同产地黄药子相似度大于98.5%。结论:该方法简便、实用、可靠,可以作为评价黄药子药材质量及其制剂体外指纹图谱研究的基础。

黄药子配伍甘草对LO2细胞膜通透性影响的研究

目的:研究甘草配伍能减轻黄药子对人肝细胞(LO2)膜通透性的影响。方法:激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)对经二乙酸荧光素(FDA)染色后的LO2细胞进行实时动态荧光强度检测。通过比较荧光强度的降低率来考察黄药子及其甘草配伍后含药血清在短时间内对细胞膜通透性的影响。结果:LSCM记录细胞荧光强度变化,在10 min扫描停止时,黄药子各组荧光强度降低率与空白组有统计学差异(P<0.05),而甘草配伍组对荧光强度的影响较黄药子组有统计学差异(P<0.05),与空白组无差异(P>0.05)。结论:黄药子含药血清短时间内即影响肝细胞膜通透性,甘草配伍后可明显减弱损伤作用,黄药子引起肝损伤的机制可能是其对肝细胞膜的直接损伤作用,甘草配伍减毒作用与此途径有关。

黄药子抗炎活性成分的研究

目的 :研究黄药子的抗炎活性成分。 方法 :通过反复硅胶柱层析对黄药子氯仿部位的化学成分进行分离纯化 ,分别采用红外 (IR)、质谱 (MS)、核磁共振 (包括 1 H- NMR,1 3C- NMR以及 2 D- NMR)方法鉴定结构 ;并通过大鼠黄独乙素灌胃 ,考察其对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀及对大鼠棉球肉芽肿的影响。 结果 :分离鉴定了 5个化合物 ,黄独乙素 ( ) ,黄独丁素 ( ) ,硬脂酸 ( ) ,β-谷甾醇 ( ) ,胡萝卜苷 ( ) ;口服黄独乙素 5 0 m g/ (kg· d)及 2 0 0 mg/ (kg· d)对大鼠角叉菜胶性足跖肿及大鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用。 结论 :黄独乙素是黄药子抗炎活性成分之一。

黄药子的研究进展

综述了有关黄药子在化学成分、药理作用。

2D NMR研究新呋喃二萜类化合物的结构

从中药黄独 Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂｕｌｂｉｆｅｒａ Ｌ．中通过柱层析色谱分离得到 ３个化合物．其中 １个 为新骨架的呋喃二萜类化合物命名为ｎｅｏｄｉｏｓｂｕｌｂｉｎ，采用核磁共振（１Ｈ，１３Ｃ，ＤＥＰＴ，１Ｈ－１Ｈ ＣＯＳＹ，ＨＭＱＣ，ＨＭＢＣ，ＮＯＥＳＹ ａｎｄ ＴＯＣＳＹ）的波谱方法确定了它的结构和相对构型，其余 的 ２个化合物分别为 Ｄｉｏｓｂｕｌｂｉｎ Ｂ，５－ｕｒｅｉｄｏｈｙｄａｕｔｏｔｉｏｎ．

亚急性黄药子中毒的实验病理学研究

目的 研究黄药子对小鼠毒性作用的病理变化及其毒作用机制。方法 按1/4LD_(50),1/10LD_(50),1/30LD_(50)剂量给ICR小鼠连续灌服200％的黄药子水煎剂,观察中毒小鼠各主要器官的组织学与超微结构变化,酶组织化学检查及血清生化检测。结果 中毒小鼠肝细胞脂肪变性,糖原增多,严重者可见灶性坏死;肾小管上皮细胞变性、坏死。通过酶组织化学方法发现肝脏SDH酶和G-6-P酶活性下降,血清ALT和BUN升高。结论 黄药子毒作用的主要靶器官或靶组织为肝和肾。毒作用机理是对线粒体、内质网等膜性结构的破坏导致酶活性的降低,影响代谢。

黄独遗传多样性研究

采用ISSR标记技术研究了我国14个黄独样品的遗传多样性.从55条简单重复序列引物中筛选出9条多态性引物,共扩增出70条带,其中67条多态性带,多态性比率为95.71%,平均每条引物扩增出7.8条带.黄独原变种内Nei s基因多样性(h)为0.294 9,有效等位基因数(Ne)为1.491 1,Shannon多样性指数(I)为0.444 8.种水平h为0.326 3,Ne为1.552 9,I为0.488 3.基因分化系数(Gst)为0.782 1,基因流(Nm)为0.139 3.聚类分析表明来自海南省和台湾省的样品与我国内陆的样品较早分离.据此可将来自我国内陆的样品分为5组.ISSR聚类分析基本上支持依据形态特征对黄独变种的划分.同时实验结果也表明,云南可能是黄独在我国的分化中心.

中药黄独的化学成分研究

薯蓣属植物中药黄独 (DioscoreabulbiferaL .)的 75 %乙醇提取物经系统溶剂萃取后 ,从乙酸乙酯萃取部分分离得到 5个化合物 ,根据理化性质和谱学分析鉴定为 β 谷甾醇 (β sitosterol,Ⅰ ) ,黄独素B(diosbulbin B ,Ⅱ ) ,7,3′ ,4′ 三羟基 3 ,5二甲氧基黄酮 (caryatin ,Ⅲ ) ,7,4′ 二羟基 3 ,5 二甲氧基黄酮 (7,4′ dihydroxy 3 ,5 dimethoxyflavone ,Ⅳ ) ,5 ,7,3′ ,4′ 四羟基黄烷 3 醇 (5 ,7,3′ ,4′ tetrahy droxyflavan 3 ol,Ⅴ )。其中 (Ⅲ )、(Ⅳ )

黄独珠芽生长期内源激素及糖类物质含量的变化

测定了不同生长阶段的黄独(Dioscorea bulbifera)珠芽内源激素IAA,ZR,DHZR,GA3和ABA的含量,以及可溶性糖、淀粉和干物质的含量,研究其变化规律。结果表明,在珠芽嫩绿到表皮完全变褐的生长过程内源激素IAA,ZR,DHZR,GA3和ABA呈不同的变化曲线增加,表皮完全变褐时达到最高值[分别为516.1,1 525.4,417.5,1 068.2,855.7 ng/g(FW)],到珠芽成熟时这些激素含量又下降。可溶性糖、淀粉和干物质含量在珠芽从嫩绿到生长停止的过程中以不同轨迹增加,到珠芽生长停止时达到最高值(分别为18.0 mg/g,13.6%和27.0%)。以上结果说明,促进珠芽生长的内源激素IAA,ZR,DHZR和GA3的增加过程持续到珠芽表皮完全变褐,而ABA含量也到珠芽表皮完全变褐时才急剧上升到最高值,所以在珠芽表皮完全变褐时生长未停止,到茎蔓枯黄时可溶性糖、淀粉和干物质的含量才达最高值。本研究结果为珠芽的生长调控和适时采摘提供参考。

黄药子水提物对小鼠肝毒性及其线粒体ATP酶和超氧化物歧化酶的抗氧化机制

目的探讨黄药子水提物(WED)对小鼠肝毒性,以及线粒体三磷酸腺苷(ATP)酶和超氧化物歧化酶(SOD)的抗氧化作用机制。方法雄性ICR小鼠分别ig给予WED 19.6,28.0和40.0 g·kg^(-1)连续给药14 d,检测肝系数,血清中碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,肝组织中ATP、活性氧(ROS)和脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量以及总SOD酶活性;同时,检测肝组织线粒体Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶和Mn2+-SOD酶活性。结果与正常对照组相比,WED 28.0和40.0 g·kg^(-1)组小鼠肝系数升高(P<0.01),WED 40.0 g·kg^(-1)组小鼠血清中ALP,GPT和GOT活性增加(P<0.05),WED 19.6,28.0和40.0 g·kg^(-1)组小鼠肝组织ATP含量降低(P<0.01),MDA和ROS含量升高(P<0.05);WED 40.0 g·kg^(-1)组肝线粒体Na^+-K^+-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性降低(P<0.05),Mn2+-SOD酶活性升高(P<0.05)。结论WED引起小鼠肝损伤的机制与ATP合成减弱、线粒体抗氧化损伤增强等相关,线粒体损伤可能是黄药子造成肝毒性的重要作用机制。

黄独的化学成分

目的研究中药黄独(Dioscorea bulbifera L.)乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离,利用理化性质和1H-NMR13C-NMR等谱学技术,对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从中分离得到6个化合物,其结构鉴定为(+)儿茶素(catechin,1)、3,5-二甲氧基山柰酚(3,5-dimethoxykaempferol,2)、山核桃素(caryatin,3)、山柰酚(kaempferol,4)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside,5)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside,6)。结论化合物4、6为首次从薯蓣属植物中分离得到的已知化合物。

中药黄独的化学成分

目的对从中药黄独 (DioscoreabulbiferaL .)乙醇 (w =0 75 )提取物的乙酸乙酯萃取部分分离得到 5个化合物进行结构鉴定。方法采用硅胶柱色谱、高效液相色谱法进行分离 ,利用理化性质和谱学分析 ,鉴定分离得到的化合物结构。结果从中分得的 5个化合物其结构鉴定为 3,5 ,3′ 三甲氧基槲皮素 ( 3,5 ,3′ trimethoxyquercetin ,Ⅰ )、山奈酚 3 O β D 吡喃半乳糖苷 (kaempferol 3 O β D galactopyranoside ,Ⅱ )、香草酸 (vanillicacid ,Ⅲ )、异香草酸 (isovanillicacid ,Ⅳ )及 ( + )表儿茶素( ( + )epicatechin ,Ⅴ )。结论化合物Ⅰ、Ⅱ为首次从薯蓣属植物中分得的已知化合物 ,Ⅲ。

黄药子肝毒作用影响因素的实验研究

目的观察黄药子毒性的影响因素。方法比较小鼠雌、雄之间及不同剂量、不同给药时间小鼠肝脏指数、GPT、GOT、ALP、TBIL的变化,观察黄药子毒性与性别、剂量、给药时间的关系及可逆性。结果黄药子引起的肝脏指数、GPT、GOT变化无显著差异性;低、中、高剂量组黄药子毒性显著升高,GPT、GOT、ALP于7d时达到高峰,随给药时间延长反有降低趋势;GOT、TBIL则随给药时间延长不断升高;在1.5kg以内,黄药子的毒性是可逆的,超出此范围则有不可逆倾向。结论黄药子毒性大小与性别无关,与剂量、时间呈一定相关性,在一定剂量范围内其毒性可逆。

黄独珠芽浸提液对大白菜种子发芽的影响及休眠期内源激素含量的变化

以黄独珠芽为材料,研究珠芽浸提液对大白菜种子发芽的影响;用ELISA法测定休眠期珠芽GA3、ABA、ZR、DHZR和IAA含量,研究珠芽休眠期内源激素的变化规律.结果表明:珠芽休眠期和萌芽时珠芽基部、中部和顶部浸提液对大白菜种子发芽的影响与对照差异不显著;珠芽休眠期GA3含量下降、ABA与ZR含量上升、GA3/ABA比值下降、IAA和DHZR含量在发芽时与休眠初期相当.黄独珠芽在休眠期和萌芽时不存在种子萌发抑制物,珠芽发芽需要GA3/ABA比值下降,ZR含量升高.

黄药子对小鼠肝脏毒性的表达及其机理研究

目的 :探讨黄药子肝毒作用的指标和肝脏毒性产生的机理。方法 :黄药子 2g kg·d、10g kg·d、5 0g kg·d给予小鼠 ,连续给药 2 1d ,观察其生化指标变化 ,药物代谢酶及抗氧化酶活性及病理变化。结果 :黄药子可引起小鼠GPT、GOT、ALP、TBIL值增高 ,GST、GSH PX、SOD活力降低 ,且呈一定剂量、时间相关性。病理变化可见肝细胞疏松、肿胀、胞核溶解、融合、坏死、汇管区炎细胞浸润 ,小胆管水肿、增生等。其毒性产生与抑制GST、GSH PX、SOD等酶的活性有关。结论 :黄药子的肝毒作用客观化指标为GPT、GOT、ATP、TBIL及组织学变化。其毒性产生的机理与抑制肝微粒体中抗氧化酶和药物代谢酶活性有关。

几种传统中药中多糖的提取及抗肿瘤活性研究

采用超声提取黄药子、黄药子+当归(质量比3∶2)、白花蛇舌草+半枝莲(质量比3∶2)三味传统中药的单复方药中的多糖成分,并应用比色法原理对提取的多糖含量进行测定,其中黄药子+当归(质量比3∶2)的粗多糖含量最大,为16.509%。经测定3种多糖都有一定的抗肿瘤活性,其活性次序为黄药子+当归(3∶2)>白花蛇舌草+半枝莲(3∶2)>黄药子。

黄药子与当归配伍对大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达的影响

目的:观察单用黄药子和黄药子配伍当归后对大鼠肝CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达的影响。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定大鼠肝CYP1A2、CYP2E1基因mRNA在给药后的变化。结果:黄药子组明显诱导CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达,黄药子配伍当归后mRNA表达受到抑制。结论:黄药子诱导P450酶系CYP1A2和CYP2E1mRNA的表达,导致肝中毒。当归配伍黄药子后抑制mRNA表达拮抗肝中毒。

黄药子对小鼠毒性的实验研究

目的:探讨黄药子对肝肾功能的影响及其病理改变。方法:确定小鼠对黄药子的最大耐受剂量(MTD);并按1/4 MTD、1/8 MTD连续给药15,30,60d观察其生化指标变化及病理改变。结果:黄药子1/4 MTD组、1/8 MTD组小鼠ALT、肝脏指数等指标较对照组异常增高,与给药剂量和时间呈现一定的相关性,停药后给药组小鼠的肝脏指数和生化指标及病理改变均有不同程度的缓解。病理变化可见肝细胞混浊肿胀、坏死、炎细胞浸润等组织学改变。结论:黄药子主要损伤小鼠的肝脏和肾脏。其对肝脏的影响包括对肝脏细胞的直接损伤和破坏肝细胞代谢途径所导致的肝结构损害;对肾脏的损害主要是对肾小球和肾小管的直接细胞毒性和严重实质性肝损伤所导致的急性肾小管损伤。