Effects of sera from burn patients on human hepatocytic viscoelasticity

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一氧化氮可减轻烧伤血清对人肝细胞的损伤

为了解烧伤早期一氧化氮（NO）与肝细胞受损的关系，本文以体外培养肝细胞为模型，应用烧伤病人（TB－SA＞5％Ⅱ°～Ⅲ°）血清和NO供体Sin－1，动态观察了肝细胞受损过程。实验分四组，正常对照组（A组）、Sin－1组（B组）、烧伤血清组（C组）、烧伤血清加Sin－1组（D组）。分别在培养后1、3、6、12小时检测培养液中谷丙转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）、乳酸脱氨酶（LDH）及丙二醛（MDA）含量。发现C组在各时相点AST、ALT、LDH及MDA均显著高于A组（P＜0．01），B组与A组无显著差异（P＞0．05），D组与C组相比在1、3两时相点有显著性差异（P＜0.01），6、12两时相点天显著差异（P＞0.05）。实验表明：（1）烧伤血清可至肝细胞损伤，引起胞膜指质氧化和胞内酶释放，并随时间延长损伤加重。（2）小剂量NO不会导致肝细胞损伤。（3）NO通过清除氧自由基减轻烧伤血清对肝细胞的损伤，该作用在培养早期时显。后期失去对肝细胞的保护作用。

烧伤血清对大鼠心肌细胞钙稳态的影响

目的 观察烫伤血清对成年大鼠分离的心肌细胞游离钙浓度 [(Ca2 + )i]及胞膜钙通道电流的影响 ,探讨烧伤引起的心肌细胞钙稳态变化。 方法 伤后 2、4、6h分离 30 %TBSAⅢ度烧伤SD大鼠血清 ,简称 2hBS、4hBS、6hBS ;逆行循环灌流、胶原酶消化分离心肌细胞 ;Fura - 2 /AM荧光染色法测定 [Ca2 + ]i;膜片钳技术全细胞记录模式测定细胞膜钙通道电流。 结果 正常心肌细胞[Ca2 + ]i为 (10 1.3± 2 1.3)nmol/L ,烧伤血清可使心肌细胞 [Ca2 + ]i显著升高。 (P <0 .0 1) ,以 6hBS的作用最强 ;钙通道阻断剂异搏定 (30mmol/L)和肌浆网rynodine受体拮抗剂普鲁卡因 (2mmol/L)均非常显著地抑制 6hBS的作用 (P <0 .0 1) ,抑制率分别为 47.7%和 6 7.6 % ,后者强于前者 (P <0 .0 1) ,2hBS使峰值L型钙电流 (ICa -L)比对照组增加 5 0 80 % ;而 6hBS使峰值ICa -L增加 1 5 2 .5倍 ;峰值电流 -电压曲线显示烧伤血清明显增加各个去极化钳制电压下的ICa ,并使得最大激活电压提前 ;细胞外液灌洗可祛除烧伤血清对钙电流的作用。 结论 烧伤血清能使心肌细胞 [Ca2 + ]i,和膜上钙通道电流显著升高 。

c-jun反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞保护作用的分子机制研究

目的 探讨c -jun反义基因转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞保护作用的分子机制。方法 烧伤血清采自3 0 %TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠 ;采用含 1%O2 的混和气体作为缺氧模型 ;采用基因重组技术构建c -jun反义基因重组体 ;由Lipo fectaminekit介导心肌细胞转染 ;缺氧复合烧伤血清处理后 12、2 4和 48h不同时相点采用Westernblot检测c -jun蛋白 ,PKCα和JNK的表达变化。结果 加入烧伤血清并造成缺氧的非转染心肌细胞 (非转染组 ) ,c -jun蛋白 ,PKCα和JNK均显著表达 ,2 4h达最高峰 ;转染c -jun反义基因重组体 (转染组 )后 ,c -jun蛋白 ,PKCα和JNK表达均明显下降。结论 c