补肾化痰复方对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢内胰岛素信号传导分子的调控

目的观察补肾化痰复方对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠糖脂代谢及卵巢内胰岛素信号传导分子表达的影响。方法 Wistar雌性大鼠孕16天时分别在颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2.5 mg/kg(其子代雌鼠随机分为给药组与模型组,每组10只)或等剂量中性茶油(其子代雌鼠为对照组,10只),每天1次,连续3天。给药组给予补肾化痰复方灌胃,模型组及对照组给予同体积蒸馏水灌胃,每天1次,连续20天。称大鼠体重、卵巢重量,计算脂体比;采用口服葡萄糖耐量试验(OGTT)测定大鼠0、0.5、1、2 h血糖水平;检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖及胰岛素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR);采用Western blot法检测卵巢内胰岛素信号传导分子蛋白激酶B(AKT2)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和细胞外信号调节激酶1(ERK1)的蛋白表达以及AKT2、GSK3β、ERK1磷酸化(P-AKT2、P-GSK3β、P-ERK1)的蛋白表达。结果与对照组比较,模型组脂体比、OGTT试验0.5、2 h血糖水平及HO-MA-IR均明显升高,HDL-C水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,给药组脂体比、OGTT试验2 h血糖水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P<0.05)。模型组卵巢组织中AKT2、P-AKT2、GSK3β、P-GSK3β、GLUT4及ERK1的表达明显低于对照组(P<0.05);给药组GSK3β、P-GSK3β及GLUT4的表达较模型组明显增高(P<0.05)。结论 PCOS雌鼠存在胰岛素抵抗及糖脂代谢功能异常,并存在卵巢组织信号传导通路的异常。补肾化痰复方能够改善胰岛素抵抗及糖脂代谢功能,可能与胰岛素信号传导分子蛋白表达的调控有关。

中西医结合治疗多囊卵巢综合征不孕30例临床观察

目的观察中西医结合治疗多囊卵巢综合征(PCOS)不孕的疗效。方法采用中药联合复方CPA/CC治疗PCOS所致不孕(肾阳亏虚证)30例,并与单用复方CPA/CC30例加以对照。结果试验组在改善肾阳亏虚、降低体重、体重指数、睾酮(T)、LH/FSH水平以及促进排卵和妊娠等方面优于对照组。结论中西医结合治疗PCOS不孕效果良好。

葛友庆补肾化痰通脉方辨治颈动脉不稳定斑块

颈动脉不稳定斑块是缺血性脑卒中的一个重要病因,可归属为"眩晕""头痛""痴呆""中风""偏枯"等范畴。葛友庆教授发现颈动脉粥样斑块多见于老年人,多伴有口干黏滞,舌暗红苔腻、脉沉细等肾虚痰浊血瘀互结之象。认为老年人体质虚弱,旧病寄身,加之情绪波动,脏腑气机失调;饮食结构变化,过食肥甘厚腻,脾胃运化障碍,聚湿、生痰化热,痰、瘀、热进一步影响气机升降,形成以肾虚为主,痰、瘀、热病理因素的恶性循环。痰、瘀是产生颈动脉粥样斑块形成的主要病理因素,肾虚痰浊瘀结互为颈动脉粥样斑块形成的重要发病机制,创立补肾化痰通脉方(制首乌、仙灵脾、白芥子、生山楂、生黄芪、红花、川芎、地龙、决明子、泽泻等组成)。可能机制是通过降低血脂水平达到稳定斑块等作用,尤其是对西药无法耐受者。附验案1则。

补肾化痰复方对多囊卵巢综合征大鼠的作用机制研究

目的观察补肾化痰复方通过调控胰岛素分泌和卵巢细胞增殖能力从而影响多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的作用,探究补肾化痰复方对减缓PCOS疾病的发生是否具有积极作用。方法经阴道涂片筛选出80只动情周期正常的雌性大鼠,采用随机数字表法将大鼠分为Ctrl组、PCOS组、低剂量组、高剂量组,每组20只。PCOS组、低剂量组、高剂量组建立PCOS大鼠模型,低剂量组、高剂量组分别给药补肾化痰复方60、120 mg/kg,PCOS组、Ctrl组采用同种方式加入等体积蒸馏水。实时监测四组大鼠游离脂肪酸、黄体酮、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;通过监测四组大鼠禁食180 min血糖变化检测其胰岛素糖耐量试验(ITT)值;采用CCK8检测大鼠卵巢颗粒细胞增殖情况。比较四组大鼠游离脂肪酸、黄体酮、TC、TG、LDL-C和HDL-C水平;禁食不同时间后ITT值;不同剂量补肾化痰复方组大鼠卵巢颗粒细胞增殖情况。结果PCOS组大鼠黄体酮、HDL-C水平显著低于Ctrl组,游离脂肪酸、LDL-C、TC、TG水平高于Ctrl组,差异具有统计学意义(P<0.05)。低剂量组黄体酮高于PCOS组,游离脂肪酸、LDL-C低于PCOS组,差异具有统计学意义(P<0.05);低剂量组TC、HDL-C和TG水平与PCOS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量组黄体酮、HDL-C水平高于PCOS组,游离脂肪酸、LDL-C、TC、TG水平低于PCOS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在相同时间点,PCOS组大鼠ITT值均高于Ctrl组,差异具有统计学意义(P<0.05);高、低剂量组ITT值与Ctrl组比较差异均无统计学意义(P>0.05);且高剂量组的ITT值随时间的变化幅度相较于低剂量组而言更小。0μM组、10μM组、50μM组和100μM组大鼠卵巢颗粒细胞相对活性分别为(91.00±11.36)%、(63.33±8.74)%、(53.00±11.79)%和(41.00±14.11)%,比较差异具有统计学意义(P<0.05);10μM组、50μM组和100μM组大鼠卵巢颗粒细胞相对活性明显低于0μM组,差异具有统计学意义(P<0.05),并且随着剂量梯度升高,下降越显著。结论补肾化痰复方能够显著升高PCOS大鼠黄体酮和HDL-C水平,下调游离脂肪酸、LDL-C、TC、TG水平,不仅会较大程度地改善胰岛素耐量,还有降低大鼠卵巢颗粒细胞的生理增殖活跃的作用。

补肾化痰复方颗粒对孕期高雄激素血症大鼠雌性子代生殖内分泌的影响

目的:研究补肾化痰复方颗粒对孕期高雄激素血症(PNA)大鼠雌性子代生殖方面的影响并探讨其机制。方法:选取Wistar雌性大鼠,在孕中期颈背部皮下注射丙酸睾丸酮,连续3d,建立PNA大鼠模型。以其雌性子代生长至成年时,用补肾化痰复方连续灌胃20d,观察其动情周期,检测血清雌二醇(E2),睾酮(T),孕酮(P),17羟孕酮(17-OHP)水平,观察卵巢形态学变化,并用RT-PCR技术检测卵巢组织中细胞色素p450 17α羟化酶(cyp17)、细胞色素p450(cyp19)及类固醇激素急性调节蛋白(star)基因的表达。结果:①PNA雌性子代存在无排卵、高雄激素血症表现,卵巢呈多囊改变;②补肾化痰复方能够改善模型鼠动情周期,降低T、P、17-OHP的水平(P<0.05);③模型组卵巢组织cyp17、cyp19、star均高表达,但cyp17及star经补肾化痰复方治疗后降低(P<0.05)。结论:①PNA大鼠的子代是研究多囊卵巢综合征(PCOS)的理想模型;②补肾化痰复方能够降低雄激素,逆转卵巢的多囊改变,改善排卵功能,能够调节PCOS模型动物生殖异常情况。

补肾化痰复方对APP/PS1双转基因小鼠海马区核仁应激-MDM2-P53信号通路的影响

目的:探讨补肾化痰复方对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(AD)模型小鼠海马区核仁应激及其下游MDM2-P53通路的影响。方法:AD小鼠分为模型组、西药组、中药低剂量组和高剂量组。正常组由同品系非转基因小鼠组成。西药组用盐酸多奈哌齐干预,剂量为0.65 mg·kg^(-1)·d^(-1)。中药高剂量组用补肾化痰复方干预,剂量为6.5 g·kg^(-1)·d^(-1),中药低剂量组的剂量减半。正常组和模型组给与等体积的ddHO。药物干预90 d后,取各组小鼠海马组织,实时荧光定量PCR检测rRNA转录水平;重亚硫酸盐测序法检测rDNA启动子区域甲基化水平;免疫荧光染色检测核仁形态;Western Blot检测核糖体蛋白(RPL5和RPL11)、MDM2,P53和pP53的表达量。结果:与正常组比较,AD模型组小鼠海马区表现出显著的核仁应激反应,包括rRNA转录水平降低、rDNA启动子区域甲基化水平升高、核仁体积减小和阳性细胞率降低(P<0.01),核糖体蛋白(RPL5和RPL11)、MDM2、P53和pP53蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.05)。与盐酸多奈哌齐比较,补肾化痰复方能更加有效地缓解AD小鼠的核仁应激压力和逆转上述各项变化。结论:补肾化痰复方能缓解AD诱发的核仁应激压力,并能借助于MDM2-P53通路调控细胞命运,从而缓解AD进程。