广西产美味猕猴桃根正丁醇部位化学成分研究

目的：研究广西产美味猕猴桃根正丁醇部位的化学成分。方法：应用色谱技术分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果：从美味猕猴桃根正丁醇部位中分离并鉴定了6个化合物，分别为毛花猕猴桃酸B（1），2a，3β，24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸（2），2a，3a，24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸（3），2a，3a，23-三羟基-12，20（30）-二烯-28-乌苏酸（4），2α，3α，24-三羟基-12，20（30）-二烯-28-乌苏酸（5），正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷（6）。结论：化合物1—4，6均为首次从该植物中分离得到，其中化合物6为首次从猕猴桃属植物中分得。

拳参正丁醇提取物对心肌缺血的影响

目的观察拳参正丁醇提取物对结扎大鼠左冠状动脉前降支损伤的保护作用。方法取40只雄性W istar大鼠,随机分为假手术组、结扎冠状动脉组、拳参正丁醇提取物高剂量组(120 mg/kg)、拳参正丁醇提取物低剂量组(60 mg/kg)。结扎冠状动脉左前降支使心肌缺血并持续120 m in,复制结扎冠状动脉损伤模型。记录缺血前、缺血15m in、给药30,60,90,120 m inⅡ导联ECG,统计各标测点Ⅱ导联ECG的ST段偏移∑-ST。治疗组于结扎冠状动脉左前降支前20 m in经十二指肠注入拳参正丁醇提取物。结扎冠状动脉组及假手术组经十二指肠注入等体积生理盐水。实验结束后心内取血测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性;测定心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。另用24只W ister大鼠同上述分组及动物模型制作方法,取其心肌作TTC染色测心肌梗死面积。结果治疗组与模型组比较,心肌梗死面积明显缩小,血清LDH、CK活性降低,血清MDA含量减小,SOD活性升高,∑-ST值减少,且呈一定剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物治疗组(高、低剂量)对大鼠结扎冠状动脉的损伤均有保护作用。

正丁醇萃取石墨炉原子吸收法测定微量锗

建立了萃取－石墨炉原子吸收法测定中草药、植物样品及水系沉积物中微量锗的方法。锗与钼酸铵在０．３ｍｏｌ／Ｌ的硝酸介质中，可以生成稳定的锗钼杂多酸盐，并能被正丁醇萃取，有机相直接进样测定。本方法采用钼酸铵浸渍处理石墨管，直接测定了枸杞、蕨麻等植物样品及水系沉积物中的微量锗。方法的检出限为６．０×１０（－１２）ｇ，对于３０ｎｇ／ｍＬ锗的测定相对标准偏差为５．０％

白头翁汤正丁醇提取物诱导白念珠菌生物被膜细胞凋亡

目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对白念珠菌生物被膜细胞凋亡的影响。方法分别以DCFH-DA染色和JC-1染色,用流式细胞仪检测白念珠菌生物被膜细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Annexin V-FITC/PI染色染色荧光显微镜观察白念珠菌生物被膜细胞磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻并检测凋亡率;FITC-VAD-FMK染色观察白念珠菌生物被膜细胞metacaspase活性;DAPI染色观察白念珠菌生物被膜细胞核形态。结果≥128μg/mL BAEB处理后白念珠菌生物被膜细胞内活性氧水平显著升高,线粒体膜电位显著降低,PS外翻增加,凋亡率明显升高,metacaspase酶活性显著升高,细胞核出现固缩和碎裂。结论白头翁汤正丁醇提取物可诱导白念珠菌生物被膜细胞凋亡。

基于相关性分析的金银花和山银花正丁醇提取物的抗肿瘤活性谱-效关系研究

本文采用相关性分析,研究了金银花和山银花正丁醇提取物的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)图谱与抗肿瘤活性的谱-效关系。首先采用HPLC-MS/MS法对金银花和山银花正丁醇提取物进行分析,得到各提取物的化学成分,同时采用噻唑蓝(MTT)法观察金银花和山银花正丁醇提取物对Mcf-7、Hela、Ht29细胞株的抑制作用,然后利用最小二乘法分析其谱-效关系,通过分析化学成分与药效活性的相关性,从中筛选出具有代表性的化合物,进而探索金银花和山银花抗肿瘤作用的药效物质基础。

刺五加的化学成分

目的研究五加科五加属植物刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms]的化学成分。方法利用各种色谱技术进行分离,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果从刺五加中分离得到7个已知成分,分别鉴定为香草醛(vanillin,1)、香草酸(vanillic acid,2)、丁香苷(syringin,3)、β-谷甾醇(β-sitosterol,4)、胡萝卜苷(daucosterol,5)、2,6-二甲氧基-4-羟基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2,6-dimethoxy-4-hydroxyphenyl-1-O-β-D-glucopyranoside,6),3,5-二甲氧基-4-羟基-苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl-1-O-β-D-glucopyranoside,7)。结论化合物6、7为首次从该植物中分离得到。

拳参正丁醇提取液对家兔胸主动脉条收缩的影响

目的:研究拳参正丁醇提取液(PBNA)对家兔离体胸主动脉条的作用。方法:采用家兔离体胸主动脉条,高钾去极化后,以不同浓度CaCl2为刺激剂,观察PBNA对其量-效曲线的影响;以NE为血管收缩刺激剂,观察PBNA对内钙释放与外钙内流的影响。结果:(1)低剂量PBNA(0.1mg/ml)可抑制高钾去极化引起的动脉条收缩,使CaCl2量-效曲线右移,最大反应性降低,高剂量PBNA(0.4mg/ml)可增强高钾去极化引起的动脉条收缩;(2)低剂量的PBNA抑制NE诱导的内钙释放所致的血管收缩反应,而高剂量的PBNA增强NE诱导的内钙释放所致的血管收缩反应;各剂量的PBNA对复钙后NE所致的血管收缩作用具有抑制趋势。结论:不同浓度的PBNA通过抑制或促进平滑肌细胞膜电压依赖Ca2+通道而对家兔主动脉条的收缩起双重效应,PBNA对受体操纵的Ca2+通道也具有一定的抑制作用,对K+通道的开放有一定的促进作用。

地菍正丁醇萃取物对链脲佐菌素致糖尿病模型小鼠的影响

目的研究地菍正丁醇萃取物对链脲佐菌素致糖尿病(DM)小鼠血糖、血脂及抗氧化水平的影响。方法腹腔一次性注射链脲佐菌素150 mg·kg-1制备DM模型小鼠,地菍正丁醇萃取物高、中、低剂量组分别给予地菍正丁醇萃取物60,40,20 g·kg-1,阳性对照组给予格列苯脲0.4g·kg-1,每天灌胃1次,正常对照组和模型对照组则以等体积纯化水灌胃,连续10 d,观察小鼠空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,计算肝脏、肾脏脏器指数。结果与模型对照组比较,地菍正丁醇萃取物给药组小鼠血糖、TC、TG显著降低(P<0.01或P<0.05),血清SOD活性明显升高(P<0.01或P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.01),肾脏指数也明显降低(P<0.01)。结论地菍正丁醇萃取物能明显降低DM小鼠空腹血糖,改善血脂代谢紊乱,并具有抗氧化作用。

杜仲雄花正丁醇提取物的镇静催眠作用研究

研究不同剂量杜仲雄花正丁醇提取物的镇静催眠作用,确定杜仲雄花镇静催眠活性部位并分析其有效作用剂量。观察不同剂量正丁醇提取物对小鼠自主活动的影响以及直接镇静催眠作用、与戊巴比妥钠的协同作用和抗惊厥作用。杜仲雄花正丁醇提取物能显著增加小鼠睡眠率,减少小鼠的自主活动次数;显著增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠率,延长阈上剂量戊巴比妥钠睡眠时间,缩短入睡潜伏期;显著减少惊厥小鼠数,延长惊厥潜伏期。杜仲雄花正丁醇提取物具有良好的镇静催眠作用。

白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌VVC临床株黏附作用的影响

目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)对外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal Candidiasis,VVC)白念珠菌临床分离株黏附作用的影响。方法平板法检测与BAEB共培养2 h、4 h时白念珠菌的CFU;XTT还原法检测与BAEB共培养2 h、4 h的白念珠菌代谢活性;试管法检测白念珠菌絮凝能力;水-烃两相法检测白念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH);荧光显微镜观察菌体活力;扫描电镜观察白念珠菌细胞形态;qRT-PCR法检测黏附相关基因ALS1、CSH1、HWP1、ALS5、ALA1、INT1、MNT2与ALS3的表达。结果 512、1 024μg/m L BAEB可显著抑制黏附2 h、4 h时的白念珠菌的CFU及代谢活性;肉眼和倒置显微镜下观察发现512、1 024μg/m L BAEB可明显延缓絮凝产生的时间;256、512、1 024μg/m L的BAEB均能够显著减少白念珠菌的细胞表面疏水性;qRT-PCR检测表明1 024μg/m L的BAEB作用后,ALS1、CSH1、ALA1、ALS3、INT1、HWP1分别下调18.7%、36%、37.8%、29.6%、19.9%、21.6%,ALS5与MNT2未产生明显变化。结论 BAEB可能通过调节黏附相关基因抑制白念珠菌VVC临床株的黏附作用。

两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究

目的通过Ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提取物的致突变试验结果,比较两种试验的灵敏度。方法对蒲葵子用正丁醇浸提,用Ames试验方法(掺入法)与彷徨试验方法,对TA100鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验。结果两种试验方法结果显示,蒲葵子正丁醇提取物在5～500μg/ml剂量范围,以Ames试验方法与彷徨试验均检测出阳性结果,而在0.025μg/ml与0.5μg/ml剂量下,彷徨试验能检测出阳性结果,而Ames方法未检测出阳性结果。结论在较低浓度时,彷徨试验能检测出Ames试验检测不出的阳性结果,表明彷徨试验灵敏度较Ames试验高。

白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌VVC临床株体外生物膜形成的抑制作用

目的探讨白头翁汤正丁醇提取物（Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB）对分离自外阴阴道念珠菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）的白念珠菌临床分离株（以下简称VVC临床株）生物膜形成的影响。方法采用微量稀释法测定BAEB对白念珠菌的最低抑菌浓度（Minimal Inhibitory Concentration,MIC）;甲基四氮盐（XTT）还原法测定BAEB对白念珠菌生物膜代谢活性的影响,Time-kill法检测BAEB对白念珠菌活菌数的影响;结晶紫染色法测定BAEB对白念珠菌生物膜生物量（Biomass）的影响;扫描电镜（SEM）观察BAEB对白念珠菌生物膜形态结构的影响;激光共聚焦显微镜（CLSM）检测BAEB对白念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测生物膜相关基因UME6、PES1和HSP90的转录水平变化。结果 BAEB对12株白念珠菌的MIC在64~256μg/mL之间,对白念珠菌生物膜的SMIC80（抑制80%生物膜形成的最低药物浓度）为1 024μg/mL或以上;Time-Kill曲线显示在12h之后,512、1 024μg/mL浓度的BAEB对白念珠菌均具良好的杀伤作用;结晶紫染色法表明512、1 024μg/mLBAEB能够减少其生物膜生物量;SEM观察到1 024μg/mL BAEB能够有效抑制白念珠菌在不同黏附介质上生物膜的完整度;CLSM显示512、1 024μg/mL的BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度;qRT-PCR检测显示在256、512、1 024μg/mL的BAEB作用下,UME6转录水平分别下调了72%、71%、77%,在512、1 024μg/mL的BAEB下HSP90转录水平上调了2.23和3.31倍,而PES1未有明显变化。结论 BAEB可以抑制白念珠菌VVC临床株体外生物膜的形成。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤时一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的研究拳参正丁醇提取物(PBNA)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤时NO及NOS活性的影响。方法 SD大鼠随机分成4组:假手术组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量及高剂量PBNA治疗组。假手术组分离颈总动脉后舌下静脉给予1ml.kg-1的NS,其余各组分别在夹闭颈总动脉前分别舌下静脉注射生理盐水、低剂量(0.3mg·kg-1)及高剂量(1mg·kg-1)的PBNA。颈总动脉夹闭1h再灌注1h后,视网膜电流图(ERG)检查,取血,分离血清,测定血清NO含量、T-NOS、iNOS及eNOS的活性。结果与假手术组相比,模型组ERG幅度明显降低(P<0.01)、血清NO含量降低(P<0.001)、iNOS活性升高(P<0.05)、eNOS活性降低(P<0.05);与模型组比较,PBNA低剂量组NO含量升高(P<0.05)、iNOS活性降低(P<0.05),低剂量组及高剂量组ERG幅度升高(P<0.001)、T-NOS(P<0.01)及eNOS(P<0.05,P<0.01)活性均升高。结论 PBNA可通过提高T-NOS和具有保护作用的eNOS活性,降低具有损伤作用的iNOS的活性,升高NO含量,提高抗氧化能力和扩血管功能,对视网膜功能起保护作用。

溶剂萃取法净化萃余酸制磷酸二氢钾

研究了以氯化钾和湿法磷酸净化后的萃余酸为原料,利用正丁醇为萃取剂回收萃余酸中湿法磷酸制备磷酸二氢钾的新方法。研究了正丁醇含水量、萃取时间、萃取温度及萃余酸用量等因素对产品产量的影响,确定了适宜的工艺条件。实验结果表明,优化的工艺条件为:m(萃余酸)∶V(正丁醇)为127.4 g/L、m(水)∶V(正丁醇)为95 g/L、温度为30℃、萃取时间为60 min、m(氯化钾)∶V(正丁醇)为26.075 g/L。本研究提供了一种回收利用萃余酸的经济、简单的方法。

拳参正丁醇提取物对豚鼠离体左心房兴奋性及功能性不应期的影响

目的观察拳参正丁醇提取物对豚鼠离体左心房兴奋性及功能性不应期的影响,并探讨其作用机制。方法采用豚鼠离体左心房测定拳参正丁醇提取物对其强度-时间曲线及功能性不应期的影响。结果拳参正丁醇提取物可使豚鼠离体左心房强度-时间曲线上移,功能性不应期缩短,且有明显的剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物可明显降低左心房的兴奋性,缩短功能性不应期,且有明显的剂量依赖性。其机制可能通过抑制心肌细胞膜电压依赖性钠通道及促进3相K^+外流作用有关。

拳参正丁醇提取物对视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究拳参正丁醇提取物(polygonum bistorla L.n-butylal cohol extract,PBNA)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时抗氧化能力及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量的影响。方法24只SD大鼠随机分成4组,即对照组、视网膜缺血再灌注模型组(简称模型组)、低剂量(0.3mg.kg-1)及高剂量(1.0mg.kg-1)PBNA组,每组各6只大鼠。颈总动脉夹闭法制作视网膜缺血再灌注模型。颈总动脉夹闭60min再灌注60min后,行视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查;比色法测定血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)浓度及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,放射免疫法检测血清TNF-α含量。结果(1)与对照组ERG幅度(2.02±0.49)mV相比,模型组ERG幅度(0.55±0.28)mV显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,低剂量PBNA组ERG幅度(3.07±0.18)mV及高剂量PBNA组ERG幅度(3.71±0.48)mV均显著升高,差异均有显著统计学意义(均为P<0.001);(2)模型组血清MDA浓度(7.98±1.21)μmol.L-1较对照组(5.58±1.50)μmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组MDA浓度(5.77±1.11)μmol.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)模型组血清NO浓度(26.31±5.34)mmol.L-1较对照组NO浓度(63.39±7.49)mmol.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.001),与模型组比较,低剂量PBNA组NO含量(43.86±9.27)mmol.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(4)模型组血清GSH-Px活性(288.20±41.90)×103U.L-1较对照组(418.80±49.27)×103U.L-1降低,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,GSH-Px活性低剂量PBNA组(434.00±86.76)×103U.L-1及高剂量PBNA组(379.20±55.71)×103U.L-1均升高,前者差异有显著统计学意义(P<0.01),后者差异有统计学意义(P<0.05);(5)模型组血清SOD活性(64.19±7.65)×103U.L-1较对照组(77.56±7.76)×103U.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,低剂量PBNA组SOD活性(83.17±6.47)×103U.L-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);(6)模型组血清TNF-α含量(3.13±0.87)ng.L-1较对照组(1.84±0.17)ng.L-1升高,差异有显著统计学意义(P<0.01),与模型组比较,高剂量PBNA组TNF-α含量(2.21±0.41)ng.L-1降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBNA可通过提高SOD、GSH-PX的活性及NO的释放,从而提高视网膜缺血再灌注损伤时的抗氧化能力,还可通过降低TNF-α的释放,降低组织细胞损伤,对眼功能起保护作用。

竹节参皂苷的免疫佐剂活性研究

目的通过对竹节参总皂苷进行分段研究,确定其发挥佐剂效应的最佳段位。方法正丁醇萃取的总皂苷过D101大孔吸附树脂,通过用不同醇浓度洗脱,得到不同洗脱段,将各个段所得皂苷与蛋白共同注入小鼠体内进行免疫,每周免疫1次,共3次,最后1次免疫后5天处死小鼠取血,测定抗体效价;然后根据HPLC色谱分析及含量测定确定。结果 Elisa实验表明90%浓度的醇过大孔树脂所得皂苷的免疫佐剂活性最强,10%次之,30%和60%相当;HPLC及含量测定证明了皂苷的佐剂活性。结论 90%醇浓度洗脱的皂苷具有显著的佐剂效应。

拳参正丁醇提取物对豚鼠心肌生理特性的影响

目的研究拳参正丁醇提取物对豚鼠离体右心房自律性及收缩特性的影响,并探讨其作用机制。方法采用豚鼠离体右心房测定拳参正丁醇提取物对其自律性、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响。结果拳参正丁醇提取物可降低豚鼠离体右心房的自律性,降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且具有明显的剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物可抑制豚鼠离体右心房的自律性,降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且具有明显的剂量依赖性。其机制可能与抑制钙离子的内流及改变肌浆网上的钙泵活性有关。

金线莲正丁醇提取物降血糖作用

目的研究金线莲正丁醇提取物的降血糖作用及其机制。方法以健康SD大鼠12只为正常对照组,将糖尿病模型大鼠48只随机分为模型对照组和金线莲正丁醇提取物大、中、小剂量组,每组12只。金线莲正丁醇提取物大、中、小剂量组分别灌胃给予金线莲正丁醇提取物600,400,200 mg·kg-1,正常对照组和模型对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液,均每天1次。给药3周后,测定大鼠体质量、血清葡萄糖含量和血清胰岛素水平。结果实验结束时,与正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量明显减轻(P<0.01),血清葡萄糖明显升高(P<0.01),与模型对照组比较,金线莲正丁醇提取物大、中、小剂量组体质量差异无统计学意义(P>0.05),血清葡萄糖明显降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),金线莲正丁醇提取物大剂量组血清胰岛素水平明显升高(P<0.05)。结论金线莲正丁醇提取物具有显著降血糖作用,大剂量金线莲正丁醇提取物能显著增加大鼠胰岛素水平,其降糖机制可能与促进β细胞再生有关。

拳参正丁醇提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究拳参正丁醇提取物对脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制。方法大鼠大脑中动脉栓塞,制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血后10 min,于舌下静脉给予不同剂量的拳参正丁醇提取物。再灌注24 h后,断头取脑,TTC染色,测定脑梗塞体积;取血,离心后,取血清,比色法测血清NOS、SOD的活性及NO、MDA的含量。结果与模型组相比,拳参正丁醇提取物治疗组脑梗塞体积减小,血清NOS和SOD的活性升高,NO含量升高,MDA含量降低。结论拳参正丁醇提取物对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其保护机制与拳参正丁醇提取物促进NO释放及增强氧自由基的清除有关。