山姜素介导NF-κB信号通路对胰腺癌细胞BXPC-3增殖、侵袭和炎症反应的影响

目的探讨山姜素介导核因子-κB(NF-κB)信号通路对胰腺癌细胞BXPC-3增殖、侵袭能力和炎症反应的影响。方法将人胰腺癌细胞BXPC-3分为对照组(0μmol/L山姜素)和不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)山姜素处理组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell小室法检测细胞侵袭,蛋白免疫印迹法检测相关蛋白表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测炎症因子表达情况。结果CCK-8实验结果显示,与对照组比较,不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)山姜素处理后,胰腺癌细胞BXPC-3的细胞活力显著下降(P<0.05);且山姜素浓度越高、处理时间越长,对BXPC-3细胞活性的抑制作用越明显(P<0.05)。与对照组比较,经50、100、200μmol/L山姜素溶液处理后,细胞的克隆形成率、细胞侵袭能力、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、神经-钙黏素(N-cadherin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、NF-κB亚基p65、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达水平均明显下降,转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10、上皮-钙黏素(E-cadherin)及NF-κB抑制蛋白(IκBα)蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。加入激活剂脂多糖(LPS)后,细胞活力、细胞侵袭能力、TNF-α、IL-6、p65、MMP-9、cyclin D1蛋白表达水平明显上升,TGF-β、IL-10、IκBα蛋白表达水平明显下降(P<0.05);而加入NF-κB通路抑制剂Sulfasalazine后上述指标变化相反。结论山姜素可抑制胰腺癌细胞BXPC-3的增殖、侵袭能力和炎症反应,其机制可能与介导NF-κB信号通路有关。

COX-2抑制剂联合survivin反义寡核苷酸抗胰腺癌BxPC-3细胞的效应

目的:探讨COX-2抑制剂和survivin反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制.方法:应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究,将BxPC-3细胞分为4组:A组(对照组),B组(Celecoxib 80μmol/L)组,C组(300 nmol/L survivin ASODN),D组(80μmol/L celecoxib+300 nmol/L survivin ASODN).采用MTT检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞凋亡率,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,并用RT-PCR检测Bcl-2、survivin和Mcl-1的mRNA国的变化.结果:将80μmol/L celecoxib和300 nmol/L survivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h和48h,D组细胞的存活率明显低于B,C组(24h:41.0%±0.4% vs 71.0%±2.2%,63.3%±4.5%;48h:34.2%±1.1% vs 61.6%±1.7%,55.0%±3%;P<0.01).作用24h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,D组细胞的凋亡率明显高于B,C组(30.33%±3.49% vs 11.93%±1.17%,22.07%±0.93%;P<0.01).caspase-3活性在B,C,D组明显高于对照组(0.04867±0.0021,0.02967±0.0021,0.08767±0.0042 vs 0.007±0.0001;P<0.01),D组细胞的caspase-3活性明显高于B,C组(0.08767±0.0042 vs 0.04867±0.0021,0.02967±0.0021;P<0.01).用100μmol/L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h后,survivin/β-actin和Mcl-1/β-actin的mRNA的比值明显低于对照组(0.68±0.05 vs 1.05±0.06,P<0.01),而Bcl-2/β-actin的mRNA的比值无明显变化(0.99±0.02 vs 1.07±0.06,P>0.05).结论:联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖,并能够明显提高caspase-3活性.COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mcl-1途径,而非Bcl-2途径.

罗非昔布对胰腺癌BXPC-3细胞裸鼠移植瘤血管形成的影响

背景与目的:肿瘤血管形成在肿瘤细胞浸润性生长中起了重要作用,增加表达的环氧合酶-2与快速生长肿瘤中的血管形成有关。本研究目的是观察选择性环氧合酶-2抑制剂—罗非昔布抑制胰腺癌生长的体内效应,以及对胰腺癌移植瘤相关血管形成的影响。方法:将表达有环氧合酶-2的人胰腺癌细胞BXPC-3种植入裸鼠皮下,形成移植瘤。经口灌入罗非昔布30mg·(kg·d)-1,共8周,记录肿瘤大小,采用Ⅷ因子免疫组化显示血管密度,BXPC-3细胞上的血管内皮生长因子(VEGF)检测亦用免疫细胞化学染色。采用RT-PCR和明胶酶法检测胰腺癌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达及酶活性的变化。结果:罗非昔布对裸鼠胰腺癌移植瘤的肿瘤重量抑瘤率为73.64%,肿瘤体积抑瘤率为87.74%。实验组胰腺癌组织微血管密度犤(1.5±0.2)个/200倍放大视野犦明显低于对照组犤(4.7±1.5)个/200倍放大视野犦。与对照组比较,罗非昔布显著降低了胰腺癌BXPC-3细胞中VEGF、MMP-2mRNA的表达以及酶活性。结论:减少胰腺癌相关的血管形成是罗非昔布阻止胰腺癌生长的机制之一。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤组织中MMP-2含量的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠免疫器官的影响和对BXPC-3裸鼠瘤组织中MMP-2表达的影响。方法建立BXPC-3肿瘤裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对裸鼠免疫器官指数的影响。应用S-P免疫组织化学方法,检测蝙蝠葛酚性碱对瘤组织MMP-2表达的影响。结果蝙蝠葛酚性碱对肿瘤裸鼠的免疫器官指数无明显影响。蝙蝠葛酚性碱可以降低BXPC-3肿瘤裸鼠瘤组织中MMP-2的含量,与模型组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠的免疫器官无严重影响,其抑瘤作用可能与降低MMP-2含量有关。该研究为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤裸鼠细胞凋亡相关基因P53蛋白表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤裸鼠肿瘤组织中P53蛋白表达的影响。方法:通过蛋白印迹技术(Western blotting)观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53蛋白表达的影响。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53蛋白表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因P53蛋白的表达有关。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤抑制作用及肿瘤组织中MMP-9含量的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠肿瘤的抑制作用和对BXPC-3肿瘤裸鼠瘤组织中MMP-9表达的影响。方法:建立BXPC-3肿瘤裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑制率。应用S-P免疫组织化学方法,检测蝙蝠葛酚性碱对瘤组织MMP-9表达的影响。结果:蝙蝠葛酚性碱高、中、低剂量对BXPC-3肿瘤裸鼠均有明显抑制肿瘤生长的作用,其抑瘤率分别为34.91%、52.83%、41.51%,与模型对照组比较具有统计学意义(P<0.01)。蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠的MMP-9表达有明显抑制作用(P<0.01)。结论:蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能与通过降低MMP-9含量有关。本研究为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据。

甲羟戊酸激酶基因真核及shRNA表达载体构建及其对BxPC-3细胞周期蛋白表达的影响

目的 构建甲羟戊酸激酶（MVK）基因真核及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞中,观察其对细胞周期蛋白的影响。方法 从BxPC-3细胞中提取总RNA,逆转录PCR（RT-PCR）法获得目的基因MVK以及通过化学合成MVK（751~779）和MVK（1089~1117）位点寡核苷酸片段,构建真核表达及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞,筛选稳定表达细胞系。Westernblot法分析转染后对BxPC-3细胞周期蛋白的影响。结果 成功获得MVK基因真核表达（pcD-NA3.1-mvk）及两个针对MVK shRNA表达载体（piLenti-RNAi-shRNA1/2）。通过抗生素筛选及Westernblot分析获得了稳定的MVK过表达及低表达细胞株。Westernblot分析显示：过表达MVK的细胞株及MVK knockdown的细胞株中细胞周期蛋白CyclinB1、CyclinE表达量与正常及对照细胞相比均显著降低。结论 MVK过表达及低表达均抑制Bx-PC-3细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E的表达。

冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞Cyclin D/Rb/p16信号蛋白的影响研究

[目的]通过观察冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞形态和DNA变化的影响,研究其对Cyclin D/Rb/p16信号通路中基因表达的调节作用,分析冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞的诱导与Cyclin D/Rb/p16信号通路之间的内在联系,为冬凌草甲素抗肿瘤提供可能的途径,为临床使用提供有利数据。[方法]冬凌草甲素作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色和Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态,RT-PCR和实时荧光定量法(realtime PCR)检测Cyclin D/Rb/p16信号通路基因的表达变化;甲基化专一性PCR试剂盒检测p16基因的甲基化。[结果]冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用BxPC-3细胞36 h时,CDK4的表达量达到最低,但p16的表达量达到最高;p16基因有甲基化。[结论]1、冬凌草甲素能诱导BxPC-3细胞形态改变。2、冬凌草甲素在一定程度下调了CDK4基因的表达,上调了p16基因的表达,不能改变p16基因的甲基化,可能通过影响Cyclin D/Rb/p16信号通路而抑制胰腺癌的生长周期。

基于表达谱芯片的冬凌草甲素抑制胰腺癌BxPC-3细胞的机制研究

[目的]应用表达谱芯片比较冬凌草甲素干预前后人胰腺癌细胞株BxPC-3的基因表达差异,寻找细胞增殖和凋亡的调控分子和信号通路,探讨冬凌草甲素抗肿瘤的分子机制。[方法]提取空白对照组及冬凌草甲素作用组总RNA,并利用标准的变性琼脂糖凝胶电泳检测其完整性。借助安捷伦快速扩增标记试剂盒标记样品,与基因表达谱芯片于安捷伦杂交室进行杂交,安捷伦DNA微阵列扫描仪扫描芯片收集数据,经分析得出药物作用后差异表达的基因。[结果]32μg·mL-1冬凌草甲素组与空白对照组相比,显著上调基因有520种,显著下调基因有651种,其中Caspase-3、Caspase-7、Caspase-8、Caspase-9等基因和蛋白经PCR和western blot得到验证。[结论]冬凌草甲素对胰腺癌细胞BxPC-3基因表达谱有一定影响,其抗肿瘤和免疫调节作用可能与一系列肿瘤及免疫相关基因的表达变化有关。

姜黄素联合木黄酮对人胰腺癌细胞株BXPC-3的作用

目的 体外观察姜黄素及木黄酮对人胰腺癌细胞株 ( BXPC- 3)增殖的抑制作用及两者联合应用时的抑制率及相互作用。方法 采用 MTT法测定两者对人胰腺癌细胞株 ( BXPC- 3)的增殖抑制率 ,利用中效原理判定两药合用的效果。结果 两种药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应也增加 ,它们的相关系数分别为 0 .95 3和0 .998,姜黄素的中效浓度为 2 89.16 μm ol/L,木黄酮的中效浓度为 10 7.5 5 μmol/L;两药合用时它们的相关系数为0 .987,中效浓度为 2 2 5 .2 0 ( 171.6 0 + 5 3.6 0 ) μm ol/L。大剂量 (大于中效剂量 )合用时是协同作用 ( CI<1) ,小剂量(小于中效剂量 )合用时是拮抗作用 ( CI>1)。结论 姜黄素联合木黄酮对人胰腺癌细胞株 BXPC- 3的生长有抑制作用 ,它们合用时大剂量是协同 。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对bFGF表达的影响

目的研究蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤新生血管bFGF表达的影响,进一步探讨其作用机制。方法建立BxPC-3裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑制率,同时应用SP免疫组织化学方法检测各组BxPC-3裸鼠肿瘤组织bFGF的表达水平。结果蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠瘤组织具有抑制作用,高、中、低剂量组抑瘤率分别为34.91%、52.83%、41.51%,与模型对照组比较具有统计学意义(P<0.01);各剂量均能明显降低BxPC-3裸鼠瘤组织bFGF的表达水平。结论蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠肿瘤具有明显的抑制作用,其机制可能是通过改善裸鼠免疫功能,抑制肿瘤新生血管形成来实现的。

蝙蝠葛酚性碱及其单体成分对BxPC-3细胞增殖作用的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)、蝙蝠葛碱(Dau)、蝙蝠葛苏林碱(DS)及比例组(Dau与DS按3∶1混合)药物对体外胰腺癌细胞BxPC-3增殖的影响。方法:BxPC-3细胞传代培养,分别加入高、中、低三个剂量的PAMD、DS、Dau及比例组溶液,空白对照组加入等体积的生理盐水,作用72h,以MTT比色法检测吸光度(OD值),计算各组对BxPC-3细胞的增殖抑制率。结果:PAMD高、中、低剂量组的抑制率分别为93.27%、24.64%、15.45%;Dau高、中、低剂量组的抑制率分别为67.18%、24.09%、12.00%;DS高、中、低剂量组的抑制率分别为20.18%、15.64%、6.27%;比例组高、中、低剂量组的抑制率分别为30.18%、41.27%、17.36%。与空白对照组比较,除Dau和DS低剂量组外各组均有统计学差异(P<0.05)。结论:PAMD及其单体成分Dau和DS对BxPC-3细胞的增殖均有抑制作用,但是Dau、DS及比例组药物对BxPC-3细胞的增殖抑制作用弱于PAMD组,说明PAMD对BxPC-3细胞的增殖抑制作用还可能与PAMD内其他成分有关系。

丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡机制的影响

目的:探讨丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度丁酸钠对BxPC-3细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测丁酸钠作用于BxPC-3细胞后的凋亡情况;TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性的变化;RT-PCR技术分析人端粒酶逆转录酶(hTERT)、bcl-2 mRNA的表达水平。结果:丁酸钠作用BxPC-3细胞能明显抑制细胞增殖,其作用具有时间和剂量依赖性。丁酸钠处理72 h的BxPC-3细胞凋亡率明显提高(P<0.01),S期细胞比例显著下降(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05)。经丁酸钠处理的实验组端粒酶活性为0.96±0.12,未经丁酸钠处理的对照组端粒酶活性为4.18±0.34,二者之间差异有显著性(P<0.05)。丁酸钠处理的实验组hTERT mRNA水平为0.168±0.045,与对照组0.685±0.141比较差异有统计学意义(P<0.01),bcl-2实验组水平为0.138±0.034,与对照组0.715±0.026比较有统计学差异。结论:丁酸钠具有强烈诱导胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的作用,其发生机制与丁酸钠下调hTERT Bcl-2 mRNA表达水平直接相关。

人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导途径中pp60c-Src和pERK1/2表达的差异

目的研究人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导系统,探寻不同类型胰腺癌信号转导通路的差异,为研究靶点药物提供基础。方法将1640培养的HPAC和BxPC-3经细胞计数相同后各分为4组,分别为对照组、TGF-α组、TGF-α+PP2组和TGF-α+PD组。细胞贴壁并达70%融合后,换无血清培养48h。无血清处理作对照,用无血清培养基溶解终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激TGF-α组2h,TGF-α+PP2组先加入终浓度为10μmol/L的PP2刺激细胞20min后加入7nmol/L的TGF-α刺激2h,TGF-α+PD组先加入30μmol/L的PD98059刺激细胞20min后加入终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激2h。用蛋白印迹方法分析HPAC和BxPC-3的4组细胞pp60c-Src和pERK1/2的表达。结果HPAC细胞pp60c-Src的表达:对照组显著高于TGF-α组、TGF-α+PD组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01);HPAC细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组和TGF-α+PD组(P<0.01),与TGF-α+PP2组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。BxPC-3细胞pp60c-Src的表达:TGF-α组显著高于对照组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01),与TGF-α+PD组相比较差异无统计学意义(P>0.05);BxPC-3细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组、TGF-α+PD组和TGF-α+PP2组(P<0.01)。结论HPAC和BxPC-3细胞中Src/MAPK信号途径存在差异。推测在BxPC-3细胞株中c-Src是活化Ras/Raf/MAPK途径的关键信号分子,应进一步研究在HPAC细胞株中c-Src的作用。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p16表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-timePCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BXPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p16mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著升高胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p16mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因表达有关。

蛋白激酶Cα反义寡核苷酸对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响

目的:观察蛋白激酶Cα(PKCα)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌BXPC-3细胞体外侵袭力的影响。方法:将BXPC-3细胞分为7组:对照组,64mg/L随机寡核苷酸序列(RODN)转染组,4mg/L、8mg/L、16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组,RT-PCR方法检测PKCαmRNA表达情况;以有效转染浓度的ASODN转染BXPC-3细胞,并设对照和RODN组,Transwell侵袭小室方法检测BXPC-3细胞体外侵袭能力。结果:16mg/L、32mg/L和64mg/LASODN转染组PKCα/GADPHmRNA灰度值(0.6371±0.0360,0.5632±0.0080,0.2389±0.0200)均低于对照组(0.9121±0.0250)(P<0.05),RODN组(0.9147±0.0170)、4mg/LASODN组(0.9123±0.0180)和8mg/LASODN组(0.9116±0.0290)与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组穿膜细胞数(286±10)和RODN组(268±3)比较,转染16mg/LPKCαASODN(119±9)可降低胰腺癌BXPC-3细胞的体外侵袭力(P<0.05)。结论:靶向PKCα的ASODN可有效阻断其在人胰腺癌BXPC-3细胞中的表达,并降低癌细胞体外侵袭力。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3荷瘤小鼠抑瘤作用及外周血TNF-α含量的影响

目的:通过实验研究,探讨蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤小鼠的抑制作用及外周血TNF-α含量的影响。方法:采用体内实验法,按0.2mL.只-1(约含瘤细胞数1×106个)接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制备裸鼠胰腺癌模型,腹腔注射给药21d,停药后次日,称取小鼠体重,摘眼球取血处死小鼠,计算抑瘤率;采用ELISA法检测BXPC-3荷瘤小鼠外周血TNF-α含量。结果:PAMD高、中、低剂量组对BXPC-3荷瘤小鼠均有明显抑制肿瘤生长的作用,在一定剂量内对荷瘤小鼠免疫器官指数无明显影响,PAMD可明显增加荷瘤小鼠外周血TNF-α含量。结论:PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能通过调节机体免疫功能,充分调动细胞因子生物学活性有关。

辛伐他汀对胰腺癌BxPC-3细胞株Shh相关蛋白的影响

目的探讨辛伐他汀对胰腺癌Bx PC-3细胞株Shh相关蛋白的影响。方法胰腺癌Bx PC-3细胞株随机分成对照组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组(50μmol/L),辛伐他汀高、中、低剂量组(20,10,5μmol/L)。采用台盼蓝染色法和MTT法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株的生长曲线和增殖抑制率;采用细胞划痕法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株运动能力;采用免疫组织化学、RT-PCR法检测胰腺癌Bx PC-3细胞株Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平。结果与对照组比较,5-FU组,辛伐他汀高、中剂量组胰腺癌Bx PC-3细胞OD值、运动能力和Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平明显降低(P<0.05)。结论辛伐他汀通过抑制Bx PC-3细胞株Shh、Ptch1、Smo、Gli1水平在胰腺癌治疗中发挥积极作用。

吲哚美辛对胰腺癌细胞BxPC-3生长的抑制作用及机制

目的探讨环氧合酶抑制剂吲哚美辛体内外对胰腺癌细胞BxPC-3细胞生长的影响及其作用机制。方法用MTT法检测吲哚美辛作用后BxPC-3细胞的增殖情况;用流式细胞分析、透射电镜和原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡和细胞周期的变化;建立裸鼠胰腺癌BxPC-3细胞移植瘤模型,用吲哚美辛给荷瘤裸鼠灌胃(3 mg.kg-1.d-1,共4周),观察其对种植瘤生长曲线的影响,TUNEL法检测裸鼠移植瘤组织细胞凋亡。结果吲哚美辛呈剂量和时间依赖性抑制BxPC-3细胞生长。TUNEL、流式细胞仪检测显示药物处理后细胞凋亡增加,细胞阻止于G0/G1。透射电镜可见细胞呈现明显凋亡形态。随着用药时间的增加,吲哚美辛对裸鼠移植瘤的生长抑制作用增加,移植瘤组织凋亡细胞增多。结论吲哚美辛体内外可抑制胰腺癌细胞BxPC-3的生长,其机制可能与促进细胞凋亡,阻滞细胞周期有关。

5-氟尿嘧啶、表阿霉素、丝裂霉素单用及合用时对胰腺癌细胞Aspc-1和Bxpc-3的抑制作用

目的 :观察 5 氟尿嘧啶 (5 FU)、表阿霉素 (E ADM)和丝裂霉素 (MMC)体外对胰腺癌细胞 (Aspc 1及Bxpc 3)的作用和药物联合应用时的相互作用。方法 :采用MTT测定法观察 5 FU、E ADM和MMC单用及合用时对细胞的抑制作用 ,并应用中效原理判定药物合用的效果。结果 :单用或者合用时随着药物浓度的增加其对细胞的抑制作用也增加 ,5 FU和MMC合用于Aspc 1细胞株 ,当效应为 0 .84时CI为1,大剂量时 (效应大于 0 .84 )是协同作用 (CI <1) ,小剂量时 (效应小于 0 .84 )是拮抗作用 (CI >1)。MMC和E ADM合用时表现为轻度的拮抗作用。 5 FU和MMC、MMC和E ADM合用于Bxpc 3,当效应分别为0 .4 9、0 .6 2时CI为 1,大于此效应表现为轻度拮抗(C >1) ,小于此效应则相反。 5 FU和E ADM合用对两株细胞量效曲线图的形态相似表现为轻度的拮抗作用 ,随着效应的增加拮抗作用略有下降。结论 :药物的相互作用与药物浓度有关 ,药物及细胞株的不同其量效曲线存在较大差异。通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度能够改善胰腺癌的化疗效果。