HPLC-DAD-ESI-MS/MS结合分子网络技术分析彭祖寿柑果肉的化学成分

以彭祖寿柑(Citrus reticulata Blanco)果肉为材料,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-电喷雾电离质谱(HPLC-DAD-ESI-MS/MS)结合分子网络技术对果肉成分进行分析。采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。在正负离子模式下采集质谱数据,并上传至全球天然产物社会分子网络(Global Natural Products Social Molecular Networking,GNPS)创建彭祖寿柑果肉分子网络。根据文献报道及在线数据库mzcloud、pubchem,比对二级质谱碎片信息及紫外吸收特征,排除分子网络假阳性结果,在果肉中共注释出70个成分,包括黄酮类7个、苯丙素类25个、二苯基庚烷类8个、有机酸类11个、脂肪酸类5个、氨基酸类4个、萜类4个、核苷酸类2个、生物碱类1个与其他类3个,其中8个二苯基庚烷成分和2个木脂素成分可能为其潜在的新成分。该研究将液相色谱-质谱联用技术与分子网络技术结合,能够快速、准确、较全面地注释彭祖寿柑果肉成分,为彭祖寿柑果肉进一步的开发与利用提供理论参考。

潮州柑果皮多糖对凝固型酸奶冷藏期品质的影响

以潮州柑果皮多糖为原料,通过评价凝固型酸奶的理化和感官特性,探讨潮州柑果皮多糖添加量对酸奶冷藏过程中品质的影响。研究结果表明:在7 d的冷藏期内,添加潮州柑果皮多糖可提高酸奶的可溶性固形物含量、黏度、持水力和悬浮稳定性,降低酸奶的乳清析出率;当多糖添加量为2.0%时,酸奶的综合品质最佳。冷藏第7天,添加2.0%多糖的酸奶pH值为4.12,可滴定酸度为96.61°T;相比对照组,可溶性固形物含量、黏度、持水力和悬浮稳定性分别提高了9.08%、40.59%、25.41%和145.83%,乳清析出率降低了55.37%。另外,相比其他组,添加1.5%和2.0%潮州柑果皮多糖的酸奶感官评分更高。因此,潮州柑果皮多糖可作为一种天然稳定剂可用于提高冷藏期凝固型酸奶品质。

NaCl胁迫对坪山柚、福橘实生苗矿质营养吸收特性的影响

通过沙培和水培实验,采用原子吸收分光光度计法和离子吸收动力学方法,对NaCl胁迫下坪山柚(CitrusgrandisOsbeck'Pingshanyou')和福橘(C.reticulataBlanco'Fuju')实生苗矿质营养吸收特性进行研究。结果表明,随NaCl浓度增加,坪山柚和福橘幼苗地上部及根部Na+、Cl-含量明显增加,K+、Ca2+含量降低。相同浓度NaCl胁迫下,坪山柚地上部及根部Na+、Cl-含量分别低于福橘,而根部K+、Ca2+含量及地上部K+含量、K+/Na+值、Ca2+/Na+值均高于福橘。NaCl胁迫下,坪山柚、福橘幼苗Na+吸收量高于Cl-吸收量,Na+及Cl-的吸收速率均随NaCl浓度的增大而增加。相同浓度NaCl胁迫下,坪山柚对Na+、Cl-的吸收速率低于福橘,这与坪山柚对Na+、Cl-的吸收具有较大的Km值及较小的Vmax值一致,表明坪山柚幼苗比福橘幼苗耐盐性强。

具有三维连通网络结构的多孔SiC/C材料的电磁损耗特征

通过有机泡沫浸渍/高温炭化和热压固化/高温炭化两种工艺分别制备了具有宏观三维连通网络结构的SiC/C泡沫和显微三维连通多孔结构的SiC/C泡沫同质压制块。使用谐振腔微扰法对比测试了2450MHz频率下两种材料的电磁参数随电导率的变化。结果表明:随着电导率的增加,SiC/C泡沫及其同质压制块的介电常数实部εr′均逐渐增加;电损耗tgδe均先增加,达到最大值后逐渐减小;SiC/C泡沫的磁损耗tgδm不断增加,而其同质压制块的tgδm值则先快速增加,达到最大值后缓慢下降。当二者具有相同有效电导率时,SiC/C泡沫的εr′值比其同质压制块约小1/2,tgδe值至少大2倍,而压制块的tgδm值超过SiC/C泡沫4倍多。SiC/C泡沫及其同质压制块是非磁性的,它们的磁损耗均由其特殊结构与电磁场相互作用产生的,是一种非本征磁损耗。

网织血小板、C-反应蛋白、降钙素原检测在急性白血病继发感染中的诊断价值

目的探讨网织血小板、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)检测在急性白血病继发感染患者中的诊断价值。方法选取2017年5月～2018年7月在鞍山市双山医院血液科住院的60例根据病原学和影像学结果诊断为发生感染的急性白血病患者作为白血病继发感染组,同时选取60名健康体检者作为对照组。检测并记录两组外周血网织血小板百分比(RP%)、CRP、PCT。结果白血病继发感染组RP%、CRP、PCT值均高于对照组,差异有高度统计学意义(P <0.01)。RP%、CRP、PCT诊断白血病继发感染时的受试者工作特征曲线(ROC)下面积分别为0.89、0.66、0.81;RP%诊断白血病继发感染时ROC下面积最大。结论网织血小板比CRP、PCT诊断白血病继发感染的价值大。

应用^(14)C和^(15)N研究多效唑对椪柑幼树的生理效应

用^(14)C喂饲法测定多效唑对椪柑幼树光合作用强度、同化产物运转与分配的影响。结果表明,多效唑处理能促使椪柑叶片叶绿素含量升高,光合作用增强;并能调节同化产物的分配,使其向根系转移增多,向新梢运转减少。^(15)N示踪试验结果表明,多效唑处理能使椪柑根系增生,吸收^(15)N增多,但却抑制根系中的氮向植株其它器官的转移,使更多的氮累积在根系中。

基于色谱-质谱联用技术和网络药理学、分子对接分析彭祖寿柑优株果皮化学成分和抗氧化活性

目的:研究彭祖寿柑优株果皮的化学成分及抗氧化能力,探究抗氧化的潜在作用机制。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾-串联质谱法(HPLC-DAD-ESI-MS/MS)与气相色谱-质谱法(GC-MS)表征彭祖寿柑优株果皮的化学成分;采用DPPH法、ABTS法、铁离子还原能力(FRAP)和脂质过氧化(TBARS)能力评价其抗氧化活性;利用网络药理学方法筛选抗氧化相关靶点,进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用Cytoscape 3.8.2软件,构建“活性成分-靶点-通路”网络,采用分子对接验证彭祖寿柑优株果皮的主要活性成分与核心靶点的相互作用。结果:HPLC-DAD-ESI-MS/MS解析出32个化合物,GC-MS解析出33个挥发性成分。体外抗氧化试验表明彭祖寿柑优株具有较显著的抗氧化能力。网络药理学及分子对接结果表明,柚皮素等黄酮类成分与TP53、MAPK3等靶点对接吻合度较好。结论:初步探究了彭祖寿柑优株多成分、多靶点、多途径干预抗氧化的潜在机制,为将彭祖寿柑优株果皮开发为功能性食品或功能性饲料提供了新的理论依据。

乳酸菌发酵宽皮柑桔全果浆营养品质及挥发性成分的变化

通过化学法和和固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,SPME-GC-MS),研究乳酸菌(植物乳杆菌Lp-115、嗜酸乳杆菌La-14和副干酪乳杆菌Lpc-37)发酵宽皮柑桔全果浆过程中活性物质、抗氧化活性与挥发性成分的变化规律。结果表明,Lp-115在宽皮柑桔全果浆中的发酵能力明显强于La-14和Lpc-37,其发酵产物具有较高含量的总酚和总黄酮;乳酸菌发酵均会降低维生素C含量,三者之间无显著性差异;Lp-115和La-4可明显提高宽皮柑桔全果浆清除DPPH自由基和还原铁离子的作用,Lpc-37则导致上述抗氧化活性发生下降。SPME-GC-MS和主成分分析显示,乳酸菌发酵后宽皮柑桔全果浆的烯类化合物、醛类化合物和芳樟醇等相对含量降低,酯类化合物和香芹酮等相对含量增加,La-14的影响强于Lp-115和Lpc-37。这说明发酵宽皮柑桔全果浆营养品质与挥发性成分很大程度受乳酸菌种类、发酵时间的影响,Lp-115是发酵宽皮柑桔全果浆的最好选择。

不同砧木对温州蜜柑光合特性的影响

以体细胞杂种红橘+枳、Troyer枳橙、Swingle枳柚和枳作砧木的‘国庆4号’温州蜜柑幼树为试材,通过大棚盆栽研究了4种砧木对幼树光合特性的影响。结果表明:嫁接在不同砧木上的温州蜜柑幼树的净光合速率(Pn)日变化相似,均表现出双峰曲线,首峰出现在10:00时,次峰小于首峰,出现在13:00时以后;综合净光合速率、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)、羧化效率(CE)和表观光量子效率(AQY)等可以看出Troyer枳橙幼树光合性能最弱,枳最强,红橘+枳和Swingle枳柚介于两者之间;可溶性蛋白、比叶重和色素含量等生理指标结果显示,枳表现最优光合特性,另外3种砧木差异不明显;在设施条件下Pn与气孔导度(Gs)、相对湿度(RH)和Tr呈正相关,与胞间CO2浓度(Ci)呈负相关,与温度(Tair)、叶面水气压亏缺(VpdL)和光照强度(PAR)相关性复杂。

橙皮苷的提取及其稳定性分析

为充分开发丰富的柑桔果皮资源,增加其经济附加值,采用碱溶酸析法提取蒰柑果皮中橙皮苷,经D-101大孔树脂纯化,再运用紫外-可见光谱扫描法分析了温度、时间、氧气、光照、pH值、金属离子等对橙皮苷的稳定性影响。结果表明:该方法提取、纯化的橙皮苷,经HPLC法检测,纯度达到96.7%,得率1.92%。提纯的橙皮苷水溶液在75℃以下加热30 m in之内,以及无氧、无光、酸性及中性条件下可保持其性能稳定;Fe3+、Cu2+对橙皮苷氧化起诱导加速作用,且在充分的氧气和光照下,特别是强光下,会引起其结构变化。

17种杀菌剂对贡柑炭疽病菌的生物活性测定研究

采用菌丝生长速率法测定了17种杀菌剂对发生于德庆的贡柑炭疽病菌的生物活性。结果表明,参测的12种新杀菌剂中,10种新杀菌剂[250 g/L施保克乳油、50%施保功可湿性粉剂、250 g/L势克乳油、250 g/L凯润乳油、250 g/L必扑尔乳油、300 g/L爱苗乳油、10%世高水分散粒剂、62%霜炭清(B)可湿性粉剂、75 g/L欧宝乳油和250 g/L富力库水乳剂]均对贡柑炭疽病菌表现出优异的抑制作用,EC50值介于0.0128～0.3637μg/mL之间,明显优于参测的250 g/L阿米西达悬浮剂(EC50=14.9902μg/mL)、50%翠贝水分散粒剂(EC50=114.7402μg/mL)和50%多菌灵可湿性粉剂(EC50=8.3998μg/mL)、40%达科宁悬浮剂(EC50=13.2340μg/mL)、62%双博可湿性粉剂(EC50=122.5649μg/mL)等5种常用杀菌剂、80%代森锰锌可湿性粉剂(EC50=400.9587μg/mL)、70%甲基托布津可湿性粉剂(EC50=131904.3068μg/mL)。

锌胁迫对不知火杂柑和椪柑叶片光合特性及超微结构的影响

采用砂基培养法,运用CI-340便携式光合测定仪、H-7650透射电子显微镜研究了不同锌浓度如0 mg/L(锌缺乏)、0.05 mg/L(对照)和0.5 mg/L(锌过量)处理下不知火杂柑(简称不知火)和椪柑叶片叶绿体色素含量、净光合速率及超微结构的变化。结果表明:(1)锌缺乏处理的不知火及锌过量处理的椪柑叶片叶绿素(a+b)和类胡萝卜素含量、锌缺乏与锌过量处理的两者叶片净光合速率均相对低于对照。(2)锌缺乏处理下,两者叶片叶绿体出现变形或空室化,其中椪柑叶绿体内淀粉粒和质体小球增多,细胞核及线粒体正常,而不知火淀粉粒少,细胞核中出现许多黑色小颗粒物质。锌过量处理下,两者叶片叶绿体出现空室化或叶绿体膜模糊,线粒体解体,其中椪柑叶绿体内质体小球增多,淀粉粒少;而不知火淀粉粒明显增多、增大,基粒片层膨胀、松弛。可见,锌胁迫对两者叶片叶绿体色素、净光合速率及超微结构有着明显的影响,其影响程度因品种而异。

套袋对‘8306’椪柑果实品质的影响

以‘8306’椪柑(Citrus reticulate Blanco cv.ponkan)为试材,研究套袋后不同拆袋时间对其果实品质的影响。结果表明:套袋后单果重有减少的倾向,果皮厚无变化;果皮类胡萝卜素含量、可滴定酸含量降低,糖酸比和维生素C含量增加;套袋对果实可溶性固形物含量、总糖含量、可食率、出汁率、种子数及囊瓣数均没有影响。综合来看,套袋可提高‘8306'椪柑果实品质,‘8306'椪柑适合套单层纸袋,最佳拆袋时间为采前15d。

柑橘光合作用的过剩能量耗散机制及其生理意义

柑橘属于C3植物,易发生光合作用的光抑制。在光抑制条件下,柑橘可通过光呼吸耗散、光化学耗散和非光化学耗散以及降低光合色素含量等方式处理过剩能量。非光化学耗散又分为高能态猝灭、状态转换和D1蛋白循环。这些机制相互关联,在不同的条件下相继启动,协同作用,是柑橘在长期进化中形成的防御光破坏的有效途径,具有十分重要的生理意义。

砂糖橘精油化学组成及对指状青霉的抑菌活性

采用水蒸气蒸馏法提取砂糖橘(Citrus reticulate Blanco)果皮精油,并用GC-MS对其成分进行分析,共鉴定出17种成分,主要包括柠檬烯(77.99%)、β-月桂烯(3.74%)、β-水芹烯(2.78%)、罗勒烯(2.64%)、β-芳樟醇(2.35%)、α-蒎烯(1.60%)、正辛醇(1.54%)、癸醛(1.24%)、4-松油醇(1.10%)和4-十一烯(1.04%)等。测定不同添加量(0.16、0.31、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00μL/mL)砂糖橘精油对指状青霉孢子萌发和菌丝体生长的作用。结果表明:低添加量(<2.5μL/mL)砂糖橘精油对指状青霉孢子萌发无影响甚至有促进作用,对指状青霉菌丝体生长有轻微的抑制;而高添加量(10μL/mL)则显著抑制孢子萌发和菌丝体生长(P<0.05)。本实验表明砂糖橘精油在防治指状青霉具有一定作用。

镁缺乏对“不知火”和“椪柑”生理指标、镁分布及叶片超微结构的影响

采用砂基培养法,研究缺镁胁迫下不知火"[Citrus reticulata×(C.reticulata×C.sinenesis)]和椪柑"(Citrus reticulata Blanco)的生理和形态结构变化,以及镁元素的分布特点.结果表明:1)镁缺乏使不知火"和椪柑"的生物量、根系活力、叶片叶绿素含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著下降,其中不知火"的下降幅度均明显高于椪柑";镁缺乏使二者叶片的过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量及叶片相对电导率显著上升,其中不知火"的MDA含量和叶片相对电导率显著高于椪柑";在镁缺乏下不知火"叶片的过氧化氢酶(CAT)活性显著升高,而椪柑"的CAT活性与对照差异无统计学意义;2)不知火"和椪柑"各部位的镁含量均随营养液中镁浓度的增加而上升,且叶片镁含量随着叶龄的增长而呈明显下降趋势,在镁缺乏下不知火"各部位叶片镁含量均显著高于椪柑";3)叶肉细胞超微结构变化显著,在镁缺乏处理下不知火"细胞器受损程度较重,如叶绿体内基粒片层模糊、数目明显减少,淀粉粒增大,叶绿体膜与线粒体膜模糊;而椪柑"叶绿体变形、离壁,叶绿体内基粒片层数目明显减少,淀粉粒和质体小球增多.可见,镁缺乏对不知火"生理及形态结构的影响较椪柑"明显.

酸橘砧和枳砧沙糖橘果园土壤、叶片、果实养分比较与相关性分析

为了解广东省清远市沙糖橘园土壤养分丰缺状况,分析结果树不同砧穗组合叶片、果实养分丰缺状况,为沙糖橘营养科学管理、果园合理施肥及产业提质增效提供科学依据。采集清远市27个10~15年生枳砧和酸橘砧沙糖橘果园的土壤、叶片及果实,分析土壤、叶片及果实矿质养分含量,分析土壤、叶片及果实养分含量间的相关性。结果表明,清远沙糖橘果园土壤pH整体偏酸性,土壤有机质较丰富,有机质含量适量及以上果园占比70.4%。速效N含量缺乏果园为51.8%,81.5%的果园土壤速效P超量,有效K超量的占比48.1%,多数果园土壤有效Mn、有效Zn、有效Mo含量较适宜,但有效Ca、有效Mg、有效B缺乏占比分别达到81.5%、88.9%、77.8%。枳砧、酸橘砧沙糖橘叶片矿质养分丰缺程度存在差异,枳砧沙糖橘叶片N、B、Ca含量较少缺乏,而酸橘砧沙糖橘叶片3种元素含量存在严重缺乏的现象,2种砧木沙糖橘叶片中Cu、Mg均相对缺乏,Mo含量均严重缺乏。枳砧和酸橘砧沙糖橘果实矿质养分的大量元素中N、K含量高于P,中量元素Mg含量低于Ca含量,微量元素中Fe含量最高。枳砧沙糖橘果实单果重、果形指数、可食率、可滴定酸、可溶性固形物、Vc含量等指标均低于酸橘砧。2种砧木的沙糖橘果园土壤矿质养分与叶片矿质养分间,枳砧Mg、Fe分别呈极显著、显著正相关,酸橘砧B、Fe均呈显著负相关,枳砧沙糖橘叶片与果实中Mo含量显著正相关,酸橘砧沙糖橘叶片、果实、土壤三者间Mo含量均为极显著正相关。清远市沙糖橘果园管理应注重改良土壤酸碱度,施用适当配比的N、P、K肥,深施有机肥的同时适量添加或叶面喷施Zn、Mg、B、Ca、Mo,合理控制含Mn农药的使用次数。

椪柑果园种植夏季绿肥的效应

为了弄清夏季绿肥对椪柑园土壤肥力及产质效应的影响,在贵州省从江县椪柑园进行了夏季绿肥(饭豆、豇豆、大豆、绿豆)的试验研究,结果表明,饭豆的生物产量最高,达29.03 t.hm-2,是大豆鲜草产量的2.32倍,绿豆的2.56倍,豇豆的2.74倍;它们的N、P2O5、K2O养分供应量依次为饭豆>绿豆>大豆>豇豆,增产效果为饭豆>大豆>绿豆>豇豆,绿肥处理中果实的可溶性固形物、总糖、还原糖、维生素C含量均高于对照,其中饭豆处理高于大豆、绿豆和豇豆处理,后3种绿肥对椪柑品质的影响无显著差异;同时,间作4种绿肥均能不同程度的对土壤肥力产生影响,显著降低土壤温度,保持土壤水分,对缓解土壤旱情有一定的作用,其中饭豆的综合效应最好,是椪柑成龄密植果园的首选绿肥品种。

基于为害状色相多重分形的槿柑病虫害图像识别

为自动识别桠柑病虫害，研究了以桠柑病虫害为害状多重分形谱特性参数为输入变量的小波神经网络病虫害识别方法。利用改进型分水岭算法提取碰柑病虫害为害状边界，对非连续的边界进行边界跟踪，将过分割区域进行区域合并，标记为害状边界，提取标记区域，生成病虫害为害状目标图像；对病虫害为害状目标图像0。～120。这一主要色相区域4等分，产生4幅色相二值图像；对二值图像进行多重分形分析，计算其标度不变区多重分形谱的高度及宽度；以此高度及宽度作为小波神经网络的输入，进行碰柑病虫害识别，5种病虫害的平均识别正确率为87％。试验结果表明：碰柑病虫害为害状的4对多重分形谱高度及宽度值较充分地反映了碰柑病虫害色相累计信息、分布信息及区间形状的典型特征，能用此方法进行碰柑病虫害机器识别。

不同诱杀方法对砂糖橘实蝇的防控效果和效益分析

柑橘实蝇危害是肇庆柑橘产区蔓延和潜在爆发的重要检疫性害虫。物理方法可用于多种实蝇的监测和防治,但生产上缺乏对不同实蝇的诱杀效果评价。在肇庆地区砂糖橘园测试了不同物理诱杀方法对柑橘大实蝇和柑橘小实蝇的诱杀效果。结果表明,未挂果果园和挂果果园内性诱剂诱捕到柑橘小实蝇的数量分别为110、32头,食物诱剂的诱捕量为25.7、6头,黄板的诱捕量为24、5头,性诱剂诱捕到柑橘小实蝇的数量显著多于食物诱剂和黄板;相反,食物诱剂和黄板诱捕到的昆虫种类和数量多于性诱剂,并能诱捕到柑橘大实蝇。在10~12月期间,柑橘小实蝇的诱捕量出现两个高峰期,而柑橘大实蝇的诱捕量一直保持较平稳的状态。在防治成本上,第一诱杀周期使用性诱剂、食物诱剂和黄板每667m2的成本分别为55、40、40元,第二个周期后分别为15、40、40元,3种诱杀方法均未有有毒灭杀化学药剂接触果实。结合两种实蝇生命周期的全年发生规律,从未挂果果园管理开始,采用多种诱捕方法结合的综合防控措施是肇庆地区砂糖橘园有效防治柑橘实蝇,推进农药减量控害的经济、绿色植保技术。