两种山茶属植物化学成分的HPLC-MS分析

采用HPLC-MS技术,对2种山茶属(Camellia Linn.)植物华东山茶(C.japonica)、茶梅(C.sasanqua Thunb)的化学成分进行了研究。通过质荷比及质谱数据,并结合相关文献,推测华东山茶19个色谱峰中的12个峰、茶梅20个色谱峰中的12个峰的成分。结果表明:这两种山茶属植物含有酚酸类、儿茶素类、黄酮醇及糖苷类物质。为科学开发利用山茶及茶梅提供了依据。

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。

药百合根尖染色体C-带分析

利用Giemsa C-带方法对药百合(Lilium speciosumThunb.var.glorosoidesBaker)进行了研究。结果表明:药百合的染色体数目为2n=2x=24,带型公式为:2n=24=8C+4CI++2CI++2CN+4I++2I+T++2,单套染色体条带总数为20条。染色体A、E、H、J、K的着丝点区域和染色体F的短臂上显示出很强的带纹,染色体A为随体染色体,具有明显的次缢痕带,染色体B的短臂上显示出3条强弱不同的带纹。通过Giemsa C-带方法可以将药百合的每条染色体区分开,药百合C-带带纹的这些特征将为其在杂交育种中后代的鉴定及特异基因的染色体定位提供可靠的依据。

石荠苧精油的GC-MS分析及其抑菌活性的研究

利用水蒸汽蒸馏法提取石荠苧〔M osla scabra(Thunb.)C.Y.W u etH.W.L i〕精油,得油率为1.2%。采用GC-MS方法分析了该挥发油的化学组成,检测到125个峰,共鉴定出其中67个化学成分并测定其相对含量,占总含量的95.25%。其中,(R)侧柏酮(26.11%)、(M)侧柏酮(13.66%)、石竹烯(8.89%)、桉叶油素(7.99%)、(R)-α-石竹烯(6.45%)、芹菜脑(5.43%)和β-荜澄茄油烯(4.51%)为主要成分。体外抑菌实验表明,该精油对7种供试细菌均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureusRoenbach)、普通变形杆菌(Proteas vulgarisHauser)、甘薯青枯假单胞菌(Ralstonia soanacearumE.F.Sm ith)、大肠杆菌(Escherichia coliCastellan i et Chalm ers)和短小芽孢杆菌(Bacillus pum ilusM eyer et Gotthe il)的最低抑菌浓度(M IC)为2%,对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilisCohn)和藤黄八叠球菌(Sarcina luteaSchroeter)的M IC为1%。

南蛇藤乙酸乙酯提取物通过活化caspase依赖的线粒体通路诱导HepG2细胞凋亡

目的通过检测南蛇藤乙酸乙酯提取物在诱导肝癌细胞HepG2凋亡过程中产生的凋亡蛋白表达量探讨其凋亡途径。方法应用Annexin V-FITC与碘化丙啶(promide iodine,PI)双染色法,通过流式细胞技术检测不同浓度(15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml和240μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物)干预HepG2细胞24小时后的细胞凋亡情况;应用蛋白质印迹法检测不同浓度(30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml)南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞24小时及60μg/ml和120μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞48小时后细胞中细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9(cleaved caspase-9)和胱冬蛋白酶3(caspase-3)的表达。结果当南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时,可诱导HepG2细胞出现细胞凋亡,且细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9和caspase-3的表达量增加;随南蛇藤提取物浓度的增加(30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml),蛋白表达亦增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可能是通过促使膜间蛋白细胞色素c表达和释放活化caspase-9与caspase-3而诱导HepG2细胞的凋亡。

分光光度法测定苦丁茶中维生素C的含量

维生素C又叫抗坏血酸,是人类营养中所需要的最重要的维生素之一,缺乏维生素C会产生坏血病。本文采用"2,4-二硝基苯肼法"测定苦丁茶中维生素C的含量。结果表明在苦丁茶中含有较高的维生素C。

野生玫瑰果还原型维生素C含量及影响因素的研究

该文以野生玫瑰果为试验材料,研究不同品系、不同采果期、不同栽培条件和贮存时间对还原型维生素C含量的影响。试验表明:4个不同品系在同一采果日还原型维生素C含量差异较大,7月末之前C品系显著高于其他3个品系;4个不同品系还原型维生素C含量都在7月10日最高,随着果实成熟均呈下降趋势;7月末之前下降速度较快,以后趋于平稳。A品系在稀植条件下还原型维生素C含量显著高于密植的。以测定还原型维生素C含量为目的时果实在-70℃冰箱中贮存不应超过4个月。

用电导法配合Logistic方程测定茶梅品种的抗寒性

【目的】测定杭州地区5个常见茶梅品种的抗寒性,为茶梅品种向长江以北地区推广提供科学依据。【方法】以目前杭州地区园林应用最广的5个山茶科山茶属茶梅品种立寒、朝仓、昭和之荣、冬牡丹、笑颜为试验材料,在冬季低温条件下进行相对电导率测定,并于寒害发生后进行低温半致死温度测定。【结果】5个茶梅品种均随着外界气温的降低,相对电导率呈先升高后降低的趋势;低温半致死温度处于-21～-14℃。【结论】5个茶梅品种对低温环境均具有较强的适应和调节能力及一定的抗寒能力,其中以昭和之荣的抗寒力最强。

西安地区茶梅露地栽培试验及生态适应性研究

对茶梅(Camellia sasanqua Thunb.)在西安地区露地引种栽培的立地环境、栽培基质和土壤pH值等方面进行了技术性研究,通过对其物候观察和生物学习性的掌握,初步确定茶梅在西安的抗寒等级在Ⅱ级以上,生活力在Ⅲ级以上,适应西安地区的气候条件,为茶梅在西安园林绿化中的应用和推广提供依据。

何首乌乙酸乙酯不溶部分化学成分的研究

从四川何首乌（ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｎｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍＴｈｕｎｂ）块根乙醇提取物的乙酸乙酯不溶部分分离得到五个单体，经理化常数测定，光谱（ＩＲ，ＵＶ，ＦＡＢ－ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，１Ｈ－１３ＣＣＯＳＹ和ＮＯＥ差谱）分析及衍生物制备，确定了两个化合物的结构为新化合物。化合物Ⅰ１，３－二羟基－６，７－二甲基酮－１－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖甙，命名为何首乌乙素，化合物Ⅱ为２，３，５，４′－四羟基－二苯乙烯－２，３－二－Ｏ－β－Ｄ葡萄糖甙，命名为何首乌丙素。其余三个结晶因量少有待进一步分离、鉴定。

蛇足石杉碱丙的结构鉴定

目的 研究石杉科植物蛇足石杉Huperziaserrata (Thunb .)Trev .的生物碱成分。方法 采用各种色谱技术进行分离纯化 ,经光谱数据分析鉴定其结构。结果 从蛇足石杉中分离得到一个生物碱单体。结论 该化合物为一具三环结构的新的lycodine型生物碱 ,命名为蛇足石杉碱丙 (huperzinineC)。

肾茶多酚提取工艺及其抗氧化活性研究

采用回流提取法,进行单因素试验和L9（34）正交试验,确定肾茶多酚最佳提取工艺;并通过测定1,1-二联苯基-2-苦肼自由基（DPPH·）和羟自由基（·OH）清除率评价其抗氧化活性。得到的肾茶多酚的优化提取工艺为液料比10∶1（m L/g）,50%乙醇回流3次,每次提取2 h,肾茶多酚提取率为3.60%,优选的提取工艺稳定可靠,重现性好。体外抗氧化活性实验结果显示：肾茶多酚的抗氧化能力随质量浓度的增大而增强,在1~10μg/m L浓度范围内和100~1250μg/m L浓度范围内,其清除DPPH自由基和羟基自由基的能力略强于抗坏血酸,两者的对DPPH自由基半数抑制浓度分别为5.78和6.31μg/m L;对羟基自由基的半数抑制浓度为851.1和940.1μg/m L。

茵陈总黄酮的提取及富集工艺

采用超声波辅助提取法对茵陈总黄酮的提取和富集工艺进行研究,用正交实验优化茵陈总黄酮的最优提取工艺为:在40℃时,以料液比1∶15(g/m L)的蒸馏水超声提取60 min.以6种大孔吸附树脂对茵陈总黄酮的富集作用进行研究,结果表明D101型树脂对黄酮的吸附和解吸附效果最好.进一步优化最佳富集工艺条件为:上样液质量浓度0.55 mg/m L,pH 4.04,体积流量1.5 BV/h,洗脱溶剂乙醇质量分数70%.

不同龄期桂花花芽分化期间矿质元素和可溶性糖含量的变化

[目的]探讨矿质元素与桂花花芽分化之间的关系,为研究桂花花芽分化和早产丰产栽培提供参考。[方法]测定了波叶银桂幼树(4年生)和成年树(14年生)花芽分化期间叶片矿质元素及可溶性糖含量的变化。[结果]成年树和幼年树N峰值分别在雌蕊分化期和花瓣分化期,P峰值均在花萼分化期;K、Ca峰值分别在花芽分化始期和花芽分化结束,成年树Mg峰值出现在雄蕊分化期,而幼年树在花萼分化期;Mn、Fe含量在成年树和幼年树中变化趋势相同,Cu峰值都在雌蕊分化期,成年树和幼年树Zn峰值分别在花芽分化结束和花瓣分化期;C/N峰值均在花芽分化始期。[结论]在花芽分化期间,幼年树叶片中N、P、Zn、Mn含量比成年树高;而Ca、Mg、Fe、K、可溶性糖含量和C/N比成年树低;Cu在两者间无差异。

茶梅茎叶中挥发油化学成分的分析

为了解茶梅茎叶中挥发油的化学成分,采用水蒸汽蒸馏法分别提取茶梅茎、茶梅叶中的挥发油,用气相色谱—质谱联用法分析和鉴定其化学成分,从茶梅茎、茶梅叶挥发油中分别确定出27,37种成分,在挥发油中的质量分数分别为0.990 40,0.963 54。其中,丁香酚为茶梅茎、茶梅叶挥发油主要成分,丁香酚在茶梅茎挥发油中的质量分数为0.922 23,在茶梅叶挥发油中的质量分数为0.913 28。

肾茶总黄酮的提取纯化工艺优化

目的应用Box-Behnken效应面法优化肾茶提取工艺,运用大孔吸附树脂优选肾茶总黄酮的纯化工艺。方法以肾茶总黄酮得率为评价指标,以乙醇体积分数,液料比和提取时间为考察因素,采用Box-Behnken效应面法优化加热回流提取工艺,并进行预测分析。通过静态和动态吸附试验考察大孔吸附树脂对肾茶总黄酮的纯化效果,并研究各因素条件对其纯化效果的影响,筛选主要影响指标的最佳工艺条件。结果肾茶最佳提取工艺为:乙醇体积分数为52.52%,液料比(mL:g)为15:1,提取时间为90分钟。DM-130大孔吸附树脂较适合肾茶总黄酮的纯化,静态吸附生药浓度为0.1 g/mL,药液pH值为2;动态吸附上样量为60 mL,吸附时间为50分钟,除杂水用量为3倍柱体积,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍树脂体积。结论 Box-Behnken效应面法用于优选肾茶的提取工艺是可行的,建立的数学模型和实验观察数据相符,DM-130大孔吸附树脂较适合肾茶总黄酮的纯化。

金银花nrDNA ITS区聚合酶链反应条件的研究

目的 :金银花nrDNAITS区序列G +C含量为 6 8% ,用常规的PCR方法扩增效果差。本研究通过改变扩增程序及使用改性剂的方法显著提高了金银花nrDNAITS区的扩增效率。方法 :分别从金银花叶及药材中提取总DNA ,通过优化扩增条件 ,对nrDNAITS区进行扩增 ,并比较了两种优化方法的差别及适应性。方法 1:提高变性温度至 97℃ ;方法 2 :添加混合改性剂 (DMSO 4 % 甘油 10 % )。结果 :与方法 1相比 ,方法 2可降低变性温度 5℃ ,升高退火温度 9℃ ,降低镁离子浓度至 0 .5mmol/L ,降低TaqDNA聚合酶用量至 0 .1U(30 μl体系 ) ,PCR产物量显著提高 ,且可消除植物DNA粗提物中杂质的干扰。结论 :通过提高退火温度及添加改性剂可克服高G +C含量金银花nrDNAITS区序列扩增的困难 ,该方法的建立有助于解决植物来源DNA模板的PCR扩增问题。

肾茶种质资源遗传多样性的ISSR分析

为了探讨中国肾茶种质资源的遗传多样性,本研究采用100条ISSR引物对87份肾茶种质资源进行试验分析,发现20条引物能扩增出清晰条带.在87份供试材料中,20个ISSR引物共产生144条扩增条带,其中多态性条带120条,多态率83.3％,平均每个ISSR标记能产生6.0条多态性片段.87份材料间的遗传相似系数变化范围为0.48 ～0.98,但6份栽培品种间遗传相似系数为0.88 ～ 0.98显示出栽培种的遗传基础相对狭窄.利用UPGMA聚类分析,供试材料可聚为2类,其中栽培品种单独聚成1类,野生材料聚为1类.结果显示,中国野生肾茶种质资源遗传多样性丰富,具有较高的开发利用价值.

香薷、野草香挥发油分析及其生物活性评价

目的分析香薷Elsholtzia ciliata(Thunb.)Hyland.、野草香Elsholtzia cypriani(Pavol.)C.Y.Wu et S.Chow挥发油,并评价其生物活性。方法水蒸气蒸馏法提取样品花、茎叶中的挥发油,GC-MS法进行分析,DPPH、ABTS法分别测定抗氧化活性,纸片琼脂扩散法测定对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞杆菌的抑制作用。结果从中共鉴定出59种成分,其中香薷以柠檬烯、芳樟醇、β-蛇床烯为主,野草香以环氧玫瑰呋喃、百里醌、β-石竹烯为主。香薷花、茎叶挥发油的抗氧化活性相近,野草香茎叶挥发油的抗氧化活性略强于花。野草香花挥发油可显著抑制金黄色葡萄球菌,对伤寒沙门氏菌和肺炎克雷伯氏菌也有一定抑制作用。结论香薷、野草香挥发油主要成分差异明显,并均具有一定生物活性,有着较好的开发价值和前景。

猫爪草粗多糖治疗自身免疫性甲状腺炎的实验研究

目的研究猫爪草粗多糖对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)小鼠免疫干预作用。方法雌性BALB/c小鼠多点皮下注射甲状腺球蛋白辅以佐剂,配合饮用高碘水,形成实验性自身免疫性甲状腺炎模型,用药干预。用化学发光法检测实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠血清甲状腺素(TT4)、三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、高灵敏人促甲状腺激素(TSH);用放射免疫法检测抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺微粒体抗体(TMAb)。结果与正常组相比,实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠血清甲状腺素、游离甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸显著降低(P<0.01),高灵敏人促甲状腺激素、抗甲状腺球蛋白抗体、抗甲状腺微粒体抗体显著升高(P<0.01);三碘甲状腺原氨酸与正常组无显著性差异。用药治疗后,与模型组相比,猫爪草粗多糖各剂量组甲状腺素、游离甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸水平显著回升(P<0.01),抗甲状腺球蛋白抗体、抗甲状腺微粒体抗体水平仍旧处于高位。结论实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠处于甲减状态,猫爪草粗多糖能在一定程度上干预实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的甲状腺激素水平,有利于其恢复,其作用可能与其抗炎及免疫调节功能有关。