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15株禽源空肠弯曲菌的分离鉴定及CheW基因序列分析 被引量:2
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作者 张博 姚学萍 +5 位作者 王印 杨泽晓 邬旭龙 莫亚霞 周丽军 廖倡宇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期78-81,共4页
为了解四川地区禽源空肠弯曲菌流行菌株的感染情况及其Che W基因的变异特点,本研究于四川地区采集禽源盲肠及内容物对空肠弯曲菌进行分离并纯化培养,将分离菌株进行染色镜检、生化试验、16S r RNA基因PCR鉴定,并对分离株的Che W基因进... 为了解四川地区禽源空肠弯曲菌流行菌株的感染情况及其Che W基因的变异特点,本研究于四川地区采集禽源盲肠及内容物对空肠弯曲菌进行分离并纯化培养,将分离菌株进行染色镜检、生化试验、16S r RNA基因PCR鉴定,并对分离株的Che W基因进行克隆测序,选取Gen Bank中登录的10株国内外空肠弯曲菌菌株与分离株进行Che W基因的序列分析及遗传进化分析。结果显示:分离株经纯化培养于哥伦比亚血琼脂培养基上后出现无溶血现象的菌落;革兰染色为阴性;生化代谢类型较稳定且与相关报道一致;16S r RNA基因序列与空肠弯曲菌(NCTC11168、YQ2210)等菌株同源性为99%以上。15株分离菌株的Che W基因的核苷酸序列与所选参考株一致性为98.68%,其推导的氨基酸序列同源性一致性在98.9%以上。其中鹌鹑源分离株CJ-1、CJ-2、CJ-4、CJ-13、CJ-14在第22位和161位均出现单个碱基的置换为A→G。本实验中分离菌株均为空肠弯曲菌且分离菌株之间Che W基因保守性强,遗传变异动态性较弱。本研究为空肠弯曲菌遗传变异方面的相关动态研究提供参考依据。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 分离鉴定 CheW基因 序列分析
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空肠弯曲菌产肠毒素性的研究 被引量:4
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作者 吴润 司宏伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期267-271,共5页
通过间接ELISA法和CHO细胞法对 2 86株空肠弯曲菌产生细胞紧张性肠毒素 (Cyto tonicEnterotoxin ,CE)的检测 ,CE的检出率分别为 2 4 5%和 12 2 % ,间接ELISA法的敏感性明显高于CHO细胞法 (P <0 0 0 1) ,并且特异性较高 ,即证实间... 通过间接ELISA法和CHO细胞法对 2 86株空肠弯曲菌产生细胞紧张性肠毒素 (Cyto tonicEnterotoxin ,CE)的检测 ,CE的检出率分别为 2 4 5%和 12 2 % ,间接ELISA法的敏感性明显高于CHO细胞法 (P <0 0 0 1) ,并且特异性较高 ,即证实间接ELISA法是检测CE的特异、敏感、简便的方法。以间接ELISA法检测 ,来自健康蛋鸡、健康后备蛋鸡、腹泻死亡后备蛋鸡、腹泻后备蛋鸡、腹泻死亡仔猪、腹泻仔猪、健康羔羊和腹泻患者菌株的CE检出率分别为 18 8% (12 /6 4 )、12 .5% (1/8)、4 4 .8% (30 /6 7)、2 1 2 % (11/52 )、12 .5% (1/8)、18.8% (15/80 )、0 .0 % (0 /6 )和 0 .0 % (0 /1)。本研究结果分析表明 ,不同来源的菌株在CE产生上有差异 ,CE产生与该菌生物型之间没有相关性 (P >0 5) ,CE产生与鸡的腹泻发生相关 (P <0 0 5) ,并且空肠弯曲菌检出率与CE检出率间呈正相关。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 细胞紧张性肠毒素 病原菌 致病性
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青岛地区空肠弯曲菌的分离鉴定及Jej基因序列分析 被引量:1
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作者 张维 盖文燕 +5 位作者 王娟 王君玮 范红结 曲志娜 黄秀梅 翟海华 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第7期138-143,168,共7页
为调查青岛地区空肠弯曲菌(C.jejuni)的流行状况,采集青岛地区不同分离地点的鸡盲肠棉拭子及内容物98份,经分离鉴定得到23株C.jejuni,分离率达到23.47%。应用C.jejuni的马尿酸酶(Jej)基因作为分子标记,对分离到的23株C.jejuni分离株... 为调查青岛地区空肠弯曲菌(C.jejuni)的流行状况,采集青岛地区不同分离地点的鸡盲肠棉拭子及内容物98份,经分离鉴定得到23株C.jejuni,分离率达到23.47%。应用C.jejuni的马尿酸酶(Jej)基因作为分子标记,对分离到的23株C.jejuni分离株和4株C.jejuni上海分离株进行分析,并与8株已知的C.jejuni序列进行相似性比较,构建系统进化树,对其系统进化关系进行分析。结果表明,分离菌株及已知菌株均能扩增出774bp的Jej基因片段,得到11个不同的序列,有11个核苷酸变异位点,变异率为0.13%~1.42%;基于Jej基因构建的进化树表明,分离株分为2个分支,其中4株分离株与C.J-NCTC11168和C.J-IA3902亲缘关系近,1株与C.JRM1221、C.J-S3亲缘关系近,2株与上海分离株亲缘关系比较近;2株与C.J-81116、C.J-M1组成另外一个分支。 展开更多
关键词 青岛 空肠弯曲菌 马尿酸酶基因 序列分析 系统进化 溯源
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禽源空肠弯曲杆菌耐药性与致病性研究 被引量:1
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作者 王娟 黄秀梅 +5 位作者 张青青 刘俊辉 王琳 刘娜 王君玮 曲志娜 《中国动物检疫》 CAS 2022年第5期55-60,共6页
为了解不同环节禽源空肠弯曲杆菌携带状况及其耐药性与致病性,从肉鸡养殖环节和屠宰环节采集600份样品并分离到241株空肠弯曲杆菌,采用微量肉汤稀释法和PCR方法对分离菌株进行耐药性和毒力基因检测。结果显示:分离菌株对环丙沙星、萘啶... 为了解不同环节禽源空肠弯曲杆菌携带状况及其耐药性与致病性,从肉鸡养殖环节和屠宰环节采集600份样品并分离到241株空肠弯曲杆菌,采用微量肉汤稀释法和PCR方法对分离菌株进行耐药性和毒力基因检测。结果显示:分离菌株对环丙沙星、萘啶酸、四环素的耐药情况尤为严重,耐药率分别为97.75%、96.78%、95.18%;养殖环节分离菌株耐药性比屠宰环节严重,分离菌株对环丙沙星、四环素的耐药率高达100%,对萘啶酸的耐药率为98.67%,对阿奇霉素、红霉素、泰利霉素的耐药率较屠宰环节菌株高约35.00%;分离菌株除未检测到VirBII基因且neuB基因携带率较低外,其他14种毒力基因携带率都较高,有11种毒力基因的携带率达90%以上。将分离菌株接种小白鼠进行致病性试验,发现菌株对小白鼠具有一定致病性。结果表明,禽源弯曲杆菌耐药严重且有一定致病力,应加强对该菌的研究和控制。 展开更多
关键词 空肠弯曲杆菌 耐药性 毒力基因 致病性
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福建省食品中分离的空肠弯曲菌株鞭毛蛋白基因flaA的PCR-RFLP分型 被引量:1
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作者 杨毓环 洪锦春 +1 位作者 叶玲清 张巧姬 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第10期1965-1967,共3页
目的:采用PCR-RFLP基因分型方法对分离自福建省不同地区不同种类食品中的空肠弯曲菌株的鞭毛蛋白基因flaA进行分型,掌握福建省食品中空肠弯曲菌的基因型别,为流行病学追踪调查提供科学依据。方法:采用欧洲弯曲菌实验室网络Campynet推荐... 目的:采用PCR-RFLP基因分型方法对分离自福建省不同地区不同种类食品中的空肠弯曲菌株的鞭毛蛋白基因flaA进行分型,掌握福建省食品中空肠弯曲菌的基因型别,为流行病学追踪调查提供科学依据。方法:采用欧洲弯曲菌实验室网络Campynet推荐的空肠弯曲菌鞭毛蛋白基因flaA的PCR-RFLP分型方法(http://Campynet.vetinst.dk/Fla.htm)。即用PCR技术对弯曲菌的鞭毛蛋白基因flaA上的一个1700 bp片段进行扩增,再用限制性内切酶DdeI对PCR产物进行酶切,通过凝胶电泳并分析酶切图谱。结果:目前福建省食品中分离的空肠弯曲菌基因型别较多样,34株空肠弯曲菌可分为18个型别。不同地区分离的菌株其基因型多不相同,只有4个型别在不同地区的菌株间有重复。结论:空肠弯曲菌鞭毛蛋白基因flaA的PCR-RFLP分型方法分辨率高,可重复性好,不需要特殊设备,且操作简单、快速,适合于实验室开展,且方法标准化后,能将世界各地获得的数据进行比较,从而能更好的了解各个基因型的区域分布和流行趋势。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 鞭毛蛋白基因flaA PCR-RFLP分型
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空肠弯曲菌脂多糖在格林巴利综合征发病中的分子模拟机制研究
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作者 孙世杰 李杰 +3 位作者 于春雷 王莉 李一 李康生 《汕头大学医学院学报》 2006年第1期9-12,共4页
目的:分析空肠弯曲菌脂多糖(LPS)与格林巴利综合征(GBS)患者神经组织之间是否存在分子模拟现象以及探讨空肠弯曲菌LPS在GBS发病中的作用机制。方法:首先从GBS患者粪便中分离培养出空肠弯曲菌,经鉴定后提取其LPS,用空肠弯曲菌LPS制备出GB... 目的:分析空肠弯曲菌脂多糖(LPS)与格林巴利综合征(GBS)患者神经组织之间是否存在分子模拟现象以及探讨空肠弯曲菌LPS在GBS发病中的作用机制。方法:首先从GBS患者粪便中分离培养出空肠弯曲菌,经鉴定后提取其LPS,用空肠弯曲菌LPS制备出GBS动物模型(实验性变态反应性神经炎),最后利用噬菌体肽库筛选技术分析空肠弯曲菌和GBS患者神经组织之间是否存在相似性抗原表位。结果:空肠弯曲菌LPS、牛髓鞘碱性蛋白以及GBS患者外周神经成分之间存在相似抗原表位。结论:空肠弯曲菌LPS和GBS患者外周神经神经节苷脂成分之间存在分子模拟现象,GBS的发病是由于机体针对感染原的免疫应答通过交叉反应导致外周神经组织损伤所致。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 格林巴利综合征 分子模拟 噬菌体肽库筛选
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Modification of Campylobacterjejuni Broiler Colonization by a Feed Additive Composed of Encapsulated Organic Acids and Essential Oils
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作者 Alexandre Thibodeau Philippe Fravalo +6 位作者 Robert Gauthier Evelyne Guevremont Nadia Bergeron Sylvette Laurent-Lewandowski Sylvaln Quessy Martine Boulianne Ann Letellier 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2014年第10期853-864,共12页
The objective of this study was to evaluate the effect of a novel feed additive on chicken intestinal colonization and carcass contamination by Campylobacterjejuni. The feed additive was composed of microencapsulated ... The objective of this study was to evaluate the effect of a novel feed additive on chicken intestinal colonization and carcass contamination by Campylobacterjejuni. The feed additive was composed of microencapsulated organic acids and essential oils (OA/EO). The feed additive tested was provided by Jefo Nutrition Inc., St-Hyacinthe, Quebec, Canada. Day-old birds were separated into two rooms and subdivided into two groups. Chicken were fed with OA/EO or not fed with OA/EO until they reached 35 d of age. At 14 d of age, chickens received an oral suspension of two well characterized C. jejuni strains, depending on the room they were housed in. The levels of C. jejuni were periodically monitored in the caecum and on the carcasses. C. jejuni colonization was further characterized by the use of high-resolution melt analysis of the C. jejuniflaA gene (HRM-flaA). The effect of the feed additive was strain-dependent. In room two, the feed additive had no effect on the caecal counts. In room one, at 35 d of age, caecal C. jejuni counts were higher with OA/EO, as opposed to carcasses counts which were lower in the treated group. The HRM-flaA analysis showed that an amplification profile was predominant in birds fed with OA/EO at 35 d of age in room one, suggesting the selection of a C. jejuni strain. In conclusion, the OA/EO seemed to be effective to reduce C. jejuni levels but this effect appeared strain dependent. 展开更多
关键词 C. jejuni control feed additive HRM organic acids and essential oils chicken colonization.
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空肠弯曲菌PEB1的B细胞免疫优势表位的鉴定及保护效果的评价
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作者 冯健 李运明 +4 位作者 刘毓刚 王艳艳 胡宗海 熊杰 张睿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期302-307,共6页
目的利用表位预测分析技术筛选空肠弯曲菌(C. jejuni)黏附蛋白PEB1的B细胞免疫优势表位,并评价其免疫保护效果。方法采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重叠肽段。ELISA系统筛选鉴定PEB1的B细胞免疫优势表位。采用KLH偶联免疫优势表... 目的利用表位预测分析技术筛选空肠弯曲菌(C. jejuni)黏附蛋白PEB1的B细胞免疫优势表位,并评价其免疫保护效果。方法采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重叠肽段。ELISA系统筛选鉴定PEB1的B细胞免疫优势表位。采用KLH偶联免疫优势表位肽免疫BALB/c小鼠,ELISA测定优势表位肽诱导的IgG抗体效价。末次免疫后7 d,经口灌胃感染C. jejuni 11168,在感染后的28 d,定量检测感染攻毒后各组小鼠的空肠组织C. jejuni的定植量以及q RT-PCR技术检测炎性细胞因子TNF-α的相对表达水平。通过HL-60细胞调理吞噬实验测定表位肽诱导产生抗体所介导的调理吞噬杀伤功能。免疫B细胞缺失小鼠,感染攻毒后检测肠组织C. jejuni的定植量。结果 PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa均能与PEB1抗血清产生强烈IgG抗体反应。抗PEB155-72aa、抗PEB197-114aa和PEB1211-228aa血清均能与重组的PEB1产生较强的抗原抗体反应。与CFA/IFA组相比,免疫PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa后血清中的抗体能够显著增强抗体介导的HL-60细胞的调理吞噬作用(P <0. 01),均显著降低C. jejuni在空肠组织中的定植量,同时也均显著降低炎性细胞因子TNF-α的相对表达水平(P <0. 01)。PEB155-72aa-KLH+CFA/IFA组,PEB197-114aa-KLH+CFA/IFA组,PEB1211-228aa-KLH+CFA/IFA组中,免疫B cell Knock out(B细胞缺失)小鼠攻毒后,C. jejuni在空肠组织中的定植量均显著高于WT(野生型)小鼠的定植量(P <0. 01)。结论成功鉴定出3个具有良好免疫原性和免疫保护作用的优势B细胞抗原表位(PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa),可用于C. jejuni疫苗的后续开发研究。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 PEB1 表位肽 调理吞噬作用
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禽肉空肠弯曲杆菌的多位点序列分型技术研究 被引量:4
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作者 王新 周婷 孟江洪 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期180-186,共7页
目的:了解禽肉空肠弯曲杆菌的耐药表型和基因型。方法:采用琼脂平板稀释法测定从零售禽肉分离的120株空肠弯曲杆菌对环丙沙星(CIP)、强力霉素(DOX)、红霉素(ERY)和硫酸庆大霉素(GEN)的敏感性。采用多位点序列分型(Multilocus Sequence T... 目的:了解禽肉空肠弯曲杆菌的耐药表型和基因型。方法:采用琼脂平板稀释法测定从零售禽肉分离的120株空肠弯曲杆菌对环丙沙星(CIP)、强力霉素(DOX)、红霉素(ERY)和硫酸庆大霉素(GEN)的敏感性。采用多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)技术,选择空肠弯曲杆菌的7个管家基因aspA、glnA、gl-tA、glyA、tkt、pgm和uncA作为目标基因,对这些基因分别进行PCR扩增及产物测序,并将120株菌的测序结果提交到http://pubmlst.org/campylobacter/进行分析。结果:有15株菌(占12.5%)对环丙沙星药物不敏感,19株菌(占15.8%)对强力霉素药物不敏感,4株菌(占3.3%)对环丙沙星和强力霉素都不敏感的菌株,所有菌株对红霉素和硫酸庆大霉素敏感。通过MLST得到68个(含10个新的)等位基因(alleles);43个(含14个新的)序列型(Sequence type,ST),其主要流行序列型依次是ST-353(占15.8%)和ST-50(占7.5%);10个序列型克隆系(ST clonal complexes)和9个没有序列型克隆系,其主要流行序列型克隆系依次是ST-353克隆系(占45%)、ST-48克隆系(占13.3%)、ST-21克隆系(占10.8%)、ST-45克隆系(占5.8%)和ST-460克隆系(占5%);对环丙沙星药物和强力霉素不敏感的序列型和序列型克隆系分别是ST-353和ST-353克隆系。结论:出现对环丙沙星和强力霉素的耐药菌株。禽肉中空肠弯曲杆菌主要流行的序列型克隆系依次是ST-353克隆系、ST-48克隆系、ST-21克隆系、ST-45克隆系和ST-46 0克隆系,耐环丙沙星和强力霉素的序列型和序列型克隆系主要是ST-353及ST-353克隆系。说明应加强禽肉空肠弯曲杆菌的耐药监测。 展开更多
关键词 空肠弯曲杆菌 耐药性 多位点序列分型 基因型分类
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