化瘀散水煎剂通过调控miR-129-5p/FOXC1轴抑制肝癌裸鼠移植瘤生长

目的:探讨化瘀散水煎剂通过调控微小RNA-129-5p/叉头框蛋白C1(FOXC1)轴对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:建立肝癌裸鼠移植瘤模型,并分为裸鼠NC组、化瘀散水煎剂组、化瘀散水煎剂+inhibitor-NC组、化瘀散水煎剂+miR-129-5p inhibitor组,每组8只。qRT-PCR法检测miR-129-5p、FOXC1 mRNA表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-129-5p与FOXC1靶向调控关系,观察记录裸鼠的瘤重及移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织形态,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡,免疫组织化学染色检测瘤组织Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1表达,Western blot检测Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1蛋白表达。结果:miR-129-5p在肝癌细胞中表达显著下降,FOXC1 mRNA表达显著升高,其中HepG2细胞变化最显著(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验表明miR-129-5p与FOXC1存在靶向调控关系;与NC组相比,化瘀散水煎剂组肿瘤细胞出现坏死,凋亡数增加,miR-129-5p、Cleaved Caspase-3显著升高,移植瘤质量和体积、FOXC1、Ki-67表达显著降低(P<0.05);下调miR-129-5p逆转化瘀散水煎剂对肝癌移植瘤的抑制作用(P<0.05)。结论:化瘀散水煎剂可能通过上调miR-129-5p从而下调FOXC1表达,进而抑制肝癌移植瘤生长。

气肿疽梭菌C54-1株的制备与检定

为研究气肿疽梭菌C54-1株(CVCC60001)的菌种特性,制备了1批气肿疽梭菌C54-1株,并对菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性、16S rDNA等进行检定,以及对于该菌的适宜培养基促生长能力等方面进行了比较。实验结果表明,该冻干菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定。16S rDNA鉴定为气肿疽梭菌,相似度为99.93%。在免疫原性检定中,使用致死剂量攻毒时,免疫组能够4/4被保护,证明该菌明矾苗免疫效果良好。使用商品化梭菌培养基对于该菌培养进行了比对,证实商品化培养基替代厌气肉肝汤的可能性。本研究为气肿疽梭菌的制备和检定提供参考依据,并使用不同培养基进行比对研究,为该菌的稳定培养和疫苗工艺改进提供了研究基础。

Niemann-Pick C1蛋白在埃博拉病毒感染中的作用及其靶向药物研究进展

埃博拉病毒属丝状病毒科,具有高传染性,能引起人类和灵长类动物出现严重出血热等症状,病死率高达90%。Niemann-Pick C1(NPC1)蛋白是埃博拉病毒感染过程中表达于宿主细胞内体膜上的一个重要受体,其与埃博拉病毒被组织蛋白酶裂解的糖蛋白(GP)的相互作用是病毒感染宿主的关键环节,介导病毒囊膜与内体膜的融合,进而将病毒基因组释放到宿主细胞。近年来,将NPC1蛋白作为广谱抗丝状病毒药物靶点研发的小分子抑制剂、单克隆抗体和基因治疗药物均有突破性进展。本文介绍了NPC1的结构及其在埃博拉病毒感染中的作用,并对靶向NPC1的小分子抑制剂、单克隆抗体药物和基因治疗药物的研究现状进行总结。

急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术治疗前后血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-12水平变化及意义

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗前后血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-12(CTRP12)水平的变化及意义。方法纳入2021年11月至2022年10月于丹阳市人民医院行急诊PCI术的AMI患者50例和同期住院行冠脉造影结果正常的患者35例,比较两组外周静脉血清CTRP12水平。PCI术前、术中及术后第3、5、7天检测血清CTRP12水平,比较罪犯冠脉口、外周静脉血清CTRP12水平和外周静脉PCI术后不同时间点的变化。采用SYNTAX评分系统评估冠脉病变严重程度,将其分为SYNTAX评分≤22分和SYNTAX评分>22分两组,比较两组外周静脉血清CTRP12水平和PCI术治疗前后不同时间点的变化。分析CTRP12与年龄、体质指数(BMI)、空腹血糖、血脂等因素的相关性。Logistic回归分析冠脉病变严重程度的影响因素。结果AMI患者外周静脉血清CTRP12水平低于正常对照组(P<0.05)。术前外周静脉与术中罪犯冠脉口血清CTRP12水平差异无统计学意义(P>0.05)。与PCI术前相比,术后第3天血清CTRP12水平降低(P<0.05),术后第5天和第7天血清CTRP12水平升高,但差异均无统计学意义(P均>0.05)。与PCI术后第3天相比,术后第5天和第7天血清CTRP12水平升高,但差异均无统计学意义(P均>0.05)。与SYNTAX≤22分组相比,SYNTAX>22分组患者PCI术前和术后第3天血清CTRP12水平降低(P均<0.05),而术后第5天和第7天血清CTRP12水平差异无统计学意义(P均>0.05)。CTRP12与总胆固醇(TC)呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关。单因素Logistic回归分析示CTRP12是AMI患者冠脉病变严重程度的独立影响因素(β=-1.671,OR=0.188,P<0.05);在校正年龄、性别、BMI、吸烟、高血压、糖尿病、空腹血糖、TC、三酰甘油(TG)、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)后,CTRP12仍是AMI患者冠脉病变严重程度的独立影响因素(β=-3.441,OR=0.032,P<0.05)。结论AMI患者PCI术前外周静脉血清CTRP12水平显著降低,术后第3天继续下降,术后第5天和第7天呈上升趋势。CTRP12是AMI患者冠脉严重程度的独立相关因素。

血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA对乳腺癌的诊断及预测术后复发的价值

目的 探讨血清C角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)对乳腺癌的诊断及预测术后复发的价值。方法 选取2019年9月至2020年8月在平顶山市第一人民医院诊治的97例乳腺癌患者作为研究组,随访3 a,按照术后有无复发分为复发组19例和未复发组78例,并选取同期健康体检者50例作为对照组,比较研究组与对照组、复发组与未复发组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平,并分析血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA对乳腺癌的诊断价值,以及对乳腺癌术后复发的预测价值。结果 研究组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平高于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA、四者联合诊断乳腺癌的AUC分别为0.784、0.722、0.754、0.821、0.888,在最佳临界值对应的敏感度、特异度CA125为59.8%、100.0%,CA153为55.7%、100.0%,CEA为58.8%、100.0%,四者联合为70.4%、100.0%。复发组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平高于未复发组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA预测乳腺癌术后复发的AUC分别0.843、0.862、0.825、0.731、0.914,在最佳临界值对应的敏感度、特异度CA125为68.4%、100%,CA153为73.7%、74.4%,CEA为57.9%、88.5%,四者联合为78.9%、96.2%。结论 血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA四者联合对乳腺癌诊断和预测术后复发均具有较高的价值。

柴胡加龙骨牡蛎汤对肝郁大鼠肝脏脂质代谢及SREBP-1c/FAS信号通路的影响

目的 探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对肝郁大鼠肝脏脂质代谢及固醇调节元件结合蛋白-1c/脂肪酸合酶(SREBP-1c/FAS)信号通路的影响。方法 将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、柴胡加龙骨牡蛎低剂量组、柴胡加龙骨牡蛎高剂量组,每组10只。空白组正常喂养,其余组大鼠采用慢性温和不可预知应激(CUMS)方法建立肝郁模型。建模成功后,氟西汀组每天给予盐酸氟西汀0.003 g/kg灌胃,柴胡加龙骨牡蛎低、高剂量组分别每天给予柴胡加龙骨牡蛎汤1.625 g/kg和3.25 g/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续灌胃4周。分别于造模前、成模后及灌胃结束后对大鼠进行称重,进行行为学实验(糖水偏嗜实验、旷场实验、悬尾实验);灌胃结束后处死大鼠,HE染色、油红O染色观察肝脏病理变化,取血检测血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]水平,采用Western blot法检测肝脏组织中SREBP-1c和FAS蛋白表达情况,采用RT-PCR法检测肝脏组织中SREBP-1c和FAS mRNA表达情况。结果 与空白组比较,灌胃结束后模型组大鼠体重、糖水偏嗜率、水平运动得分、垂直运动得分均明显降低(P均<0.05),悬尾不动时间均明显延长(P<0.05),出现肝脏增大、脂滴空泡化及肝细胞脂肪堆积,血清TG、TC、LDL-C水平均明显升高(P均<0.05),血清HDL-C水平明显降低(P<0.05),肝脏组织中SREBP-1c和FAS蛋白及mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠体重、糖水偏嗜率、水平运动得分、垂直运动得分均明显增加(P均<0.05),悬尾不动时间均明显缩短(P均<0.05),肝脏病理改变明显减轻,血清TG、TC、LDL-C水平均明显降低(P均<0.05),血清HDL-C水平均明显升高(P均<0.05),肝脏组织中SREBP-1c和FAS蛋白及mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤对肝郁大鼠的肝脏脂质代谢有调节作用,机制可能与调控SREBP-1c/FAS信号通路相关。

血清CCL20、FAS、SREBP-1c联合检测在结直肠癌临床诊断及预后评估中的应用价值探讨

目的探讨血清趋化因子CC亚家族配体20(CCL20)、脂肪酸合酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)联合检测在结直肠癌临床诊断及预后评估中的应用价值。方法选取2017年1月至2020年5月106例结直肠癌患者为研究对象,50例健康体检者为对照,均检测血清CCL20、FAS、SREBP-1c,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估CCL20、FAS、SREBP-1c的诊断价值,并随访预后结局,进行生存分析。结果结直肠癌组的血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平均高于健康对照组(P<0.05)。血清CCL20、FAS、SREBP-1c诊断结直肠癌的灵敏度分别为80.00%、78.00%、76.00%,特异度分别为68.60%、81.40%、75.50%。血清CCL20、FAS、SREBP-1c水平与分化程度、临床分期有关联(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、大体分型、组织学分型无关联(P>0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组3年无进展生存率分别为41.67%、42.86%、41.11%,低于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的68.18%、73.33%、81.25%(P<0.05)。CCL20、FAS、SREBP-1c高水平组无进展生存时间为33个月,短于CCL20、FAS、SREBP-1c低水平组的38、48、44个月(P<0.05)。结论血清CCL20、FAS、SREBP-1c可能与结直肠癌的发生发展有一定关联,可作为结直肠癌的辅助诊断筛查和预后随访指标,血清CCL20、FAS、SREBP-1c高水平可能预示着肿瘤进展和预后不良。

川崎病患儿血清CaN、NFATc1水平与免疫球蛋白治疗反应的相关性

目的探讨川崎病患儿血清钙调神经磷酸酶(CaN)、活化T细胞核因子c1(NFATc1)水平与免疫球蛋白(IVIG)治疗反应的相关性,以期为临床改善治疗效果提供理论参考。方法采用前瞻性研究,选取平顶山市第一人民医院2018年1月至2023年1月100例川崎病患儿作为研究对象,检测入院时患儿的血清CaN、NFATc1水平,同时收集患儿的一般资料,根据IVIG治疗反应情况分为IVIG治疗敏感组与IVIG治疗无反应组。比较两组患儿的血清CaN、NFATc1水平及一般资料,采用点二列相关性检验血清CaN、NFATc1水平与IVIG治疗反应之间的关系,并采用logistic回归性检验二者对IVIG治疗反应的影响。结果100例患儿中有20例为IVIG治疗无反应,占比为20%(20/100)。IVIG治疗无反应组患儿入院时血清CaN、NFATc1及C反应蛋白(CRP)水平高于IVIG治疗敏感组(P<0.05)。经点二列相关性检验显示血清CaN、NFATc1水平与川崎病患儿IVIG治疗无反应存在正相关关系(r>0,P<0.05)。经logistic回归性分析检验显示高水平血清CaN、血清NFATc1是导致患儿IVIG治疗无反应的影响因素(P<0.05)。结论川崎病患儿IVIG治疗无反应发生风险较高,且与血清CaN、血清NFATc1存在关系,二者的高水平表达是导致IVIG治疗无反应的影响因素。

补体C1s对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1s小干扰RNA(siRNA)、C1s短发夹RNA(shRNA)或C1s过表达慢病毒对ESCC细胞进行C1s的敲低或过表达,CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Western blot检测基质金属蛋白酶MMP1和MMP13表达;裸鼠皮下成瘤实验检测C1s对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组织化学法检测移植瘤中CD34表达,分析肿瘤微血管的形成。结果:ESCC组织中C1S mRNA表达明显高于ANTs,敲低C1s可明显抑制ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长,而过表达C1S则具有相反的效果;C1s敲低的ESCC细胞TE-1中MMP1和MMP13的表达降低;与对照组相比,C1s过表达组移植瘤中的微血管更加丰富。结论:C1s在ESCC组织中显著上调,并促进ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长。C1s可能在ESCC发生发展中发挥重要作用。

贲门癌组织FOXC1、SOX11表达及与病人临床病理特征和预后的关系

目的 观察贲门癌病人癌组织中和癌旁正常组织叉头框C1(FOXC1)、性别决定区Y框蛋白11(SOX11)的表达变化,并探讨二者表达与临床病理特征和预后的关系。方法 收集本院2018年3月~2020年3月期间确诊的94例贲门癌病人,所有病人均行腹腔镜近端胃切除+胃食管吻合术,根据病人3年预后情况分为生存组(54例)和死亡组(40例)。采用免疫组化法检测组织FOXC1、SOX11表达水平,采用Kaplan-Meier法分析贲门癌病人癌组织FOXC1、SOX11表达水平与3年生存率的关系,采用Cox风险回归模型分析贲门癌病人3年预后的影响因素。结果 贲门癌病人癌组织中FOXC1阳性表达率高于正常组织,SOX11阳性表达率低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。病理分期Ⅲ+Ⅳ期、组织低分化、有淋巴结转移的贲门癌病人癌组织中FOXC1阳性表达率和SOX11阴性表达率显著高于病理分期Ⅰ+Ⅱ期、组织中/高分化、无淋巴结转移病人(P<0.05)。死亡组病理分期Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移、FOXC1阳性表达、SOX11阴性表达病人比例高于生存组(P<0.05)。贲门癌病人癌组织中FOXC1阳性表达病人3年生存率低于FOXC1阴性表达病人(P<0.05);贲门癌病人癌组织中SOX11阴性表达病人3年生存率低于SOX11阳性表达病人(P<0.05)。FOXC1是贲门癌病人3年随访期内死亡的独立危险因素,SOX11是贲门癌病人3年随访期内死亡的保护因素(P<0.05)。结论 FOXC1高表达、SOX11低表达可能参与贲门癌的发生发展,与病人不良预后有重要联系。

急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术前后血清CTRP12水平变化及其与支架内再狭窄的关系

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)前后血清补体C1肿瘤坏死因子相关蛋白家族12(CTRP12)水平的变化及与对支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选取2021年1月至2023年6月江苏省丹阳市人民医院确诊为AMI并行PCI的患者104例,统计术后12个月内ISR发生率,并根据复查冠脉造影结果将其分为ISR组和非ISR组。比较两组患者PCI术前和出院前日血清CTRP12水平。Logistic回归分析AMI患者PCI术后ISR的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析CTRP12对AMI患者PCI术后ISR的预测价值。结果104例AMI患者PCI术后12个月ISR发生率为14.4%(15/104)。ISR组术前TIMI血流≤1比例、白细胞计数、中性粒细胞计数、TC、LDL-C较非ISR组显著升高,出院前日血清CTRP12水平低于非ISR组(P<0.05)。非ISR组中,出院前日血清CTRP12水平较术前升高(P<0.05)。ISR组中,出院前日血清CTRP12水平较术前降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,出院前日血清CTRP12水平降低是AMI患者PCI术后ISR的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,出院前日血清CTRP12对AMI患者PCI术后ISR预测的最佳截断点为3.89 ng/mL(敏感度93.3%,特异度73.0%),ROC曲线下面积(AUC)为0.849。结论出院前日血清CTRP12水平对AMI患者PCI术后ISR发生具有一定预测价值,CTRP12可能是AMI患者PCI术后ISR的治疗靶分子。

2型糖尿病并发视网膜病变患者血清皮质醇、肌生成抑制素、SCUBE-1水平变化及临床意义

目的探讨2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病视网膜病变(DR)患者血清皮质醇、肌生成抑制素(Mstn)、信号肽-补体蛋白C1r/C1s、Uegf和Bmp1-表皮生长因子结构域包含蛋白1(SCUBE-1)的水平变化,并分析其与增生型DR的关系。方法将2018年3月至2021年12月北京中医医院怀柔医院眼科收治的T2DM并发DR患者365例纳入研究,根据有无新生血管分为增生型DR组(62例)和非增生型DR组(303例)。将同期北京中医医院怀柔医院内分泌科收治的单纯T2DM患者51例纳入研究作为T2DM组。另外,选取同期于北京中医医院怀柔医院体检健康者51例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清皮质醇、Mstn和SCUBE-1水平,同时收集纳入研究者基线资料,采用Pearson相关分析血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1与基线资料中各指标的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1对增生型DR的诊断价值。结果血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1水平的组间比较显示,增生型DR组均高于非增生型DR组,非增生型DR组均高于T2DM组,T2DM组均高于健康对照组(P<0.05)。单因素分析显示,增生型DR组体重指数(BMI)、空腹糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血清葡萄糖(FSG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、血尿素(Urea)、血肌酐(Cr)、尿清蛋白排泄率(UAER)高于非增生型DR组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,T2DM并发DR患者血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1水平与BMI、糖尿病病程、HbA1c、FSG、FINS、HOMA-IR、TG、Urea、Cr、UAER均呈正相关(P<0.05)。血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1、两两联合(皮质醇+Mstn、皮质醇+SCUBE-1、Mstn+SCUBE-1)及3项指标联合检测诊断增生型DR的ROC曲线下面积分别为0.695、0.747、0.742、0.768、0.758、0.771、0.838,3项联合应用的诊断效能较高。结论T2DM并发DR患者血清皮质醇、Mstn、SCUBE-1水平异常升高,与增生型DR有关,3项指标联合检测对增生型DR具有较高的诊断价值。

鸭圆环病毒ORF-C1基因的扩增及遗传进化分析

鸭圆环病毒(DuCV)感染能够引起鸭的免疫抑制,引起多种病原的继发性感染,在我国鸭群中广泛流行。为了解DuCV的遗传变异情况,对采自山东、江苏和贵州3个省份的19个鸭场的样品进行了PCR测定,并对DuCV的ORF-C1基因进行测序和遗传进化分析。PCR测定结果显示,19个鸭场中有9个鸭场的样品为DuCV阳性,总体阳性率为47.4%;ORF-C1基因序列测定结果显示,9株DuCV之间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为93.4%~100%和82.2%~100%,与NCBI中已公布的DuCV毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为77.8%~99.5%和71.5%~-99.6%;遗传进化分析显示,9株DuCV全部属于DuCV-1b亚型,其中有7株在同一分支上,与D11-JW-001等韩国毒株遗传距离较近,另外2株则与山东、广西的毒株遗传距离较近;此外,与已公布的毒株相比,9株DuCV都在158位发生了氨基酸突变,由E/D变为L/P。上述结果表明,DuCV-1仍然为我国鸭群中的优势流行基因型,但病毒的基因也在不断地发生变异,应该对其进行持续监测。

载脂蛋白C1表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨载脂蛋白C1 (APOC1)表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步阐明其相关分子机制。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测不同肝癌细胞中APOC1mRNA表达水平,筛选APOC1低表达的人肝癌HepG2细胞作为研究对象。将pcDNA3.1-APOC1质粒转染至HepG2细胞过表达APOC1 (APOC1过表达组),以转染空载体pcDNA3.1的HepG2细胞为对照组,采用MTS法和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测2组细胞增殖活性和增殖率,Transwell小室实验检测2组细胞中迁移细胞数,流式细胞术和TUNEL法检测2组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率,Western blotting法检测2组细胞中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、蛋白激酶B (AKT)、磷酸化AKT (p-AKT)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:TCGA数据库分析,肝癌患者癌组织中APOC1 mRNA表达水平低于正常肝组织(P<0.05),并且APOC1 mRNA低表达组肝癌患者预后较差。RT-qPCR法检测,HepG2细胞中APOC1 mRNA表达水平最低,选取该细胞作为后续研究对象。与对照组比较,APOC1过表达组细胞增殖活性和增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),迁移细胞数明显减少(P<0.01), S期细胞百分率和细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与对照组比较,APOC1过表达组细胞中p-ERK、 p-AKT和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:APOC1高表达能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其机制可能与其抑制p-ERK、p-AKT、Bcl-2蛋白表达和促进cleaved caspase-3蛋白表达有关。

过表达CTRP6通过调控Nrf2/HO-1通路在减轻糖尿病小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨过表达C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-6(CTRP6)通过调控核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路在减轻糖尿病小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法于2021年9月-2022年6月在武汉大学人民医院进行实验,选取清洁级雄性C57BL/6小鼠18只,采用随机数字表法分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(IR)、脑缺血再灌注+CTRP6过表达组(IR+CTRP6),各6只。IR组、IR+CTRP6组连续5 d腹腔注射STZ 50 mg/kg建立小鼠糖尿病模型,IR+CTRP6组在糖尿病模型建立3周后脑室注射腺相关病毒(AAV)-CTRP6,6周后2组采用线栓法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型,Sham组仅行手术操作不作任何处理。再灌注24 h后TTC检测脑梗死面积;Western-blot检测Nrf2、HO-1、NQO-1、p-NF-κB/NF-κB、p-IKK/IKK蛋白水平;WST-1法检测SOD,可见光法检测CAT,TBA法检测MDA,ELISA法检测IL-1β、TNF-α、MCP-1水平;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;原位凋亡荧光素检测细胞凋亡情况。结果与Sham组比较,IR组Nrf2、HO-1、NQO-1、SOD、CAT均降低(P均<0.01),p-NF-κB/NF-κB、p-IKK/IKK、MDA、IL-1β、TNF-α、MCP-1、Caspase-3、Caspase-9、TUNEL阳性细胞升高(P均<0.01);与IR组比较,IR+CTRP6组Nrf2、HO-1、NQO-1、SOD、CAT均升高(P均<0.01),脑梗死面积、p-NF-κB/NF-κB、p-IKK/IKK、MDA、IL-1β、TNF-α、MCP-1、Caspase-3、Caspase-9、TUNEL阳性细胞均降低(P均<0.01)。结论CTRP6通过调控氧化应激、炎性反应、细胞凋亡进而减轻糖尿病小鼠脑缺血再灌注损伤。

FOXC1人表皮干细胞向汗腺细胞分化的影响

目的探究叉头框C1(FOXC1)对人表皮干细胞向汗腺细胞分化的影响及可能机制。方法收集2021年1月至2022年6月行包皮环切术7例的患者正常包皮组织,分离培养得到表皮干细胞,采用慢病毒介导FOXC1基因进行转染,并为过表达组、干扰组和对照组,RT-PCR及Western blot检测细胞FOXC1 mRNA及蛋白表达,MTT实验及吉姆萨染色检测细胞增殖水平、克隆形成率,ELISA检测培养基中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达,激光共聚焦显微镜检测Ca^(2+)荧光强度,Western blot检测细胞角蛋白(CK19)、CK18、癌胚抗原(CEA)、β1整合素(ITGB1)表达。结果与对照组比较,过表达组细胞中FOXC1 mRNA及蛋白相对表达量、细胞增殖水平、细胞克隆形成率、Ca^(2+)荧光强度、MMP-2、MMP-9、表皮干细胞标记物CK18、CEA蛋白表达量升高(P<0.05),ITGB1、CK19蛋白表达量降低(P<0.05);与对照组比较,干扰组中FOXC1 mRNA及蛋白相对表达量、细胞增殖水平、细胞克隆形成率、Ca^(2+)荧光强度、MMP-2、MMP-9、表皮干细胞标记物CK18、CEA蛋白表达量降低(P<0.05),ITGB1、CK19蛋白表达量升高(P<0.05)。结论FOXC1可促进表皮干细胞向汗腺细胞分化的表型改变,其作用可能与其能促进表皮干细胞增殖及上调Ca^(2+)、MMP-2、MMP-9表达有关。

感染性肺炎患儿血清APOC1、CCL5、MMP-9水平变化及相关性分析

目的探讨感染性肺炎患儿血清载脂蛋白C1(APOC1)、趋化因子C-C基元配体5(CCL5)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平变化及其相关性。方法选取2020年2月至2022年2月山西省儿童医院108例感染性肺炎患儿作为研究组,同期65例体检健康儿童作为对照组。统计两组血清APOC1、CCL5、MMP-9水平、肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)]。Pearson分析血清各指标间相关性及其与肺功能相关性,绘制受试者工作特征曲线评价血清各指标对感染性肺炎的诊断价值,并对血清各指标不同表达水平患儿发生感染性肺炎的危险性进行比较。结果轻症组、重症组血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于对照组,FEV1/FVC、FEV1%低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重症组血清APOC1、CCL5、MMP-9水平高于轻症组,FEV1/FVC、FEV1%低于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染性肺炎患儿血清APOC1、CCL5、MMP-9水平与FEV1/FVC、FEV1%均呈负相关(P<0.05);感染性肺炎患儿血清APOC1与CCL5、MMP-9呈正相关,CCL5与MMP-9呈正相关(r=0.836,P<0.0001;r=0.805,P<0.0001;r=0.841,P<0.0001)。血清APOC1、CCL5、MMP-9联合检测诊断感染性肺炎的曲线下面积(AUC)高于各指标单项检测的AUC。APOC1、CCL5、MMP-9高表达水平可增加感染性肺炎发生风险。结论感染性肺炎患儿血清APOC1、CCL5、MMP-9水平升高,且与肺功能损伤有关,监测其水平变化有助于诊断感染性肺炎,可为评估该疾病发生风险、病情进展提供参考。

FOXC1和E-Cadherin表达水平与肝癌临床预后的关系及对肝癌细胞生物学行为的影响

目的探讨叉头框转录基因C1(FOXC1)和上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)在肝癌组织中的表达,并分析与预后相关性及对癌细胞生物学行为的影响。方法将2017年4月—2022年4月在西北大学附属医院/西安市第三医院接受根治术治疗的85例原发性肝细胞癌患者为研究对象,均术中采集癌灶组织和癌旁组织,通过免疫组织化学法测定FOXC1、E-Cadherin的表达水平,并分析两者表达与患者预后的相关性。并选用细胞系HepG2,分为sh FOXC1、sh NC及空白对照组,通过平板克隆实验、Transwell实验测定细胞的增殖与侵袭能力。结果通过测定,本组病例肝癌组织中FOXC1蛋白和E-Cadherin阳性表达率分别为74.12%、28.24%,癌旁组织分别为43.53%、100.00%,差异存在统计学意义(P<0.05)。TNM分期是Ⅲ~Ⅳ期、低中分化、肿瘤直径≥3cm患者的FOXC1阳性表达率高,E-cadherin阳性表达率低,差异均存在统计学意义(P<0.05)。通过Spearman分析显示,在肝癌组织中FOXC1表达与预后呈负相关(P<0.05),E-Cadherin表达水平与预后呈正相关(P<0.05)。通过细胞实验,空白对照组、sh NC组FOXC1表达水平高于正常组,而E-cadherin表达低于正常组,差异均存在统计学意义(P<0.05)。在敲低FOXC1后,癌细胞增殖、侵袭等能力均显著减弱(P<0.05)。结论FOXC1、E-cadherin表达和肝癌治疗预后存在相关性,前者通过促进癌细胞增殖,并抑制后者表达促进上皮-间充质转化进程,增强肝癌细胞侵袭性,影响到临床预后。

益气养阴活血方对IgA肾病小鼠外周血B淋巴细胞C1β-3-GaLT11、Cosmc表达及肠黏膜免疫反应的影响

目的:探究益气养阴活血方对IgA肾病小鼠外周血B淋巴细胞核心1β1,3-半乳糖基转移酶(C1β-3GaLT11)及其伴侣蛋白(Cosmc)表达和肠道黏膜免疫反应的影响。方法:小鼠随机分为空白组、模型组、中药(益气养阴活血方)低、中、高剂量组,每组15只。除空白组外,其余各组建立小鼠IgA肾病模型。检测血清白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平;检测血清Gd-IgA1水平及肾小球系膜区Gd-IgA1荧光强度;HE染色及PAS染色观察肾组织病理改变;HE染色观察结肠组织病理变化;qRT-PCR法检测外周血B淋巴细胞Cosmc mRNA、C1β-3-GaLT11 mRNA表达;Western Blot法检测结肠组织中Cosmc、C1β-3-GaLT11、B细胞活化因子(Baff)、TGF-β表达及肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素17(IL-17)、TGF-β蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠Gd-IgA1沉积、蛋白尿和血尿症状增加,肾功能降低,肾小球系膜增生及肾小管炎症浸润明显,肠黏膜炎症浸润等病理损伤严重,肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc及C1β-3-GaLT11活性降低,Gd-IgA1生成增多(P<0.05)。益气养阴活血方可降低Gd-IgA1沉积,改善IgA肾病小鼠蛋白尿和血尿症状,促进肾功能恢复,缓解肾小球系膜增生及肾小管炎症浸润,缓解肠黏膜炎症浸润,提高肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc、C1β-3-GaLT11活性,抑制Gd-IgA1生成(P<0.05)。结论:益气养阴活血方可改善肠黏膜损伤、提高肠道及外周血B淋巴细胞表面的Cosmc、C1β-3-GaLT11活性,使其催化IgA糖基化能力增强,减少Gd-IgA1生成及沉积,缓解Gd-IgA1诱发的IgA肾病肾损伤。

非酒精性脂肪性肝病患者外周血内皮素、C型凝集素-1水平与小肠细菌过度生长、肝纤维化的关系

目的探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血内皮素(ET)、C型凝集素-1(Dectin-1)水平与小肠细菌过度生长(SIBO)、肝纤维化的关系。方法选择2021年10月至2022年10月沧州市中心医院收治的88例NAFLD患者作为研究对象(设为NAFLD组),另选择同期在该院体检的65名健康体检者作为对照组。采用ELISA法检测受试者血清ET和Dectin-1水平。采用Pearson相关系数法分析NAFLD患者外周血ET、Dectin-1水平与SIBO的相关性。采用ROC曲线分析外周血ET、Dectin-1水平对NAFLD患者肝纤维化的评估价值。结果与对照组相比,NAFLD组的SIBO阳性率及血清ET、Dectin-1水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.001)。与SIBO阴性组相比,SIBO阳性组的乳果糖氢呼气试验(LHBT)集值及血清ET、Dectin-1水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,NAFLD组血清ET、Dectin-1水平与LHBT集值均呈正相关(r=0.552,P<0.05;r=0.451,P<0.05)。与对照组相比,无肝纤维化组、轻度肝纤维化组和重度肝纤维化组的血清ET、Dectin-1水平均显著升高,且随肝纤维化程度加重,血清ET、Dectin-1水平随之升高(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清ET、Dectin-1水平评估NAFLD患者肝纤维化的最佳截断值分别为65.63 pg/mL、18.52 pg/mL。血清ET和Dectin-1联合检测评估NAFLD患者肝纤维化的曲线下面积(AUC)均大于单项检测,差异均有统计学意义(P均<0.05),且联合检测的特异度较高。结论与健康人群相比,NAFLD患者外周血ET、Dectin-1水平均显著升高,且其水平与SIBO阳性率呈正相关。NAFLD患者外周血ET与Dectin-1联合检测评估患者肝纤维化具有一定应用价值。