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空气细颗粒物通过补体C3a/C3aR轴诱导上皮细胞炎症 被引量:2
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作者 梁爽 闫冰 +1 位作者 王成硕 张罗 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第6期377-381,共5页
目的探讨空气细颗粒物(PM2.5)诱导上皮细胞炎症反应的潜在机制。方法人正常肺支气管上皮细胞Beas-2b细胞暴露于不同剂量PM2.5(0、25、50、100μg/ml)24 h后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测细... 目的探讨空气细颗粒物(PM2.5)诱导上皮细胞炎症反应的潜在机制。方法人正常肺支气管上皮细胞Beas-2b细胞暴露于不同剂量PM2.5(0、25、50、100μg/ml)24 h后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测细胞中胸腺基质淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)、白细胞介素6(IL-6)、IL-8、IL-1β和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF),以及补体C3(complement component 3)、C3a及其受体C3aR表达水平。并利用C3aR拮抗剂处理Beas-2b细胞验证其对PM2.5诱导的炎症水平的抑制作用。结果PM2.5暴露诱导上皮细胞中TSLP、IL-6、IL-8、IL-1β和GMCSF表达显著上调,并诱导细胞中补体C3、C3a和C3aR的基因和蛋白水平显著增加。而C3aR拮抗剂处理可显著抑制PM2.5诱导的Beas-2b细胞中TSLP、IL-6、IL-8和IL-1β的增加。C3aRA也可下调PM2.5诱导的GMCSF表达增加,但差异无统计学意义。结论PM2.5可能通过补体C3a/C3aR轴诱导上皮细胞炎症反应。 展开更多
关键词 颗粒物 上皮细胞 支气管 补体c3 炎症 空气细颗粒物 BEAS-2B细胞
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维甲酸对银屑病红细胞表面天然免疫分子CD59表达及补体C3和C4的影响 被引量:3
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作者 刘辉 顾军 《医学与哲学(B)》 2015年第4期69-70,共2页
研究维甲酸治疗前后银屑病红细胞表面天然免疫分子CD59表达及血清补体C3、C4的变化,以探讨红细胞天然免疫功能变化在银屑病发病机制中的作用。对33例中重度寻常型银屑病患者阿维A口服20mg,1次/天,疗程3个月,同时用银屑病面积和严重度指... 研究维甲酸治疗前后银屑病红细胞表面天然免疫分子CD59表达及血清补体C3、C4的变化,以探讨红细胞天然免疫功能变化在银屑病发病机制中的作用。对33例中重度寻常型银屑病患者阿维A口服20mg,1次/天,疗程3个月,同时用银屑病面积和严重度指数(PASI)评分评价疗效;治疗前后分别采用流式细胞仪定量测定红细胞CD59,用数率蛋白比浊法检测血清补体C3、C4含量。结果33例银屑病患者长期小剂量阿维A口服有效率84%,维甲酸治疗前后银屑病患者红细胞CD59定量存在明显差异(P<0.05),治疗前后红细胞CD59定量与PASI评分呈显著正相关(γ=0.913,P<0.001)。维甲酸治疗银屑病疗效确切,其对银屑病患者红细胞天然免疫功能的紊乱可能有免疫调节作用,并进一步影响特异性免疫的反应进行模式,从而发挥治疗作用。银屑病红细胞CD59测定可作为银屑病病情评估的指标。 展开更多
关键词 银屑病 维甲酸 红细胞 天然免疫 CD59 c3 C4
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子宫平滑肌细胞SM22-α基因的pEGFP-C3载体构建及siRNA筛选 被引量:1
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作者 胡灵玉 周昌菊 +4 位作者 谷永红 杨益民 丁小凤 周芳亮 贺琼芝 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第2期146-149,共4页
为研究SM22-α基因在子宫平滑肌中作用机制提供实验基础,通过筛查siRNA有效序列,来构建含SM22-α基因的pEGFP-C3-SM22-α载体.首先构建含有SM22-α基因的pEGFP-C3载体;其次利用FT293细胞并采用Western-bolt检测SM22-α蛋白表达的改变,... 为研究SM22-α基因在子宫平滑肌中作用机制提供实验基础,通过筛查siRNA有效序列,来构建含SM22-α基因的pEGFP-C3-SM22-α载体.首先构建含有SM22-α基因的pEGFP-C3载体;其次利用FT293细胞并采用Western-bolt检测SM22-α蛋白表达的改变,筛查到siRNA有效序列;得到含SM22-α基因pEGFP-C3-SM22-α载体和干扰SM22-α表达蛋白的siRNA有效片段,成功干扰SM22-α蛋白在子宫平滑肌中的表达. 展开更多
关键词 子宫平滑肌细胞 SM22-α基因 pEGFP-c3-SM22-α载体 SIRNA
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积雪草苷合大黄素对肿瘤坏死因子α诱导的肾系膜细胞C3表达的影响 被引量:11
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作者 朱晓玲 王永钧 +2 位作者 张迎华 杨汝春 卜爽剡 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第4期414-417,共4页
目的:探讨积雪草苷合大黄素干预肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的BALB/C小鼠肾小球系膜细胞补体核心成分-C3 mRNA及蛋白的表达水平.方法:采用BALB/C第3~5代肾小球系膜细胞,模型组TNFα 5 ng·ml^-1诱导 24 h,治疗组在TNFα诱导的同... 目的:探讨积雪草苷合大黄素干预肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的BALB/C小鼠肾小球系膜细胞补体核心成分-C3 mRNA及蛋白的表达水平.方法:采用BALB/C第3~5代肾小球系膜细胞,模型组TNFα 5 ng·ml^-1诱导 24 h,治疗组在TNFα诱导的同时,分别以积雪草苷1、2、4 μg·ml^-1合大黄素 0.1、0.2、0.4 μg·ml^-1进行干预,于 24 h 后分别提取细胞上清及RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶链免疫方法(ELISA)分别检测肾小球系膜细胞C3 mRNA和蛋白的表达.结果:正常BALB/C小鼠的肾小球系膜细胞具有一定的C3 mRNA和蛋白表达.经TNFα诱导后C3 mRNA和蛋白表达均明显上调,用上述3种不同浓度的积雪草苷合大黄素干预后,肾小球系膜细胞C3 mRNA及蛋白水平表达均出现不同程度的下调,呈一定的剂量依赖关系.结论:积雪草苷合大黄素能够抑制炎性细胞因子TNFα上调所致的肾局部C3过度产生,具有保护肾功能、延缓病程进展的作用. 展开更多
关键词 积雪草苷合大黄素 肾系膜细胞 肿瘤坏死因子Α 补体c3
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慢性B淋巴细胞白血病、肾脏淀粉样变性合并C3肾小球病 被引量:2
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作者 张志宏 谢红浪 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期195-200,共6页
老年男性患者,临床表现肾病综合征,血清单克隆游离轻链比例异常,免疫固定电泳见κ型Ig G单克隆免疫球蛋白条带,肾活检病理提示肾淀粉样变性合并C3肾小球病,间质大量CD20+细胞浸润。骨髓穿刺及活检提示淋巴浆细胞高度增生。结合临床、病... 老年男性患者,临床表现肾病综合征,血清单克隆游离轻链比例异常,免疫固定电泳见κ型Ig G单克隆免疫球蛋白条带,肾活检病理提示肾淀粉样变性合并C3肾小球病,间质大量CD20+细胞浸润。骨髓穿刺及活检提示淋巴浆细胞高度增生。结合临床、病理最终诊断慢性B淋巴细胞白血病、肾淀粉样变性合并C3肾小球病。 展开更多
关键词 B淋巴细胞白血病 肾淀粉样变性 c3肾小球病
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RAC3基因对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:3
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作者 盛菲 纪逸萱 +2 位作者 丁海遐 章青 李文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期399-403,共5页
目的探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学(第二军医大学)长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用q PCR... 目的探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3(RAC3)对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学(第二军医大学)长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用q PCR法检测绒毛组织中RAC3 m RNA的表达。取C57/B6小鼠孕6.5、14.5和19.5 d的胎盘组织进行m RNA芯片检测。在早期人滋养层细胞系HTR-8/SVneo中干扰和过表达RAC3后,应用CCK-8法和Transwell实验检测RAC3对HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果不明原因自然流产绒毛组织中RAC3 m RNA的表达低于人工流产绒毛组织(P<0.05)。小鼠孕6.5、14.5 d胎盘组织中Rac3m RNA的表达高于孕19.5 d(P均<0.05)。与对照组相比,干扰RAC3表达后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱(P均<0.05),过表达RAC3后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P均<0.01)。结论 RAC3对早期滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有重要调控作用。 展开更多
关键词 自然流产 人工流产 ras相关c3肉毒杆菌毒素底物3 胎盘 滋养层细胞
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帕瑞昔布钠抑制补体C3表达减轻骨癌痛的实验分析
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作者 高美玲 蔡强 +2 位作者 柯昌斌 许先成 王贤裕 《浙江临床医学》 2015年第6期914-915,共2页
目的:探讨帕瑞昔布钠抑制补体C3表达减轻骨癌痛的作用。方法健康雌性SD大鼠120只,体重160-200 g,随机分为4组(每组30只):假手术组(S组)、骨癌痛组(P组)、帕瑞昔布钠治疗组(T组)和C3补体抑制剂(PEG-Cp40)干预组(C组)。P... 目的:探讨帕瑞昔布钠抑制补体C3表达减轻骨癌痛的作用。方法健康雌性SD大鼠120只,体重160-200 g,随机分为4组(每组30只):假手术组(S组)、骨癌痛组(P组)、帕瑞昔布钠治疗组(T组)和C3补体抑制剂(PEG-Cp40)干预组(C组)。P组、T组和C组均采用胫骨髓腔内注射Walker-256乳腺癌细胞的方法建立大鼠胫骨癌痛模型,S组胫骨骨髓腔内注射等量生理盐水。T组和C组分别鞘内注射帕瑞昔布钠和PEG-Cp40蛋白质10mg。分别于造模前1d及术后3、5、7、14d时测定机械痛阈值,痛阈测定结束后处死大鼠,取脊髓组织,采用免疫比浊法测定脊髓后角中C3补体的表达情况;采用RT-PCR法测定C3的mRNA表达情况。结果与S组比较,P组接种后5-14d机械痛阈下降(P〈0.05),C3含量和mRNA水平明显上调(P〈0.05);与P组比较,T、C组造模后7-14d机械痛阈升高(P〈0.05),C3含量和mRNA水平明显下降(P〈0.05);T、C组间未见明显差异(P〉0.05)。结论帕瑞昔布钠可能通过抑制C3作用来减轻骨癌痛。 展开更多
关键词 帕瑞昔布钠 补体c3 小胶质细胞 骨癌痛
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非小细胞肺癌组织中AKR1C3水平及其临床意义 被引量:1
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作者 陈宓 贾霖 韩建军 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第9期787-791,共5页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中醛酮还原酶1 C3(AKR1C3)表达及其临床意义。方法收集2013年1月至2016年3月88例手术切除的NSCLC组织及83例癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测上述组织中的AKR1C3表达水平,分析AKR1C3表达与... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中醛酮还原酶1 C3(AKR1C3)表达及其临床意义。方法收集2013年1月至2016年3月88例手术切除的NSCLC组织及83例癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测上述组织中的AKR1C3表达水平,分析AKR1C3表达与NSCLC临床病理参数(性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、组织学类型及淋巴结转移)的关系;根据随访资料分析AKR1C3表达与预后的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价AKR1C3表达在NSCLC早期诊断中的效能。结果 NSCLC组AKR1C3表达水平为0.187±0.175,低于癌旁正常组织的1.079±0.384,差异有统计学意义(P<0.05);AKR1C3诊断NSCLC的曲线下面积为0.982(95%CI:0.966~0.998)。AKR1C3表达与NSCLC性别、年龄、组织学类型及淋巴结转移无关,与肿瘤大小及TNM分期有关。肿瘤大小>3 cm的AKR1C3表达量为0.095±0.055,低于肿瘤大小≤3 cm的0.340±0.201,而Ⅲ、Ⅳ期的AKR1C3表达量为0.094±0.058,低于Ⅰ、Ⅱ期的0.265±0.202,差异有统计学意义(P<0.05)。全组NSCLC患者的中位总生存期(OS)为17.60个月。AKR1C3高表达者的中位OS为20.60个月,高于低表达者的11.90个月,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+Ⅱ期患者的中位OS为21.65个月,高于Ⅲ+Ⅳ期的16.20个月,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤大小≤3 cm者的中位OS为18.40个月,高于>3 cm者的15.70个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AKR1C3在NSCLC组织中表达降低,且与TNM分期、肿瘤大小及预后有关,可能与NSCLC发生发展有关,在NSCLC诊断及病情评估有一定价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 醛酮还原酶1 c3 临床意义 预后
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超声介导白蛋白微泡破裂法促进增强型绿色荧光蛋白C3基因在中国仓鼠卵巢细胞的表达
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作者 管晓翔 范乐明 +3 位作者 陈琪 郦明芳 李肖蓉 邵力正 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2003年第1期27-30,共4页
基因治疗的研究已取得不少进展 ,但要成功地应用于临床仍存在许多困难 ,安全、有效的基因载体及良好的靶向性就是其中最重要的难点之一。本研究根据超声介导白蛋白微泡破裂可以增加真核细胞膜对大分子 (如DNA)通透性的原理 ,探讨一种新... 基因治疗的研究已取得不少进展 ,但要成功地应用于临床仍存在许多困难 ,安全、有效的基因载体及良好的靶向性就是其中最重要的难点之一。本研究根据超声介导白蛋白微泡破裂可以增加真核细胞膜对大分子 (如DNA)通透性的原理 ,探讨一种新的转基因方法 ,以便安全有效和定向地转移目的基因。实验中选择绿色荧光蛋白C3基因为标记基因 ,以白蛋白微泡为载体 ,用超声介导微泡破裂的方法在体外进行中国仓鼠卵巢细胞的基因转化 ,同时以脂质体为对照 ,激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率。台盼蓝染色观察细胞的活性。体外试验发现 0 .8MHz、1.0W cm2 、10 %脉冲周期、60s超声介导 10 %白蛋白微泡破裂可以有效稳定转化增强的绿色荧光蛋白C3基因在中国仓鼠卵巢细胞表达 ,平均转化阳性率可达 5 6.2 % ,活性实验证明对细胞无毒副作用 。 展开更多
关键词 病理生理学 超声 白蛋白微泡 介导基因转化 分子生物学实验 绿色荧光蛋白
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外酶C3转移酶转基因表达对小梁细胞的影响
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作者 刘旭阳 王宁利 Paul Kaufman 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期109-117,共9页
目的:探讨腺病毒载体介导的外酶C3转移酶(exoenzyme C3 transferase,C3)表达对体外培养的正常或地塞米松处理的人类小梁细胞的作用.方法:构建C3和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒表达载体(AdC3GFP).用AdC3GFP转导人类正常或经地塞米松处理的... 目的:探讨腺病毒载体介导的外酶C3转移酶(exoenzyme C3 transferase,C3)表达对体外培养的正常或地塞米松处理的人类小梁细胞的作用.方法:构建C3和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒表达载体(AdC3GFP).用AdC3GFP转导人类正常或经地塞米松处理的小梁细胞.观察(1)小梁细胞肌动蛋白、粘着斑蛋白(vinculin)、β-链蛋白(β-catenin)的变化;(2)地塞米松能否诱导小梁细胞形成肌动蛋白交联网(cross linked actin networks,CLANs)结构以及AdC3GFP对CLANs的影响.以仅表达GFP的腺病毒载体(AdGFP)作为对照.结果:与对照相比,AdC3GFP转导小梁细胞后3~4d细胞出现肌动蛋白细胞骨架裂解,相应粘着斑蛋白阳性的粘着斑减少和β-链蛋白染色丧失.与非转导细胞相比,AdGFP转导细胞肌动蛋白细胞骨架,粘着斑蛋白和β-链蛋白染色均与非转导细胞类似.经地塞米松处理的小梁细胞形成典型CLANs结构,AdC3GFP可降解肌动蛋白及已形成的CLANs结构.结论:C3基因表达产物可降解小梁细胞肌动蛋白和细胞连接以及由地塞米松诱导的小梁细胞CLANs形成.提示C3基因治疗可能是青光眼降眼压治疗的有效方法. 展开更多
关键词 外酶c3转移酶 转基因 地塞米松 小梁细胞 转基因表达 绿色荧光蛋白(GFP) 转移酶 c3 外酶 networks
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RhoA抑制剂C3转移酶对大鼠肝星状细胞黏附和迁移的影响 被引量:1
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作者 张书凯 王玉珍 陈新 《河北医药》 CAS 2007年第8期784-785,共2页
目的观察RhoA抑制剂C3转移酶对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖、黏附和迁移的影响。方法将培养的肝星状细胞分为4组:对照组,LPA组,C3组,LPA+C3组。采用甲苯胺蓝染色法测定细胞黏附率,Boyden Chamber小室测定HSC跨膜迁移数量... 目的观察RhoA抑制剂C3转移酶对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖、黏附和迁移的影响。方法将培养的肝星状细胞分为4组:对照组,LPA组,C3组,LPA+C3组。采用甲苯胺蓝染色法测定细胞黏附率,Boyden Chamber小室测定HSC跨膜迁移数量,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖。结果C3转移酶对HSC的增殖、黏附和迁移均具有抑制作用,并且抑制了LPA诱导的HSC增殖、黏附和迁移。结论RhoA信号转导通路抑制剂-C3转移酶对LPA诱导的HSC增殖、黏附和迁移具有抑制作用。 展开更多
关键词 c3转移酶 肝星状细胞 RHOA 大鼠
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LPS对牦牛瘤胃上皮细胞补体C3激活和ATP生成代谢的影响 被引量:1
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作者 张祺琪 王俊梅 +9 位作者 岳子奇 郭逸芯 施丽媛 张晓红 邹华围 彭全辉 薛白 王立志 王之盛 胡瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4664-4675,共12页
旨在通过脂多糖(LPS)诱导牦牛瘤胃上皮细胞建立炎症模型,考察瘤胃上皮细胞作为非免疫细胞是否存在细胞内补体C3激活,及其对细胞三磷酸腺苷(ATP)生成的影响,为瘤胃健康营养调控技术提供试验依据。用不同浓度的LPS处理牦牛瘤胃上皮细胞系... 旨在通过脂多糖(LPS)诱导牦牛瘤胃上皮细胞建立炎症模型,考察瘤胃上皮细胞作为非免疫细胞是否存在细胞内补体C3激活,及其对细胞三磷酸腺苷(ATP)生成的影响,为瘤胃健康营养调控技术提供试验依据。用不同浓度的LPS处理牦牛瘤胃上皮细胞系,采用CCK-8法测定细胞活力;ELISA试剂盒测定细胞内补体C3激活产物C3a、C3b浓度以及培养基中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度;化学法检测细胞内ATP浓度,线粒体红色荧光探针和流式细胞仪检测线粒体数量及膜电位;qPCR检测细胞IL-1β、IL-6、TNF-α,补体C3及其激活关键酶组织蛋白酶B(CTSB)和组织蛋白酶L(CTSL),以及ATP合成酶亚基(ATP 5A和ATP 5C1)等基因相对表达量。结果发现:1)不同浓度LPS处理后,牦牛瘤胃上皮细胞活力极显著下调(P<0.01),TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎因子的基因表达量和浓度极显著上调(P<0.01),在LPS浓度为10μg·mL^(-1)时,牦牛瘤胃上皮细胞炎症模型构建成功;2)炎症下,牦牛瘤胃上皮细胞内补体C3及其激活关键酶CTSB的基因表达量极显著升高(P<0.01),激活产物补体片段C3a和C3b浓度极显著升高(P<0.01);3)炎症下,牦牛瘤胃上皮细胞ATP含量极显著下降(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.05),ATP合成酶亚基ATP 5A和ATP 5C1的基因表达量随着LPS处理浓度升高显著下调(P<0.01)。综上,利用LPS诱导建立了牦牛瘤胃上皮细胞炎症模型。在LPS刺激下,牦牛瘤胃上皮细胞可发生细胞内补体C3激活过程,并抑制线粒体ATP合成酶亚基ATP 5A、ATP 5C1和有氧呼吸关键酶ME 1的基因表达,线粒体膜电位降低,抑制ATP生成。因此,LPS诱导炎症可抑制瘤胃上皮细胞ATP生成,从而导致瘤胃健康问题。 展开更多
关键词 牦牛 瘤胃上皮细胞 免疫炎症 补体c3 ATP
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ADP-核糖聚合酶、补体C3及调节性T细胞与系统性红斑狼疮患者病情活动度的关系 被引量:5
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作者 赵琳 《医学综述》 2016年第23期4714-4717,共4页
目的探讨ADP-核糖聚合酶(PARP)、补体C3及调节性T细胞与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情活动度的关系。方法选取2014年10月至2015年10月上海中医药大学附属曙光医院收治的84例SLE患者为SLE组,另选取同期80例正常体检者为对照组,应用蛋白印... 目的探讨ADP-核糖聚合酶(PARP)、补体C3及调节性T细胞与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情活动度的关系。方法选取2014年10月至2015年10月上海中医药大学附属曙光医院收治的84例SLE患者为SLE组,另选取同期80例正常体检者为对照组,应用蛋白印迹法测定PARP水平,散射比浊法测定补体C3水平,免疫荧光法测定外周血CD_4^+CD_(25)^+调节T细胞百分率、叉头蛋白P3抗体(FoxP3^+)调节性T细胞,应用酶联免疫吸附测定检测白细胞介素10(IL-10)及转化生长因子β_1(TGF-β_1)水平。结果 SLE组患者FoxP3^+调节性T细胞、IL-10水平显著高于对照组[(11.09±1.24)%比(6.23±1.01)%、(21.77±2.36)mg/L比(12.98±2.02)mg/L],而PARP、补体C3、CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞、TGF-β_1水平显著低于对照组[(5.24±1.02)mg/L比(7.84±2.11)mg/L、(0.84±0.22)g/L比(1.26±0.36)g/L、(3.21±0.34)%比(5.83±0.58)%、(3.62±0.52)ng/L比(4.89±1.56)ng/L,P<0.05]。重度活动性SLE组患者FoxP3^+调节性T细胞、IL-10水平显著高于轻中度组及稳定组,而PARP、补体C3、CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞、TGF-β_1水平显著低于轻中度组及稳定组(P<0.05)。SLE合并肾功能损害者FoxP3^+调节性T细胞高于SLE肾功能正常者[(12.60±0.48)%比(10.08±0.50)%],而补体C3水平、PARP、CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞显著低于SLE肾功能正常者[(0.72±0.24)g/L比(0.94±0.32)g/L、(4.22±0.78)mg/L比(5.94±0.82)mg/L、(2.48±0.34)%比(3.69±0.26)%,P<0.05]。FoxP3^+调节性T细胞、IL-10与SLE活动指数呈正相关(r=0.458,0.725,P<0.05),而PARP、CD_4CD_(25)调节性T细胞、补体C3、TGF-β_1水平与SLEDAI呈负相关(r=-0.412,-0.522,-0.623,-0.522,P<0.05)。结论 PARP、补体C3及调节性T细胞与SLE活动度有密切的关系,可作为SLE病情发生及进展的评价指标。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 ADP-核糖聚合酶 补体c3 调节性T细胞 病情活动度
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miR-202-5p通过下调NFATc3的表达抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、迁移和侵袭 被引量:2
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作者 杨谊琼 李丹丹 +2 位作者 刘平 郑文涛 胡赟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1206-1212,共7页
目的:探讨miR-202-5p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinoma,OSCC)细胞生长、集落形成、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:通过qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113和SCC-4)和口腔角质细胞HOK中miR-202-5p和T细胞核因子c3(nuclear fa... 目的:探讨miR-202-5p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinoma,OSCC)细胞生长、集落形成、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:通过qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113和SCC-4)和口腔角质细胞HOK中miR-202-5p和T细胞核因子c3(nuclear factor of activated T-cells isoform c3,NFATc3)mRNA的表达水平;将miR-202-5p mimic或/和NFATc3过表达质粒转染入Tca8113和SCC-4细胞,用MTT和集落形成实验检测转染对细胞增殖的影响,划痕伤口愈合实验和Transwell实验检测转染对细胞迁移和侵袭的影响,用Western blotting实验检测转染对NFATc3蛋白表达的影响;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-202-5p对候选靶基因NFATc3的直接调控作用。结果:与正常口腔角质细胞HOK相比,miR-202-5p在OSCC细胞Tca8113和SCC-4中呈低表达(均P<0.01),NFATc3 m RNA和蛋白质表达显著升高(P<0.01)。在Tca8113细胞和SCC-4细胞中,过表达miR-202-5p可显著抑制细胞生长、集落形成、迁移、侵袭以及细胞中NFATc3表达(均P<0.01)。NFATc3被证实是miR-202-5p的靶基因,过表达NFATc3能逆转miR-202-5p对OSCC细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用。结论:miR-202-5p通过下调NFATc3表达发挥其肿瘤抑制功能,导致OSCC细胞的生长、迁移和侵袭受到抑制。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-202-5p T细胞核因子c3 增殖 侵袭 迁移
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通过体外细胞培养观察补体C3对骨形成影响的实验研究 被引量:2
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作者 刘康 童铭豪 +3 位作者 唐彬彬 曹延广 史晓林 余阳 《中国骨伤》 CAS CSCD 2022年第6期548-554,共7页
目的:探讨慢病毒介导补体C3沉默载体转染人B淋巴细胞Raji-成骨细胞系MG63共培养体系对共培养体系成骨能力的影响及其作用机制。方法:构建慢病毒补体C3沉默载体,转染人B淋巴细胞Raji后建立体外Raji-成骨细胞系MG63共培养体系,分为空白对... 目的:探讨慢病毒介导补体C3沉默载体转染人B淋巴细胞Raji-成骨细胞系MG63共培养体系对共培养体系成骨能力的影响及其作用机制。方法:构建慢病毒补体C3沉默载体,转染人B淋巴细胞Raji后建立体外Raji-成骨细胞系MG63共培养体系,分为空白对照组(不做特殊处理)、补体C3沉默组(慢病毒补体C3沉默载体转染共培养体系)与模型组(慢病毒空载载体转染共培养体系)。培养24 h后,采用反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法及Western-Blot法检测各组补体C3表达水平;各组分别培养0、3、6、12、24、48、72 h后采用CCK-8检测各组成骨细胞系MG63增殖能力;培养24 h后分别采用流式细胞术检测各组成骨细胞系MG63的细胞凋亡情况,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)检测盒检测各组MG63细胞AKP活力,采用Western-Blot法检测各组成骨细胞系MG63的骨保护素(osteoprotegerin,OPG)蛋白表达水平。结果:RT-PCR法检测结果显示补体C3沉默组C3表达水平低于空白对照组和模型组;Western-Blot法检测结果显示补体C3沉默组C3表达水平低于空白对照组和模型组;CCK-8检测结果提示培养3、6 h后补体C3沉默组MG63增殖能力与空白对照组、模型组比较差异无统计学意义;培养12 h后补体C3沉默组成骨细胞系MG63增殖能力高于空白对照组和模型组;培养24、48、72 h后补体C3沉默组成骨细胞系MG63增殖能力高于空白对照组和模型组;流式细胞术检测结果提示补体C3沉默组成骨细胞系MG63的细胞凋亡水平低于空白对照组和模型组;AKP检测盒检测结果提示补体C3沉默组AKP活力高于空白对照组和模型组;Western-Blot法检测结果提示补体C3沉默组OPG蛋白表达水平高于空白对照组和模型组。结论:补体C3的沉默能够增强成骨细胞系MG63的骨形成能力,并且发挥这种能力需要时间的累积。补体C3可能通过改变OPG/RANKL/RANK轴来影响成骨能力。 展开更多
关键词 补体c3 骨生成 细胞培养技术 碱性磷酸酶
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载脂蛋白C3转基因小鼠脾脏免疫细胞表型及其活性分析
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作者 徐聪 蔺志杰 +2 位作者 龚卫娟 贾筱琴 李国利 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第3期208-215,221,共9页
目的:分析载脂蛋白C3(Apo C3)转基因小鼠脾脏免疫细胞的表型及活性。方法:以12只ICR背景Apo C3转基因小鼠为研究模型,选取鼠龄/性别匹配的野生型小鼠作为对照,采集小鼠球后静脉丛血液,以酶反应显色比色法联合酶标仪测定血浆甘油三酯水平... 目的:分析载脂蛋白C3(Apo C3)转基因小鼠脾脏免疫细胞的表型及活性。方法:以12只ICR背景Apo C3转基因小鼠为研究模型,选取鼠龄/性别匹配的野生型小鼠作为对照,采集小鼠球后静脉丛血液,以酶反应显色比色法联合酶标仪测定血浆甘油三酯水平,选取血浆甘油三酯含量≥1 000 mg/dL(11.3 mmol/L)的小鼠用于后续实验。取小鼠脾脏制备成单细胞悬液,采用细胞膜表面分子、胞内分子及核内分子染色法,通过流式细胞术检测转基因小鼠和野生型小鼠脾脏免疫细胞频率和表型。再将转基因小鼠或野生型小鼠脾脏细胞与结肠癌细胞MC38分别以1∶1、1∶3、3∶1效靶比共培养72 h后,通过流式细胞术检测CD8+ T细胞CD107a的表达。结果:Apo C3转基因小鼠血浆甘油三酯含量较野生型小鼠显著升高(P<0.01),而体质量差异无统计学意义(P>0.05)。与野生型小鼠相比,Apo C3转基因小鼠脾脏CD3+CD8+、CD3+CD8+NKG2D+细胞频率明显增多,髓系抑制性Gr-1+CD11B+细胞频率增加,脾脏NK1.1+NK、NK1.1+NKG2D+细胞的频率明显减少(P 均>0.05);脾脏CD3+CD4+NKG2D+、CD3+CD4+IL-17+细胞频率以及调节性T 细胞,NKT 细胞,γδT 细胞,B 细胞和巨噬细胞频率均无明显变化(P 均>0.05)。Apo C3 转基因小鼠CD8+CD62LCD44+、CD8+CD44+KLGR1+频率升高,以效应性T细胞为主,且CD8+ T细胞分泌IFN-γ活性增强;转基因小鼠中CD8+ T淋巴细胞CD107a的表达增加差异均具有统计学意义(P 均<0.05)。结论:Apo C3转基因小鼠呈现高水平血浆甘油三酯,其免疫细胞表型及活性具有显著变化,其中CD8+ T细胞频率及生物活性上调,髓系抑制性细胞频率升高,NK细胞频率降低;并且转基因小鼠中CD8+T淋巴细胞对靶细胞杀伤能力增强。 展开更多
关键词 载脂蛋白c3 转基因小鼠 免疫细胞 甘油三酯
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MicroRNA-34c regulates porcine granulosa cell function by targeting forkhead box O3a 被引量:3
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作者 XU Yuan ZHANG Ai-ling +4 位作者 ZHANG Zhe YUAN Xiao-long CHEN Zan-mou ZHANG Hao LI Jia-qi 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第9期2019-2028,共10页
Granulosa cells(GCs) are somatic cells of ovary, the behaviors of GCs are important for ovarian function. MicroRNAs(miRNAs) are a class of endogenous 18–24 nucleotide(nt) non-coding RNAs, some of which have bee... Granulosa cells(GCs) are somatic cells of ovary, the behaviors of GCs are important for ovarian function. MicroRNAs(miRNAs) are a class of endogenous 18–24 nucleotide(nt) non-coding RNAs, some of which have been shown to be important regulators of GCs function. miR-34c involved in the regulation of various biological processes and was identified to be a pro-apoptotic and anti-proliferative factor in many cell types. However, the roles of miR-34c in GCs function remain unknown. In this study, we used Annexin V-FITC and Ed U assays to demonstrate that miR-34c exerted pro-apoptotic and anti-proliferative effects in porcine GCs. Dual-luciferase reporter assays, quantitative real-time PCR(q RT-PCR) and Western blotting identified Forkhead box O3a(Fox O3a) as a direct target gene of miR-34c. The overexpression of FoxO3a rescued the phenotypic change caused by miR-34c in porcine GCs. In conclusion, miR-34c regulate the function of porcine GCs by targeting FoxO3a. 展开更多
关键词 porcine microRNA-34c FoxO3a granulosa cell function
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NFATc3敲除对肝癌细胞转录组的影响及其潜在靶基因的初步筛选
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作者 杨菁 关贵文 +2 位作者 张婷 王竞州 陈香梅 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期754-762,共9页
目的探究NFATc3基因敲除对肝癌细胞转录组的影响,并对NFATc3调控的靶基因进行初步筛选,以期为明确NFATc3靶基因及寻找新的抗肝癌治疗靶点提供依据。方法利用敲除NFATc3的SMMC7721细胞,在有或无仙台病毒(Sendai virus,SeV)感染时进行转... 目的探究NFATc3基因敲除对肝癌细胞转录组的影响,并对NFATc3调控的靶基因进行初步筛选,以期为明确NFATc3靶基因及寻找新的抗肝癌治疗靶点提供依据。方法利用敲除NFATc3的SMMC7721细胞,在有或无仙台病毒(Sendai virus,SeV)感染时进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)检测,并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。对两组测序数据差异基因交集中的免疫相关基因进行PPI蛋白网络互作分析,并利用qRT-PCR实验验证敲减或过表达NFATc3对肝癌细胞内S100A8和S100A9表达水平的影响。利用数据库数据,分析肝癌中S100A8和S100A9 mRNA表达水平及预后。结果经RNA-seq分析发现,肝癌细胞中NFATc3敲除后差异表达基因主要富集在发育、代谢、细胞外基质和血管生成等通路。PPI蛋白网络分析发现S100A8和S100A9可能是NFATc3的重要靶基因。qRT-PCR实验结果显示敲除或敲减NFATc3均可上调S100A8和S100A9的表达,而表达外源NFATc3则可下调S100A8/S100A9的表达。数据库分析显示,肝癌组织中S100A8/S100A9的表达水平显著高于癌旁组织,S100A8/S100A9高表达的肝癌患者与患者生存期短及预后较差相关。结论肝癌细胞中NFATc3基因敲除影响的宿主基因功能主要富集在发育、代谢、细胞外基质和血管生成等通路。NFATc3可以抑制S100A8和S100A9基因的转录表达,S100A8和S100A9可能是肝癌中NFATc3调控的潜在靶基因。 展开更多
关键词 RNA-SEQ 活化T细胞核因子c3 差异表达基因 通路功能富集 靶基因
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外周血NK细胞补体C3及血清蛋白水平检测在急性颅脑损伤患者中诊断价值
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作者 李想 范晓峰 《浙江临床医学》 2019年第3期381-383,共3页
目的 观察急性颅脑损伤患者外周血自然杀伤细胞(NK)、补体C3、血清蛋白水平动态变化,为临床治疗提供参考依据.方法 选取2016年5月至2018年1月急性颅脑损伤患者60例,按格拉斯哥昏迷评分法(GCS)将其分轻中型组37例、重型组23例.另选取同... 目的 观察急性颅脑损伤患者外周血自然杀伤细胞(NK)、补体C3、血清蛋白水平动态变化,为临床治疗提供参考依据.方法 选取2016年5月至2018年1月急性颅脑损伤患者60例,按格拉斯哥昏迷评分法(GCS)将其分轻中型组37例、重型组23例.另选取同期体检健康者60例为对照组.患者在入院第1、3、5、7天采集血液样本,检测外周血NK细胞阳性率、补体C3水平及血清蛋白[血清白蛋白(ALB)、白介素-6(IL-6)、血清C反应蛋白(CRP)]水平.结果 轻中型组和重型组患者入院第1、3、5、7天NK细胞阳性率均低于对照组,重型组低于轻中型组,差异有统计学意义(P<0.05);轻中型组和重型组患者入院第1天补体C3水平低于对照组,第3、5天补体C3水平高于对照组,重型组第7天补体C3水平高于对照组,重型组入院第3、5、7天补体C3水平高于轻中型组,差异有统计学意义(P<0.05);轻中型组和重型组入院第1、3、5、7天ALB水平均低于对照组,IL-6、CRP水平高于对照组,重型组入院第1、3、5、7天的ALB水平均低于轻中型组,IL-6、CRP水平均高于轻中型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 急性颅脑损伤患者随着时间延长,其外周血NK细胞水平及血清ALB、IL-6、CRP水平不断降低,补体C3水平不断增加,故观察患者外周血NK细胞、补体C3及血清蛋白水平的动态变化,能为临床预测急性颅脑损伤程度提供参考依据. 展开更多
关键词 急性颅脑损伤 NK细胞 补体c3 血清蛋白 动态变化
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慢病毒介导稳定表达AKR1C3的前列腺癌细胞株的建立 被引量:1
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作者 谢程国 陈智新 +2 位作者 邓业瀚 李世林 张镜伟 《广州医科大学学报》 2017年第6期1-5,共5页
目的:构建稳定表达AKR1C3基因的人前列腺癌细胞株DU145-AKR1C3,探讨AKR1C3基因对DU145细胞增殖的影响。方法:构建携带AKR1C3基因的重组慢病毒载体p EZ-LV201-AKR1C2和对照质粒p EZ-LV201-NC,并包装相应的慢病毒,用病毒感染低表达AKR1C3... 目的:构建稳定表达AKR1C3基因的人前列腺癌细胞株DU145-AKR1C3,探讨AKR1C3基因对DU145细胞增殖的影响。方法:构建携带AKR1C3基因的重组慢病毒载体p EZ-LV201-AKR1C2和对照质粒p EZ-LV201-NC,并包装相应的慢病毒,用病毒感染低表达AKR1C3基因的DU145细胞,经嘌呤霉素筛选后获得稳定细胞克隆DU145-AKR1C3和DU145-NC;采用实时荧光定量PCR和Western-Blot法分别检测稳定细胞株中AKR1C3的mRNA、蛋白表达水平;CCK-8法用于检测细胞增殖能力的改变。结果:成功构建了重组慢病毒表达质粒p EZ-LV201-AKR1C3和p EZ-LV201-NC,并制备了相应的慢病毒;经嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株DU145-AKR1C3和DU145-NC;DU145-AKR1C3细胞中AKR1C3基因的mRNA和蛋白水平显著升高;相对母细胞DU145和DU145-NC对照组,DU145-AKR1C3细胞在接种2 d后开始出现明显的生长加快(P<0.05)。结论:AKR1C3基因过表达可以促进人前列腺癌细胞DU145细胞的增殖。 展开更多
关键词 AKR1c3基因 前列腺肿瘤 DU145 细胞增殖
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