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雷帕霉素对人前列腺癌C4-2B细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 李刚 王磊 +3 位作者 刘会 吕涛 徐淑娜 董传海 《临床和实验医学杂志》 2019年第2期140-143,共4页
目的探讨雷帕霉素对人前列腺癌C4-2B细胞增殖和凋亡的影响。方法采用购自中国科学院上海细胞生物学研究所人前列腺癌C4-2B细胞,分为两组,实验组分别选择10 nmol/L、20 nmol/L、40 nmol/L、60 nmol/L浓度雷帕霉素的DMEM培养基处理,对照... 目的探讨雷帕霉素对人前列腺癌C4-2B细胞增殖和凋亡的影响。方法采用购自中国科学院上海细胞生物学研究所人前列腺癌C4-2B细胞,分为两组,实验组分别选择10 nmol/L、20 nmol/L、40 nmol/L、60 nmol/L浓度雷帕霉素的DMEM培养基处理,对照组选择含0. 1%DMSO的培养基。在体外用CCK8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞株的凋亡情况。结果 C4-2B在雷帕霉素的作用下增殖能力明显减弱,并呈现一定的时间依赖性和剂量依赖性;软琼脂克隆形成实验显示,与对照组相比实验组C4-2B克隆形成的数目减少,体积明显变小;与对照组相比,流式细胞术显示细胞经雷帕霉素处理以后细胞的凋亡比率明显增加。结论雷帕霉素能够抑制C4-2B细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 c4-2b细胞 雷帕霉素 增殖凋亡
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PC-1基因表达增强C4-2B前列腺癌细胞生存 被引量:2
2
作者 李素萍 张惠 +6 位作者 王健 施庆国 黄翠芬 陈亮 夏令 郭迟鸣 周建光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期388-393,共6页
建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3·1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT-PCR技术,分别从蛋白... 建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3·1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT-PCR技术,分别从蛋白水平和RNA水平确定外源PC-1基因表达.MTT和软琼脂集落形成能力等一系列方法,研究PC-1基因的功能,RT-PCR和实时定量PCR检测前列腺癌发生发展相关基因表达的变化.结果表明,PC-1基因的高表达能够诱导雄激素受体(AR)调控基因和一系列重要的信号通路成员基因PSA、PSMA、NKX3·1、Jagged1、EphA3、SGEF和NOTCH3等表达发生变化.实验结果初步证明,PC-1基因表达在晚期前列腺癌中,以及在雄激素非依赖的转变中可以发挥作用,PC-1基因表达可调控一些重要信号通路.对PC-1基因功能深入研究将有可能为发现新的前列腺癌的诊断治疗分子靶标提供线索. 展开更多
关键词 c4-2b 细胞 Pc-1 基因 基因表达 前列腺癌 稳定转染
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miR-141-3p靶向TGF-β2对人前列腺癌C4-2B细胞恶性生物学行为的影响 被引量:4
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作者 王寓 邱明星 熊国兵 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1237-1243,共7页
目的:探讨miR-141-3p与转化生长因子-β2(transforming growth factor β2, TGF-β2)基因的靶向关系及其对人前列腺癌细胞株C4-2B恶性生物学行为的影响。方法:转染miR-141-3p mimic后,qRT-PCR检测C4-2B细胞miR-141-3p和TGF-β2 mRNA的... 目的:探讨miR-141-3p与转化生长因子-β2(transforming growth factor β2, TGF-β2)基因的靶向关系及其对人前列腺癌细胞株C4-2B恶性生物学行为的影响。方法:转染miR-141-3p mimic后,qRT-PCR检测C4-2B细胞miR-141-3p和TGF-β2 mRNA的表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-141-3p与TGF-β2的靶向关系。miR-141-3p mimic与TGF-β2过表达载体单独或共转染C4-2B细胞后, Western blotting检测转染C4-2B细胞中TGF-β2蛋白的表达水平,Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果:miR-141-3p mimic转染后,C4-2B细胞miR-141-3p的相对表达水平明显提高、TGF-β2 mRNA的相对表达水平明显降低(均P<0.01)。miR-141-3p mimic与野生型报告载体共转后,荧光素酶的活性显著降低(P<0.01);miR-141-3p mimic与突变型报告载体共转后,荧光素酶的活性没有明显变化(P>0.05);mi R-141-3p mimic添加到pcTGF-β2转染的C4-2B细胞后,细胞增殖倍数明显降低、凋亡细胞数目显著增加、细胞侵袭能力显著降低(均P<0.01)。结论:miR-141-3p与TGF-β2存在靶向关系,且两者协同影响人前列腺癌C4-2B细胞增殖、侵袭能力并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 c4-2b细胞 miR-141-3p 转化生长因子-Β2 增殖 凋亡 侵袭
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甘草甜素抑制PI3K/AKT/AR通路诱导人前列腺癌C4-2B细胞凋亡 被引量:1
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作者 杨博雅 赵瑞宁 +5 位作者 王振位 李佳鑫 秦凯悦 郭凤英 勉昱琛 聂黎虹 《宁夏医科大学学报》 2022年第3期228-233,共6页
目的 探讨甘草甜素(glycyrrhizin,GLY)诱导人前列腺癌C4-2B细胞凋亡机制。方法 用不同浓度(12.5、25、50、100、200、400、800μmol·L^(-1))的GLY刺激人前列腺癌C4-2B细胞,采用CCK-8法检测细胞活性;细胞计数、细胞克隆实验检测细... 目的 探讨甘草甜素(glycyrrhizin,GLY)诱导人前列腺癌C4-2B细胞凋亡机制。方法 用不同浓度(12.5、25、50、100、200、400、800μmol·L^(-1))的GLY刺激人前列腺癌C4-2B细胞,采用CCK-8法检测细胞活性;细胞计数、细胞克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)、裂解型胱天蛋白酶3(c-Caspase3)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、雄激素受体(AR)。结果 CCK-8结果显示,与对照组(0μmol·L^(-1)GLY)相比,12.5、25、50、100、200、400、800μmol·L^(-1)GLY均可以抑制C4-2B细胞增殖(P<0.05或P<0.01),组间比较,呈一定的浓度依赖性,测得IC_(50)值为321.1μmol·L^(-1);与对照组(0μmol·L^(-1)GLY)相比,100、200、400μmol·L^(-1)GLY处理组细胞个数、细胞克隆形成数均减少,细胞形态发生改变且细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01);与对照组(0μmol·L^(-1)GLY)相比,GLY处理组Bax、c-Caspase3蛋白表达增加,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT、AR蛋白表达降低,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05或P<0.01);联合/单用PI3K特异性抑制剂渥漫霉素(WM)发现,单独给予10μmol·L^(-1)WM,p-PI3K、p-AKT、AR、Bcl-2蛋白表达降低,Bax、c-Caspase3蛋白表达增加,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05或P<0.01);200μmol·L^(-1)GLY联合10μmol·L^(-1)WM共处理C4-2B细胞后上述变化趋势更显著(P均<0.01)。结论 GLY抑制C4-2B细胞增殖、诱导其凋亡可能与PI3K/AKT/AR信号通路有关。 展开更多
关键词 甘草甜素 前列腺癌 c4-2b细胞 细胞凋亡 雄激素受体
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Construction of Cox7a2 fluorescent vector and its effect on cytochrome C oxidase activity in mouse Sertoli cell line TM4
5
作者 刘保兴 《外科研究与新技术》 2011年第4期260-260,共1页
Objective To construct Cox7a2 fluorescent vector and study its effect on cytochrome C oxidase ( COX) activity in mouse Sertoli cell line TM4. Methods The coding region of CoxTa2 was amplified from mouse Sertoli cell l... Objective To construct Cox7a2 fluorescent vector and study its effect on cytochrome C oxidase ( COX) activity in mouse Sertoli cell line TM4. Methods The coding region of CoxTa2 was amplified from mouse Sertoli cell line TM4 by RT-PCR. PCR product was 展开更多
关键词 line cell construction of cox7a2 fluorescent vector and its effect on cytochrome c oxidase activity in mouse Sertoli cell line TM4 TM
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刺五加苷B对MPP^+诱导PC12细胞损伤ERK通路的影响 被引量:8
6
作者 董杨 刘树民 +3 位作者 安丽凤 卢芳 唐波 周世慧 《分子诊断与治疗杂志》 2011年第3期155-158,共4页
目的观察刺五加苷B对MPP+诱导损伤的PC12细胞ERK1/2蛋白及相关转录因子表达的影响,探究其神经保护作用机制。方法以MPP+损伤的PC12细胞为模型组,以正常PC12细胞为对照组,Western blot法检测细胞ERK1/2表达及磷酸化水平,荧光定量PCR法检... 目的观察刺五加苷B对MPP+诱导损伤的PC12细胞ERK1/2蛋白及相关转录因子表达的影响,探究其神经保护作用机制。方法以MPP+损伤的PC12细胞为模型组,以正常PC12细胞为对照组,Western blot法检测细胞ERK1/2表达及磷酸化水平,荧光定量PCR法检测c-fos和c-jun mRNA的表达水平。结果模型组ERK1/2磷酸化水平较对照组显著降低(P<0.01),c-fos和c-jun表达明显上调,差异有统计学意义;给予刺五加苷B(10mg·L-1)后,受损细胞ERK1/2的磷酸化水平明显升高,c-fos和c-jun基因的过表达水平降低。结论刺五加苷B对MPP+诱导的PC12细胞损伤的保护作用机制可能与提高ERK1/2蛋白磷酸化水平,避免诱发c-fos和c-jun基因过表达有关。 展开更多
关键词 帕金森病 刺五加苷b Pc12细胞 ERK1/2 1-甲基-4-苯基吡啶离子 c-fos c-JUN
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王不留行环肽B逆转前列腺癌C4-2细胞激素非依赖性生长及作用机制
7
作者 牟睿宇 廖洋 +5 位作者 贾春鑫 孔凡铭 孙彬栩 郭姗琦 易丹 贾英杰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期5898-5904,共7页
目的明确王不留行逆转人前列腺癌C4-2细胞激素非依赖性生长的单体成分,探究王不留行抑制去势抵抗性前列腺癌发生发展的作用机制。方法采用CCK-8法检测王不留行单体成分对C4-2细胞增殖的影响;采用CCK-8法联合Annexin V-APC法检测王不留... 目的明确王不留行逆转人前列腺癌C4-2细胞激素非依赖性生长的单体成分,探究王不留行抑制去势抵抗性前列腺癌发生发展的作用机制。方法采用CCK-8法检测王不留行单体成分对C4-2细胞增殖的影响;采用CCK-8法联合Annexin V-APC法检测王不留行单体成分对C4-2细胞雄激素非依赖性生长的作用;采用Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路和雄激素受体(androgen receptor,AR)蛋白表达;过表达AR后,采用荧光素酶报告基因检测AR的转录活性。结果王不留行环肽B对C4-2细胞增殖的抑制作用最为显著。在有雄激素的条件下,王不留行环肽B对C4-2细胞凋亡的诱导作用和对细胞增殖的抑制作用较弱;王不留行环肽B组p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平降低。过表达AR后,与对照组比较,双氢睾酮组AR蛋白表达水平和相对荧光素酶活力显著升高(P<0.05),王不留行环肽B组AR表达水平和相对荧光素酶活力显著降低(P<0.05);与双氢睾酮组比较,双氢睾酮+王不留行环肽B组AR蛋白表达水平和相对荧光素酶活力显著降低(P<0.05)。结论王不留行环肽B能明显抑制C4-2细胞增殖,具有逆转C4-2细胞激素非依赖性生长的作用,可以通过AR以及PI3K/Akt信号通路发挥抑制去势抵抗性前列腺癌发生发展的作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 王不留行环肽b c4-2细胞 雄激素 非依赖性生长 PI3K/Akt信号通路 雄激素受体
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Apoptotic effect and mechanisms of AHPN on human skin malignant melanoma cell A375 被引量:2
8
作者 Min Pan Zhen-hui Peng Sheng-xiang Xiao Jian-wen Ren Yan Liu Xiao-li Li Zheng-xiao Li 《Journal of Nanjing Medical University》 2008年第1期18-22,共5页
Objective: To study apoptotic effects of synthetic retinoic acid 6-[3-(1-adamantyl)-4-hydroxyphenyl]-2-naphthalene carboxylic acid(AHPN) on human skin malignant melanoma A375 cells in comparison with the natural ... Objective: To study apoptotic effects of synthetic retinoic acid 6-[3-(1-adamantyl)-4-hydroxyphenyl]-2-naphthalene carboxylic acid(AHPN) on human skin malignant melanoma A375 cells in comparison with the natural ligand all-trans-retinoic acid(ATRA) in vitro and the mechanisms related to the actions of AHPN. Methods:MTT assay was used to determine the anti-proliferative effects of AHPN and ATRA on A375 cells. Flow cytometry was performed to investigate the influence of AHPN and ATRA on cell cycle and cell apoptosis. In addition, transfection and luciferase activity assays were employed to explore the mechanisms of how AHPN executes its proapoptotic function. Results:Firstly, AHPN promoted apoptosis and GI arrest in A375 cells compared with ATRA. Secondly, the activity of NF-K B in A375 cells treated with AHPN increased 2-3 times compared with solvent DMSO treatment. Conclusion:AHPN, in comparison with ATRA, is a more effective alternative for therapy of malignant melanoma. The potentially proapoptotic function of AHPN requires activation of NF-K B. 展开更多
关键词 6-[3-(1-adamantyl)-4-hydroxyphenyl]-2-naphthalene carboxylic acid(AHPN) ATRA A375 cell line apoptosis NF-K b
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含噻吩[2,3-b]并噻吩-吡咯[3,4-c]并吡咯二酮结构单元聚合物的合成及其在太阳能电池中的应用研究 被引量:3
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作者 冯宇 苏智兴 +3 位作者 孙丽 刘绍刚 刁开盛 张卫民 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1613-1621,共9页
设计并合成了一种交叉共轭的(cross-conjugated)缺电子型聚合物单体——二溴代噻吩[2,3-b]并噻吩-吡咯[3,4-c]并吡咯(DPPTTZ)二酮,并将其分别与噻吩(T)、硒吩(Se)和N-甲基吡咯(Py)的双锡试剂进行共聚反应,获得了一类新的供体-受体(D-A)... 设计并合成了一种交叉共轭的(cross-conjugated)缺电子型聚合物单体——二溴代噻吩[2,3-b]并噻吩-吡咯[3,4-c]并吡咯(DPPTTZ)二酮,并将其分别与噻吩(T)、硒吩(Se)和N-甲基吡咯(Py)的双锡试剂进行共聚反应,获得了一类新的供体-受体(D-A)型共轭聚合物光电材料.这类材料分子的最高占有轨道(HOMO)能级较低,因此其光电器件具有较高的开路电压(Voc),稳定性好.此外,它们在紫外-可见光区有较宽的吸收,最大吸收位于波长620 nm附近;能带隙(band gap)小,分别为1.86 e V(p DPPTTZ-T)、1.83 e V(p DPPTTZ-Se)和1.85 e V(p DPPTTZ-Py).器件初步测试结果表明,上述聚合物与PC71BM组成的本体异质结聚合物太阳能电池Voc在0.68~0.81 V之间,能量转化效率(PCE)最高达3.05%(p DPPTTZ-T). 展开更多
关键词 交叉共轭聚合物 吡咯并吡咯 噻吩并噻吩 有机太阳能电池 聚合物半导体
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重组人干扰素α-2b阴道片联合聚焦超声治疗高危型HPV感染的疗效及对T细胞亚群、炎症因子的影响
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作者 孙琮 刘静 +1 位作者 刘琦 乔丽 《检验医学与临床》 2025年第4期470-474,共5页
目的探讨重组人干扰素α-2b阴道片联合聚焦超声治疗高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床效果,并观察其对HPV转阴率、白带清洁度、T细胞亚群、炎症因子的影响。方法选择2022年6月至2023年6月该院收治的高危型HPV感染患者100例作为研究对象... 目的探讨重组人干扰素α-2b阴道片联合聚焦超声治疗高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床效果,并观察其对HPV转阴率、白带清洁度、T细胞亚群、炎症因子的影响。方法选择2022年6月至2023年6月该院收治的高危型HPV感染患者100例作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组(重组人干扰素α-2b阴道片治疗)和观察组(重组人干扰素α-2b阴道片+聚焦超声治疗),各50例。比较2组治疗后HPV转阴率、白带清洁度,以及2组治疗前后T细胞亚群(CD4^(+)T细胞比例、CD8^(+)T细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值)、炎症因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)]水平。比较2组总有效率和不良反应总发生率。结果治疗后,与对照组比较,观察组的HPV转阴率、白带清洁度正常率更高(P<0.05)。治疗后,与对照组比较,观察组的CD4^(+)T细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值更高,CD8^(+)T细胞比例,以及CRP、IL-6、PCT水平更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,观察组的总有效率更高(P<0.05),不良反应总发生率更低(P<0.05)。结论重组人干扰素α-2b阴道片联合聚焦超声能够升高HPV转阴率和白带清洁度正常率,改善患者的免疫功能和炎症反应,提高治疗疗效,降低患者的不良反应发生率。 展开更多
关键词 重组人干扰素α-2b阴道片 聚焦超声 高危型人乳头瘤病毒 cD4^(+)T细胞 c反应蛋白 白细胞介素-6 降钙素原
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Functional maturation of mouse CD4^+CD8^- thymocytes induced by medullary-type thymus epithelial cells 被引量:2
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作者 路力生 陈慰峰 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第4期427-439,共13页
Murine CD4+CD8- (CD4SP) thymocyte subset is a heterogeneous population, in which the Qa-2- cells are less functional, whereas the Qa-2+ cells are fully functional. Evidence is provided here that the transition from Qa... Murine CD4+CD8- (CD4SP) thymocyte subset is a heterogeneous population, in which the Qa-2- cells are less functional, whereas the Qa-2+ cells are fully functional. Evidence is provided here that the transition from Qa-2- to Qa-2+ CD4SP thymocytes is an intrathymic process of differentiation induced by thymic medullary-type epithelial cells. The separated Qa-2-CD4SP could be induced to express Qa-2 molecules up to 84%- 89% of the total viable celb after cocultured for 3d with MTEC1 cells, a murine thymic medullary type epithelial cell line established in our laboratory. Kinetic study showed that both the percentage of Qa-2+ cells and the density of the expressed Qa-2 molecules on CD4SP thymocytes induced by MTEC1 were progressively increasing in 72-h cultures. The MTECl-induced Qa-2+CD4SP thymocytes were fully functional, which exhibited capabilities of proliferation and cytokine secretion in response to Con A stimulation as high as those of freshly isolated Qa-2+CD4SP thymocytes. The profile of cytokines secreted by MTECl-induced Qa-2+CD4SP thymocytes was Thy 0 type specified by the production of IL-2, IL-4 and IL-6. The results suggest that Qa-2-CD4SP thymocytes may give rise to the Qa-2+CD4SP thymocytes, and acquire fully functional competence in thymic medulla under the foster of local epithelial cells. 展开更多
关键词 cD4+cD8- THYMOcYTES THYMIc epithelial cell line Qa-2 expression FUNcTIONAL maturation.
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前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株的建立及相关lncRNA和mRNA的筛选 被引量:2
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作者 关翰 凌志新 +6 位作者 方芳 毛溧凯 尤宗昊 王灿 陈恕求 许斌 陈明 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期116-121,共6页
目的:构建人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株并筛选恩杂鲁胺耐药对lncRNA和mRNA表达谱的影响。方法:体外以恩杂鲁胺10μmol/L浓度诱导培养人前列腺癌LNCa P及C4-2B细胞株6个月,建立耐药细胞株LNCa P-ENZA及C4-2B-ENZA。MTT法检测各细胞株IC5... 目的:构建人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株并筛选恩杂鲁胺耐药对lncRNA和mRNA表达谱的影响。方法:体外以恩杂鲁胺10μmol/L浓度诱导培养人前列腺癌LNCa P及C4-2B细胞株6个月,建立耐药细胞株LNCa P-ENZA及C4-2B-ENZA。MTT法检测各细胞株IC50值和耐药指数,Western印迹检测前列腺癌恩杂鲁胺耐药相关基因FL-AR、AR-V7、HnRNPA1在各细胞株中的表达。应用高通量芯片技术筛选C4-2B和C4-2B-ENZA细胞中差异表达的lncRNA与mRNA。结果:恩杂鲁胺耐药细胞株LNCa P-ENZA和C4-2B-ENZA的IC50值分别为60.83、88.32μmol/L,与亲本细胞(分别为12.31、18.96μmol/L)相比显著增高(P<0.05),其耐药指数分别为4.94和4.67。Western印迹结果表明LNCa P-ENZA和C4-2B-ENZA中恩杂鲁胺耐药相关基因AR-V7、HnRNPA1的蛋白表达量相较与LNCa P和C4-2B细胞显著升高,而FL-AR的表达量未见显著改变。通过lncRNA芯片技术筛选后发现与C4-2B相比,在C4-2B-ENZA细胞中显著差异表达的lncRNA有1 440个,其中上调倍数最大者为DPP10-AS1(fold change=33.6),下调最大倍数为G090385(fold change=186.41);mRNA有1 236个,其中上调倍数最大者为BCHE(fold change=193.70),下调倍数最大者为ANKRD1(fold change=182.90)。结论:成功建立了人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞,并且筛选出了与耐药相关的lncRNA与mRNA,为前列腺癌恩杂鲁胺耐药的治疗提供分子依据。 展开更多
关键词 前列腺癌 恩杂鲁胺耐药 LNcaP细胞株 c4-2b细胞株 lncRNA MRNA
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RRS1在MPP^+诱导SH-SY5Y细胞凋亡过程中表达的变化及意义 被引量:1
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作者 能一鸣 张峥 +3 位作者 李雪 王芳玲 华亚男 侯琳 《精准医学杂志》 2020年第4期323-327,330,共6页
目的探究核糖体合成调节因子1(RRS1)在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^+)诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡过程中表达的变化及意义。方法以含有0、100、200、400μmol/L MPP^+的培养基培养SH-SY5Y细胞48 h,用CCK-8法检测各组细胞的增殖... 目的探究核糖体合成调节因子1(RRS1)在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^+)诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡过程中表达的变化及意义。方法以含有0、100、200、400μmol/L MPP^+的培养基培养SH-SY5Y细胞48 h,用CCK-8法检测各组细胞的增殖活力,用JC-1法检测细胞线粒体膜电位,采用Annexin V-APC/PI试剂盒检测细胞凋亡率,用Western blot检测细胞抑癌因子P53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)与RRS1蛋白的表达。构建RRS1慢病毒过表达载体(Lv-RRS1)和慢病毒阴性对照载体,对细胞进行慢病毒转染后,用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测慢病毒转染效率;对转染细胞以400μmol/L MPP^+处理48 h,用CCK-8检测细胞增殖活力,用Annexin V-APC/PI试剂盒检测细胞凋亡率,用Western blot检测细胞RRS1、P53、Bcl-2和Bax蛋白的相对表达情况。结果细胞经MPP^+处理培养,SH-SY5Y细胞增殖活力、线粒体膜电位显著降低(F=95.63、69.90,P<0.05);细胞凋亡率明显升高(F=258.49,P<0.01);P53蛋白和Bax蛋白表达明显升高(F=40.47、20.78,P<0.05);RRS1蛋白和Bcl-2蛋白表达明显降低(F=28.44、42.43,P<0.05)。慢病毒转染后,与对照组相比较,Lv-RRS1组RRS1 mRNA和蛋白表达量均明显增加(t=15.59、6.05,P<0.01);对转染的细胞以400μmol/L MPP^+处理48 h后,与对照组相比较,Lv-RRS1组细胞增殖活力显著升高(t=4.76,P<0.01);细胞凋亡率明显降低(t=5.80,P<0.01);RRS1蛋白和Bcl-2蛋白表达明显升高(t=12.41、3.14,P<0.05);P53蛋白和Bax蛋白表达显著降低(t=5.20、4.77,P<0.05)。结论RRS1在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡中低表达,RRS1可能通过影响凋亡相关因子P53、Bax和Bcl-2蛋白的表达参与MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡。 展开更多
关键词 核蛋白质类 1-甲基-4-苯基吡啶 细胞系 肿瘤 神经母细胞瘤 帕金森病 细胞凋亡 基因 p53 bcL-2相关X蛋白质 原癌基因蛋白质c-bcL-2 体外研究
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Rat cardiomyocyte H9c2(2-1)-based sulforhodamine B assay as a promising in vitro method to assess the biological component of effluent toxicity
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作者 Elsa T Rodrigues Susana F Nascimento +2 位作者 Maria Joao Moreno Paulo J Oliveira Miguel A Pardal 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2020年第10期163-170,共8页
The treatment of wastewaters is crucial to maintain the ecological status of receiving waters,and thereby guarantee the protection of aquatic life and human health.Wastewater quality evaluation is conventionally based... The treatment of wastewaters is crucial to maintain the ecological status of receiving waters,and thereby guarantee the protection of aquatic life and human health.Wastewater quality evaluation is conventionally based on physicochemical parameters,but increasing attention has been paid to integrate physicochemical and biological data.Nevertheless,the regulatory use of fish in biological testing methods has been subject to various ethical and cost concerns,and in vitro cell-based assays have thus become an important topic of interest.Hence,the present study intends:(a) to evaluate the efficiency of two different sample pre-concentration techniques (lyophilisation and solid phase extraction) to assess the toxicity of municipal effluents on rat cardiomyoblast H9c2(2-1) cells,and (b) maximizing the use of the effluent sample collected,to estimate the environmental condition of the receiving environment.The gathered results demonstrate that the H9c2(2-1) sulforhodamine B-based assay is an appropriate in vitro method to assess biological effluent toxicity,and the best results were attained by lyophilising the sample as pre-treatment.Due to its response,the H9c2(2-1) cell line might be a possible alternative in vitro model for fish lethal testing to assess the toxicity of municipal effluents.The physicochemical status of the sample suggests a high potential for eutrophication,and iron exceeded the permissible level for wastewater discharge,possibly due to the addition of ferric chloride for wastewater treatment.In general,the levels of carbamazepine and sulfamethoxazole are higher than those reported for other countries,and both surpassed the aquatic protective values for long-term exposure. 展开更多
关键词 Municipal wastewater treatment plant effluent LYOPHILISATION Solid phase extraction cell-based assays H9c2(2-1)cell line SRb assay
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防堵塞锆酸钙-硅酸二钙-碳水口耐火材料在钢铁工业的应用
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作者 刘会林 《耐火与石灰》 2011年第5期30-35,共6页
由于能形成铝酸钙液相,CaZrO3-βCa2SiO4-C复合耐火材料被用来防止或降低水口堵塞。研究了基于不同粒度级别的CZ-βC2S和石墨的配方对致密度参数、常温耐压强度和抗热震性能的影响。同时,对添加抗氧化剂B4C前后的配方进行了抗氧化试验... 由于能形成铝酸钙液相,CaZrO3-βCa2SiO4-C复合耐火材料被用来防止或降低水口堵塞。研究了基于不同粒度级别的CZ-βC2S和石墨的配方对致密度参数、常温耐压强度和抗热震性能的影响。同时,对添加抗氧化剂B4C前后的配方进行了抗氧化试验。结果表明:中颗粒尺寸含量较高的配方具有好的体积密度、显气孔率和常温耐压强度,而碳含量高的配方致密化程度低。同时,B4C增强了研究试样的抗氧化性能。 展开更多
关键词 水口 b4c caZrO3-βca2SiO4-c复合耐火材料
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Regulation of lovastatin on a key inflammation-related microRNA in myocardial cells 被引量:2
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作者 Guo Weizao Liu Huichen +2 位作者 Li Lin Yang Man Du Aihua 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2014年第16期2977-2981,共5页
Background Advances in the understanding of cardiovascular pathogenesis have highlighted that inflammation plays a central role in athemsclemtic coronary heart disease.Therefore,exploring pharmacologically based anti-... Background Advances in the understanding of cardiovascular pathogenesis have highlighted that inflammation plays a central role in athemsclemtic coronary heart disease.Therefore,exploring pharmacologically based anti-inflammatory treatments to be used in cardiovascular therapeutics is worthwhile to promote the discovery of novel ways of treating cardiovascular disorders.Methods The myocardial cell line H9c2(2-1) was exposed to lipopolysacchadde (LPS) in culture and resulted in a cellular pro-inflammation status,miR-21 microRNA levels were detected using quantitative real-time polymerase chain reaction (Q-RT-PCR).The influence of Iovastatin on miR-21 under normal and pro-inflammatory conditions was tested after being added to the cell culture mixture for 24 hours.Conditional gene function of two predicted cardiovascular system relevant downstream targets of miR-21,protein phosphatase 1 regulatory subunit 3A (PPP1R3A) and signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3),were analyzed with immunoblotting.Results Forty-eight hours of LPS treatment significantly increased the miR-21 to 170.71%±34.32% of control levels (P=0.002).Co-treatment with Iovastatin for 24 hours before harvesting attenuated the up-regulation of miR-21 (P=0.013).Twenty-four hours of Iovastatin exposure up-regulated PPP1R3A to 143.85%±21.89% of control levels in cardiomyocytes (P=0.023).Lovastatin up-regulated the phosphorylation level of STAT3 compared to the background LPS pretreatment (P=0.0077),this effect was significantly (P=0.018) blunted when miR-21 was functionally inhibited.Conclusions miR-21 plays a major role in the regulation of the cellular anti-inflammation effects of Iovastatin. 展开更多
关键词 LOVASTATIN H9c2 2-1) cell line MIcRORNA INFLAMMATION coronary heart disease
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氯胺酮对心肌缺血再灌注损伤中Toll样受体-4和核因子-κB表达的影响 被引量:2
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作者 于国军 陆化梅 杨富林 《医学分子生物学杂志》 CAS 2019年第6期569-574,共6页
目的研究氯胺酮对心肌细胞H9c2缺血再灌注损伤的保护作用及对Toll样受体-4(TLR-4)和核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法将处于对数生长期的大鼠心肌H9c2细胞分为3组:正常对照组(Con组)、缺氧复氧组(I/R组)、缺氧复氧+氯胺酮组(I/R+K组)... 目的研究氯胺酮对心肌细胞H9c2缺血再灌注损伤的保护作用及对Toll样受体-4(TLR-4)和核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法将处于对数生长期的大鼠心肌H9c2细胞分为3组:正常对照组(Con组)、缺氧复氧组(I/R组)、缺氧复氧+氯胺酮组(I/R+K组).各组细胞处理后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)水平及细胞外乳酸脱氢酶(LDH)含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测TLR-4 mRNA水平.Western印迹检测TLR-4、NF-κB及凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达水平.结果与Con组相比,I/R组细胞增殖能力显著降低,细胞内ROS水平升高,细胞漏出LDH含量增多,细胞凋亡率显著增加,TLR-4和NF-κB表达水平明显上调,Caspase-3蛋白激活增多(P<0.05).与I/R组相比,I/R+K组细胞增殖能力明显升高,细胞内ROS水平降低,细胞漏出LDH含量减少,细胞凋亡率显著降低,TLR-4和NF-κB表达水平下调,Caspase-3蛋白激活减少(P<0.05).结论氯胺酮能够通过抑制TLR-4和NF-κB的表达,减轻细胞损伤,减少细胞凋亡,对心肌细胞缺血再灌注损伤起保护作用. 展开更多
关键词 氯胺酮 H9c2细胞 心肌缺血再灌注损伤 TOLL样受体-4 核因子-Κb
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小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗急性上呼吸道感染的疗效 被引量:8
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作者 马文献 邵婷 侯园园 《中国药物经济学》 2023年第3期52-55,共4页
目的探讨小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗急性上呼吸道感染患儿血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及免疫功能的影响。方法选取2018年1月至2021年1月乌鲁木齐市第一人民医... 目的探讨小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗急性上呼吸道感染患儿血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及免疫功能的影响。方法选取2018年1月至2021年1月乌鲁木齐市第一人民医院收治的150例急性上呼吸道感染患儿作为研究对象,用抽签法随机分为观察组与对照组,各75例。对照组单用重组人干扰素α-2b,观察组联用小儿豉翘清热颗粒。比较两组患儿疗效,退热时间及咳嗽、腹泻、鼻塞、呕吐、咽痛消失时间,治疗前后血清hs-CRP、IL-4、TNF-α、IgG、IgA、IgM水平。结果观察组治疗有效率为97.33%,显著高于对照组的70.67%(P<0.05);观察组退热时间及咳嗽、腹泻、鼻塞、呕吐、咽痛消失时间明显短于对照组(P<0.05);治疗后,两组血清hs-CRP、IL-4、TNF-α和IgM水平明显降低(P<0.05),IgG、IgA水平明显升高(P<0.05),且上述指标观察组变化显著优于对照组(P<0.05)。结论小儿豉翘清热颗粒联合重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗急性上呼吸道感染可以提高疗效,改善患儿炎症状态,提高免疫功能。 展开更多
关键词 小儿豉翘清热颗粒 重组人干扰素Α-2b喷雾剂 急性上呼吸道感染 超敏c反应蛋白 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-4
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乳腺癌预后生物标志物研究进展 被引量:9
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作者 韩璐 宋丰举 陈可欣 《天津医药》 CAS 2016年第4期404-407,共4页
乳腺癌是世界范围内女性发病率最高的恶性肿瘤,也是导致女性癌症相关死亡的最主要原因。近些年乳腺癌患者数量呈逐年增加趋势,严重威胁女性的生命健康和生活质量。因此,乳腺癌预后的研究对乳腺癌患者意义深远。随着分子生物学的发展,一... 乳腺癌是世界范围内女性发病率最高的恶性肿瘤,也是导致女性癌症相关死亡的最主要原因。近些年乳腺癌患者数量呈逐年增加趋势,严重威胁女性的生命健康和生活质量。因此,乳腺癌预后的研究对乳腺癌患者意义深远。随着分子生物学的发展,一些分子生物学标志物被发现与乳腺癌患者预后有关,这使得更准确、有效地评估乳腺癌患者的预后成为可能。本文旨在对乳腺癌预后生物标志物的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 预后 生物学标记 综述 MIRNA-21 miRNA-210 cXcR4 ALDH1A1 bcL2 bRcA1/bRcA2
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一测多评法测定五味健脑合剂中7种成分的含量 被引量:3
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作者 宋军妹 朱云芳 许伟 《西北药学杂志》 CAS 2020年第6期807-813,共7页
目的建立能同时测定五味健脑合剂中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚含量的一测多评法(QAMS)。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30... 目的建立能同时测定五味健脑合剂中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚含量的一测多评法(QAMS)。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;以乙腈-1 mL·L^(-1)磷酸为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为320(检测2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)和270 nm(检测朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚);以淫羊藿苷为内参物,测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、6-姜辣素和8-姜酚的相对校正因子(RCF),利用RCF计算指标性成分的含量,并与外标法(ESM)测定结果进行对比,验证QAMS的可行性。结果 7种成分分别在7.68~192.00,2.86~71.50,4.69~117.25,7.87~196.75,5.46~136.50,1.83~45.75和0.67~16.75μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均回收率(RSD值)分别为99.31%(0.97%),98.50%(1.25%),98.19%(1.35%),100.04%(0.67%),97.99%(1.40%),96.94%(1.29%)和97.26%(0.91%),ESM和QAMS法测定结果无明显差异。结论 QAMS评法操作便捷、结果准确、重复性好,可用于五味健脑合剂中7种成分的同时测定。 展开更多
关键词 一测多评法 五味健脑合剂 相对校正因子 2 3 5 4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 朝藿定A 朝藿定b 朝藿定c 淫羊藿苷 6-姜辣素 8-姜酚
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