补体C5a、C5a受体及其拮抗剂的研究进展

C5a是最重要的补体活化产物之一,它与相应的C5a受体结合被激活后,参与了多种疾病的病理过程,如急性肺损伤、脓毒血症、类风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。如何阻断C5a信号的下传,从而减轻炎症反应一直是免疫学研究的热点问题。目前C5a和C5a受体的拮抗剂主要分为抗C5a抗体、小分子拮抗剂、C5a反义肽、C5a突变体和细菌来源的趋化抑制蛋白等。本文着重介绍C5a和C5a受体的结构与功能,以及相关拮抗剂的研究进展。

温胆汤对肥胖代谢相关基因B4 galt7、Sc5d启动子甲基化及表达的影响

目的 分析中医化痰名方温胆汤对肥胖腹腔脂肪组织代谢相关基因B4 galt7、Sc5d启动子区甲基化及表达的影响。方法 首先采用高脂饲料喂养构建肥胖大鼠模型,通过高、中、低不同剂量温胆汤干预肥胖大鼠,观察药物减重降脂的效应;然后采用Massarray技术检测B4Galt7、Sc5d基因启动子甲基化情况;再分别利用实时荧光定量RT-PCR技术、蛋白质印迹技术检测B4Galt7、Sc5d基因的表达情况,分析启动子区甲基化情况与表达间的关系。结果 (1)温胆汤的干预效果与药物浓度无明显剂量依赖关系,高、中剂量温胆汤对肥胖大鼠具有较好减轻体质量作用;温胆汤对改善肥胖大鼠的血脂中TG、TC、LDL-C水平有积极意义,尤其以高剂量组明显。(2)B4 galt7基因启动子区共检测到有31个位点发生甲基化改变。空白对照组与正常对照组比较平均甲基化程度上升,其中有24个位点甲基化程度上升。在此24个位点中,各药物组基本呈现与空白组相对的调控方向,即甲基化程度较空白对照组下降;Sc5d基因启动子区共检测到有37个位点发生甲基化改变。空白对照组与正常对照组比较平均甲基化程度下降,其中有20个位点甲基化程度下降。在此20个位点中,各药物组基本呈现与空白对照组相对的调控方向,即甲基化程度较空白对照组上升。(3)空白对照组与正常对照组相比B4Galt7 mRNA表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05);温胆汤干预后,各药物组表达低于空白对照组,但组间均无统计学差异(P>0.05);空白对照组与正常对照组相比Sc5d mRNA表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05);温胆汤干预后,各药物组与空白对照组比较表达降低,其中药物中剂量组降低明显,具有统计学差异(P<0.05)。(4)空白对照组与正常对照组比较,B4Galt7、Sc5d蛋白表达升高明显(P<0.01)。温胆汤干预后,各药物组B4Galt7、Sc5d蛋白表达明显低于空白对照组,且差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 温胆汤对B4Galt7基因启动子甲基化程度的影响均与其表达无明显关系,而对Sc5d基因启动子的甲基化的影响与其表达有相关性。

基于STC12C5A60S2单片机显示模块的实验研究

以常用的STC12C5A60S2单片机为主控芯片,以实验室单片机平台为载体,分别对数码管、LCD1602、LCD12864、OLED以及TFT五种显示屏进行DS18B20温度传感器采集与显示实验。实验测试结果表明五种显示模块均能有效采集并显示当前温度值,对比分析各种显示模块的性能,为不同应用场景下的显示需求提供了参考和借鉴,具有重要的实际应用价值。

基于STC12C5A60S2的温湿度控制系统设计

文章针对环境温湿度对纺织生产影响很大的情况,设计温湿度控制系统。系统采用STC12C5A60S2为控制核心,由DHT11进行数据采集,并且采用直观的1602LCD数字显示模块,以实现温度和湿度实时显示,高温时启动外部负载降温,低温时外部负载停止工作的控制,以将温湿度控制在一定的范围内,可以帮助纺织厂生产区域控制环境温湿度,确保纺织厂的温湿度符合要求。

C5aR与C5L2在脓毒症中的作用

脓毒症时补体系统过度激活产生大量过敏毒素C5a,C5a与其受体相互作用在脓毒症的发生过程中十分重要,成为研究脓毒症发生机制中的一个新热点.

黄芪-莪术对C5a介导JAK2/STAT3通路调控Lewis肺癌小鼠Th17/Treg细胞平衡影响的实验研究

目的探讨黄芪-莪术影响C5a介导JAK2/STAT3通路调控肿瘤微环境中Th17/Treg细胞平衡,从而阐明其在此途径抑制肿瘤进展的相关机制。方法40只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、中药干预组、阳性对照药(PMX53)组,每组各10只。腋下接种Lewis细胞建立肺癌小鼠模型,于接种后第3天开始,中药干预组按8.2 g/kg剂量给予中药浓煎液灌胃,模型对照组和PMX53组予等容积灭菌双蒸水灌胃,连续14 d;PMX53组分别于第3、6、9、12、15天按1mg/kg剂量给予腹腔注射PMX53,模型对照组和中药干预组同时腹腔注射等容PBS溶液。每2 d测算各组小鼠肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线;于第15天处死,剖取瘤块,ELISA法检测血清C5a、IL6、IL-10、IL-17、TGF-β等因子水平,流式细胞术检测并计算外周血和肿瘤组织中Th17/Treg细胞比例,Western Blot和Real-time PCR法检测肿瘤组织中JAK2/STAT3信号通路相关蛋白及mRNA表达。结果与模型对照组比较,中药干预组和PMX53组肿瘤生长较缓慢,补体C5a、JAK2和STAT3蛋白及mRNA水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值、Treg占比均降低,SOCS3蛋白及mRNA水平、Th17/Treg比例增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪-莪术可降低补体C5a进而抑制JAK2/STAT3通路活化,并调节肿瘤微环境中Th17/Treg平衡达到抑制肿瘤生长的作用。

基于C5G7-MOX的中子输运计算方法比较及MOC参数敏感性初步分析

特征线方法(Method of Characteristics,MOC)因其具备强大的几何处理能力,且在计算过程中亦能兼顾计算成本和计算精度,被广泛应用于高保真数值模拟计算中。常见的中子输运计算方法除MOC外,还包括碰撞概率法(Collision Probability method,CP)和界面流法(Interface Current method,IC)等。本文从方法理论以及数值计算两方面将MOC、CP和IC进行比较分析,评估其在pin-by-pin计算中的能力。同时在MOC计算中,不同的参数选择会对计算成本和计算精度产生影响,因此有必要进行敏感性分析以寻求最佳参数。本文首先将三种计算方法从原理上进行比较分析,再基于2D C5G7-MOX基准题完成了数值计算及MOC参数敏感性初步分析。计算结果表明:MOC在计算精度、计算效率和内存开销上均优于CP和IC。MOC的计算耗时和内存开销分别为23.9 min和37.5 MB,与参考解的相对误差仅为6.04×10^(-4)。而CP和IC的计算耗时分别为MOC的56.7倍和15.6倍,内存开销分别为MOC的407.7倍和32.8倍。进一步通过参数敏感性分析发现:网格划分对计算内存开销以及计算时间的影响最大,而极角的选择对计算精度的影响最大,并且给出一组综合优化建议参数:网格划分6×6,极角为GAUS且数目为2,方位角个数为30。该组参数的计算耗时为45.4 min,内存开销为264.7 MB,相对误差为5.9×10^(-5),归一化后的栅元均方根误差为0.002 55。

C5b-9在补体相关性肾脏疾病中应用的研究进展

补体活化的终产物C5b-9在多个肾脏疾病的发病机制中发挥着重要作用。C5b-9通过在肾小球毛细血管壁、肾小管、系膜区等结构以不同形式沉积介导肾脏损伤,并与组织损伤的严重程度及疾病的活动度相关,通过抑制C5b-9的形成可缓解蛋白尿等临床症状。目前C5抑制剂依库珠单抗已应用于临床中,其通过减少C5b-9在肾脏中的沉积、减轻肾组织损伤及改善肾功能,在一部分患者中取得了显著的效果。加强对C5b-9的认识将为补体相关性肾脏疾病的诊疗提供新的思路。本文总结了C5b-9在多种肾脏疾病中发挥的作用及可能的治疗靶点。

C5orf34基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建C5orf34基因的过表达慢病毒载体。方法通过聚合酶链反应(PCR)选择性扩增C5orf34基因目的片段,将目的片段连接至载体,利用基因重组技术构建带有C5orf34基因目的片段的重组载体,将重组载体转化到感受态细胞扩增并对阳性克隆的C5orf34过表达慢病毒载体进行测序,将正确重组的过表达慢病毒载体包装并转染色至293T细胞进行后续的慢病毒转染和滴度测定,采用实时定量PCR法检测C5orf34基因的过表达水平。结果经过测序比对显示,慢病毒载体与设计参考序列一致。重组慢病毒经包装并转染293T细胞后可观察到荧光,显示C5orf34过表达慢病毒载体滴度为1.0×10^(8)TU/mL。实时定量PCR的结果显示,在稳定转染C5orf34基因的细胞中C5orf34基因表达水平明显增高。结论成功构建C5orf34基因过表达慢病毒载体,为进一步研究C5orf34基因在肺癌发生发展过程中的机制奠定了生物学基础。

Apo A5、Alarin、C5a在单纯肥胖儿童高胰岛素血症中评估价值及临床意义

目的探讨载脂蛋白A5(Apo A5)、脂肪因子Alarin、补体C5a(C5a)在单纯肥胖儿童高胰岛素血症(HINS)中评估价值及意义。方法根据是否有HINS将2020年9月至2023年8月我院收治的302例单纯肥胖儿童分为HINS组、无HINS组,比较两组基线数据与血清Apo A5、Alarin、C5a水平,对相关数据进行统计分析。结果HINS组有糖尿病家族史患儿占比及FINS高于无HINS组(P<0.05);HINS组Apo A5低于无HINS组,Alarin、C5a高于无HINS组(P<0.05);相关性分析显示,Apo A5与FINS呈负相关(r=-0.759,P<0.05),Alarin、C5a与FINS呈正相关(r=0.816、0.829,P<0.05);Apo A5与Alarin、C5a呈负相关(r=-0.841、-0.827,P<0.05),Alarin与C5a呈正相关(r=0.860,P<0.05);线性回归分析显示,控制了糖尿病家族史等混杂因素后,Apo A5、Alarin、C5a仍与单纯肥胖儿童HINS呈显著的相关性(P<0.001);Apo A5、Alarin、C5a评估HINS的AUC依次为0.705、0.725、0.717,Apo A5+Alarin+C5a评估HINS的AUC最高为0.932,敏感度为79.17%,特异度为94.17%(P<0.05)。结论Apo A5、Alarin、C5a是单纯肥胖儿童HINS独立相关影响因素,联合检测三者水平有望成为预测HINS的一个有效方案,三者或可为儿童肥胖及HINS的预防提供新思路。

大国与中亚国家间“C5+1”对话机制的发展现状、动因与前景

“C5+1”机制在近些年来成为中、美、俄、欧、印等大国介入中亚事务的主要借助手段,突出表现为参与大国日益增多和对话层级不断提升。大国近年来之所以重视以“C5+1”机制介入中亚事务,主要是因为大国在中亚利益的整体性和有限性、中亚区域合作取得新进展等原因,但根本原因在于中亚地区大国竞争的加剧。“C5+1”机制在近年来的兴盛,对中国的中亚外交具有双重影响。展望未来,大国的意愿仍将是决定“C5+1”机制存续与发展的关键要素,同时不同大国参与下的“C5+1”间既有竞争又有合作的基本关系面在较长时间内不会改变,以及阿富汗有可能成为“C5+1”的成员国,扩展为“C6+1”。这些对中国来说既是机遇也是挑战,中国应着力提高“C5+1”机制下与中亚国家间的务实合作水平,同时也应密切关注其他大国“C5+1”机制的进展,取长补短,推动中国对中亚外交行稳致远。

C5-BODIPY的氧化及碘代反应研究

在合成C5-BODIPY的基础上,进一步通过PCC氧化、碘代等反应合成了C5-BODIPY的衍生物。化合物4的单晶结构,准确揭示了C5-BODIPY衍生物的碘代结构,为制备种类繁多的新型近红外荧光染料提供了宝贵的经验。

东昆仑它温查汉西矿床C5异常区地质特征及勘查类型探讨

它温查汉西C5异常区经过连续勘查已完成了详查,共计施工钻孔165个,见矿钻孔102个,圈定矿体47条,编号Ⅰ-1~Ⅰ-47矿体。本文通过对矿区主矿体特征进行总结,以地质勘查新规范为基础,对本区矿床勘查类型进行论述,为该区工程部署及资源量估算提供依据,同时为矽卡岩型铁多金属矿床勘查类型的确定提供参考。根据各主矿体的特征,求得矿区铁矿的五个地质因素类型系数值之和为1.52,铜矿为1.64,锌为1.57,确定矿区主矿产铁的勘查类型为Ⅲ类型、铜矿产的勘查类型为Ⅱ~Ⅲ类过渡,铅、金、锌矿产的勘查类型为Ⅲ类型。综上,矿区铁矿的基本勘查工程间距为100 m×50 m,铜矿的基本勘查工程间距为100 m×80 m;铅锌勘查基本网度为50 m×50 m。通过对矿区勘查类型的论述,重新优化了工程布置,并估算(控制+推断)铁矿石量2007.90×10^(4) t;控制+推断铜金属量7.61×10^(4) t;控制+推断锌金属量6.05×10^(4) t;控制+推断金金属量2861.17 kg,资源量达到了中型矿床规模。

GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响

目的ATP结合盒B亚家族成员1(ATP binding cassette subfamily B member 1,ABCB1)的异常表达在多种癌症的发生发展中发挥关键作用。然而,G蛋白偶联受体C家族5组A型(G protein coupled receptor family C group5 type A,GPRC5A)调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响仍不清楚。本研究探讨了GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响。方法我们采用RT-PCR、Western-blot或免疫组化实验,分析ABCB1在肺腺癌细胞系、人肺腺癌组织以及GPRC5A基因敲除小鼠和野生型小鼠的气管上皮细胞和肺组织中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析GPRC5A基因敲除小鼠气管上皮细胞对化疗药物的敏感性。采用皮下肿瘤形成实验探讨下调ABCB1表达是否可抑制体内肺腺癌增殖。采用免疫荧光和免疫沉淀实验研究GPRC5A和ABCB1之间潜在的调控关系。结果ABCB1在肺腺癌细胞系和人类肺腺癌组织中表达上调。GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞及肺组织的ABCB1表达高于野生型小鼠。与GPRC5A野生型小鼠的气管上皮细胞相比,GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞对塔立奇达和多柔比星更敏感。注射移植细胞28天后,接受ABCB1基因敲除细胞移植的GPRC5A-/-C57BL/6小鼠的肺肿瘤的体积和重量均明显低于野生型细胞移植小鼠(P=0.0043,P=0.0060)。此外,免疫荧光和免疫沉淀实验表明,GPRC5A通过直接结合方式调控ABCB1的表达。结论GPRC5A通过抑制ABCB1表达降低肺腺癌增殖。GPRC5A调节ABCB1表达的途径有待研究。

Sublytic C5b-9上调KLF5促进Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞生成IL-23的作用

目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-23的作用。方法:(1)建立大鼠Thy-1N模型和体外培养大鼠GMC,用Western blot(WB)检查Thy-1N大鼠肾组织和受sublytic C5b-9刺激的GMC中KLF5和IL-23的表达。(2)分别将KLF5过表达质粒(pIRES2-KLF5)或KLF5小干扰质粒(shKLF5)转染GMC,通过实时荧光定量PCR和WB检测KLF5和IL-23的mRNA和蛋白水平。(3)将IL-23全长启动子荧光素酶报告基因质粒(p GL3-IL-23-FL)转染GMC,再给予sublytic C5b-9刺激,或将p GL3-IL-23-FL与pIRES2-KLF5或shKLF5共转染GMC,用荧光素酶报告基因实验检测IL-23启动子活性的变化。(4)将慢病毒(lentivirus,LV)包装的LV-shKLF5和LV-shCTR行肾动脉灌注术导入大鼠肾组织,经小动物脏器可见光三维成像和冰冻切片观察GFP表达,证实LV-shCTR在肾组织中富集效率。之后再复制大鼠Thy-1N,用WB检查肾组织中KLF5和IL-23的蛋白表达。结果:(1)Thy-1N大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中,KLF5和IL-23的表达均显著升高,且KLF5的表达高峰稍早于IL-23。(2)在GMC中过表达或敲低KLF5能分别引起IL-23表达的升高或降低。(3)Sublytic C5b-9刺激或KLF5过表达均可增加GMC中IL-23启动子的活性,但敲低KLF5后可明显下调由sublytic C5b-9刺激GMC诱导的IL-23启动子活性。(4)敲低Thy-1N大鼠肾组织中KLF5的表达后,其肾组织中IL-23的表达水平明显降低。结论:大鼠Thy-1N发病早期,sublytic C5b-9刺激GMC后可通过上调KLF5促进IL-23基因的转录与表达。

馏分油加氢装置C5 减产方案分析与总结

经调查,市场对C5产品销售渠道相对狭窄,易造成公司小库容产品憋库的生产状况。以公司高效发展为出发点,同时为了提高部分高附加值产品收率,因此进行C5减产方案,以降低C5产品的产量。主要分析了馏分油加氢装置C5减产方案的可行性,并确定调整方向,通过优化反应单元温升和优化分馏单元操作的调整方法实施方案。经生产数据分析,降低反应温升和提高液化气收率两种方式均可以有效降低C5产品产量。

C5a受体拮抗剂对小鼠脊髓损伤后后肢功能的影响及作用机制

目的观察补体裂解因子C5a受体拮抗剂(C5a receptor antagonist,C5aRA)对小鼠脊髓损伤后炎症反应及功能变化的干预效果,探讨C5a在脊髓损伤后的作用机制。方法利用成年雌性C57BL/6J小鼠建立脊髓夹伤模型,在术前45 min经腹腔注入C5aRA AcF-[OP(D-Cha)WR](PMX53),同时建立甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)注射组、生理盐水注射组和假手术组对照。应用ELISA、RT-PCR观察炎症因子TNF-α及IL-1β表达的变化,通过流式细胞方法检测小胶质细胞百分比的变化,并进行小鼠后肢的行为学评分(mouse scale for locomotion,BMS)。结果生理盐水组小鼠脊髓于伤后1 h即出现炎症因子的明显升高,TNF-α在1 h达峰值,IL-1β在12 h达峰值,后下降,到72 h两者均已接近基线值;小胶质细胞百分比在SCI后1 d即出现升高,3 d较明显,7 d达峰,14 d已下降,但仍高于正常水平。与生理盐水组相较,应用C5aRA特异性抑制C5a后,损伤早期的炎症因子表达水平及炎症细胞增殖均明显被抑制,BMS评分显著优于生理盐水组(P<0.05),但其对炎症反应的抑制作用略弱于MP组(P<0.05)。结论应用C5aRA特异性拮抗C5a可以抑制脊髓损伤后早期炎症因子TNF-α、IL-1β表达及炎症细胞小胶质细胞活化增殖,改善后肢的行为学评分,提示C5a通过增强脊髓损伤后早期炎症反应参与了脊髓损伤后的继发性损伤。

补体裂解产物C5a的研究进展

C5a由C5裂解而来,由74个氨基酸构成,是一种潜在的前炎症因子。C5a在羧肽酶的作用下迅速变成C5adesArg,通过G蛋白受体经典的通路与C5aR结合后在天然免疫中和适应性免疫中均发挥着重要的作用,非G蛋白受体通路目前的研究还不明朗。研究发现,C5a是许多自身免疫性疾病的重要病原起始物,所以抑制C5a的释放在未来的治疗中是一个很好的策略和方向。

人C5a过敏毒素拮抗剂的分子设计及其活性检测

目的 :从蛋白质结构与功能的关系出发 ,探讨C5aR与其配体的C5a的结合位。方法 :按分子设计理论 ,采用亲水性方案寻找C5aR胞外区高亲水性区域 ,Fmoc方案人工合成C5aR第 9～ 30位氨基酸基序 (P2 2肽 ) ,经高效液相色谱纯化 ,毛细管电泳鉴定。结果 :合成多肽 (P2 2 )的纯度为 95 19% ,每次缩合的平均效率为 99 78% ;能与anti C5aRMcAb(S5 1,Serotic公司 )有效地结合 ,酶联OD490极显著高于同浓度对照多肽C2 0 ;还可被配体rh C5a( 10ng ml)明显抑制而降低其酶联OD值 (P <0 0 5 ) ,此外 10ng mlP2 2还可抑制rhC5a所致U937细胞胞浆Ca2 + 升高 (P <0 0 1)。结论 :从C5aR分子中寻找C5a结合位基序 ,可拮抗C5a的过敏毒素作用 。

10万t/a混合C5生产1,4-丁二醇工艺中氧化反应器的模拟与优化

针对10万t/a顺酐法生产1,4-丁二醇工艺受原料影响较大的缺陷,结合我国混合C5烃的市场情况,采用C5原料生产1,4-丁二醇,针对该工艺的关键设备-正戊烷氧化反应器,采用Aspen Plus软件对影响顺酐和苯酐产率和选择性的关键参数进行了灵敏度分析,优化了反应参数,提高了顺酐和苯酐的产率和选择性。在优化条件下,正戊烷的转化率以及苯酐和顺酐的产量大大提高。在单耗不变的情况下,顺酐的产率和选择性由原来的34.1%和6.9%分别增加到45.1%和32.1%,苯酐的产率从15.7%降低到13.5%,苯酐的选择性从3.2%升高到9.6%,而一氧化碳的产率和选择性由原来的43.1%和8.7%分别降低到32.0%和2.7%。优化后的反应条件提高了顺酐的产率和选择性,有利于正戊烷氧化生成顺酐的反应。