C57BL/6小鼠微小三毛滴虫的观察与种系发育分析

为鉴定从某外单位引进的C57BL/6小鼠粪样检测中发现的虫体种类,本试验对虫体进行形态学观察,并进行种系发育分析。取C57BL/6小鼠粪样涂片和瑞士染色后进行显微镜观察,提取粪样总DNA,根据三毛滴虫的16S rRNA进行PCR扩增后测序,运用MEGA11进行种系发育分析。显微镜观察发现,虫体符合微小三毛滴虫的形态学特征,测序发现微小三毛滴虫的基因序列与鼠三毛滴虫高度同源。

枸杞多糖对C57BL/6J骨质疏松症小鼠的早期防治

目的探讨枸杞多糖(LBP)对C57BL/6J骨质疏松症小鼠的早期防治作用。方法选用12周C57BL/6J雌鼠,采用双侧卵巢完全切除术制备骨质疏松症模型,假手术组切除卵巢周围脂肪组织,术后1周,选取手术成功的小鼠分为假手术组、模型组和LBP组。LBP组给予灌胃LBP 0.1 g·kg^(-1),1次/d,连续12周,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水。酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中雌二醇(E_(2))含量;生物化学方法检测血清氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;Micro CT扫描胫骨微观结构,观察骨小梁厚度(Tb·Th)、骨表面积和骨体积之比(BS/BV)、骨小梁分离度(Tb·Sp)、骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨体积(BV)的变化。结果与假手术组小鼠比较,模型组小鼠的体质量增长率升高、子宫脏器系数明显减小、血清E_(2)含量下降、血清氧化应激指标MDA含量增高、SOD活力降低(P均<0.01);与模型组小鼠比较,LBP组小鼠子宫脏器系数、血清E_(2)含量差异均无统计学意义(P均>0.05),但体质量增长率下降、血清MDA含量降低、SOD活力增加(P均<0.01),骨组织BMD、BV升高(P均<0.05),Tb·Th及BV/TV均显著升高(P均<0.01)。胫骨三维重建图显示,模型组骨皮质变薄,呈现骨质疏松改变,骨小梁数量减少,排列紊乱,髓腔明显扩大;LBP组较模型组骨小梁数量增加。结论LBP可能通过调控早期骨质疏松症小鼠的氧化应激反应,发挥改善骨质疏松的作用。

姜黄联合山楂对C57肥胖小鼠的减肥作用及机制研究

目的:评价姜黄联合山楂的减肥作用并探索其减肥机制。方法:32只C57BL/6J小鼠随机分为四组:正常组、正常干预组、高脂组、高脂干预组,每组8只。每天定时灌胃相应药物,每周定时检测小鼠脂肪率、瘦肉率、摄食和饮水量变化,每隔两周同一时间测定小鼠的随机血糖,12周后脱颈椎处死小鼠采集标本。检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST),通过附睾脂肪和肝脏HE染色,观察脂肪和肝脏组织形态变化。实时荧光PCR法检测肝脏组织中胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)、肝X受体α(Liver X Receptorα,LXRα)、固醇调节元件结合蛋白2(Sterol Regulatory Element Binding Protein,SREBP2)、固醇调节元件结合蛋白1C(Sterol Regulatory Element Binding Protein,SREBP1C)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(Steary-coenzyme A dehydro-synthase-1,SCD1)mRNA的相对表达水平。结果:相比高脂组,高脂干预组小鼠体质量、脂肪率、TG、TC、LDL-C显著降低,瘦肉率、HDL-C显著升高(P<0.05),摄食、饮水量无显著差异;抑制了脂肪细胞肥大,使得脂肪沉积减少;改善了肝脏细胞空泡化、炎症浸润;肝脏组织中CYP7A1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),LXRα、SREBP1C、SCD、FAS mRNA表达水平极显著降低(P<0.01),SREBP2 mRNA表达水平无显著变化。结论:姜黄-山楂具有良好的减肥作用,其减肥机制与调节相关基因中mRNA表达水平有关。

顺铂诱导肾损伤模型在C57BL/6小鼠J和N亚型中的差异性研究

目的探讨C57BL/6 J和N亚型小鼠在顺铂诱导肾损伤模型中的易感性差异,为选择药物肾损伤模型提供理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠J和N两种亚型,各随机分为正常组(Control)、模型组(cisplatin,CDDP)。模型组腹腔注射顺铂(3.33 mg·kg^(-1)),隔天给药,持续2周,记录小鼠体重变化、存活率;检测Scr、BUN和β2-MG评价肾功能;HE、Masson和PAS染色法观察肾皮质病理改变。IL-6、IL-1β和IL-18等炎症因子检测顺铂导致的肾脏炎症反应。结果与Control组相比,CDDP组两种亚系小鼠Scr、BUN和β2-MG均明显升高;组织学结果显示肾小管损伤,胶原纤维化和糖原沉积均增加;IL-6、IL-1β和IL-18炎症因子含量和肾皮质蛋白表达均明显升高。C57BL/6N与C57BL/6J系小鼠比较,C57BL/6N系小鼠肾功能指标Scr和BUN均值明显偏高(P<0.01),组织学评分各病理损伤较C57BL/6J亚系小鼠明显偏高,反映纤维化的Masson染色差异具有统计学意义(P<0.01);IL-6、IL-1β和IL-18均值明显偏高,但差异无统计学意义。结论C57BL/6 J和N亚型小鼠均可使用顺铂诱导成功肾损伤模型,相比于C57BL/6J小鼠,C57BL/6N亚系小鼠在肾功能、组织学以及炎症因子等方面损伤明显,提示C57BL/6N亚系小鼠更适于作为药物或者其他肾功能损伤模型的建立。

C57BL/6J小鼠背景的CD19嵌合抗原受体T细胞的制备及优化

目的:探索C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞体外刺激条件、最佳培养和感染时间,以期提高CD19嵌合抗原受体T细胞(m CD19 CAR-T)的感染效率。方法:将纯化的C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞在包被CD3/CD28抗体(anti-CD3/CD28 coated)、包被CD3抗体+可溶性CD28抗体(anti-CD3 coated+soluble anti-CD28)和包被CD3抗体(anti-CD3 coated)3种不同条件下分别刺激12 h和24 h,后续培养24 h、48 h和72 h并记录细胞克隆数。在上述3种条件下分别刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞12、24和36 h,然后加入白介素(IL)-2(100 U/ml),镜下记录培养24 h、48 h和72 h的细胞克隆数;此条件下取刺激24 h的CD3^(+)T细胞,感染m CD19 CAR-T逆转录病毒,制备m CD19 CAR-T细胞,流式检测48 h时3组中GFP+CAR-T细胞的百分率。结果:利用获得BALB/c小鼠m CD19 CAR-T细胞的最优化条件,制备C57BL/6J小鼠的m CD19 CAR-T细胞感染效率仅5.23%;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞24 h,终止刺激继续培养至48 h时细胞克隆数最高;在上述条件刺激24 h后加入IL-2培养48 h,anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated组T细胞增殖克隆数量显著增加,且CAR-T细胞感染效率为17.63%±4.17%。结论:C57BL/6J小鼠来源T细胞制备CAR-T细胞的最佳条件与BABL/c小鼠不同;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated+IL-2刺激条件下诱导的T细胞感染逆转录病毒后可获得最高效率的m CD19 CAR-T细胞。

17β-雌二醇抗BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光照损伤的比较

目的:通过建立BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光损伤模型,研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)的视网膜神经保护作用,为成功构建E2抗视网膜光损伤模型提供实验数据。方法:成年雌性BALB/c、C57BL/6小鼠各40~45只,实验分组如下:正常对照组,去势手术对照组,去势光照组(小鼠去势手术14d后进行持续10000lx白光光照刺激4、8、12、16、24h组),玻璃体腔注射假手术组,生理盐水组和E2预处理组(去势手术14d后暗适应24h后分别行玻璃体腔注射2μL生理盐水或10-5 mol/L E2),每组各6只。通过石蜡切片HE染色、TUNEL染色、视网膜电图检测视网膜形态及功能变化。结果:去势光损组视网膜内核层/外核层厚度从白光10000lx光照4h组开始显著减小;玻璃体腔注射E2预处理可显著抑制两种品系小鼠视网膜各层细胞的凋亡(P<0.01)以及C57BL/6小鼠视网膜电图检测中最大混合反应a波和b波波幅的下降(P<0.05)。结论:相同光照条件对两种品系小鼠光损敏感性存在差异;E2对BALB/c小鼠无论是视网膜形态学及功能学上都产生了保护作用,而对C57BL/6小鼠功能学保护作用显著。

枸杞多糖对去势C57BL/6J小鼠小脑的神经保护作用

目的观察枸杞多糖对去势C57BL/6J小鼠小脑的神经保护和认知功能改善作用。方法选用12周龄C57BL/6J雌鼠,随机分为假手术组、模型组和枸杞多糖(LBP)干预组。12周龄雌鼠去势后1周,LBP干预组给予灌胃枸杞多糖0.1 g·kg^(-1),每天1次,连续12周,假手术组和模型组灌胃服用等量蒸馏水。应用旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验检测小鼠焦虑及学习记忆能力;酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中雌二醇(E2)含量;生物化学方法检测血清及小脑半球氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;蛋白免疫印迹法检测小脑半球胆碱乙酰转移酶(ChAT)及炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相对表达量。结果去势小鼠LBP干预12周后,与假手术组小鼠比较,模型组小鼠的体质量增加、子宫系数下降、学习记忆能力减弱、血清E2含量下降、血清及小脑半球氧化应激指标MDA含量增高,SOD和GSH-Px活力降低,小脑半球ChAT的表达量下调以及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量上调(P均<0.05)。与模型组小鼠比较,LBP干预组小鼠的体质量、子宫系数及血清E2含量差异无统计学意义(P均>0.05),学习记忆能力、氧化应激指标MDA含量,SOD和GSH-Px活力、小脑半球ChAT及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的相对表达量均有所改善(P均<0.05)。结论LBP干预可以改善去势C57BL/6J小鼠的认知功能,可能与其对小脑的抗氧化、抗炎及提高ChAT的表达有关。

不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质功能区的微血管形态计量学分析

目的 观察不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51显微镜结合Image-Pro Plus 5.1进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5.1软件进行微血管长度密度(mlcrovascular length density, Lv)、微血管表面积密度(microvascular surface area density, Sv)、微血管体积密度(microvascular volume density, Vv)的定量分析。结果 碱性磷酸酶在成年组和老年组的大脑皮质微血管内表达丰富,在幼年组略有表达,而在乳鼠组无表达;软脑膜血管进入皮质的方式分T字形、Y字形、大弧形和小弧形四种;相同年龄不同部位的Lv、Sv和Vv显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0.05)。老年组的各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论 C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区微血管内碱性磷酸酶的表达随年龄增长而增多,成年时达到峰值,其脑内微血管构筑为脑血管疾病及模型制备提供形态学参数。

奥贝胆酸对高脂喂养的C57BL/6J小鼠糖脂稳态的影响

目的研究奥贝胆酸(OCA)对高脂喂养C57BL/6J小鼠糖脂代谢的影响。方法给C57BL/6J小鼠喂高脂饮食(HFD)12周后,将其随机分为模型组(model)和OCA干预组(10 mg/kg,连续灌胃6周),每组10只。喂12周正常饲料的C57BL/6J小鼠作为对照组(control),模型组和对照组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。实验期间开展口服葡萄糖耐量和胰岛素耐量实验。实验结束后,测定血清中肝功能相关指标,记录肝脏质量,测定肝脏中脂质相关指标,并对肝脏进行苏木精-伊红(HE)染色;RT-qPCR检测肝脏中脂质代谢相关基因表达。结果糖负荷和注射胰岛素后,模型组各个时间点血糖和曲线下面积(AUC)明显高于对照组(P<0.01),OCA干预组能缓解模型组小鼠糖耐量异常(P<0.05),提高胰岛素敏感性(P<0.05);模型组血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白总胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显高于对照组(P<0.01),高密度脂蛋白总胆固醇(HDL-C)水平显著低于对照组(P<0.01),OCA干预组能显著降低模型组血清中TG、TC、FFA、LDL-C、ALT和AST水平(P<0.01),增加模型组血清中HDL-C含量(P<0.01);模型组肝脏中TG、TC、FFA含量明显高于对照组(P<0.01),OCA干预组能缓解模型组小鼠肝脏脂肪变性(P<0.05);模型组法尼醇X核受体(FXR)/固醇调节元件结合蛋白(SREBP)途径相关基因与对照组相比表达异常(P<0.01),OCA干预组逆转模型组FXR/SREBP途径相关基因表达异常(P<0.05)。结论OCA可能通过调节FXR/SREBP途径改善HFD小鼠肝脏脂质代谢紊乱,进而改善HFD小鼠糖耐量异常和胰岛素抵抗。

γ-Synuclein在不同年龄段C57小鼠内毛细胞中的差异表达

目的观察不同年龄段C57BL/6J小鼠内毛细胞中γ-Synuclein的表达差异性,探讨其与老年性聋听力损失的可能关系。方法随机选取出生后1月龄、3月龄、6月龄和9月龄C57BL/6 J小鼠各12只,对其进行ABR检测,取其耳蜗基底膜顶、底回进行免疫荧光染色,观察γ-Synuclein的表达差异情况。结果各年龄段C57小鼠ABR32kHz(高频)听力阈值分别为38.75±7.42、45.00±7.39、66.25±9.80、79.58±8.38dB SPL,从6月龄开始32kHz听阈明显升高(P<0.05),9月龄时相比6月龄进一步升高(P<0.05)。各年龄组免疫荧光染色耳蜗顶回γ-Synuclein染色完整未见缺失,底回γ-Synuclein出现选择性表达缺失,各年龄组选择性表达缺失数分别为1.08±1.00、1.25±1.22、2.75±1.91、4.42±2.11个,从6月龄开始γ-Synuclein在底回选择性表达缺失明显增加(P<0.05),9月龄时相比6月龄进一步增加(P<0.05)。结论γ-Synuclein选择性表达缺失增加的变化趋势与ABR测听高频听阈升高的变化趋势相符,提示γ-Synuclein与老年性聋听力损失存在可能关系。

C57BL/6小鼠急性放射性肠炎模型的建立

目的 用不同剂量的X射线照射C57BL/6小鼠,以建立急性放射性肠炎小鼠模型,为进一步探索急性放射性肠炎的发生和作用机制奠定基础。方法 取SPF级雄性6-8周龄C57BL/6小鼠23只,随机分为对照组(n=3)和6、12、15和18Gy(n=5)不同剂量照射实验组,观察小鼠15d存活率和体重变化情况。另取60只小鼠,随机分为对照组和6Gy、12Gy、15Gy(n=15)不同剂量照射实验组,分别在第1、3、7d颈椎脱臼处死各5只小鼠,取末端回肠组织做病理切片,进行HE染色、Masson染色,采用RT-qPCR方法检测肠组织中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和促纤维化生长因子TGF-β1的mRNA相对表达量变化。结果 辐照后第3d,照射组6Gy、12Gy、15Gy较对照组促炎细胞因子IL-1β、IL6、TNF-α和促纤维化生长因子TGF-β1有显著性变化,15Gy较对照组照射组小鼠回肠绒毛高度降低,隐窝数目减少、深度变浅,隐窝腔变大,肠纤维化更明显,而6Gy及12Gy相应表型不明显。结论 X射线一次性腹部照射,大体观察和病理切片表明15Gy和18Gy照射组具有临床急性放射性肠炎的症状,18Gy照射组小鼠会出现死亡,不能为进一步实验研究提供模型,15Gy可作为急性放射性肠炎小鼠模型的最佳照射剂量。

清洁级C57BL/6剖腹产小鼠两种分娩期判断方法比较研究

我部利用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠在半屏障系统环境设施条件下进行剖腹产术。采用触诊法、推算法判断妊娠小鼠分娩期获得剖腹产仔鼠成活率分别为８９．５２％、９１．７５％，两种方法结果十分接近，而在实际应用中，我们认为触诊法对半屏障系统下清洁级剖腹产小鼠分娩期的判断更为方便、实用。

不同品系小鼠肥胖模型比较及C57BL/6J小鼠肥胖机制研究

目的建立和比较不同品系小鼠肥胖模型,并研究C57BL/6J小鼠肥胖形成的分子机制。方法选用C57BL/6J、ICR和KM 3个品系♂小鼠,各品系小鼠随机分为正常对照和高脂模型组,分别在饲养4周与8周后测定小鼠体重、脂肪重量、Lee’s指数;脂肪细胞形态学观察和横截面面积计量;酶法检测血脂和LPL活性,应用荧光实时定量PCR技术探讨模型形成分子机制。结果 C57BL/6J小鼠模型组体重、脂肪重量、Lee’s指数、脂肪细胞横截面面积与对照组比较均明显升高,形成良好肥胖模型,而ICR和KM小鼠肥胖指标不如C57BL/6J小鼠变化明显。机制研究表明,C57BL/6J小鼠造模后血清LPL活性升高,肝脏PPARα、脂肪组织PPARγ和DGAT表达上调,脂肪组织HSL、ATGL和TGH表达下调,这些酶、受体的表达变化是形成肥胖的重要机制。结论 C57BL/6J小鼠经高脂饲料诱导4周后可形成良好肥胖模型,PPARα、PPARγ、LPL、DGAT、HSL、ATGL和TGH既是肥胖形成的主要机制,也是减肥药物作用靶点判断的生物标志物。

不同孕期弓形虫感染对C57BL/6J小鼠胚胎发育和子鼠学习能力的影响

目的 观察虫株毒力的差异和感染时间的不同对小鼠胚胎发育和子鼠学习能力的影响。方法 用RH株或PP株两种弓形虫株 ,腹腔感染不同孕期的C5 7BL/ 6J小鼠。结果 实验表明 ,与对照组相比 ,在妊娠期感染RH株或PP株 ,会使卵黄囊直径、胚胎体长、胚胎头、体节数和胎仔体重、体长降低或减小 ,胎儿死亡率增高 ,在水迷宫测试中 ,子鼠分辨学习能力也显著低于正常对照组。结论 上述影响以RH株感染组最为显著 ,影响的严重程度以感染期而不同 ,在妊娠早期感染对胚胎的生长发育和学习能力影响最为显著 ,中期感染次之 ,晚期感染较轻。

C57black/6小鼠全脑缺血模型脑内Bax和Bcl-2的表达

本研究采用C57black/6小鼠制备全脑缺血模型,观察脑缺血后多个脑区Bax和Bcl-2基因的表达。双侧颈总动脉夹闭(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)15min,造成全脑缺血,24h后取脑组织进行Bax和Bcl-2免疫组织化学染色。结果显示:Bax阳性细胞广泛分布在大脑皮层、丘脑和杏仁核,阳性产物主要位于胞质内。除丘脑外,其他各部位Bax阳性神经元的密度缺血组均显著高于假手术组(P<0.05);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。Bcl-2阳性细胞在大脑皮层和丘脑均有表达,缺血组大脑皮层内Bcl-2阳性神经元的密度显著高于假手术组(P<0.05);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。以上结果表明双侧颈总动脉夹闭法致C57black/6小鼠全脑缺血模型可致多脑区Bax和Bcl-2的广泛表达,提示Bax和Bcl-2可能介导了缺血所致的神经元损伤。

巢蛋白在成年C57小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布及比较

目的 观察巢蛋白 (nestin)在成年C5 7小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布 ,探讨并比较神经干细胞在两种啮齿类动物中分布的异同。 方法 采用免疫组织化学ABC法和间接免疫荧光法 ,显示含神经干细胞特征性的标志物巢蛋白的阳性结构在上述两种啮齿类动物中枢神经系统中的分布。 结果 在成年C5 7小鼠中枢神经系统中 ,巢蛋白在整个脑室系统周围均有表达 ,免疫阳性结构位于室管膜细胞胞体及其突起 ,并呈现由吻端向尾端渐次减少的趋势。在成年SD大鼠的脑室系统中 ,巢蛋白主要分布在侧脑室外侧壁及其周围脑区。此外 ,在两者的齿状回、穹窿下器、最后区等脑结构中也有巢蛋白的表达。成年C5 7小鼠中枢神经系统中巢蛋白的表达 ,无论在免疫阳性结构的数量上还是在染色强度上都明显多于和强于成年SD大鼠。 结论 巢蛋白在成年C5 7小鼠中枢神经系统中的广泛脑区均有表达 ,而在成年SD大鼠中仅见于有限的脑区 ,提示成年C5 7小鼠中枢神经系统可能具有较强的神经可塑性和损伤修复能力。

卡介苗含量对成功建立C57BL/6小鼠CIA模型的影响

目的:明确佐剂中卡介苗含量对成功建立C57BL/6小鼠胶原性关节炎(Collagen in-duced arthritis,CIA)模型的影响,为开展类风湿关节炎(RA)的有关动物实验研究提供参考。方法:四个模型组以鸡Ⅱ型胶原(TypeⅡcollagen,CⅡ)与含不同浓度高毒卡介苗的完全弗氏佐剂(Completed Freund’s adjuvant,CFA)免疫C57BL/6小鼠诱导CIA,以关节炎指数为评价造模成功率,并对免疫成功模型进行一般状态观察、关节炎指数评分、脾脏指数计算、组织病理学和关节影像学检查。另设正常对照组。结果:四模型组小鼠踝关节分别于加强免疫后d4、d3、d3、d2天开始出现红肿,d14肿胀厚度达到高峰,小鼠死亡率分别为0%、5%、6%、80%,小鼠的CIA发生率分别为15%、60%、55%、死亡率高无数据;关节炎指数、脾脏指数均显著高于正常对照组(P<0.01);病理学结果显示:造模成功小鼠患病关节表现出周围炎性细胞浸润、滑膜增生、软骨和骨骼破坏等较为典型的变化;足爪X线摄片显示:关节间隙变窄,关节面不光滑,周围软组织影增厚;关节强直、畸形;正常对照组小鼠则无上述表现。结论:含2.5 mg/ml高毒卡介苗的完全弗氏佐剂,与鸡Ⅱ型胶原充分乳化,可成功诱导C57BL/6小鼠关节炎模型,免疫模型在临床发病特点、组织病理学改变等方面,较充分模拟了人类RA的病变特征,可适用于开展RA防治药物或其机制的实验研究模型。

链脲佐菌素诱导C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型研究

目的 建立与 2型糖尿病 (非胰岛素依赖型糠尿病、NIDDM)病人临床特征和发病过程相似的NIDDM动物模型。方法 用高脂肪饲料喂养C57BL/6J雄性断乳小鼠 3周 ,腹腔注射链脲佐菌素 (STZ) ,继续喂养 4周 ,测定给药前和给药后 1、3、4周非空腹血糖、实验结束时非空腹胰岛素水平 ,观察胰腺形态学变化。结果 喂养 3周后 (给药前 )高脂饲料 -STZ组及高脂饲料 -柠檬酸组血糖浓度 (7 0± 0 39)mmol/L、(6 8± 0 4 5)mmol/L高于普通饲料 -STZ组及普通饲料 -柠檬酸组 (5 3± 0 4 0 )mmol/L、(5 4± 0 39)mmol/L ,P <0 0 5;实验结束时 ,高脂饲料 -STZ组血糖浓度 (13 1± 2 0 1)mmo/L高于高脂饲料 -柠檬酸 (6 9± 0 4 6 )mmol/L、普通饲料 -柠檬酸组 (6 0± 0 4 6 )mmol/L和普通饲料 -STZ组 (7 1± 0 6 2 )mmol/L(P <0 0 5) ,各组间血浆胰岛素浓度、体重及饮水量差异无显著性 ,P >0 0 5;实验过程中高脂饲料STZ组和柠檬酸组小鼠每天进食热量 (6 4 4 9± 9 2 )kJ/只 ,(70 7± 9 6 )kJ/只 ,显著高于普通饲料STZ组和柠檬酸组 (52 7± 7 9)kJ/只 ,(57 3± 11 7)kJ/只 ;各组小鼠胰腺和胰岛细胞形态正常。结论 高脂肪饲料和STZ是用C57BL/6J断乳幼鼠建立NIDDM模型所必须的 ,10 0mg/kg体重STZ对普通饲料小鼠?

生姜对C57小鼠毛发生长影响的研究

目的:探讨生姜对C57BL/6J小鼠毛发生长的促进作用。方法:C57BL/6J小鼠背部脱毛,给予不同浓度的生姜汁,观察其对小鼠毛发生长周期和生长速度的影响;组织学检查其对毛囊和黑色素的影响。结果:14 d后生姜各组皮肤开始变黑,19 d后生姜皮肤各组开始长出毛发,29 d生姜各组均长满毛发。与空白对照组对比,均具有显著性差异,与阳性对照组相比,在生长初期和中期,促毛发生长作用较弱,后期则达到相同的效果;对毛发的生长速度影响在高中剂量的范围内呈现剂量依赖性;病理切片显示,用药组可增加小鼠皮肤真皮层黑色素分布,刺激毛囊生长,使其进入生长期,而同期空白组仍然处于毛发休止期。结论:生姜具有明显的促毛发生长作用。

高效建立129/ter、C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系的方法学探讨

A new method for establishing ES cell lines from 129/ter、C57BL/6J mice was set up which was characterized by the murine embryonic fibroblast cell(MEF) feeder, the medium of rat heart cell-conditioned medium(RH-CM)for ES cells, and the consecutive digestion by the digestion liquid containing 1% serum. Every group of improved experiments was done with a control of routine method. The results showed that, compared with routine method, the improved way increased the ratio of ES cell lines of 129/ter mice from 11.8% to 33.3%, and of C57BL/6J from 3.7% to 13.3%. The difference is distinct. The passage culture of ES cells showed that, compared with medium added LIF, RH-CM not only inhibited the differentiation of murine ES cells, maintained its dipoild karyotype, but also promote its adherence growth. This kind of culture condition not only maintained the ES cells in an undifferentiated state and their normal dipoild karyotype, but also a series of other characteristics of totipotent embryonic stem cells during extended culture period.