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HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价
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作者 曹明翔 徐华 +4 位作者 张浩然 刘鹏 毛正睿 姜莉 杨二霞 《质量安全与检验检测》 2024年第2期21-26,共6页
为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8... 为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱-紫外法 EV71-ca16二价手足口病灭活疫苗 纯度 肠道病毒71型(EV71) 柯萨奇病毒A组16型(ca16)
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EV71与CA16双价灭活疫苗诱导小鼠免疫原性研究 被引量:11
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作者 王轩 高帆 +7 位作者 毛群颖 王一平 王超 邵杰 游松 安文琪 徐苗 梁争论 《微生物学免疫学进展》 2014年第2期1-6,共6页
目的评价EV71和CA16双价灭活疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答。方法分别应用EV71和CA16双价疫苗、EV71和CA16单价疫苗按单针、两针(0,14 d)的程序免疫小鼠,采用细胞病变法检测血清第1针免疫后21 d时中和抗体效价,应用LUMINEX... 目的评价EV71和CA16双价灭活疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答。方法分别应用EV71和CA16双价疫苗、EV71和CA16单价疫苗按单针、两针(0,14 d)的程序免疫小鼠,采用细胞病变法检测血清第1针免疫后21 d时中和抗体效价,应用LUMINEX液相芯片技术检测小鼠脾单个核细胞体外经抗原刺激分泌细胞因子的水平。结果双价疫苗与EV71单价疫苗单针、两针免疫相比,EV71中和抗体几何平均值相近(118.8∶84.0;159.5∶156.8,P>0.05)。双价疫苗与CA16单价疫苗单针免疫诱导的CA16中和抗体均为阴性;两针免疫CA16中和抗体几何平均值一致(30.0∶26.9,P>0.05)。加强免疫7 d后,小鼠脾MNC经EV71抗原刺激,双价疫苗较EV71单价疫苗诱导Th2类细胞因子IL-4、5、6、10和炎症因子TNF-α的分泌水平显著增高(P=0.020,P=0.027,P=0.038,P=0.019,P=0.026);MNC经CA16抗原刺激,双价疫苗与CA16单价疫苗相比诱导细胞因子水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论双价疫苗可诱导与单价疫苗相似的中和抗体应答水平,并可提高Th2类细胞因子应答,研究为EV71和CA16双价灭活疫苗的研发提供了实验依据。 展开更多
关键词 肠道病毒71型(EV71) 柯萨奇病毒A16型(ca16) 疫苗 中和抗体
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EV71及CA16不同检测方法敏感度及特异性比较 被引量:1
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作者 李华 杨婷 +9 位作者 姜广菊 何晓娟 岳磊 谢天宏 杨水芝 朱凡丽 龙润乡 杨蓉 罗芳宇 谢忠平 《医学研究杂志》 2015年第1期58-62,共5页
目的比较检测肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)及柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)不同检测方法、不同生产厂家(A、B、C、D、E)荧光定量PCR检测试剂的敏感度及特异性。方法对EV71及CA16各10个病毒株进行稀释,取原倍、10-3... 目的比较检测肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)及柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)不同检测方法、不同生产厂家(A、B、C、D、E)荧光定量PCR检测试剂的敏感度及特异性。方法对EV71及CA16各10个病毒株进行稀释,取原倍、10-3及10-63个浓度,分别采用实时荧光定量PCR法(分别用不同厂家的检测试剂)、RT-PCR法、ELISA法及细胞培养4种方法进行检测,每种检测连续重复3次,然后将其结果进行比较分析。结果 EV71及CA16经不同方法及试剂检测后结果显示,荧光定量PCR方法敏感度最高,依次为细胞培养法、RT-PCR(VP1)法及ELISA法;细胞培养法、RT-PCR(VP1)法及ELISA法的特异性较荧光定量PCR检测方法的特异性高,但荧光定量PCR检测试剂均出现不同程度非特异的假阳性结果;不同的荧光定量PCR检测试剂中,D厂家试剂检测EV71和C厂家试剂检测CA16的敏感度和特异性最高。结论 RT-PCR(VP1)方法更适于检测EV71及CA16,如条件许可则建议联合采用细胞培养检测方法,提高检测结果的敏感度和特异性。 展开更多
关键词 手足口病 EV71 ca16 敏感度 特异性
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氯仿抽提纯化CA 16病毒最优条件的筛选
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作者 张也 李华 +7 位作者 杨婷 岳磊 谢天宏 龙润乡 罗芳宇 杨蓉 何鑫 谢忠平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期282-286,共5页
目的筛选氯仿抽提纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的最优条件。方法根据《中国药典》三部(2015版)的相关要求,选择病毒感染性滴度、残余蛋白、残余牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、残余卡那霉素及残余氯仿含... 目的筛选氯仿抽提纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的最优条件。方法根据《中国药典》三部(2015版)的相关要求,选择病毒感染性滴度、残余蛋白、残余牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、残余卡那霉素及残余氯仿含量等指标,分析氯仿抽提的不同条件及超滤浓缩对纯化产物质量指标的影响。将CA16浓缩病毒液与氯仿按不同体积比进行一抽多洗纯化,分析不同比例氯仿对纯化效果的影响;将CA16超滤浓缩病毒液分别用不同浓度的PBS洗涤,以评价不同离子浓度的PBS洗涤对纯化病毒纯化液质量指标的影响。结果不同浓度的PBS洗涤液、病毒液与氯仿体积比对纯化液病毒感染性滴度均无明显影响,病毒回收率平均为81.7%;随着PBS洗涤次数的增多,洗液中的杂蛋白逐渐减少,氯仿比例及PBS离子浓度对蛋白去除率影响不明显,蛋白去除率均大于82%(82.69%~93.6%),平均去除率88.37%;不同氯仿比例、不同PBS浓度及不同洗涤次数对残余卡那霉素含量无明显影响,结果均低于30 ng/mL,经超滤浓缩后,其含量低于3.0 ng/mL;氯仿抽提纯化残余BSA的去除率可达68.87%,若结合超滤浓缩工艺,残余BSA的去除率可达94.74%;超滤浓缩后纯化病毒液残余氯仿去除率可达98%以上,最终纯化液残余氯仿含量小于6μg/mL。结论氯仿抽提方法结合超滤浓缩可得到符合要求的CA16病毒实验性疫苗。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 氯仿抽提 疫苗 质量控制
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CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达
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作者 王文广 匡德宣 +5 位作者 李娜 陆彩霞 罕园园 仝品芬 孙晓梅 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期479-484,共6页
目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB... 目的 探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法 用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达情况,探针法实时荧光定量PCR检测病毒载量,以β-Actin作内参染料法实时荧光定量PCR检测受体SCARB2基因的相对表达量,结合基因序列比对,分析其与感染的相关性。结果 CA16感染TSLF,可引起明显的细胞病变,免疫荧光实验可见病毒和受体SCARB2蛋白,以100TCID50/10^5 cells的比例感染TSLF可在48 h左右病毒载量达到最高,SCARB2基因有与感染相关的高表达,而其基因序列也与人有较高同源性。结论 CA16可感染TSLF,树鼩SCARB2可参与感染。 展开更多
关键词 ca16 树鼩肺成纤维细胞 感染 ScaRB2
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HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞的凋亡 被引量:3
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作者 石华 杨俊霞 +5 位作者 袁成福 易发平 魏丽丽 刘革力 马永平 宋方洲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期348-351,共4页
目的:观察HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因体外共转染,联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的效应。方法:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因的质粒载体分别以单独或联合的方式转染人宫颈癌Ca Ski细胞,随后利用RT-PCR技术检测细胞中HPV-16 E6癌基因的... 目的:观察HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因体外共转染,联合诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的效应。方法:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因的质粒载体分别以单独或联合的方式转染人宫颈癌Ca Ski细胞,随后利用RT-PCR技术检测细胞中HPV-16 E6癌基因的mRNA水平变化;Western blot分析细胞中抑癌蛋白p53水平的变化;流式细胞技术分析细胞凋亡情况。结果:经HPV-16 E6 siRNA和hIL-24转染后细胞后HPV E6癌基因的mRNA水平均下降,其中联合转染组显著下降(P<0.05);抑癌蛋白p53水平均增高,其中联合转染组显著增高,细胞凋亡率均升高,其中联合转染组显著升高(P<0.05)。结论:HPV-16 E6 siRNA与hIL-24基因分别转染宫颈癌Ca Ski细胞后,均能抑制Ca Ski细胞中HPV-16 E6癌基因的表达,使抑癌蛋白p53恢复活性,诱导宫颈癌Ca Ski细胞凋亡;两者联合则具有协同效应,能显著提高肿瘤细胞凋亡率。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 RNA 小分子干扰 凋亡 基因 HPV-16 E6 SIRNA 基因 hIL-24 ca Ski细胞
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CD8^+T细胞在CA16感染手足口病中的表达变化及潜在作用
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作者 李莉 《中国医学创新》 CAS 2016年第13期6-9,共4页
目的:对比分析15~24个月及2~5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者外周血中CD8^+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素。方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿... 目的:对比分析15~24个月及2~5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者外周血中CD8^+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素。方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿童HFMD病例外周血标本共72例,其中普通型32例,危重症40例,采用流式细胞术对患者外周血CD8^+T淋巴细胞亚群进行检测分析。结果:15~24个月普通型HFMD患者外周血CD8^+T淋巴细胞百分比略高于正常健康儿童参考值,而危重症患者CD8^+T细胞略低于正常参考值。此外,与正常参考值相比,2~5岁普通型及危重症患者外周血中CD8^+T淋巴细胞百分比均减低,其中危重症患者略低于普通型患者。结论:CA16感染后,不同年龄、不同病情的HFMD患者外周血中CD8^+T细胞的表达变化不太明显,说明CA16感染后,患者体内的CD8^+T细胞基本能够发挥正常的抗病毒免疫效应。而在危重症时,两个年龄段患者CD8^+T细胞百分比略低或减低,说明CA16的持续性感染可能对机体CD8^+T细胞的表达产生了影响,使其杀伤病毒效应减低,这可能是CA16感染诱导神经系统并发症发生的免疫病理因素之一。 展开更多
关键词 ca16 CD8+T细胞 手足口病 作用
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2017-2020年江门地区儿童手足口病流行病学特征及非EV71型非CA16型肠道病毒型别分析 被引量:8
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作者 阮燕如 陆少颜 《中国医学创新》 CAS 2021年第12期97-101,共5页
目的:分析广东省江门市2017-2020年手足口病的流行特征,了解非EV71型非CA16型肠道病毒的分子流行病学特征,为本市进一步临床治疗和防控工作提供科学依据。方法:通过全国传染病报告信息管理系统收集2017-2020年本市手足口病患儿资料,收... 目的:分析广东省江门市2017-2020年手足口病的流行特征,了解非EV71型非CA16型肠道病毒的分子流行病学特征,为本市进一步临床治疗和防控工作提供科学依据。方法:通过全国传染病报告信息管理系统收集2017-2020年本市手足口病患儿资料,收集整理2017-2020年本院信息系统报告的手足口病例及分析其流行特征,采用荧光RT-PCR法对疑似手足口病患者标本同时进行EV通用型、EV71型、CA16型检测,并选取EV71型和CA16阴性而EV通用型阳性的标本进行型别鉴定,设计5’非编码区特异性引物,RT-PCR扩增后进行序列测定,最后对核苷酸的同源性进行比对及确定病毒的型别。结果:2017-2020年江门市共报告HFMD总发病人数为31 709例,其中2017年报告病例数最高。4年内共采集了因怀疑手足口病到本院就诊患儿的2 587例标本,并同时进行EV通用型、EV71型、CA16型检测,总阳性1 263例,总阳性率为48.82%。阳性主要以托幼儿童和男患儿为主。其中EV71核酸阳性173例,占13.70%;CA16核酸阳性282例,占22.33%;其他EV核酸阳性808例,占63.97%。在2017-2020年中确定属于肠道病毒分型共87份,检出的非EV71型非CA16型的肠道病毒有6种型别,分别为CA6、CA10、CA4、CA12、CA5、CA8,其中CA6是占主要的,为70.11%,其次是CA10占13.79%。结论:江门市手足口病的分布呈现出人群差异、季节差异,非EV71型非CA16型的肠道病毒病原谱有六种,病毒型别以CA6为主。应持续进行病原学检测,掌握优势型别,为防控提供依据。 展开更多
关键词 手足口病 流行病学 病原学监测 非EV71非ca16肠道病毒 病原谱
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新型荧光粉Ca2Zn4Ti16O38:Pr^3+Na^+的合成和红色长余辉性质 被引量:3
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作者 祁媛 廉世勋 +2 位作者 余丽萍 周文 尹笃林 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期218-222,共5页
采用溶胶-凝胶法合成了Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+荧光粉。通过X-射线衍射和荧光光谱表征样品的物相组成和发光性质。X射线衍射(XRD)分析表明添加适量的H3BO3作助熔剂有利于形成良好的Ca2Zn4Ti16O38晶体结构。荧光光谱表明Ca2Zn4Ti16O38∶... 采用溶胶-凝胶法合成了Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+荧光粉。通过X-射线衍射和荧光光谱表征样品的物相组成和发光性质。X射线衍射(XRD)分析表明添加适量的H3BO3作助熔剂有利于形成良好的Ca2Zn4Ti16O38晶体结构。荧光光谱表明Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+在可见光区(450~495nm)呈现Pr3+离子的4f→4f特征激发光谱以及613nm(1D2→3H4)和644nm(3P0→3F2)特征发射。Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+被可见光(475nm)激发产生的3P0→3F2(644nm)红色发射呈现出极慢的衰减特性。Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+是一种新型的可见光激发红色长余辉荧光粉。 展开更多
关键词 ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+ 可见光激发 红色长余辉
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前驱溶液的pH值对制备Ca_2Zn_4Ti_(16)O_(38)∶Pr^(3+),Na^+发光粉物相、形貌和发光性质的影响 被引量:5
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作者 周文 余丽萍 +3 位作者 廉世勋 祁媛 朱爱玲 荣春英 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第5期712-718,共7页
以钛酸丁酯、醋酸钙、醋酸锌、柠檬酸和乙二醇为原料,采用溶胶-凝胶法制备Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+发光粉。研究了前驱溶液的pH值对溶胶-凝胶转变过程、发光粉物相组成、样品形貌和发光性质的影响。通过热重-差热分析(TG/DTA)、X射线衍... 以钛酸丁酯、醋酸钙、醋酸锌、柠檬酸和乙二醇为原料,采用溶胶-凝胶法制备Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+发光粉。研究了前驱溶液的pH值对溶胶-凝胶转变过程、发光粉物相组成、样品形貌和发光性质的影响。通过热重-差热分析(TG/DTA)、X射线衍射(XRD)分析、扫描电子显微镜(SEM)对前驱物分解、发光粉物相和颗粒大小进行了研究。采用荧光光谱对材料的光谱性质进行了表征。研究发现前驱溶液pH≤3时,所得发光粉样品为蓬松的、颗粒均匀的单相Ca2Zn4Ti16O38粉末,红色余辉时间较长;随着pH值增大,逐渐有杂质相TiO2、CaTiO3和Zn2TiO4生成,并且样品颗粒逐渐变大,颗粒团聚呈现不规则形状,余辉时间变短。结果表明,只有在pH≤3条件下以溶胶-凝胶法制备Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+,Na+发光粉下才能获得被日光有效激发,并呈现余辉衰减慢的红色长余辉(644 nm)发光。 展开更多
关键词 ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+ 溶胶-凝胶法 PH值 红色发光粉 长余辉
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红色长余辉荧光粉Ca_2Zn_4Ti_(16)O_(38)∶Pr^(3+)的水热辅助合成及发光性质 被引量:2
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作者 夏茂 谷智强 +4 位作者 刘琼 张吉林 周文理 廉世勋 余丽萍 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第2期253-259,共7页
采用水热法辅助合成了纯相Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+荧光粉,初始nCa∶nZn∶nTi=2∶4.1∶15,煅烧条件为1 050℃空气气氛烧结5 h。并以X射线衍射、扫描电镜、紫外可见漫反射光谱和荧光光谱表征了样品的物相组成、微观形貌和光谱性质。合成的荧... 采用水热法辅助合成了纯相Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+荧光粉,初始nCa∶nZn∶nTi=2∶4.1∶15,煅烧条件为1 050℃空气气氛烧结5 h。并以X射线衍射、扫描电镜、紫外可见漫反射光谱和荧光光谱表征了样品的物相组成、微观形貌和光谱性质。合成的荧光粉在高温煅烧后仍较好地保持了球形的微观形态,优化的Pr3+掺杂浓度为0.015。Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+荧光粉在471 nm波长激发下发射红光,发射谱通过高斯分峰拟合得到位于605、620和645 nm的3个发射峰,分别对应于Pr3+的1D2→3H4,3P0→3H6和3P0→3F2跃迁。在471 nm波长激发下,Ca2Zn4Ti16O38∶Pr3+的614 nm红光发射表现出超长余辉特性,表明该荧光粉是一种能被可见光有效激发的红色长余辉荧光粉。 展开更多
关键词 ca2Zn4Ti16O38∶Pr^3+ 水热法 红色长余辉荧光粉
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Ag_(42)In_(42)Ca_(16)二十面体准晶与2/1立方近似相Ag_(42)In_(45)Ca_(13)的稳定性研究
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作者 邓彬彬 郭可信 《金属学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期120-124,共5页
Ag_3In_3Ca中的主要合金相是简单立方Ag_(42)In_(45)Ca_(13)(空间群为Pa3,a=2.496nm),它是Ag_(42)In_(42)Ca_(16)二十面体稳定准晶的2/1立方近似相,选区电子衍射(SAED)实验表明,2/1立方近似相与二十面体准晶有相似的局部结构,X射线能谱(... Ag_3In_3Ca中的主要合金相是简单立方Ag_(42)In_(45)Ca_(13)(空间群为Pa3,a=2.496nm),它是Ag_(42)In_(42)Ca_(16)二十面体稳定准晶的2/1立方近似相,选区电子衍射(SAED)实验表明,2/1立方近似相与二十面体准晶有相似的局部结构,X射线能谱(EDS)、电子能量损失谱(EBLS)和X射线粉晶衍射分析表明,Ag_3In_3Ca合金中的立方相Ag_(42)In_(45)Ca_(13)不稳定,薄膜电镜样品在空气中易发生化学反应,产物中主要是Ca和O,还有少量C块状合金在空气中放置14d后,其中的立方相Ag_(42)In_(45)Ca_(13)分解,二元合金相AgIn_2和In_4Ag_9的含量明显增加,在550℃保温55h后,立方近似相Ag_(42)In_(45)Ca_(13)的含量显著减少。在相同条件下,二十面体准晶Ag_(42)In_(42)Ca_(16)保持不变,具有高的结构和化学稳定性。 展开更多
关键词 Ag-In-ca合金 二十面体准晶 立方近似相 稳定性 Ag42In42ca16 Ag42In45ca13
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银翘散加减对手足口病CA16病毒全基因组表达谱的影响 被引量:4
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作者 张泽渊 杨宏仁 《实用临床医药杂志》 CAS 2017年第9期126-128,共3页
目的探讨银翘散加减对柯萨奇病毒A组16型感染手足口病恒河幼猴细胞基因表达谱的影响。方法 30只SPF级恒河幼猴,按照随机数字表法分为治疗组(15只)和对照组(15只),治疗组以银翘散加减方保留灌肠,对照组不进行治疗。连续7 d后样本的全基... 目的探讨银翘散加减对柯萨奇病毒A组16型感染手足口病恒河幼猴细胞基因表达谱的影响。方法 30只SPF级恒河幼猴,按照随机数字表法分为治疗组(15只)和对照组(15只),治疗组以银翘散加减方保留灌肠,对照组不进行治疗。连续7 d后样本的全基因组表达谱进行PCA分析。研究2组患者基因表达谱的差异,并对差异基因行Venn图分析、分层聚类分析和基因本体论GO分析。结果通过基因组表达谱共筛选到894个差异表达基因,明显上升和下调2个大类。差异表达基因参与的富集的分子包括:许多炎性趋化因子、参与细胞通讯、细胞周期、免疫系统过程、转录调节和代谢过程等生物学过程的因子。结论 2组基因表达谱存在明显差异,差异表达基因所涉及的生物学过程与中药减轻CA16引起的炎性趋化、免疫系统反应等有相关性。 展开更多
关键词 手足口病 银翘散 ca16 基因表达谱
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肠道病毒EV71和CA16感染患儿的体液免疫功能分析 被引量:1
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作者 叶萃英 洪书迟 +1 位作者 赵昕峰 吴亦栋 《浙江临床医学》 2016年第12期2308-2309,共2页
目的探讨肠道病毒EV71和CA16感染患儿的体液免疫功能与临床病情的关系。方法对2014年10月至2015年7月260例手足口病患儿资料进行回顾性分析,其中CA16阳性80例,EV71阳性180例,EV71阳性根据病情分为重症组80例和轻症型100例,以同期健... 目的探讨肠道病毒EV71和CA16感染患儿的体液免疫功能与临床病情的关系。方法对2014年10月至2015年7月260例手足口病患儿资料进行回顾性分析,其中CA16阳性80例,EV71阳性180例,EV71阳性根据病情分为重症组80例和轻症型100例,以同期健康体检的儿童100例作为健康对照组。用免疫比浊法测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA及补体C3、C4水平,采用Mann-Whitney U检验分析数据。结果EV71感染手足口病重症组患儿的IgG、IgM、IgA、C3、C4水平的中位数分别为7.510、1.295、0.520、1.170、0.410g/L,轻症组患儿的IgG、IgM、IgA、C3、C4水平的中位数分别为7.985、1.460、0.580、1.120、0.420,分别与对照组间的差异具有统计学意义(P均〈0.05)。其中重症组IgG、IgA低于轻症组,IgM、C3、C4高于轻症组。EV71感染手足口痛组血清免疫球蛋白IgM高于CA16感染组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论EV71感染手足口病患儿的体液免疫功能受到了影响,导致免疫球蛋白IgG和IgA降低,IgM及补体C3、C4水平增高,且与病情的轻重相关。 展开更多
关键词 EV71 ca16 体液免疫
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EV71-IgM和CA16-IgM联合检测在手足口病中的应用 被引量:1
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作者 蔡锡欣 《医学食疗与健康》 2020年第2期181-182,共2页
目的:探讨EV71-IgM和CA16-IgM联合检测在手足口病中的应用。方法:随机选取2018年6月至2019年7月我院手足口病患儿70例,使用北京万泰公司生产的酶标试剂盒,运用酶联免疫吸附法对患儿的EV71-IgM、CA16-IgM进行检测,分析70例患儿EV71-IgM、... 目的:探讨EV71-IgM和CA16-IgM联合检测在手足口病中的应用。方法:随机选取2018年6月至2019年7月我院手足口病患儿70例,使用北京万泰公司生产的酶标试剂盒,运用酶联免疫吸附法对患儿的EV71-IgM、CA16-IgM进行检测,分析70例患儿EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性情况,并统计分析70例患儿不同发病时间EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性情况。结果:70例患儿中EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性率分别为51.41%、45.7%、88.6%。发病1-7d EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性率分别为51.41%、45.7%、88.6%;发病8-11d EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性率分别为47.1%、41.4%、80%;发病≥12d EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性率分别为42.9%、38.6%、74.3%。随着发病时间的延长,患儿的EV71-IgM、CA16-IgM、EV71-IgM和CA16-IgM联检阳性率逐渐降低(P<0.05)。结论:EV71-IgM和CA16-IgM联合检测在手足口病中的应用价值高。 展开更多
关键词 EV71-IgM ca16-IgM 联合检测 手足口病
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肠道病毒EV71型和CA16型IgM抗体检测试剂盒的分析性能
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作者 何水珍 严荔贞 +1 位作者 施少鑫 钟秋蓉 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第10期1672-1675,共4页
目的 评价基于磁微粒化学发光法的肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)IgM抗体检测试剂盒的精密度、稳定性及方法学比对,并初步评价其临床应用价值。方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件和标准,对柯萨奇病毒A16型Ig... 目的 评价基于磁微粒化学发光法的肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)IgM抗体检测试剂盒的精密度、稳定性及方法学比对,并初步评价其临床应用价值。方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件和标准,对柯萨奇病毒A16型IgM抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)(CA16 IgM CMIA)和肠道病毒71型IgM抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)(EV71 IgM CMIA)进行分析性能评价。采用受试者工作特征曲线评估CA16 IgM CMIA及EV71 IgM CMIA与已上市酶联免疫法检测试剂的符合率。结果 CA16 IgM CMIA批内精密度CV为1.10%和1.63%,中间精密度CV为5.70%~7.20%,EV71 IgM CMIA批内精密度CV为2.80%和1.59%,中间精密度CV为2.91%~4.49%,试剂机载稳定性良好。临床病症与手足口病相似或病原结构与肠道病毒相近的其他病原体的高浓度抗体特异性血清对CA16 IgM CMIA和EV71 IgM CMIA的检测结果无影响,不存在交叉反应。CA16 IgM CMIA和EV71 IgM CMIA与已上市酶联免疫法检测试剂的总符合率分别为96.4%和98.9%。结论 基于磁微粒化学发光法的肠道病毒71型IgM抗体检测试剂盒和柯萨奇病毒A16型IgM抗体检测试剂盒具有良好的精密度和机载稳定性,与已上市酶免试剂对比性能良好,适用于临床大规模样本的检测。 展开更多
关键词 EV71 IgM ca16 IgM 化学发光法 分析性能
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CA16、EV71和WBC、ALT、AST及CKMB检验诊断小儿手足口病的效果研究
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作者 沙敏 《中外医疗》 2020年第7期186-188,共3页
目的探究柯萨奇病毒16型(CA16)、肠道病毒71型(EV71)两种病毒,以及白细胞计数(WBC)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CKMB)四种检验指标对小儿手足口病的影响和诊断效果。方法便利择取2018年1月—2019年7月在该院进... 目的探究柯萨奇病毒16型(CA16)、肠道病毒71型(EV71)两种病毒,以及白细胞计数(WBC)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CKMB)四种检验指标对小儿手足口病的影响和诊断效果。方法便利择取2018年1月—2019年7月在该院进行治疗的疑似手足口病患儿共560例,2018年1—12月入院患儿设置为对照组,2019年1—7月入院患儿设置为观察组,每组280例。通过胶体金法判定EV71性质,按照不同性质排列组合分为4组,比较4组WBC、ALT、AST及CKMB检查结果。结果对照组280例患儿中CA16患儿共35例,阳性率12.50%,观察组280例患儿中CA16阳性患儿共30例,阳性率10.71%,差异无统计学意义(χ^2=0.435,P>0.05)。定性检验结果显示CA16阳性和EV71阳性组患儿63例,CA16阳性及EV71阴性组患儿58例,CA16阴性和EV71阳性组患儿502例,CA16阴性和EV71阴性组495例,CA16阳性和EV71阳性和CA16阳性及EV71阴性患儿WBC、ALT、AST及CKMB检查结果差异无统计学意义(P>0.05),CA16阳性和EV71阳性、CA16阴性及EV71阳性患儿CKMB显著高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论疑似CA16手足口病患儿开展WBC、ALT、AST及CKMB等血液指标检查对疾病确诊无理想效果,因此不建议在临床中推广应用,而CKMB检查可作为EV71阳性患儿的确诊。 展开更多
关键词 ca16 EV71 WBC ALT AST CKMB
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柯萨奇病毒A组16型研究进展 被引量:26
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作者 王一平 毛群颖 梁争论 《微生物学免疫学进展》 2012年第3期62-66,共5页
柯萨奇病毒A组16型(CA16)是引起手足口病(HFMD)的主要病原体,与肠道病毒71型(EV71)交替或共同流行;特别是近年在西太平洋地区呈现流行强度高、重症和死亡人数多的特点,已成为该地区的重大公共卫生问题。研发安全有效的疫苗是控制HFMD流... 柯萨奇病毒A组16型(CA16)是引起手足口病(HFMD)的主要病原体,与肠道病毒71型(EV71)交替或共同流行;特别是近年在西太平洋地区呈现流行强度高、重症和死亡人数多的特点,已成为该地区的重大公共卫生问题。研发安全有效的疫苗是控制HFMD流行的有效手段。由于EV71所致疾病在重症和死亡病例中所占比例高,对其疫苗研发得到了广泛关注,全病毒灭活疫苗已进入III期临床,有望即将应用于婴幼儿HFMD的防控。EV71疫苗的顺利研发随之也增加了对CA16疫苗研发的迫切性。近年来日本、新加坡以及中国台湾地区逐渐开始关注CA16相关的研究,我国也有多家企业开展CA16疫苗的研发。本文就CA16的病原学,流行病学,实验室诊断,治疗和预防等方面进行了综述。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型(ca16) 疫苗
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柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达 被引量:1
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作者 王志宏 丁莹莹 +3 位作者 冯娇娇 李连青 潘卫 郭存九 《中国现代医生》 2014年第14期69-72,75,共5页
目的构建重组质粒柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus group A type 16,CA16)VP1,并进行原核表达及鉴定。方法用PCR方法扩增CA16 VP1序列,构建其重组表达质粒pET21b-CA16 VP1,并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行诱导表达及纯化,SDS-PAG... 目的构建重组质粒柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus group A type 16,CA16)VP1,并进行原核表达及鉴定。方法用PCR方法扩增CA16 VP1序列,构建其重组表达质粒pET21b-CA16 VP1,并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,间接ELISA方法检测重组蛋白CA16 VP1的抗原性和有效性。结果成功原核表达并纯化了CA16 VP1蛋白,可与小鼠抗CA16病毒血清特异性结合,与太原市老年人群中部分血清存在高反应性。结论 CA16 VP1蛋白获得成功表达,ELISA检测具有良好的抗原性和有效性,为CA16诊断试剂盒的研究奠定基础。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16 VP1蛋白 原核表达 酶联免疫吸附 Coxsackievirus GROUP A type 16(ca16)
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小鼠在柯萨奇病毒A组16型活病毒免疫原性评价中的应用 被引量:1
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作者 孟华清 杨婷 +5 位作者 谢天宏 李华 岳磊 宋霞 张也 谢忠平 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第6期409-414,共6页
目的评价小鼠在柯萨奇病毒A组16型(CA16)活病毒感染中免疫原性的应用,为减毒活疫苗研究提供实验数据。方法以不同剂量的CA16活病毒通过皮下、腹腔和肌肉途径接种不同年龄的ICR和BALB/C小鼠,采集初次免疫7d、21d、28d以及加强免疫7... 目的评价小鼠在柯萨奇病毒A组16型(CA16)活病毒感染中免疫原性的应用,为减毒活疫苗研究提供实验数据。方法以不同剂量的CA16活病毒通过皮下、腹腔和肌肉途径接种不同年龄的ICR和BALB/C小鼠,采集初次免疫7d、21d、28d以及加强免疫7d后的血样:通过微量细胞病变中和法检测中和抗体效价,细胞因子ELISA检测试剂盒检测6种细胞因子含量。结果初次免疫后28d,肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率分别为83.33%、40.00%和0.00%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1:169、1:32和0;加强免疫后,肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率均达100%,抗体GMT分别为1:813、l:609和1:32,肌肉和腹腔途径免疫的小鼠血清抗体GMT平均增长4.8倍和19.0倍;加强免疫7d的抗体阳转率达100%;明显高于初次免疫28d和21d;BALB/c小鼠与ICR小鼠相比,前者的中和抗体效价和抗体阳转率明显高于后者,而小鼠年龄对中和抗体效价和抗体阳转率的影响不显著(P〉0.05);免疫剂量对中和抗体效价和抗体阳转率的影响显著(P〈0.05),高剂量病毒免疫小鼠后中和抗体效价和抗体阳转率明显比低剂量高(P〈0.05);细胞因子检测结果显示加强免疫7d后的白细胞介素100L-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量与初次免疫7d的相比显著增加。结论BALB/c和ICR小鼠可做为CA16活病毒免疫原性评价的动物模型,以4~6周龄的BALB/c小鼠最为敏感。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型(ca16) 免疫原性 细胞因子 减毒活疫苗
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