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CRISPR/CAS9敲除PD-1的肿瘤浸润T淋巴细胞回输对小鼠结肠癌的治疗作用 被引量:1
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作者 瞿紫微 李晓辉 +3 位作者 郭建辉 陈华涛 吴彪 孟庆彬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1189-1196,共8页
目的:探讨应用成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas9)技术敲除程序性死亡分子-1(PD-1)的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,从3只模型小鼠肿瘤组织中提取TIL,并... 目的:探讨应用成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas9)技术敲除程序性死亡分子-1(PD-1)的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,从3只模型小鼠肿瘤组织中提取TIL,并提取外周血淋巴细胞;对TIL进行PD-1基因敲除;回输实验分为对照组(Control)、输注淋巴细胞组(Lym)、输注荷瘤小鼠TIL组(TIL)、慢病毒空载对照组(pVSV-G-PX458-NC)组、PX458-PD-1-sgRNA1组(PD-1-sgRNA1),每组10只;测量各组小鼠肿瘤组织质量及肿瘤抑制率;TUNEL法检测各组小鼠肿瘤组织细胞凋亡;ELISA检测各组小鼠肿瘤组织TNF-α和IFN-γ含量;免疫组化检测肿瘤组织CD4+T、CD8+T细胞表达;免疫荧光法检测肿瘤组织细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和血管内皮生长因子(VEGF)表达;Western blot检测肿瘤组织PD-1及其主要配体PD-L1表达。结果:PD-1-sgRNA1能明显抑制小鼠肿瘤细胞体内生长,抑制肿瘤组织Ki-67和VEGF表达及PD-1、PD-L1表达,提高肿瘤组织细胞凋亡率、TNF-α、IFN-γ含量、CD4+T、CD8+T细胞表达(均P<0.05)。结论:CRISPR/CAS9敲除PD-1的TIL回输能明显抑制结肠癌小鼠肿瘤组织Ki-67和VEGF表达,增加CD4+T、CD8+T细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长作用。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 PD-1 结肠癌 肿瘤浸润淋巴细胞 肿瘤生长
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Serum tumor markers (carcinoembryonic antigen, carbohydrate antigen 19-9, carbohydrate antigen 72-4, carbohydrate antigen 24-2, ferritin) and gastric cancer prognosis correlation
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作者 Jie-Wen Zhu Ling-Zhen Gong Qian-Wen Wang 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE 2024年第9期2808-2814,共7页
BACKGROUND Gastric cancer is a kind of malignant tumor which is prevalent all over the world.Although some progress has been made in the treatment of gastric cancer,its prognosis is still not optimistic,so it is of gr... BACKGROUND Gastric cancer is a kind of malignant tumor which is prevalent all over the world.Although some progress has been made in the treatment of gastric cancer,its prognosis is still not optimistic,so it is of great significance to find reliable prog-nostic indicators to guide the treatment and management of patients with gastric cancer.AIM To explore the relationship between serum levels of five biomarkers[carcinoem-bryonic antigen(CEA),carbohydrate antigen(CA)19-9,CA72-4,CA24-2,and ferritin]and prognosis in patients with gastric cancer.METHODS This study included 200 patients with gastric adenocarcinoma,and conducted an in-depth analysis of their baseline characteristics,relationship between tumor markers and staging,and prognosis.The study found that CA19-9 has a signi-ficant correlation with tumor stage,the average levels of CA24-2,CEA,CA72-4 and ferritin were slightly increased disregarding the stage of tumor.Survival analysis showed that increases in CEA,CA19-9,CA24-2,and ferritin were all associated with shortened overall survival of patients.Further multivariate ana-lysis revealed that elevated serum CA72-4 levels were an inde-pendent adverse prognostic factor.RESULTS This study reveals that there is a significant correlation between the expression levels of serum tumor markers CEA,CA19-9,CA72-4,CA24-2 and ferritin in patients with gastric cancer and prognosis,and can be used as important indicators for prognostic evaluation of gastric cancer.In particular,markers that appear abnormally elevated initially may help identify gastric cancer patients with poor prognosis.CONCLUSION Serum CEA and CA19-9 play an important role in the prognosis assessment of gastric cancer,and are effective tools to guide clinical practice and optimize individualized treatment strategies for gastric cancer patients. 展开更多
关键词 Gastric cancer PROGNOSIS carcinoembryonic antigen carbohydrate antigen 19-9 carbohydrate antigen 72-4 carbohydrate antigen 24-2 FERRITIN serum markers Retrospective study
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scAAV9-IGF-1对SOD1-G93A小鼠抗凋亡通路的作用
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作者 温迪 吉盈肖 +2 位作者 李秋生 陈相 刘亚坤 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2024年第2期106-110,共5页
目的 探索以自我互补双链腺相关病毒9为载体介导的人胰岛素样生长因子-1 (scAAV9-IGF-1)对SOD1-G93A转基因小鼠抗凋亡通路的作用。方法 采用肌萎缩侧索硬化(ALS)的动物模型即转基因SOD1-G93A突变型及野生型(wild type-SOD1,WT-SOD1)小鼠... 目的 探索以自我互补双链腺相关病毒9为载体介导的人胰岛素样生长因子-1 (scAAV9-IGF-1)对SOD1-G93A转基因小鼠抗凋亡通路的作用。方法 采用肌萎缩侧索硬化(ALS)的动物模型即转基因SOD1-G93A突变型及野生型(wild type-SOD1,WT-SOD1)小鼠,在其出生后60 d龄时,雌性同窝阳性SOD1-G93A转基因小鼠采用随机的方法分配到治疗组及溶剂对照组,治疗组全身多点肌肉注射scAAV9-IGF-1,溶剂对照组多点肌肉注射AAV9-GFP,同年龄WT-SOD1作为阴性对照组。在肌肉注射40~50 d后,利用PCR技术检测腰髓中IGF-1含量的变化,同时检测抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2的mRNA含量变化,通过免疫组化染色观察抗凋亡通路因子Bcl-xl、Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达。结果 PCR技术检测显示scAAV9-IGF-1处理后,腰髓中IGF-1的mRNA含量显著高于GFP对照组,抗凋亡通路因子Bclxl、Bcl-2的mRNA含量均高于溶剂对照组(均P<0.05),而与WT组差异无统计学意义。免疫组化染色结果显示,治疗组中抗凋亡通路蛋白Bcl-xl,Bcl-2在小鼠腰髓前角神经元中的表达多于溶剂对照组,并且与WT阴性对照组相当。结论 scAAV9-IGF-1可以激活SOD1-G93A转基因小鼠模型中的抗凋亡通路,其通过上调Bcl-xl,Bcl-2的mRNA水平,进而增加Bcl-xl、Bcl-2的蛋白表达,从而产生抗凋亡的作用。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化 SOD1-G93A转基因小鼠 腺相关病毒9 人胰岛素样生长因子-1 抗凋亡通路
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基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株及其表型研究
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作者 李雪银 吴传新 +3 位作者 刘慧玲 李丽 程莎 孙航 《免疫学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期87-95,共9页
目的 采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法 设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成... 目的 采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的THP-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法 设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染THP-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对THP-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果 成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株THP-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制THP-1细胞增殖,下调THP-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强THP-1巨噬细胞吞噬功能。结论 成功构建IDO1基因敲除的THP-1细胞株;IDO1对THP-1细胞增殖活性、分化调节以及THP-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 吲哚胺-2 3-双加氧酶1 基因敲除 THP-1细胞 巨噬细胞
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3种化学发光检测系统检测CA19-9的一致性评价
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作者 郑芸 李清茹 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第5期936-940,共5页
目的评价新产业、罗氏、雅培发光系统检测CA19-9指标的结果一致性。方法确认核医学科近期雅培CA19-9检测样本并保存,分别在新产业及罗氏检测系统复测,依据临床诊断信息分组,通过成对样本秩和检验、Passing-Bablok回归性分析及Kappa分析... 目的评价新产业、罗氏、雅培发光系统检测CA19-9指标的结果一致性。方法确认核医学科近期雅培CA19-9检测样本并保存,分别在新产业及罗氏检测系统复测,依据临床诊断信息分组,通过成对样本秩和检验、Passing-Bablok回归性分析及Kappa分析比较该指标在各厂家检测系统的血清学表达差异。通过ROC曲线比较分析各厂家指标在诊断恶性肿瘤的效能。结果秩和检验表明,3种检测系统检测CA19-9,成对数据差异性显著。相关性及Passing-Bablok分析,罗氏与新产业相关系数R^(2)为0.931,Y=0.8875X+1.3765,两检测系统结果线性度无明显偏差;罗氏与雅培相关系数R^(2)为0.5818,Y=1.7178X-6.4599,两检测系统结果线性度有明显偏差;新产业与雅培相关系数R^(2)为0.5195,Y=0.4690X+5.5883,两检测系统结果线性度有明显偏差。Kappa分析中,罗氏与新产业组Kappa值为0.864,一致性较好;罗氏与雅培组Kappa值为0.714,一致性一般;新产业与雅培组Kappa值为0.650,一致性一般。针对恶性肿瘤的ROC分析,罗氏CA19-9曲线下面积为0.688;新产业CA19-9曲线下面积为0.679;雅培CA19-9曲线下面积为0.651。在检测恶性肿瘤中,罗氏CA19-9灵敏度为73.91%,特异性为59.81%,总符合度为65.34%;新产业CA19-9灵敏度为65.22%,特异性为65.42%,总符合度为65.34%;雅培CA19-9灵敏度为63.77%,特异性为52.33%,总符合度为56.82%。结论罗氏与新产业比对结果线性度无明显偏差,一致性较高,两种检测结果的互换性较为理想;对于恶性肿瘤的诊断,两厂家检测系统对CA19-9诊断效能均为良好;单纯依据CA19-9结果做恶性肿瘤的诊断,3种诊断效能均不理想。 展开更多
关键词 ca19-9 化学发光 实验室评价
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TT、Alb、CEA、CA19-9联合检测对结直肠癌与肠息肉的鉴别诊断
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作者 袁宁 张群 +3 位作者 沙德厚 吴晓婷 赵书平 张志军 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第3期520-525,共6页
目的 探讨TT、Alb、CEA、CA19-9联合检测对结直肠癌与肠息肉的诊断及鉴别的价值。方法 分析青岛大学附属泰安市中心医院2019年03月至2020年7月间,经病理诊断确诊的500例结直肠癌患者作为结直肠癌组,500例肠息肉患者作为肠息肉组,并纳入... 目的 探讨TT、Alb、CEA、CA19-9联合检测对结直肠癌与肠息肉的诊断及鉴别的价值。方法 分析青岛大学附属泰安市中心医院2019年03月至2020年7月间,经病理诊断确诊的500例结直肠癌患者作为结直肠癌组,500例肠息肉患者作为肠息肉组,并纳入同期的500名健康者为健康组。比较三组受试者的TT、Alb、CEA、CA19-9的表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估单独和联合检测对结直肠癌与肠息肉的诊断及鉴别诊断的效能。结果 与健康组相比,结直肠癌组TT、Alb水平均显著下降,CEA、CA19-9水平均显著升高,差异有统计学意义(Z=-11.69、-27.38、-18.32、-10.28,P均<0.05)。与健康组相比,肠息肉组TT、Alb水平均显著下降,CEA、CA19-9水平显著升高,差异有统计学意义(Z=-3.94、-15.95、-6.17、-3.70,P均<0.05)。结直肠癌组与肠息肉组相比较TT、Alb水平显著下降,CEA、CA19-9水平显著升高,差异有统计学意义(Z=-7.82、-13.69、-13.89、-7.07,P均<0.05)。ROC曲线分析显示,TT、Alb、CEA、CA19-9联合检测筛查结直肠癌的AUC为0.96,敏感性为0.870,特异性为0.956;联合检测用于筛查肠息肉的AUC为0.825,敏感性为0.684,特异性为0.836;鉴别结直肠癌与肠息肉的AUC为0.851,敏感性为0.772,特异性为0.820。结论 TT、Alb、CEA、CA19-9四项联合检测对结直肠癌筛查具有较高的临床应用价值,并且能较好的区分结直肠癌与肠息肉,可为结直肠癌的筛查及与肠息肉鉴别诊断提供参考。 展开更多
关键词 TT ALB CEA ca19-9 结直肠癌 肠息肉
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DBT参数与CA19-9、ALP的相关性及对乳腺癌的诊断价值
7
作者 胡菲 邹丹丹 +4 位作者 韦丽光 李桃 司成海 韩旭 张琳 《中国实验诊断学》 2024年第7期795-798,共4页
目的 探讨数字乳腺断层摄影(Digital breast tomosynthesis, DBT)参数与CA19-9、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)的相关性及对乳腺癌的诊断价值。方法 选取2019年1月到2022年1月秦皇岛市第一医院收治的150例疑似乳腺癌患者,对患... 目的 探讨数字乳腺断层摄影(Digital breast tomosynthesis, DBT)参数与CA19-9、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)的相关性及对乳腺癌的诊断价值。方法 选取2019年1月到2022年1月秦皇岛市第一医院收治的150例疑似乳腺癌患者,对患者进行检查,以病理检查结果为“金标准”,确诊为乳腺癌的78例患者为研究组,非乳腺癌的72例患者为对照组。检测各组DBT参数与CA19-9、ALP的结果。结果 与对照组相比,研究组患者AGD、ESE、钙化分数、CA19-9、ALP升高(P<0.05)。与T1~T2期相比较、T3~T4期患者AGD、ESE、钙化分数、CA19-9、ALP升高(P<0.05)。AGD、ESE、钙化分数、CA19-9、ALP与病情分期呈正相关(P<0.05)。AGD、ESE、钙化分数与CA19-9、ALP表达水平正相关(P<0.05)。与AGD、ESE、钙化分数单项诊断相比,三项联合对乳腺癌的诊断价值较高,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论 DBT参数对乳腺癌具有较高诊断价值,且与CA19-9、ALP具有一定相关性,可用于乳腺癌的诊断。 展开更多
关键词 乳腺癌 数字乳腺断层摄影 ca19-9 碱性磷酸酶 诊断价值
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血清PCSK9、ICAM-1与ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后的关系
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作者 姚天宇 王植荣 +4 位作者 马静 路陆 宋朕 张振山 刘润 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第5期589-592,共4页
目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与急性冠脉综合征(ACS)合并糖尿病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后心肌损伤及预后的关系。方法将2020年1月至2022年3月该院收治的58例ACS合并糖尿病患者纳入研究... 目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)与急性冠脉综合征(ACS)合并糖尿病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后心肌损伤及预后的关系。方法将2020年1月至2022年3月该院收治的58例ACS合并糖尿病患者纳入研究。患者行PCI手术后,根据是否发生心肌损伤,分为心肌损伤组(n=24)和心肌未损伤组(n=34)。对患者术后进行12个月的随访,根据是否发生主要不良心血管事件(MACE)分为预后不良组(n=20)和预后良好组(n=38)。比较不同组别的患者血清PCSK9、ICAM-1水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清PCSK9、ICAM-1水平对ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后不良的预测价值。结果心肌损伤组患者血清PCSK9、ICAM-1水平高于心肌未损伤组(P<0.05)。预后不良组患者血清PCSK9、ICAM-1水平高于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清PCSK9联合血清ICAM-1的预测价值最高,其用于预测ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后不良的曲线下面积(AUC)最大,分别为0.865和0.820。结论血清PCSK9、ICAM-1水平与ACS合并糖尿病患者PCI术后心肌损伤及预后密切相关,两者联合检测对患者心肌损伤及预后不良的预测价值最高。 展开更多
关键词 前蛋白转化酶枯草溶菌素9 细胞间黏附分子-1 急性冠脉综合征 糖尿病 经皮冠状动脉介入 心肌损伤 预后
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基于CRISPR/Cas9技术构建PAX3-FOXO1融合基因敲除腺泡状横纹肌肉瘤细胞模型
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作者 张乾儒 田娇 +4 位作者 孟莲 史奇 李亚 夏慧欣 李锋 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期621-630,共10页
目的使用CRISPR/Cas9技术构建稳定敲除PAX3-FOXO1融合基因的人腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)细胞系(RH30),并验证PAX3-FOXO1功能。方法运用在线网站针对PAX3、FOXO1设计sgRNA,选择切割效率最高的一组构建LV-PAX3-sgRNA、LV-FOXO1-sgRNA及LV-C... 目的使用CRISPR/Cas9技术构建稳定敲除PAX3-FOXO1融合基因的人腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)细胞系(RH30),并验证PAX3-FOXO1功能。方法运用在线网站针对PAX3、FOXO1设计sgRNA,选择切割效率最高的一组构建LV-PAX3-sgRNA、LV-FOXO1-sgRNA及LV-Cas9慢病毒载体;LV-Cas9病毒感染RH30细胞,潮霉素筛选后,通过RT-PCR及qRT-PCR检测RH30-Cas9细胞中Cas9基因表达;LV-PAX3-sgRNA及LV-FOXO1-sgRNA慢病毒载体分别感染RH30-Cas9细胞,流式分选筛选荧光阳性细胞;Sanger测序、PCR等分别验证RH30-PAX3-KO细胞及RH30-FOXO1-KO细胞中PAX3-FOXO1表达;EDU、TUNEL、Transwell实验检测敲除RH30-PAX3-KO细胞及RH30-FOXO1-KO细胞功能改变。结果成功构建靶向PAX3、FOXO1的CRISPR/Cas9慢病毒载体;PCR验证稳定表达Cas9的RH30细胞系(RH30-Cas9)构建成功;PCR、Western Blot验证靶向PAX3或FOXO1均成功敲除RH30中PAX3-FOXO1融合基因;靶向PAX3或FOXO1抑制RH30细胞增殖、侵袭、迁移,促进凋亡。结论使用CRISPR/Cas9成功构建敲除PAX3-FOXO1的RH30细胞系;敲除PAX3-FOXO1抑制了RH30细胞增殖、迁移等恶性生物学行为。 展开更多
关键词 横纹肌肉瘤 PAX3-FOXO1 CRISPR/cas9 基因编辑
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血清CEA、CA19-9、ITGβ6在胃癌根治术患者中的表达及预后评估中的意义
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作者 朱雅婷 周志雄 雷晋铭 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第3期446-449,共4页
目的 探讨血清CEA、CA19-9、ITGβ6在胃癌根治术患者中的表达及预后评估中的意义。方法 分析2020年4月至2021年8月湘南学院附属医院收治的29例胃癌根治术患者的临床资料,并纳入同期健康体检者49名作为对照组,同时根据胃癌根治术患者预... 目的 探讨血清CEA、CA19-9、ITGβ6在胃癌根治术患者中的表达及预后评估中的意义。方法 分析2020年4月至2021年8月湘南学院附属医院收治的29例胃癌根治术患者的临床资料,并纳入同期健康体检者49名作为对照组,同时根据胃癌根治术患者预后情况将其分为死亡组11例与存活组18例。记录两组患者入院时基线资料及入院24 h血清CEA、CA19-9、ITGβ6水平并进行比较。结果 胃癌组患者血清CEA、CA19-9、ITGβ6水平均分别明显高于对照组,差异有统计学意义(t=6.135,4.209,3.943,P<0.05)。死亡组患者血清CEA、CA19-9、ITGβ6水平均分别明显高于存活组,差异有统计学意义(t=3.723,3.431,3.867,P<0.05)。CEA+CA19-9+ITGβ6联合检测的AUC值0.901,敏感度为0.909,特异度为0.944,表明三指标联合诊断胃癌根治术预后的价值更优(P<0.05)。结论 CEA+CA19-9+ITGβ6联合检测可有效诊断胃癌及提高对胃癌根治术患者的预后评估效果。 展开更多
关键词 CEA ca19-9 ITGβ6 胃癌
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血清CEA、CA19-9、β_(2)-MG表达与膀胱癌患者吡柔比星膀胱灌注化疗疗效和生存期相关分析
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作者 王爽 王丹 《华北理工大学学报(医学版)》 2024年第2期117-122,共6页
目的探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、癌抗原199(CA19-9)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)水平与膀胱癌患者吡柔比星膀胱灌注化疗疗效和生存期的关系。方法选取2021年3月~2023年4月在南阳市第一人民医院接受吡柔比星膀胱灌注化疗的98例膀... 目的探讨膀胱癌患者血清癌胚抗原(CEA)、癌抗原199(CA19-9)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)水平与膀胱癌患者吡柔比星膀胱灌注化疗疗效和生存期的关系。方法选取2021年3月~2023年4月在南阳市第一人民医院接受吡柔比星膀胱灌注化疗的98例膀胱癌患者作为研究对象,根据化疗结果分为化疗有效组(52例)和化疗无效组(46例)。比较两组患者的临床资料和血清CEA、CA19-9、β_(2)-MG水平,并进行单因素和多因素分析、生存分析及Cox回归分析。结果化疗有效组血清CEA、CA19-9、β_(2)-MG水平均低于化疗无效组(P<0.001)。进一步经多因素Logistic回归分析显示血清CEA水平是影响化疗效果和生存期的独立危险因素,高表达者化疗效果差,预后不良。血清CA19-9、β_(2)-MG水平也与化疗效果相关,但不是独立影响因素。结论血清CEA水平是预测膀胱灌注化疗疗效和生存期的重要指标,建议对膀胱癌患者进行血清CEA、CA19-9、β_(2)-MG检测,以指导个体化治疗方案的制定。 展开更多
关键词 膀胱癌 吡柔比星 CEA ca19-9 β_(2)-MG 生存分析
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血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测在肝硬化鉴别诊断中的价值 被引量:1
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作者 朱娅琪 《中国民康医学》 2024年第7期139-141,共3页
目的:观察血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、糖类抗原19-9(CA19-9)、高尔基体蛋白73(GP73)水平联合检测在肝硬化鉴别诊断中的价值。方法:选取2020年4月至2022年7月该院收治的81例肝硬化患者进行横断面研究,设为肝硬化组。选取同期81例肝... 目的:观察血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、糖类抗原19-9(CA19-9)、高尔基体蛋白73(GP73)水平联合检测在肝硬化鉴别诊断中的价值。方法:选取2020年4月至2022年7月该院收治的81例肝硬化患者进行横断面研究,设为肝硬化组。选取同期81例肝炎患者进行横断面研究,设为肝炎组。比较两组入院时血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平;采用点二列相关性分析对血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平与肝硬化的相关性进行分析;绘制ROC曲线,分析血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平单项及联合检测鉴别诊断肝硬化的价值。结果:肝硬化组血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平均高于肝炎组,差异有统计学意义(P<0.05);点二列相关性分析结果显示,血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平与肝硬化呈正相关(r>0,P<0.05);ROC曲线结果显示,入院时血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测诊断肝硬化的曲线下面积(AUC)为0.908,高于三者单项检测诊断(AUC=0.758、0.813、0.724,P<0.05)。结论:血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测诊断肝硬化的价值高于三者单项检测诊断。 展开更多
关键词 肝硬化 壳多糖酶3样蛋白1 糖类抗原19-9 高尔基体蛋白73 检测 诊断
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基于CRISPR/Cas9基因编辑技术构建PD-L1-GFP报告基因HT29细胞株
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作者 谢钰珍 覃鸿妮 +2 位作者 吴凡 孙曙光 孟丽君 《山东理工大学学报(自然科学版)》 2024年第2期67-72,共6页
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和同源重组技术在PD-L1基因的特定位置敲入绿色荧光蛋白(GFP)序列,构建含有PD-L1-GFP报告基因的结肠癌细胞(HT29)稳定细胞株。根据CRISPR-Cas9靶点设计原则,针对PD-L1基因终止密码子设计两对sgRNA,退火形成... 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和同源重组技术在PD-L1基因的特定位置敲入绿色荧光蛋白(GFP)序列,构建含有PD-L1-GFP报告基因的结肠癌细胞(HT29)稳定细胞株。根据CRISPR-Cas9靶点设计原则,针对PD-L1基因终止密码子设计两对sgRNA,退火形成双链后连接至Lenti-V2空载质粒中,转化培养后提取质粒并测序验证。对于正确的Lenti-V2-sgRNA重组质粒,T7E1酶切验证其基因编辑效率。根据靶点位置设计左同源臂+GFP+右同源臂序列合成Donor片段,双酶切后连接至pUC19,重组载体转化扩增后同样进行质粒提取和测序验证。将验证成功的Lenti-V2-sgRNA和pUC19-donor-GFP共转染HT29细胞,荧光显微镜检测GFP表达情况,菌落PCR及基因测序验证GFP报告基因的靶向插入效果。经酶切和测序鉴定,靶向编辑PD-L1的Cas9载体Lenti-V2-gRNA和含GFP基因的Donor质粒pUC19-donor-GFP构建成功。两个重组质粒转染HT29细胞后,显微观察、多克隆验证、单克隆筛选及鉴定结果显示,GFP成功转入HT29细胞并进行了表达,经有限稀释法筛选出的单克隆细胞荧光均一,且与对照组相比,阳性细胞克隆的基因组PCR均检测到特异条带,表明在PD-L1终止密码子前成功插入了GFP片段,细胞株构建成功。通过基因编辑技术成功构建了稳定表达PD-L1-GFP报告基因的HT29结肠癌细胞株,建立了一个可以直观在细胞上观察PD-L1是否表达以及表达的强弱程度的系统,为后期体内外筛选调控PD-L1的上游新靶点及药物奠定了基础。 展开更多
关键词 PD-L1 CRISPR/cas9 报告基因 GFP
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血清TK1联合CEA、CA125、CA19-9检查在消化道肿瘤风险筛查中的应用研究
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作者 吴珊珊 颜见钦 刘周发 《中国医学创新》 CAS 2024年第24期125-129,共5页
目的:研究血清胸苷激酶1(TK1)联合癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)检查在消化道肿瘤风险筛查中的应用。方法:回顾性分析2020年1月—2023年1月在萍乡市人民医院进行消化道肿瘤风险筛查的80例体检者病历资料,将... 目的:研究血清胸苷激酶1(TK1)联合癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)检查在消化道肿瘤风险筛查中的应用。方法:回顾性分析2020年1月—2023年1月在萍乡市人民医院进行消化道肿瘤风险筛查的80例体检者病历资料,将检出恶性肿瘤的患者纳入恶性肿瘤组(n=30),检出良性肿瘤的患者30例作为良性肿瘤组,20例健康人群作为健康组。检测三组受检者血清TK1、CEA、CA125、CA19-9的水平,比较三组之间肿瘤标志物水平的差异性,并以受试者操作特征(ROC)曲线评估上述指标单一和联合预测恶性肿瘤的诊断价值。结果:恶性肿瘤组和良性肿瘤组患者的TK1、CEA、CA125、CA19-9的水平均高于健康组(P<0.05),且恶性肿瘤组患者肿瘤标志物水平均高于良性肿瘤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TK1预测患有恶性肿瘤的ROC曲线下面积(AUC)为0.894,敏感度和特异度分别为76.47%、96.43%(P<0.05);CEA预测患者患有恶性肿瘤的AUC为0.859,敏感度和特异度分别为88.24%、64.29%(P<0.05);CA125预测患者患有恶性肿瘤的AUC为0.845,敏感度和特异度分别为68.63%、82.14%(P<0.05);CA19-9预测患者患有恶性肿瘤的AUC为0.845,敏感度和特异度分别为98.04%、57.14%(P<0.05);联合检测具有较高敏感度,为100%。结论:较于健康人群,良性肿瘤和恶性肿瘤患者TK1、CEA、CA125、CA19-9水平均升高,恶性肿瘤患者水平显著升高,单一肿瘤标志物的检测效能较低,易出现假阳性而误诊,而联合检测诊断效能较高。 展开更多
关键词 消化道肿瘤 体检 血清胸苷激酶1 癌胚抗原 糖类抗原125 糖类抗原19-9 筛查
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Studies on the temporal,structural,and interacting features of the clubroot resistance gene Rcr1 using CRISPR/Cas9-based systems
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作者 Hao Hu Fengqun Yu 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期1035-1048,共14页
Clubroot disease is a severe threat to Brassica crops globally,particularly in western Canada.Genetic resistance,achieved through pyramiding clubroot resistance(CR)genes with different modes of action,is the most impo... Clubroot disease is a severe threat to Brassica crops globally,particularly in western Canada.Genetic resistance,achieved through pyramiding clubroot resistance(CR)genes with different modes of action,is the most important strategy for managing the disease.However,studies on the CR gene functions are quite limited.In this study,we have conducted investigations into the temporal,structural,and interacting features of a newly cloned CR gene,Rcr1,using CRISPR/Cas9 technology.For temporal functionality,we developed a novel CRISPR/Cas9-based binary vector,pHHIGR-Hsp18.2,to deliver Rcr1 into a susceptible canola line(DH12075)and observed that early expression of Rcr1 is critical for conferring resistance.For structural functionality,several independent mutations in specific domains of Rcr1 resulted in loss-offunction,highlighting their importance for CR phenotype.In the study of the interacting features of Rcr1,a cysteine protease gene and its homologous allele in canola were successfully disrupted via CRISPR/Cas9 as an interacting component with Rcr1 protein,resulting in the conversion from clubroot resistant to susceptible in plants carrying intact Rcr1.These results indicated an indispensable role of these two cysteine proteases in Rcr1-mediated resistance response.This study,the first of its kind,provides valuable insights into the functionality of Rcr1.Further,the new vector p HHIGR-Hsp18.2 demonstrated an inducible feature on the removal of add-on traits,which should be useful for functional genomics and other similar research in brassica crops. 展开更多
关键词 Clubroot resistance Brassica crops caNOLA Rcr1 CRISPR/cas9 system Gene knock-out Timing control Non-synonymous mutation Protein-protein interaction
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基于CRISPR/Cas9系统构建裸鼹鼠HIF-1α基因敲除质粒及其功能验证
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作者 张静远 姜晓龙 崔淑芳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期202-209,共8页
目的利用簇状规则间隔回文重复序列(CRISPR)/Cas9基因编辑系统构建质粒并敲除裸鼹鼠皮肤成纤维(NMR skin fibroblasts,NSF)细胞HIF-1α基因,为研究裸鼹鼠的耐低氧机制及缺氧相关疾病的发生发展机制提供体外细胞模型。方法针对裸鼹鼠HIF-... 目的利用簇状规则间隔回文重复序列(CRISPR)/Cas9基因编辑系统构建质粒并敲除裸鼹鼠皮肤成纤维(NMR skin fibroblasts,NSF)细胞HIF-1α基因,为研究裸鼹鼠的耐低氧机制及缺氧相关疾病的发生发展机制提供体外细胞模型。方法针对裸鼹鼠HIF-1α基因的1~4号外显子区域设计4对sgRNA序列,并成功构建表达质粒。筛选得到最优sgRNA后,转染HEK-293T细胞收集上清液测定病毒滴度。前期用pLenti-Cas9(blast)病毒感染NSF细胞,后用制备的HIF-1α-sgRNA病毒感染表达Cas9蛋白的NSF细胞。经药筛后观察荧光表达,同时提取细胞gDNA和蛋白。通过T7E1酶和Western Blot检测NSF细胞中HIF-1α基因变化及蛋白表达情况。结果Sanger测序显示,所设计的sgRNA成功插入到pX459和pKLV2-U6-sgRNA2载体上,序列验证正确,重组质粒构建成功;T7E1酶切实验成功切除3条带,sgRNA的打靶效率为54%,Western Blot结果表明,经药筛后的裸鼹鼠NSF细胞HIF-1α基因敲除成功,蛋白水平显著降低(P=0.0019);且未发现HIF-1α敲除细胞形态的明显变化,基因敲除对细胞增殖能力无明显影响。结论成功构建靶向裸鼹鼠HIF-1α基因的CRISPR/Cas9质粒,且质粒靶向敲除HIF-1α基因功能验证成功,将有利于裸鼹鼠耐低氧机制研究,并为人类缺氧相关疾病防治提供理论依据。 展开更多
关键词 裸鼹鼠 HIF-1Α 基因敲除 CRISPR/cas9系统
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血清CA125、CEA、CA19-9联合检测对结直肠癌筛查的价值
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作者 陶芸 王晓旭 《贵州医药》 CAS 2024年第6期958-961,共4页
目的探讨结直肠癌筛查中血清CA125、CEA、CA19-9联合检测的价值。方法回顾性选取本院结直肠癌患者70例为结直肠癌组、50例肠溃疡患者为肠溃疡组、50例肠息肉患者为肠息肉组、50名健康体检人员为健康组。结果结直肠癌组患者的血清CA125、... 目的探讨结直肠癌筛查中血清CA125、CEA、CA19-9联合检测的价值。方法回顾性选取本院结直肠癌患者70例为结直肠癌组、50例肠溃疡患者为肠溃疡组、50例肠息肉患者为肠息肉组、50名健康体检人员为健康组。结果结直肠癌组患者的血清CA125、CEA、CA19-9水平均高于肠溃疡组、肠息肉组、健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组的血清CA125、CEA、CA19-9单独与联合检测阳性率均高于其余三组,差异均有统计学意义(P<0.05);各组血清CA125、CEA、CA19-9联合检测阳性率高于单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组TNM分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者的血清CA125、CEA、CA19-9水平均逐渐升高,Dukes分期A~B期患者的各项血清水平均低于C~D期患者,病理分型低分化、中分化、高分化患者的各项血清水平均逐渐降低,有淋巴结转移患者的各项血清水平均高于无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组患者手术后的血清CA125、CEA、CA19-9水平均低于手术前,未复发患者的各项血清水平均低于复发患者,化疗有效患者的各项血清水平均低于化疗无效患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌筛查中血清CA125、CEA、CA19-9联合检测的价值较单独检测高。 展开更多
关键词 结直肠癌 ca125 CEA ca19-9 联合检测
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术前CA19-9联合FIB含量预测肝癌切除术后早期复发的临床意义
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作者 甘雨 吴相波 +3 位作者 但汉君 董晓天 管宇帆 安家泽 《空军军医大学学报》 CAS 2024年第3期257-262,共6页
目的探讨糖类抗原19-9(CA19-9)联合纤维蛋白原(FIB)预测肝癌切除术后早期复发的临床意义。方法选取空军军医大学西京医院肝胆外科2020年6月至2021年6月收治的164例肝癌患者,手术切除后进行2年的随访,根据复发情况将患者分为早期复发组(n... 目的探讨糖类抗原19-9(CA19-9)联合纤维蛋白原(FIB)预测肝癌切除术后早期复发的临床意义。方法选取空军军医大学西京医院肝胆外科2020年6月至2021年6月收治的164例肝癌患者,手术切除后进行2年的随访,根据复发情况将患者分为早期复发组(n=71)和非早期复发组(n=93)。收集患者基线资料,比较两组术前CA19-9及FIB含量水平差异,采用多因素logistic回归分析寻找影响肝癌切除术后早期复发的因素,使用受试者工作特征(ROC)曲线评价术前CA19-9及FIB预测肝癌切除术后早期复发的效能。结果164例患者中肝切除术后早期复发71例(43.3%)。多因素logistic回归分析显示,巴塞罗那肝癌(BCLC)分期较晚、肿瘤未分化、术中输血、术前甲胎蛋白(AFP)>400 g/L、CA19-9>17.95 U/mL及FIB>2.73 g/mL(均P<0.05)是肝癌患者切除术后早期复发的独立危险因素。ROC曲线分析结果显示,CA19-9预测肝癌切除术后早期复发的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度分别为0.793(95%CI:0.723~0.862)、0.662、0.817。FIB含量预测肝癌切除术后早期复发的AUC、敏感度、特异度分别为0.800(95%CI:0.734~0.866)、0.648、0.753。联合检测预测肝癌切除术后早期复发的AUC、敏感度、特异度分别为0.913(95%CI:0.869~0.958)、0.831、0.925。结论BCLC分期较晚、肿瘤未分化、术中输血、术前AFP>400 g/L、CA19-9>17.95 U/mL及FIB>2.73 g/mL与肝癌患者切除术后早期复发密切相关,CA19-9与FIB含量联合预测肝癌切除术后早期复发的价值较高。 展开更多
关键词 ca19-9 FIB 肝癌 切除术 早期复发
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The combined detection of carcinoembryonic antigen,carcinogenic antigen 125,and carcinogenic antigen 19-9 in colorectal cancer patients
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作者 Ling-Zhen Gong Qian-Wen Wang Jie-Wen Zhu 《World Journal of Gastrointestinal Surgery》 SCIE 2024年第7期2073-2079,共7页
BACKGROUND Hepatic metastases are common and difficult to treat after colorectal cancer(CRC)surgery.The predictive value of carcinoembryonic antigen(CEA),cancer antigen(CA)125 and CA19-9 combined tests for liver metas... BACKGROUND Hepatic metastases are common and difficult to treat after colorectal cancer(CRC)surgery.The predictive value of carcinoembryonic antigen(CEA),cancer antigen(CA)125 and CA19-9 combined tests for liver metastasis is unclear.AIM To evaluate predictive value of combined tests for CEA,CA125,and CA19-9 levels in patients with liver metastases of CRC.METHODS The retrospective study included patients with CRC alone(50 cases)and patients with CRC combined with liver metastases(50 cases)who were hospitalized between January 2021 and January 2023.Serum CEA,CA125 and CA19-9 levels were compared between the two groups,and binary logistic regression was used to analyze the predictive value of the combination of these tumor markers in liver metastasis.In addition,we performed receiver operating characteristic(ROC)curve analysis to assess its diagnostic accuracy.RESULTS The results showed that the serum CEA,CA125 and CA19-9 levels in the CRC with liver metastasis group were significantly higher than those in the CRC alone group.Specifically,the average serum CEA level in the CRC with liver metastasis group was 162.03±810.01 ng/mL,while that in the CRC alone group was 5.71±9.76 ng/mL;the average serum CA125 levels were 43.47±83.52 U/mL respectively.and 13.5±19.68 U/mL;the average serum CA19-9 levels were 184.46±473.13 U/mL and 26.55±43.96 U/mL respectively.In addition,binary logistic regression analysis showed that CA125 was significant in predicting CRC liver metastasis(P<0.05).ROC curve analysis results showed that the areas under the ROC curves of CEA,CA125 and CA19-9 were 0.607,0.692 and 0.586.CONCLUSION These results suggest that combined detection of these tumor markers may help early detection and intervention of CRC liver metastasis,thereby improving patient prognosis. 展开更多
关键词 Colorectal cancer Liver metastasis serum markers carcinoembryonic antigen cancer antigen 125 cancer antigen 19-9 Receiver operating characteristic analysis
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肿瘤标志物CEA、CA19-9、CA12-5联合检测在卵巢囊肿鉴别诊断中的应用
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作者 胡昆龙 《黑龙江医药》 CAS 2024年第2期426-428,共3页
目的:探讨卵巢囊肿采用肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原12-5(CA12-5)联合检测诊断的价值。方法:从我院2021年2月—2023年2月收治的卵巢囊肿患者中抽出45例恶性患者作为恶性组,抽取45例良性患者作为良性组,同... 目的:探讨卵巢囊肿采用肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原12-5(CA12-5)联合检测诊断的价值。方法:从我院2021年2月—2023年2月收治的卵巢囊肿患者中抽出45例恶性患者作为恶性组,抽取45例良性患者作为良性组,同期从来我院体检的体检健康女性中抽取45例作为对照组。入组者均行肿瘤标志物CEA、CA19-9、CA12-5检测。比较三组的CEA、CA19-9、CA12-5含量以及阳性表达;分析上述指标单独及联合检测诊断卵巢囊肿性质的效能。结果:恶性组的CEA、CA19-9、CA12-5含量均高于良性组和对照组(P<0.05);良性组的CA12-5含量高于对照组(P<0.05)。恶性组的CEA、CA19-9、CA12-5阳性表达率高于良性组和对照组(P<0.05);良性组的CA12-5阳性表达率高于对照组(P<0.05)。CEA、CA19-9、CA12-5联合诊断的准确率、敏感度分别为90.00%、91.11%,均高于单一诊断(P<0.05),联合诊断的特异性与单一诊断无明显差异(P>0.05)。结论:肿瘤标志物CEA,CA19-9,CA12-5均具有一定的卵巢囊肿诊断价值,三者联合检测的鉴别诊断效能更高,有助于提高卵巢癌的检出。 展开更多
关键词 肿瘤标志物CEA ca19-9 ca12-5 卵巢囊肿 鉴别诊断
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