不同时机针刺大椎对干酵母致热大鼠体温及下丘脑cAMP变化趋势的影响

目的:以干酵母发热大鼠模型为基础,研究不同时机针刺大椎时体温与cAMP的变化趋势,以探究发热大鼠的最佳针刺时机和体温降低幅度改变的机制。方法:450只SD大鼠,随机选取10只大鼠为空白对照组,其余大鼠使用20%酵母悬液进行发热模型的建立,然后随机分为模型对照组90只、上升期治疗组90只、峰值前治疗组80只、峰值治疗组70只、峰值后治疗组60只。各组进行体温与cAMP含量测定。结果:4个治疗组均可使发热大鼠体温降至空白对照组水平,解热时间:峰值治疗组(3 h)<峰值后治疗组(4 h)<峰值前治疗组(6 h)<上升期治疗组(8 h);各治疗组体温降低幅度和cAMP降低幅度由大到小依次为峰值治疗组、峰值后治疗组、峰值前治疗组、上升期治疗组;体温降低值与cAMP降低值具有显著正相关关系。结论:不同时机针刺干酵母致热大鼠大椎穴均有退热作用并可使体温降至正常水平,以体温到达峰值时进行针刺治疗效果最佳。不同时机针刺发热大鼠大椎穴可能是通过改变cAMP等中枢体温正调节介质的降低幅度来实现改变体温降低幅度。

Research on the Construction and Practice of College English Spoken Language Network Training Camp under the “Let’s talk” Model

Based on the"Understandable Output Hypothesis"a practical study on the construction of college oral English network training camp is set up,through speech learning and imitation,building language input in natural environment,exploring effective output mode based on information technology platform,providing foreign language learners with opportunities to express language and get feedback.Students use relevant resources on the Internet to complete the oral activities of"thematic activities"together,so as to cultivate students'cooperative learning,communication skills,team spirit and language communication ability.

基于细胞内第二信使cAMP的检测评估化合物对多巴胺靶点的活性影响

目的 建立一种基于细胞水平的第二信使cAMP检测方法来评估化合物对多巴胺(DA)受体的活性影响。方法 通过构建DA受体真核表达载体,应用Flp-In系统和脂质体转染法构建表达DA受体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系,反转录PCR(RT-PCR)鉴定DA受体的表达情况;利用TR-FRET cAMP方法检测阳性化合物对DA靶点的激活和抑制作用;毛喉素(Forskolin)是一种有效的腺苷酸环化酶(AC)激活剂,诱导细胞内cAMP的形成。结果 经RTPCR鉴定,宿主细胞中无目的表达,而转染后的细胞多巴胺细胞系中有目的基因表达,成功构建表达多巴胺受体的细胞模型;TR-FRET cAMP方法检测结果显示所构建的多巴胺受体细胞模型可以反映化合物的激动和抑制作用。结论 所构建的DA受体表达细胞系可以通过TR-FRET cAMP方法检测多巴胺受体被激活后胞内产生的第二信使cAMP的浓度变化,进而反映化合物对DA靶点的活性影响,为DA靶点的化合物筛选提供一种简便快捷的方法。

开放共享背景下城市公园绿地露营满意度评价——以广州为例

随着城市居民亲近自然的户外活动需求日益增长,出现了在城市公园中开展露营活动的新现象,因此有必要探讨城市公园如何更好地支撑露营活动的开展。从游客满意度视角出发,通过构建城市公园露营满意度指标体系,基于在广州部分城市公园获取的问卷调查数据,运用IPA-Kano模型对城市公园承载露营活动的满意度进行评价。研究表明:基本型要素包括从公园入口到露营点的方便程度、随身财物的安全、消防安全、疫情防控措施、露营区域的空间充足程度、露营区域的私密性/嘈杂程度、露营区域的树荫、开放区域大小和草坪的保养维护水平,是最需要改善的要素;关键性绩效型要素包括停车方便程度和蛇虫叮咬,是第二优先级的待改善要素;不同要素的露营满意度在不同类型公园间存在差异。旨在提高城市公园满足居民露营需求的能力,以期为城市公园绿地的开放共享方式提供参考借鉴。

户外精致露营的盈利模式探究

2020年被称为“精致露营元年”,相关运动产品销售迎来爆发式增长。精致露营是目前风靡各大社交媒体的户外运动方式,具有更生活化更潮流化的特征,激发国内市场快速发展。基于此,本文以精致露营为研究对象,首先对精致露营以及盈利模式作出明确定义,并运用文献阅读法、问卷调查法、实地考察法分析精致露营的利润对象、利润点、利润杠杆、利润来源和利润屏障。本文通过寻找精致露营市场在生产经营中的盈利机会,以期为我国精致露营行业可持续发展提供助力。

龙琥醒脑颗粒对脑出血模型小鼠cAMP/PKA/AQP4信号通路的调控作用

目的:探讨龙琥醒脑颗粒对脑出血(ICH)模型小鼠cAMP/PKA/AQP4信号通路的调控作用。方法:参照Rynkowski法建立小鼠ICH模型,将60只雄性ICH小鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、龙琥醒脑颗粒高剂量组和龙琥醒脑颗粒低剂量组,每组12只,造模成功后,中药高、低剂量组小鼠分别灌胃给予20 g/kg、10 g/kg的龙琥醒脑颗粒溶液,正常对照组、假手术组和模型组小鼠则给予等量蒸馏水。采用Longa法,对各组小鼠分别于给药7 d、14 d后进行神经功能缺损评分;采用干湿重法评估ICH后血肿周围脑组织含水量;分别采用荧光定量PCR(qPCR)法和western blotting法检测末次给药后各组小鼠脑组织中cAMP、PKA和AQP4基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,龙琥醒脑颗粒高、低剂量组均能显著降低神经功能缺损评分和脑组织含水量(P<0.05),同时明显下调cAMP、PKA和AQP4基因和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:龙琥醒脑颗粒对ICH模型小鼠cAMP/PKA/AQP4信号通路具有明显的调控作用,这可能是其抗神经功能缺损、减轻脑水肿而治疗ICH的重要机制之一。

小青龙汤和补肾定喘汤对哮喘大鼠肺组织β受体和cAMP水平的影响

用放射配基竞争结合法和放射免疫法测定连续激发哮喘的大鼠第１，３，７天肺组织β受体（βＡＲ）和环磷酸酰苷（ｃＡＭＰ）水平。结果：哮喘大鼠肺组织βＡＲ和ｃＡＭＰ含量于激发后逐日下降，激发第３天，βＡＲ含量已明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），第７天时，βＡＲ和ｃＡＭＰ均降至最低点，与正常对照组相比，差异极显著（Ｐ＜０．０１），小青龙汤和补肾定喘汤治疗后，βＡＲ、ｃＡＭＰ含量显著上升（Ｐ＜０．０１），其中βＡＲ含量仍低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），小青龙汤组ｃＡＭＰ含量已达到正常水平。

基于胃肠组织cAMP/PKA信号转导通路变化研究大鼠脾气虚证模型与线粒体损伤模型的相关性

【目的】基于胃肠组织cAMP/PKA信号转导通路的变化研究大鼠脾气虚证模型与线粒体损伤模型的相关性,探讨脾气虚证的生物学机制。【方法】采用饮食不节加力竭游泳法复制脾气虚证大鼠模型,采用腹腔注射鱼藤酮法复制线粒体损伤大鼠模型。采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测大鼠胃肠组织环磷酸腺苷(cAMP)含量,分别采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测大鼠胃肠组织蛋白激酶A(PKA)、糖原磷酸化酶(Gp)、磷酸化酶激酶(PHK)的mRNA和蛋白的表达情况。【结果】脾气虚证模型大鼠胃肠组织cAMP含量及PKA、Gp、PHK mRNA和蛋白的表达水平与线粒体损伤模型大鼠无显著性差异。【结论】脾气虚证的现代生物学机制可能与机体线粒体损伤时cAMP/PKA信号转导通路的变化有关。

cAMP、cGMP及基因表达谱在心气虚型家兔心衰模型中的变化

目的通过观察cAMP、cGMP的含量和比值,以及对基因表达谱芯片的分析,从微观角度揭示家兔心气虚证心衰模型的发病机制。方法导管术造成家兔充血性心力衰竭,于15 d、30 d取血检测cAMP、cGMP含量并剪取心肌组织进行HE染色及病理观测损伤程度,并利用全基因表达谱芯片分析心气虚型心衰模型家兔的基因表达差异。结果①正常家兔的心肌细胞无损伤,造模15 d、30 d家兔均出现心肌细胞损伤,且30 d的损伤更加广泛和严重;②与正常对照组比较,造模15 d和30 d组cGMP含量增加(P<0.05),cAMP含量和cAMP/cGMP比值下降(P<0.05),且30 d组与15 d组比较cGMP含量增加(P<0.05),cAMP含量和cAMP/cGMP比值下降(P<0.05);③15 d、30 d模型组与正常对照组间差异基因的交集基因有665个,对NCBI中功能注释明确的家兔基因,应用序列比对来注释功能,得到16个功能明确的基因,它们主要与离子通道、肌收缩和信号转导等功能有关。结论血清cAMP、cGMP含量、cAMP/cGMP比值可较好地反映心气虚证家兔心衰的病变程度,可用于对该模型进行评价;交集的665个基因包含模型稳定影响的基因,对该部分基因进行分析挖掘有望找到受模型影响的特异基因。

旅游涉入对露营旅游者环境责任行为的影响研究——以旅游者幸福感为中介

基于环境责任行为理论,将旅游者幸福感作为中介变量,运用结构方程模型分析旅游涉入对露营旅游者环境责任行为的影响机制。研究结果表明:(1)风险性、实现幸福感对旅游者环境责任行为具有直接显著的正向影响。(2)重要性/象征性、愉悦性直接显著正向影响实现幸福感;且愉悦性的影响力更大,愉悦性也直接正向影响享乐幸福感。(3)愉悦性可以通过实现幸福感间接影响旅游者环境责任行为。

基于EASI模型的海外营地安防系统脆弱性评估

海外中资企业作为中国企业在“一带一路”沿线国家的投资者和运营者,面临着各种安全威胁。为确保企业的安全,营地安防系统发挥着关键作用。定量分析“一带一路”海外营地安防系统的薄弱路径,可以帮助企业建立强大的安全防护体系,保护资产和员工安全,促进项目顺利进行。该文基于EASI模型对某海外中资企业营地安防系统进行脆弱性评估,利用模拟场景建立敌手入侵序列图,对所有入侵路径进行计算,分析最薄弱路径的关键影响因素,针对最薄弱路径提出改进措施,提高海外中资企业营地安防系统的有效性。

基于云自适应遗传算法的野营器材运输路径优化

针对野营器材运输投送过程中存在的及时性不强、精准性不高和匹配性欠佳等问题,论文围绕现代联合作战保障和现代军事物流体系建设,综合考虑野营器材运输投送中的时间要求、经济成本和风险制约,构建运输路径优化模型,并采用基于云自适应遗传算法优化求解,以期制定合理的野营器材运输方案,供野营器材保障决策参考。

5味山姜属中药乙醇提取物对胃溃疡寒证大鼠血清cAMP、cGMP的影响及其胃组织病理学观察

目的 :观察高良姜、大高良姜、草豆蔻、红豆蔻、益智5味山姜属中药乙醇提取物对醋酸灌胃型胃溃疡寒证大鼠血清cAMP、cGMP及cAMP/cGMP的影响,以及其胃组织病理变化。探讨同属中药温热药性和温中散寒功效的相关性。方法 :以4℃冰知母水提液、15%冰醋酸水溶液复制大鼠胃溃疡寒证模型,造模后随机分为模型组,西咪替丁组,附子理中丸组,各受试药物乙醇部位高、低剂量组。观察各组中药乙醇提取物对大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值的影响,胃组织的病理切片的变化以及胃黏膜损伤情况。结果 :5味山姜属中药乙醇提取物均能显著升高胃溃疡寒证大鼠血清cAMP含量及cAMP/cGMP比值(P<0.05或P<0.01)。光镜下观察胃组织病理变化,各给药组被覆黏膜形态呈现较大的差异;且高良姜等各给药高剂量组的炎细胞浸润、黏膜充血情况均显著地降低(P<0.01或者P<0.05),说明5味中药乙醇提取物均不同程度的改善胃溃疡寒证症状。结论 :通过"性效关联"规律,利用"病证结合"模型验证了山姜属5味中药的温热药性和温中散寒功效。说明山姜属5味中药性效相关性,可能是同属中药具有相同的药效部位或相似的物质基础。

复健片对大脑中动脉闭塞模型大鼠cAMP/PKA信号通路mRNA及神经营养因子表达的影响

目的:研究复健片对大脑中动脉模闭塞型大鼠cAMP/PKA信号通路mRNA及神经营养因子生长相关蛋白43、脑源性神经营养因子表达的影响,探讨其治疗脑梗死的作用机制。方法:50只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、复健片高剂量组、复健片低剂量组、丁苯酞组,每组10只,除对照组外,其余各组制备大脑中动脉闭塞模型,采用Zea Longa 5分制进行评分,1~3分为模型成功。各组采用相应干预措施14d,采用HE染色观察大鼠梗死区神经元损伤情况,RT-PCR法检测梗死区脑组织BDNF、GAP-43、PKA、cAMP mRNA表达情况,Western Blot法检测梗死区脑组织BDNF、GAP-43的含量。结果:与对照组比较,模型组梗死区脑组织神经元损伤明显,GAP-43mRNA表达量降低(P<0.05),BDNF、PKA、cAMP mRNA表达量明显降低(P<0.01),BDNF、GAP-43蛋白表达量降低(P<0.05);与模型组相比,复健片高、低剂量组梗死区脑组织神经元损伤均减轻,BDNF、GAP-43、PKA、cAMP mRNA的表达均明显升高(P<0.01),复健片高剂量组BDNF、GAP-43蛋白表达量明显升高(P<0.01),低剂量组二者的表达也升高(P<0.05)。结论:复健片可激活cAMP/PKA信号通路,调控梗死区脑组织中神经营养因子BDNF、GAP-43的表达,促进大脑中动脉闭塞模型大鼠的神经再生。

基于CFTR的胞浆内第二信使cAMP检测方法的建立

目的:建立一种基于CFTR可敏感检测胞浆内第二信使cAMP的检测方法。方法:构建CFTR和YFP-H148Q/I152L真核表达载体,应用脂质体转染法构建共表达CFTR和YFP-H148Q/I152L的FRT细胞,倒置荧光显微镜观察其表达情况,流式细胞仪检测细胞纯度;荧光淬灭动力学实验验证细胞模型的有效性;荧光淬灭动力学实验验证细胞模型可筛选CFTR调节剂;放射免疫法检测加入CFTR激活剂后细胞内的cAMP浓度。结果:倒置荧光显微镜下观察到CFTR表达在细胞膜上,YFP-H148Q/I152L表达于胞浆中;成功构建共表达CFTR和YFP-H148Q/I152L的FRT细胞模型;荧光变化斜率值与CFTR调节剂浓度成剂量依赖关系,该模型可筛选CFTR调节剂;荧光变化斜率值可反映胞浆内cAMP浓度,该模型可敏感检测胞浆内cAMP浓度。结论:此细胞模型可以高效敏感检测胞浆内第二信使cAMP浓度,为cAMP信号相关靶点的研究提供一种简便快捷的方法。

基于cAMP/cGMP、AQP4探究综合性虚损症模型的建立

目的:通过比较两种混合造模对虚证小鼠体征及cAMP/cGMP、AQP4的影响,探寻综合性虚损症模型小鼠造模方法。方法:将KM小鼠随机分为正常对照组、模型组A、模型组B,进行灌胃番泻叶水浸液、游泳、失血造模,每周检测体质量、自主活动、体温、游泳力竭时间,连续3周。处死动物,检测血浆cAMP、cGMP含量,脏器指数和肾脏组织AQP4蛋白表达。结果:模型组A、模型组B均能明显地造成小鼠体质量增长变慢,体温下降,自主活动减少,游泳力竭时间缩短,血浆cAMP、cGMP含量升高,AQP4蛋白表达降低,且模型组B还使肝、脾、肾指数增加。结论:模型组A、模型组B在造模2周后能造成小鼠虚证模型,造模3周特征表现更明显。模型组B比模型组A损伤更明显。

结合Kano-QFD与FBS模型的露营椅创新设计方法研究

针对露营椅开发设计主要依赖生产企业和设计师的主观判断、设计方案与用户需求匹配度低、缺少科学量化的设计要素获取方法等问题,结合Kano-QFD与FBS模型,探索针对露营椅的创新设计方法。首先,通过用户访谈和调查问卷获取露营椅的初始用户需求,利用Kano模型得到用户需求类别及重要度;其次,基于QFD理论对用户需求进行量化分析,获取露营椅各项设计要求及权重;最后,将获得的关键设计要求导入FBS模型,完成露营椅功能要素到结构要素的映射转化,最终实现露营椅的创新设计。实践证明,结合Kano-QFD和FBS模型,能全面获取及分析用户需求,输出露营椅的具体解决方案,实现了用户需求到产品设计要素的精准映射,为展开露营椅创新设计提供一条新路径。

酸枣仁提取物调控cAMP-PKA通路促进小鼠体长增长及大鼠慢波睡眠的机制研究

目的探讨酸枣仁提取物调控cAMP-PKA通路影响小鼠体长增长及大鼠慢波睡眠的具体机制。方法 (1)48只昆明种雄性小鼠随机分为6组,分别为空白对照组(灌胃去离子水,并于末次灌胃后侧脑室注射灭菌的0.9%NaCl溶液)、蓝墨水组(灌胃去离子水,并于末次灌胃后侧脑室注射过滤灭菌的蓝墨水)、用药组(灌胃酸枣仁提取物水溶液,并于末次灌胃后侧脑室注射过滤灭菌的蓝墨水)、阳性对照组(灌胃酸枣仁皂苷A水溶液,并于末次灌胃后侧脑室注射过滤灭菌的蓝墨水)、Gi/o蛋白抑制剂+用药组(灌胃酸枣仁提取物水溶液,并于末次灌胃后侧脑室注射加有过滤灭菌蓝墨水的PT)和5-HT1AR抑制剂+用药组(灌胃酸枣仁提取物水溶液,并于末次灌胃后侧脑室注射加有过滤灭菌蓝墨水的P-MPPF)。各组小鼠灌胃相应药物,连续20 d。测定小鼠体长差异,采用ELISA法测定小鼠血清生长激素(GH)水平、脑组织5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)活性、PKA的含量和Gi/o蛋白的含量;Western blot法测定小鼠脑组织5-HT1AR蛋白的表达。(2)36只SD大鼠随机分成6组,分组及给药方式同小鼠,连续给药3 d后,采用WXL睡眠自动分析系统,分析大鼠睡眠时相差异。结果 (1)与空白对照组和蓝墨水组比较,用药组、Gi/o蛋白抑制剂+用药组、5-HT1AR抑制剂+用药组、阳性对照组小鼠体长均明显增长(P<0.01);与空白对照组比较,用药组和阳性对照组小鼠血清GH水平、5-HT1AR蛋白含量、Gi/o蛋白含量均明显升高(P<0.01),5-HT1AR活性升高(P<0.05),PKA含量明显降低(P<0.01);与蓝墨水组比较,用药组和阳性对照组小鼠血清GH水平明显升高(P<0.01),Gi/o蛋白含量、5-HT1AR活性升高(P<0.05),PKA含量明显降低(P<0.01);与Gi/o蛋白抑制剂+用药组和5-HT1AR抑制剂+用药组比较,用药组和阳性对照组小鼠血清GH水平、5-HT1AR蛋白含量均明显升高(P<0.01),5-HT1AR活性升高(P<0.05)。用药组与阳性对照组比较,小鼠体长、GH水平、5-HT1AR活性、PKA的含量、Gi/o蛋白含量和5-HT1AR蛋白含量差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)与空白对照组比较,用药组大鼠总睡眠时间明显增长(P<0.01);阳性对照组大鼠总睡眠时间增长(P<0.05)。与蓝墨水组比较,用药组大鼠总睡眠时间明显增长(P<0.01);阳性对照组大鼠总睡眠时间增长(P<0.05)。与Gi/o蛋白抑制剂+用药组和5-HT1AR抑制剂+用药组比较,用药组和阳性对照组大鼠总睡眠时间增长(P<0.05)。用药组与阳性对照组比较,大鼠总睡眠时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论酸枣仁提取物可以通过提高Gi/o蛋白的表达,使之通过cAMP-PKA途径促进5-HT1AR在脑内的含量和活性提高,还可延长慢波睡眠,进而促进GH的分泌发挥促进骨骼增长的生物学效应。

工作坊式“大学生生涯课程体验营”教学模式探索

工作坊式“大学生生涯课程体验营”教学模式在大学生职业发展与就业指导课程中的应用具有良好效果。“大学生生涯课程体验营”教学模式以工作坊平台为载体,以“大学生生涯课程体验营”为品牌,以工作坊式教学模式为抓手,形成大一到大四有机整合的递进式工作坊教学体系,变“突击式”教学为“持续性”教学。对工作坊式“大学生生涯课程体验营”教学模式的总体设计、实施过程、品牌建设、成效检验进行探讨,进一步提出改进措施,助推大学生职业发展与就业指导课程教学改革,创新教学模式。

隐含资本成本估计方法的适用性问题——以中国上市公司为例

隐含资本成本对于金融投资决策和资产估值有着极为重要的意义,隐含资本成本的测算方法具有避免标准资产定价模型估计公司层面资本成本的误差问题、不依赖于传统资产定价模型的设定以及信息含量丰富等特点。本文梳理和比较了隐含资本成本的八类估计方法,并采用中国上市公司的数据进行了实际测度。单变量的相关性检验,支持OJN、GGM、CT三种方法对隐含资本成本估测的效果更好的判断;多元回归分析显示,GGM和CT两种方法的计量结果较为理想,能更准确地反映风险,并可作为预期收益的无偏估计。