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CB30A-1井钻井液技术
1
作者 朱可尚 马惠芳 张瑞旺 《石油钻采工艺》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期24-26,共3页
CB30A - 1井是在埕岛海域钻探的 1口定向井 ,完钻井深 430 3 .88m ,其钻探目的是开发CB30区域古生界、太古界潜山油藏。针对该井所钻地层上部造浆性强、井壁坍塌严重 ,下部易发生井喷、井漏的特点 ,不同井段采用了不同的钻井液配方 ,上... CB30A - 1井是在埕岛海域钻探的 1口定向井 ,完钻井深 430 3 .88m ,其钻探目的是开发CB30区域古生界、太古界潜山油藏。针对该井所钻地层上部造浆性强、井壁坍塌严重 ,下部易发生井喷、井漏的特点 ,不同井段采用了不同的钻井液配方 ,上部地层选用聚合物钻井液体系 ;下部地层选用无固相聚合醇钻井液体系 ,利用欠平衡钻井技术钻至 42 2 0 .44m ,发生井漏 ,漏失速度为 48m3/h ,随后采用无封堵、保护储层钻井液顺利完钻。现场应用表明 ,聚合物钻井液体系抑制能力强 ,携岩和井眼稳定等性能较好 ;无固相聚合醇钻井液体系具有较好抗高温、润滑、防塌性能 ,在保护油气层方面具有独特作用。同时 ,无封堵、保护储层钻井液为开发同类地层积累了丰富经验。 展开更多
关键词 cb30A—1井 钻井液 聚合物 无固相聚合醇 定向钻井 井壁稳定 井漏
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无封堵钻井技术在埕岛油田CB30A-1井的应用
2
作者 朱可尚 《中国海上油气(工程)》 2004年第6期412-413,共2页
埕岛油田CB30A 1井在四开钻进至 4 2 2 0 4 4m时发生井漏 (漏失速度达 4 8m3/h) ,随后发生井涌。采用无封堵钻井技术 ,顺利地完成了该井四开钻进任务。文中介绍了无封堵钻井工艺及其在CB30A 1井的应用情况。
关键词 埕岛油田 钻井技术 封堵 井漏 井涌 钻井工艺 漏失 钻进 速度 应用情况
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miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制研究
3
作者 刘海英 曹天柱 崔自重 《四川医学》 CAS 2024年第7期709-715,共7页
目的探究miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制。方法体外培养人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃腺癌细胞(AGS)。RT-qPCR检测miR-30a-5p表达水平,Starbase数据库预测miR-30a-5p的表达水平及其与JAK1的潜在结合位点,双荧光素... 目的探究miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制。方法体外培养人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃腺癌细胞(AGS)。RT-qPCR检测miR-30a-5p表达水平,Starbase数据库预测miR-30a-5p的表达水平及其与JAK1的潜在结合位点,双荧光素酶报告实验验证miR-30a-5p对JAK1基因的靶向调控作用,免疫荧光检测自噬标志物LC3阳性细胞水平,WB检测JAK1和自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 Ⅱ/Ⅰ和p62)的表达水平。结果与GES-1组相比,AGS组细胞中miR-30a-5p表达水平显著降低;过表达miR-30a-5p后,AGS细胞中自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 Ⅱ/Ⅰ)表达水平以及自噬标志物LC3阳性细胞水平显著降低,p62蛋白的表达水平显著升高;miR-30a-5p与JAK1存在结合位点且靶向负调控JAK1;与miR-30a-5p过表达+oe-NC对照处理,miR-30a-5p过表达同时过表达JAK1处理后观察到AGS细胞中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平明显增加,p62蛋白水平明显降低,进一步的免疫荧光也观察到miR-30a-5p过表达+过表达JAK1后LC3荧光强度明显增加。结论miR-30a-5p靶向负调控JAK1蛋白的表达,抑制人胃腺癌AGS细胞自噬。 展开更多
关键词 胃腺癌 miR-30a-5p JAK1 AGS细胞 细胞自噬
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miR-30a-3p靶向NOD1对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响 被引量:3
4
作者 刘建花 雷大洲 +2 位作者 周凡 齐俊杰 李世勋 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期414-420,共7页
目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1... 目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1基因表达水平,荧光素酶报告检测miR-30a-3p和NOD1靶向关系,Western blot检测NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平,CCK8法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测LDH、CK、MDA、T-SOD水平。结果 miR-30a-3p表达水平随缺氧复氧处理时间增长而下降,NOD1基因表达水平随缺氧复氧处理时间增长而升高。在荧光素酶报告实验中,NOD1 WT+miR-30a-3p mimic荧光素酶活性显著低于NOD1 WT+NC组。与Ctrl组比较,H/R组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高;与H/R组比较,miR-30a-3p mimic组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平升高,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率降低,miR-30a-3p inhibitor组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、clcaspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高。结论 miR-30a-3p可靶向作用于NOD1,缓解心肌细胞缺氧复氧造成的损伤,其作用机制可能与调控NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 缺氧复氧损伤 心肌缺血再灌注 NOD1 miR-30a-3p
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NPHP3-AS1通过调控miR-30a-5p影响缺氧诱导的心肌细胞增殖及凋亡的研究 被引量:3
5
作者 王苗 王裕岱 +4 位作者 黄玉冰 陈芬 王圣 李斌 董小莉 《中国循证心血管医学杂志》 2020年第8期918-922,926,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA NPHP3-AS1)对缺氧诱导的心肌细胞增殖及凋亡的影响,及其对微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)的调控作用。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,缺氧处理心肌细胞建立细胞损伤模型,将缺氧处理的心肌细胞作为模型组。同... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA NPHP3-AS1)对缺氧诱导的心肌细胞增殖及凋亡的影响,及其对微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)的调控作用。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,缺氧处理心肌细胞建立细胞损伤模型,将缺氧处理的心肌细胞作为模型组。同时将正常培养的心肌细胞作为对照组。分别将si-NC、si-NPHP3-AS1、anti-miR-30a-5p、si-NPHP3-AS1与anti-miR-30a-5p转染至心肌细胞,随后进行缺氧处理,分别记作模型组+si-NC组、模型组+si-NPHP3-AS1组、模型组+anti-miR-30a-5p组、模型组+si-NPHP3-AS1+anti-miR-30a-5p组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NPHP3-AS1、miR-30a-5p的表达量;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证NPHP3-AS1、miR-30a-5p的靶向结合关系;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase3)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)的表达量。结果缺氧处理后,心肌细胞中NPHP3-AS1的表达量显著升高,G0-G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞凋亡率显著升高,Caspase3蛋白水平显著升高,Ki67蛋白水平显著降低(P均<0.05);干扰NPHP3-AS1的表达后,G0-G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高,细胞凋亡率显著降低,Caspase3蛋白水平显著降低,Ki67蛋白水平显著升高(P均<0.05);双荧光素酶报告实验证实NPHP3-AS1可靶向结合miR-30a-5p;干扰miR-30a-5p能减弱干扰NPHP3-AS1对缺氧诱导的心肌细胞增殖及凋亡的作用。结论干扰NPHP3-AS1可能通过上调miR-30a-5p的表达从而促进缺氧诱导的心肌细胞增殖及抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA NPHP3-AS1 miR-30a-5p 缺氧 心肌细胞
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猫眼草提取物通过miR-30a-5p/NF-κB抑制白介素-1β诱导结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 吴雄健 朱海燕 +2 位作者 胡滢 黄子倩 刘晓平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1890-1895,共6页
目的研究猫眼草提取物是否通过miR-30a-5p/核因子κB(NF-κB)调节白介素-1β(IL-1β)诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法将HT29细胞分为:NC组、IL-1β组、低剂量(2.5 mg·L^(-1))+IL-1β组、中剂量(5 mg·L^(-1))+IL-1... 目的研究猫眼草提取物是否通过miR-30a-5p/核因子κB(NF-κB)调节白介素-1β(IL-1β)诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法将HT29细胞分为:NC组、IL-1β组、低剂量(2.5 mg·L^(-1))+IL-1β组、中剂量(5 mg·L^(-1))+IL-1β组、高剂量(10 mg·L^(-1))+IL-1β组、miR-NC+IL-1β组、miR-30a-5p+IL-1β组、anti-miR-NC+高剂量+IL-1β组、anti-miR-30a-5p+高剂量+IL-1β组。采用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞增殖活性,克隆形成实验检测细胞克隆,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞蛋白的表达水平,qRT-PCR检测miR-30a-5p表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移及侵袭数量增多,miR-30a-5p表达水平减弱(均P<0.01)。与IL-1β组比较,低剂量+IL-1β组、中剂量+IL-1β组、高剂量+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移及侵袭数量降低,miR-30a-5p表达水平提升(均P<0.01);高剂量+IL-1β组中p-p65表达水平低于IL-1β组(P<0.01)。miR-30a-5p+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移和侵袭数量比miR-NC+IL-1β组降低(均P<0.01)。anti-miR-30a-5p+高剂量+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移和侵袭数量高于anti-miR-NC+高剂量+IL-1β组(均P<0.01)。结论猫眼草提取物通过上调miR-30a-5p、下调NF-κB信号通路活性,抑制IL-1β诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 猫眼草提取物 IL-1Β miR-30a-5p NF-ΚB 增殖 转移
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miR-30a-5p和NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响
7
作者 李爱明 刘克 +1 位作者 王园园 王乾 《武警医学》 CAS 2020年第7期595-600,共6页
目的研究miR-30a-5p和靶基因NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法收集2016-09至2019-03在保定市第一医院行手术切除治疗的非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织标本64例,QPCR和Western blot分别检测非小细... 目的研究miR-30a-5p和靶基因NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法收集2016-09至2019-03在保定市第一医院行手术切除治疗的非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织标本64例,QPCR和Western blot分别检测非小细胞肺癌组织样本和细胞中miR-30a-5p和NUAK1的表达;TargetScan网站预测miR-30a-5p与NUAK1间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验和Western blot进行验证;MTT和Transwell实验检测miR-30a-5p及联合过表达NUAK1对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果非小细胞肺癌组织中miR-30a-5p的相对表达量(0.33±0.14)低于癌旁组织(1.00±0.21),差异有统计学意义(t=21.237,P<0.05);非小细胞肺癌组织中NUAK1 mRNA表达(4.13±1.87)和蛋白表达(3.41±1.62)均高于癌旁组织(1.00±0.17、1.00±0.16),差异有统计学意义(t=13.335、11.844,P<0.05)。非小细胞肺癌细胞系H460、H1299、A549中miR-30a-5p表达量(0.35±0.03、0.51±0.05、0.28±0.03)低于人正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.00±0.11),差异有统计学意义(F=77.100,P<0.05);H460、H1299、A549细胞中NUAK1 mRNA相对表达量(2.98±0.30、2.39±0.24、3.42±0.36)和蛋白相对表达量(3.06±0.31、2.27±0.23、4.12±0.41)均显著高于BEAS-2B细胞(1.00±0.09、1.00±0.11),差异有统计学意义(F=46.660、63.070,P<0.05)。结论miR-30a-5p可通过靶向NUAK1抑制非小细胞肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭,提示miR-30a-5p和NUAK1可能成为一种新的临床诊断和治疗非小细胞肺癌的靶点。 展开更多
关键词 miR-30a-5p 新式激酶家族1 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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circ_WBSCR17通过调节miR-30a-5p/JAK1轴减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症反应
8
作者 董海芸 韩芳 +1 位作者 齐一舟 梅峰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1756-1762,1768,共8页
目的探讨circ_WBSCR17通过调节miR-30a-5p/JAK1轴对高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症的影响。方法将人肾小球系膜细胞HMCL分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖处理HMCL细胞)、HG组(30 mmol/L葡萄糖处理细胞)、si-NC组(30 mmol/L葡萄糖+转... 目的探讨circ_WBSCR17通过调节miR-30a-5p/JAK1轴对高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症的影响。方法将人肾小球系膜细胞HMCL分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖处理HMCL细胞)、HG组(30 mmol/L葡萄糖处理细胞)、si-NC组(30 mmol/L葡萄糖+转染si-NC)、si-circ_WBSCR17组(30 mmol/L葡萄糖+转染si-circ_WBSCR17)、si-circ_WBSCR17+inhibitor-NC组(30 mmol/L葡萄糖+si-circ_WBSCR17和inhibitor-NC共转染)、si-circ_WBSCR17+miR-30a-5p inhibitor组(30 mmol/L葡萄糖+si-circ_WBSCR17和miR-30a-5p inhibitor共转染);RT-qPCR检测细胞中circ_WBSCR17、miR-30a-5p的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-8表达水平;Western blot检测细胞中JAK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;荧光原位杂交(FISH)实验检测circ_WBSCR17的分布情况,双荧光素酶报告基因实验分别验证circ_WBSCR17和miR-30a-5p、JAK1的关系。结果与NG组比较,HG组HMCL细胞增殖能力降低,TNF-α、IL-6和IL-8水平、p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1、p-STAT3/STAT3、Bax、TGF-β1、FN、collagenIV、α-SMA蛋白表达升高(P<0.05);与HG组和si-NC组比较,si-circ_WBSCR17组HMCL细胞中miR-30a-5p表达、OD450值、PCNA表达升高,TNF-α、IL-6和IL-8水平、circ_WBSCR17、p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1、p-STAT3/STAT3、Bax、TGF-β1、FN、collagenIV、α-SMA表达降低(P<0.05);抑制miR-30a-5p减弱了敲低circ_WBSCR17对HMCL细胞增殖的促进作用,增强了细胞凋亡、细胞纤维化和炎症反应;FISH实验证实circ_WBSCR17主要分布在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验证实circ_WBSCR17、JAK1与miR-30a-5p存在靶向调控关系。结论敲低circ_WBSCR17可通过调节miR-30a-5p/JAK1轴,进而减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症。 展开更多
关键词 circ_WBSCR17 miR-30a-5p JAK1 人肾小球系膜细胞 纤维化 炎症反应
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血清miR-30a-5p通过靶向FOXD1对膝骨关节炎发展的影响 被引量:2
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作者 张丹龙 梁少博 +2 位作者 魏巍 庄岩 张堃 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第2期282-287,共6页
目的:探讨膝骨关节炎(KOA)患者血清miR-30a-5p水平变化及其临床意义。方法:收集2019年1月至2022年1月西安交通大学医学院附属红会医院创伤骨科收治的253例KOA活动期患者(KOA组)和209例非KOA志愿者(对照组)的临床资料进行前瞻性分析。其... 目的:探讨膝骨关节炎(KOA)患者血清miR-30a-5p水平变化及其临床意义。方法:收集2019年1月至2022年1月西安交通大学医学院附属红会医院创伤骨科收治的253例KOA活动期患者(KOA组)和209例非KOA志愿者(对照组)的临床资料进行前瞻性分析。其中20例KOA患者接受全膝关节置换,25例对照组采用选择性膝关节镜探查清理术获取滑膜组织。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测血清和滑液miR-30a-5p水平;采用western blotting法检测滑膜组织叉头框D1(FOXD1)蛋白表达。通过Spearman相关分析评估miR-30a-5p与Kellgren-Lawrence(K-L)分级、西安大略大学和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)、膝关节疼痛数字等级评定量表(NRS)评分以及炎症指标的相关性。结果:KOA组血清miR-30a-5p水平显著高于对照组[2.32(1.92~3.20)vs.1.08(0.82~1.48),Z=-12.663,P<0.001];受试者工作特征曲线(ROC)分析的灵敏度和特异性分别为83.80%和78.0%;KOA患者血清miR-30a-5p水平与WOMAC评分、膝关节疼痛NRS评分以及白细胞计数(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)均呈正相关关系(P<0.05)。78例首次诊断KOA患者治疗4周后血清miR-30a-5p水平较基线值显著降低(P<0.001)。另外20例KOA患者滑膜组织中FOXD1蛋白表达较对照组下调(P<0.001),且血清miR-30a-5p水平与滑膜组织中FOXD1蛋白表达呈负相关关系(P<0.001),与滑液中miR-30a-5p水平呈正相关关系(P<0.001)。结论:血清miR-30a-5p水平的升高可能通过抑制FOXD1促进KOA的进展,血清miR-30a-5p可能成为KOA诊断和评估的潜在指标。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 血清miR-30a-5p 叉头框D1蛋白 滑液 疾病进展
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miR-30a-5p/MTA1轴与喉鳞状细胞癌细胞Hep2生物学特性的相关性研究 被引量:1
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作者 裴婷 张海利 +2 位作者 陈英 史聪 樊慧娟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第4期545-549,共5页
目的探讨miR-30a-5p通过靶向调控MTA1对喉鳞癌细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响。方法通过生物信息技术预测miR-30a-5p靶基因MTA1,并采用实时荧光定量PCR和双荧光素酶报告实验验证。将miR-30a-5p模拟物(mimics)和对照组(NC)分别转染至... 目的探讨miR-30a-5p通过靶向调控MTA1对喉鳞癌细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响。方法通过生物信息技术预测miR-30a-5p靶基因MTA1,并采用实时荧光定量PCR和双荧光素酶报告实验验证。将miR-30a-5p模拟物(mimics)和对照组(NC)分别转染至对数期的喉鳞癌细胞株Hep2中。利用CCK-8实验检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果实时荧光定量PCR实验结果显示,实验组和对照组中转染后表达水平分别为(12.62±0.97)和(1.04±0.32),差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-30a-5p模拟物+pGL4.10和+pGL 4.73分别与其野生型和突变型比较表达水平为(0.41±0.06)和(0.91±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。在CCK-8实验结果显示,实验组比对照组24、48、72 h的吸光度值相对倍数低,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell细胞迁移实验结果显示,实验组和对照组细胞数目分别为(207.67±7.23)个和(369.00±41.22)个,差异有统计学意义(P<0.05)。在流式细胞术检测细胞周期结果示,实验组G1期、S期和G2期均较miR-NC对照组小,细胞周期阻滞;细胞凋亡结果示,实验组和对照组细胞凋亡率分别为(22.61±5.70)%和(4.52±2.12)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-30a-5p/MTA1轴可能对喉鳞状细胞癌的发生机制产生一定的阻碍作用。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 miR-30a-5p MTA1 增殖 迁移
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miR-30a-5p通过靶向下调ATF1提高非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性
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作者 郭昱言 王军利 +6 位作者 陈阿倩 卫鑫 柯悦 包兴 李宇星 宋丽萍 马红兵 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第13期2331-2336,共6页
目的:探索miR-30a-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞的放射增敏效应及其相关机制,为提高NSCLC放射敏感性提供理论依据。方法:采用qRT-PCR检测人正常肺上皮细胞株BEAS-2B、人肺癌细胞株A549、H460中miR-30a-5... 目的:探索miR-30a-5p对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞的放射增敏效应及其相关机制,为提高NSCLC放射敏感性提供理论依据。方法:采用qRT-PCR检测人正常肺上皮细胞株BEAS-2B、人肺癌细胞株A549、H460中miR-30a-5p表达情况;应用miR-30a-5p agomir、antagomir及对照转染A549细胞株,联合放射,检测miR-30a-5p对A549细胞株的放射增敏效应;通过生物信息学预测并筛选miR-30a-5p的靶基因,采用双荧光素酶报告基因检测进行验证;siATF1、miR-30a-5p agomir及siATF1+miR-30a-5p agomir转染A549细胞,通过qRT-PCR、Western Blotting检测靶基因表达与miR-30a-5p的关系,并通过平板克隆形成实验检测其对A549细胞株的放射增敏效应。结果:miR-30a-5p在A549和H460细胞株中表达均低于BEAS-2B细胞株(P<0.001);miR-30a-5p agomir转染联合放射,A549细胞放射生物学参数D_(0)、D_(q)、N较agomir NC组降低(均为P<0.05)。靶基因预测及验证结果显示,miR-30a-5p可以与ATF1的3'UTR特异性结合,ATF1是miR-30a-5p的一个靶基因,过表达miR-30a-5p可下调ATF1表达。siATF1、miR-30a-5p agomir及siATF1+miR-30a-5p agomir转染A549细胞联合照射,A549细胞克隆形成率及放射生物学参数D_(0)、D_(q)、N均低于对照组(均为P<0.05)。结论:miR-30a-5p通过靶向下调ATF1表达,在A549细胞中发挥放射增敏效应。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-30a-5p ATF1 放射敏感性
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LncRNA HIF1A-AS2 accelerates malignant phenotypes of renal carcinoma by modulating miR-30a-5p/SOX4 axis as a ceRNA 被引量:3
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作者 Mingwei Chen Xuedong Wei +4 位作者 Xiu Shi Le Lu Guangbo Zhang Yuhua Huang Jianquan Hou 《Cancer Biology & Medicine》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期587-603,共17页
Objective:Several reports have proposed that lnc RNAs,as potential biomarkers,participate in the progression and growth of malignant tumors.HIF1 A-AS2 is a novel lnc RNA and potential biomarker,involved in the genesis... Objective:Several reports have proposed that lnc RNAs,as potential biomarkers,participate in the progression and growth of malignant tumors.HIF1 A-AS2 is a novel lnc RNA and potential biomarker,involved in the genesis and development of carcinomas.However,the molecular mechanism of HIF1 A-AS2 in renal carcinoma is unclear.Methods:The relative expression levels of HIF1 A-AS2 and miR-30 a-5 p were detected using RT-qPCR in renal carcinoma tissues and cell lines.Using loss-of-function and overexpression,the biological effects of HIF1 A-AS2 and miR-30 a-5 p in kidney carcinoma progression were characterized.Dual luciferase reporter gene analysis and Western blot were used to detect the potential mechanism of HIF1 A-AS2 in renal carcinomas.Results:HIF1 A-AS2 was upregulated in kidney carcinoma tissues when compared with para-carcinoma tissues(P<0.05).In addition,tumor size,tumor node mestastasis stage and differentiation were identified as being closely associated with HIF1 A-AS2 expression(P<0.05).Knockdown or overexpression of HIF1 A-AS2 either restrained or promoted the malignant phenotype and WNT/β-catenin signaling in renal carcinoma cells(P<0.05).Mi R-30 a-5 p was downregulated in renal cancers and partially reversed HIF1 A-AS2 functions in malignant renal tumor cells.HIF1 A-AS2 acted as a micro RNA sponge that actively regulated the relative expression of SOX4 in sponging miR-30 a-5 p and subsequently increased the malignant phenotypes of renal carcinomas.HIF1 A-AS2 showed a carcinogenic effect and miR-30 a-5 p acted as an antagonist of the anti-oncogene effects in the pathogenesis of renal carcinomas.Conclusions:The HIF1 A-AS2-miR-30 a-5 p-SOX4 axis was associated with the malignant progression and development of renal carcinoma.The relative expression of HIF1 A-AS2 was negatively correlated with the expression of miR-30 a-5 p,and was closely correlated with SOX4 mRNA levels in renal cancers. 展开更多
关键词 HIF1a-AS2 SOX4 miR-30a-5p kidney carcinoma ceRNA
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miRNA sequencing analysis of healthy and atretic follicles of chickens revealed that miR-30a-5p inhibits granulosa cell death via targeting Beclin1 被引量:2
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作者 Haorong He Dongmei Li +14 位作者 Yongtong Tian Qinyao Wei Felix Kwame Amevor Congjiao Sun Chunlin Yu Chaowu Yang Huarui Du Xiaosong Jiang Menggen Ma Can Cui Zhichao Zhang Kai Tian Yao Zhang Qing Zhu Huadong Yin 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2022年第5期1351-1372,共22页
Background:The egg production performance of chickens is affected by many factors,including genetics,nutrition and environmental conditions.These factors all play a role in egg production by affecting the development ... Background:The egg production performance of chickens is affected by many factors,including genetics,nutrition and environmental conditions.These factors all play a role in egg production by affecting the development of follicles.MicroRNAs(miRNAs)are important non-coding RNAs that regulate biological processes by targeting genes or other non-coding RNAs after transcription.In the animal reproduction process,miRNA is known to affect the development and atresia of follicles by regulating apoptosis and autophagy of granulosa cells(GCs).Results:In this study,we identified potential miRNAs in the atretic follicles of broody chickens and unatretic follicles of healthy chickens.We identified gga-miR-30a-5p in 50 differentially expressed miRNAs and found that gga-miR-30a-5p played a regulatory role in the development of chicken follicles.The function of miR-30a-5p was explored through the transfection test of miR-30a-5p inhibitor and miR-30a-5p mimics.In the study,we used qPCR,western blot and flow cytometry to detect granulosa cell apoptosis,autophagy and steroid hormone synthesis.Confocal microscopy and transmission electron microscopy are used for the observation of autophagolysosomes.The levels of estradiol(E2),progesterone(P4),malondialdehyde(MDA)and superoxide dismutase(SOD)were detected by ELISA.The results showed that miR-30a-5p showed a negative effect on autophagy and apoptosis of granulosa cells,and also contributed in steroid hormones and reactive oxygen species(ROS)production.In addition,the results obtained from the biosynthesis and dual luciferase experiments showed that Beclin1 was the target gene of miR-30a-5p.The rescue experiment conducted further confirmed that Beclin1 belongs to the miR-30a-5p regulatory pathway.Conclusions:In summary,after deep miRNA sequencing on healthy and atretic follicles,the results indicated that miR-30a-5p inhibits granulosa cell death by inhibiting Beclin1. 展开更多
关键词 Apoptosis Autophagy BECLIN1 Chicken granulosa cells MiR-30a-5p Oxidative stress RNa-seq Steroid hormone
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基于HT48R30A-1的自动寻星系统
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作者 高海东 钱江 《微计算机信息》 北大核心 2008年第29期116-118,共3页
本文介绍了一种基于HT48R30A-1的自动寻星系统,并详细阐述了系统的整体设计思路。论文从硬件设计、软件设计、硬软件部分同机械结构的合理适配等几个方面做了论述,并就设计过程中遇到的一些问题及解决方法做了进一步描述。
关键词 卫星接收机 HT48R30a-1 霍尔器件 DISEQC
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MicroRNA-30a-5p靶向Beclin1抑制自噬减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤 被引量:1
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作者 郑学松 胡善策 冯广才 《实用药物与临床》 CAS 2019年第7期684-692,共9页
目的探究微小型RNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)对胰腺泡细胞损伤的影响及作用机制.方法不同浓度牛胆酸钠诱导AR42J细胞损伤,取最佳用药浓度,建立胰腺泡损伤模型.细胞分为Control组、Model组、mimicmock组及miR-30a-5p mimic组... 目的探究微小型RNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)对胰腺泡细胞损伤的影响及作用机制.方法不同浓度牛胆酸钠诱导AR42J细胞损伤,取最佳用药浓度,建立胰腺泡损伤模型.细胞分为Control组、Model组、mimicmock组及miR-30a-5p mimic组,牛胆酸钠及miR-30a-5p mimic处理细胞后,RT-PCR检测miR-30a-5p mRNA水平,MTT检测细胞存活,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测脂肪酶及淀粉酶活性,ELISA检测多种炎症因子的浓度,免疫印记检测自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达.生物信息预测miR-30a-5p和Beclin1的靶向关系,通过荧光素酶报告实验验证.pcDNA Beclin1(pc-Beclin1)及miR-30a-5p mimic转染经牛胆酸钠处理的AR42J细胞,检测细胞存活、凋亡、脂肪酶淀粉酶活性、自噬相关蛋白表达及炎症因子浓度.结果500μmol/L牛胆酸钠处理AR42J细胞.miR-30a-5p mimic可显著提高Model组AR42J细胞中miR-30a-5p的mRNA水平及细胞存活率,降低凋亡细胞百分比、脂肪酶淀粉酶活性及细胞培养上清中炎症因子的浓度.同时,miR-30a-5p mimic可显著降低Model组AR42J细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及Beclin1表达,提高p62、p-P13K、p-Akt及p-mTOR表达.miR-30a-5p mimic显著降低Beclin1wt的荧光酶活性.pc-Beclin1显著上调Beclin1,提高LC3表达,并显著减弱miR-30a-5pmimic对AR42J细胞的促增殖抗凋亡作用及对炎症反应的抑制作用.结论miR-30a-5p通过靶向下调Beclin1,减轻牛胆酸钠诱导的胰腺泡细胞损伤. 展开更多
关键词 miR-30a-5p BECLIN1 胰腺泡细胞损伤 自噬
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MiR-30a-3p靶基因的预测与验证 被引量:1
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作者 孙晓娈 姚元庆 +2 位作者 尹国武 延佳佳 朱晓明 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期671-674,共4页
目的:预测和验证miR-30a-3p的靶基因。方法:利用生物信息学方法预测miR-30a-3p的靶基因;扩增靶基因3'UTR区,与pmirGLO质粒连接构建靶基因融合表达载体后与miR-30a-3p mimics共同转染到人正常滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中,利用双荧... 目的:预测和验证miR-30a-3p的靶基因。方法:利用生物信息学方法预测miR-30a-3p的靶基因;扩增靶基因3'UTR区,与pmirGLO质粒连接构建靶基因融合表达载体后与miR-30a-3p mimics共同转染到人正常滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-3p与靶基因的靶向关系;在HTR-8/SVneo细胞中转染miR-30a-3p mimics,利用Western Blot实验检测靶蛋白表达水平。结果:生物信息学方法预测结果显示胰岛素样生长因子-1(IGF-1)为miR-30a-3p靶基因之一;双荧光素酶报告基因实验显示,IGF-1基因3'UTR区中含有明确的miR-30a-3p结合位点;Western Blot实验结果显示HTR-8/SVneo细胞转染miR-30a-3p mimics后,IGF-1蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论:miR-30a-3p与IGF-1有确切的靶向关系,miR-30a-3p能够负性调控IGF-1蛋白水平的表达。 展开更多
关键词 微小RNA miR-30a-3p 胰岛素样生长因子-1 双荧光素酶报告基因实验
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miR⁃30a⁃5p靶向与调控SNAIL1抑制人胃癌细胞BGC⁃823的迁移 被引量:2
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作者 李欣 张富蕊 +6 位作者 周文淼 张乐乐 施天怡 张震 刘昆梅 韩学波 郭乐 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期438-447,共10页
已有研究表明,miR-30a-5p在胃癌中发挥抑癌基因的作用,抑制胃癌细胞的增殖与侵袭,但其抑制胃癌发生发展的机制尚不清楚。本文研究miR-30a-5p如何靶向调控SNAIL 1,进而影响人胃癌细胞BGC-823的迁移。通过qRT-PCR检测和TCGA数据库分析发现... 已有研究表明,miR-30a-5p在胃癌中发挥抑癌基因的作用,抑制胃癌细胞的增殖与侵袭,但其抑制胃癌发生发展的机制尚不清楚。本文研究miR-30a-5p如何靶向调控SNAIL 1,进而影响人胃癌细胞BGC-823的迁移。通过qRT-PCR检测和TCGA数据库分析发现,miR-30a-5p的表达水平在胃癌组织与胃癌细胞BGC-823中均降低。利用划痕实验和Transwell实验检测发现,在BGC-823细胞中转染miR-30a-5p mimics过表达miR-30a-5p后细胞迁移和侵袭明显被抑制,而转染miR-30a-5p inhibitor降低miR-30a-5p表达水平时细胞迁移和侵袭能力提高。qRT-PCR和Western印迹及免疫荧光检测发现,过表达miR-30a-5p细胞中波形蛋白(vimentin)和N-钙黏着蛋白(N-cadherin)的mRNA及蛋白质表达水平降低,而E-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平升高。在miR-30a-5p inhibitor组中结果恰恰相反。通过生物信息学预测、双荧光素酶基因报告、Western印迹及免疫荧光验证SNAIL 1是miR-30a-5p作用的靶基因。在过表达miR-30a-5p的BGC-823细胞中进一步过表达SNAIL 1,可以逆转miR-30a-5p的作用。该研究表明,miR-30a-5p可通过负调控靶基因SNAIL 1的表达,进而抑制BGC-823胃癌细胞的迁移。本研究将为miR-30a-5p在胃癌发生发展中的作用机制提供理论依据,并有望为胃癌治疗提供新靶点和生物标志物。 展开更多
关键词 胃癌 miR-30a-5p SNAIL 1 迁移
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-19.9~99.9℃调功式温控电路
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作者 江雪山 《家庭电子》 2004年第7期31-32,共2页
本文介绍的电路使用HT48R30A—l单片机制作的-19.9—99.9℃调功式温控电路,其原理如图1所示。该单片机具有ROM程序空间2k,端口也比较多,数码管的位驱和笔段驱动都是直接由单片机端口担任,因此,外部芯片使用相对就少了,仅仅需要... 本文介绍的电路使用HT48R30A—l单片机制作的-19.9—99.9℃调功式温控电路,其原理如图1所示。该单片机具有ROM程序空间2k,端口也比较多,数码管的位驱和笔段驱动都是直接由单片机端口担任,因此,外部芯片使用相对就少了,仅仅需要一只电存储器就可以。 展开更多
关键词 HT48R30a-1 单片机 温度测量 调功式温控电路 电路原理
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舒筋接骨汤调控微小RNA-30a-5p/Sprouty1基因对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响
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作者 王均动 郑胜 王功国 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2019年第2期155-160,共6页
目的 探讨舒筋接骨汤对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖和成骨分化能力的影响及其可能作用机制.方法 培养hMSCs,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度舒筋接骨汤生药和下调Sprouty1对细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测hMSCs中微小RN... 目的 探讨舒筋接骨汤对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖和成骨分化能力的影响及其可能作用机制.方法 培养hMSCs,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度舒筋接骨汤生药和下调Sprouty1对细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测hMSCs中微小RNA?30a?5p(miR?30a?5p)表达水平,RT?qPCR和免疫印迹法检测不同分组细胞中Sprouty1及核心结合蛋白因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)mRNA和蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR?30a?5p靶向调控Sprouty1的作用.结果 舒筋接骨汤呈浓度依赖性促进hMSCs增殖,1 mg/ml时促进细胞增殖效果最佳;与对照组比较,舒筋接骨汤处理可明显促进hMSCs中miR30a?5p及RUNX2、OSX mRNA和蛋白表达(P<0.05),抑制Sprouty1 mRNA和蛋白表达(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示miR?30a?5p靶向负调控Sprouty1的表达;下调Sprouty1促进hMSCs增殖及细胞中OSX、RUNX2 mRNA和蛋白表达.结论 舒筋接骨汤可能通过调控miR?30a?5p/Sprouty1基因表达,促进hMSCs增殖和成骨分化. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 舒筋接骨汤 微小RNa-30a-5p Sprouty1
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miR-30a-3p靶向ANXA1调控EB病毒阳性皮肌炎患者炎症反应的实验研究 被引量:4
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作者 徐翔峰 邬燕莺 +1 位作者 李佳佳 陆瑶 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期466-474,共9页
皮肌炎(Dermatomyositis,DM)是一种主要影响皮肤和肌肉的自身免疫性疾病,EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染可能在皮肌炎的发生扮演着重要的角色。为了探讨miR-30a-3p通过靶向膜联蛋白A1(Annexin A1,ANXA1)调控EBV阳性皮肌炎患者炎症... 皮肌炎(Dermatomyositis,DM)是一种主要影响皮肤和肌肉的自身免疫性疾病,EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染可能在皮肌炎的发生扮演着重要的角色。为了探讨miR-30a-3p通过靶向膜联蛋白A1(Annexin A1,ANXA1)调控EBV阳性皮肌炎患者炎症反应的机制,本研究通过qRT-PCR检测外周血样本和外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-30a-3p和ANXA1 mRNA的表达;通过ELISA分析外周血样本和PBMCs中相关炎症因子(IL-1β、IL-17、TNF-α)的表达;通过生物信息学软件预测miR-30a-3p的靶基因并通过双荧光素酶报告实验确定二者之间的结合作用。结果显示:与对照组相比,在皮肌炎患者外周血样本中miR-30a-3p、IL-1β、IL-17、TNF-α表达显著上调(P<0.05);与对照组相比,EBV组中miR-30a-3p、IL-1β、IL-17、TNF-α表达显著上调(P<0.05);与对照组相比,miRNA mimics组中miR-30a-3p、IL-1β、IL-17、TNF-α表达显著上调(P<0.05);生物信息学分析显示ANXA1是miR-30a-3p的靶标,与对照组相比,miRNA mimics组miR-30a-3p可以与ANXA13’UTR区域结合并特异性抑制ANXA1的表达;与oe-NC+miRNA mimics组相比,在oe-ANXA1+miRNA mimics组中ANXA1的表达是可以挽救miR-30a-3p所抑制的ANXA1表达,进而抑制PBMCs中相关炎症因子的表达。从而得出结论:miR-30a-3p通过靶向抑制ANXA1表达,进而促进PBMCs中相关炎症因子的表达以及皮肌炎炎症反应的发生。 展开更多
关键词 miR-30a-3p 膜联蛋白A1(ANXA1) 外周血单核细胞(PBMCs) 炎症因子 皮肌炎
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