期刊文献+
共找到20篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
拟南芥转录因子CBF2的克隆与生物信息学分析 被引量:7
1
作者 申鹏 毛娟 +1 位作者 刘爱平 陈佰鸿 《中国农学通报》 CSCD 2014年第4期90-95,共6页
本研究旨在克隆转录因子CBF2并对其进行生物信息学分析得到该基因相关信息。试验以拟南芥基因组DNA为模板,根据GenBank中拟南芥转录因子CBF2(FJ491243.1)已知序列设计引物,回收扩增的目的片段与T-easy载体连接后转入大肠杆菌(E.coli DH5... 本研究旨在克隆转录因子CBF2并对其进行生物信息学分析得到该基因相关信息。试验以拟南芥基因组DNA为模板,根据GenBank中拟南芥转录因子CBF2(FJ491243.1)已知序列设计引物,回收扩增的目的片段与T-easy载体连接后转入大肠杆菌(E.coli DH5α),经蓝白斑筛选后提取重组体的质粒,经滞后筛选、PCR、酶切鉴定无误后进行测序。经生物信息学分析,该基因全长651 bp,其中编码区长648 bp,编码216个氨基酸,其蛋白的分子式为C1056H1623N293O333S16,相对分子质量为24.26 kDa,等电点为5.00,该蛋白为亲水性非分泌型蛋白,无信号肽存在;其蛋白质二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规卷曲为主。肽链可能含有9处丝氨酸磷酸化位点,6处苏氨酸磷酸化位点,以及2处酪氨酸磷酸化位点。本研究通过对CBF2基因的生物信息学分析,获得了该基因的相关信息,并与已有研究结果进行比对分析,推测该基因在植物抗逆过程中有重要的作用。 展开更多
关键词 拟南芥 转录因子 cbf2 克隆 生物信息学
下载PDF
棉花GbCBF2基因的克隆、互补表达载体的构建及遗传转化 被引量:3
2
作者 孔丽颖 李翔 +2 位作者 李才运 刘晓东 李月 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期40-45,共6页
为研究棉花CBF2基因在植物抗逆中的作用,构建了p CAMBIA1300-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T植物互补表达载体,并对拟南芥cbf2突变体进行遗传转化。以新海16 c DNA为材料,采用PCR的方法克隆4个棉花CBF2基因,同时克隆拟南芥CBF2基因启动子At ... 为研究棉花CBF2基因在植物抗逆中的作用,构建了p CAMBIA1300-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T植物互补表达载体,并对拟南芥cbf2突变体进行遗传转化。以新海16 c DNA为材料,采用PCR的方法克隆4个棉花CBF2基因,同时克隆拟南芥CBF2基因启动子At CBF2P和终止子At CBF2T,并将这些基因与p Bluescript SK载体连接,构建p Bluescript SK-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T中间过渡载体,用SacⅠ和Bam HⅠ双酶切中间载体,获得At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T核心片段,将此片段插入到p CAMBIA1300表达载体中,构建p CAMBIA1300-At CBF2P-Gb CBF2-At CBF2T植物互补表达载体。以拟南芥cbf2突变体为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化,获得转棉花CBF2基因群体。获得转基因株系后,将为筛选出棉花的CBF2抗冻负调控基因及棉花抗逆分子育种奠定基础。 展开更多
关键词 棉花 cbf2基因 互补表达载体 遗传转化
下载PDF
拟南芥CBF2基因的抗旱性研究 被引量:4
3
作者 李新玲 徐香玲 王全伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期96-99,103,共5页
以拟南芥为材料,根据已报道的序列设计引物克隆了CBF2基因及rd29A基因启动子,并构建了植物表达载体pBI-rd-cbf,用以转化烟草。转基因烟草的Northern杂交检测显示,30%PEG诱导条件下CBF2基因在诱导30 min之后持续较高的表达水平,且表达水... 以拟南芥为材料,根据已报道的序列设计引物克隆了CBF2基因及rd29A基因启动子,并构建了植物表达载体pBI-rd-cbf,用以转化烟草。转基因烟草的Northern杂交检测显示,30%PEG诱导条件下CBF2基因在诱导30 min之后持续较高的表达水平,且表达水平受胁迫诱导程度的影响。抗旱生理指标测定显示,干旱条件下转基因烟草植株的脯氨酸含量迅速增高,远超于野生型;而丙二醛含量的增长幅度要比野生型植株小很多,且随着胁迫时间的延长,转基因植株体内的丙二醛含量逐步趋于稳定。试验证明,CBF2基因在提高农作物的抗旱性方面具有极大的利用价值。 展开更多
关键词 拟南芥cbf2基因 转基因烟草 PEG 抗旱性
下载PDF
冷相关转录因子CBF2基因的克隆及其植物表达载体的构建 被引量:2
4
作者 刘俊 蔡平钟 +4 位作者 马林 张志雄 向跃武 王闵霞 张志勇 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期428-432,共5页
从拟南芥Columbia基因组DNA中分别克隆了CBF2基因和低温诱导型启动子Rd29A。测序结果显示:克隆的CBF2基因长725 bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性为99.8%;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序... 从拟南芥Columbia基因组DNA中分别克隆了CBF2基因和低温诱导型启动子Rd29A。测序结果显示:克隆的CBF2基因长725 bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性为99.8%;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序列比较,其核苷酸同源性为99.5%。以双元载体pCAMBIA1301为基础,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-CBF2,为利用CBF2基因提高植物的耐寒性创造了条件。 展开更多
关键词 cbf2 启动子 克隆 双酶切 植物表达载体
下载PDF
转CBF2基因番茄抗NaCl胁迫研究 被引量:3
5
作者 李新玲 徐香玲 张月学 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第12期160-162,共3页
为明确CBF2基因过量表达对提高植物抗盐胁迫的作用,对NaCl胁迫下的转基因番茄株系进行了分子检测和生理特性分析。结果表明CBF2基因过量表达能够提高转基因番茄植株的耐NaCl能力,表现为在含有150 mmol/L和300 mmol/L NaCl的MS培养基上,... 为明确CBF2基因过量表达对提高植物抗盐胁迫的作用,对NaCl胁迫下的转基因番茄株系进行了分子检测和生理特性分析。结果表明CBF2基因过量表达能够提高转基因番茄植株的耐NaCl能力,表现为在含有150 mmol/L和300 mmol/L NaCl的MS培养基上,转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系,在生理生化特性上表现为转基因番茄的可溶性蛋白含量和过氧化物酶(POD)活性比非转基因株系明显增加,而丙二醛(MDA)含量明显低于非转基因株系。 展开更多
关键词 转基因番茄 cbf2基因 NACL胁迫 生理特性
下载PDF
两种拟南芥CBF2基因突变体的鉴定与分析 被引量:1
6
作者 刘晓东 刘超 +3 位作者 焦彬彬 代培红 苏秀娟 李月 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期19-25,共7页
低温是主要的逆境胁迫之一,限制了作物的地理分布和产量。筛选理想的抗冻靶基因用于分子育种对于稳定农业生产具有重要意义。CBF调节子在植物抗冻反应中扮演主要的角色,CBF2是CBF调节子的组成成分之一,在抗冻反应中扮演负调控的作用。采... 低温是主要的逆境胁迫之一,限制了作物的地理分布和产量。筛选理想的抗冻靶基因用于分子育种对于稳定农业生产具有重要意义。CBF调节子在植物抗冻反应中扮演主要的角色,CBF2是CBF调节子的组成成分之一,在抗冻反应中扮演负调控的作用。采用qRT-PCR和常规农艺性状测定法对2种CBF2基因突变体cbf2-1和cbf2-2进行了多项指标的鉴定,结果发现在这2种突变体中CBF2基因的表达存在不同程度的缺陷,cbf2-1中CBF2基因受低温诱导表达,但表达量与对照相比,明显下降;而cbf2-2中CBF2基因诱导表达的效应完全丧失。抗冻性检测结果显示CBF2基因的表达量越低,其突变体植株的抗冻性越强,同时冷胁迫后冷响应的下游基因表达量也越高,更重要的是,虽然这2种CBF2基因突变体抗冻性明显增强,但与野生型植株相比,其开花时间和单株种子产量并没有明显变化。以上结果表明CBF2是一种可以利用基因组编辑技术进行作物抗冻育种的理想候选靶基因,可以利用最新的基因组编辑技术进行作物抗冻育种研究。 展开更多
关键词 拟南芥 cbf2 抗冻 负调控
下载PDF
与逆境胁迫相关的rd29A启动子和CBF2基因的克隆及其表达载体构建 被引量:1
7
作者 李新玲 杨传平 +1 位作者 徐香玲 曲敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第13期3828-3829,3853,共3页
以拟南芥为材料,通过PCR扩增成功地克隆了逆境诱导型启动子rd29A和CBF2转录因子。序列分析表明,951bp的rd29A序列包含完整的DRE、ABRE等4种保守顺式作用元件;651 bp的CBF2基因包含了完整的AP2 DNA结合域以及特异的氨基酸序列PKKPA-GRKKF... 以拟南芥为材料,通过PCR扩增成功地克隆了逆境诱导型启动子rd29A和CBF2转录因子。序列分析表明,951bp的rd29A序列包含完整的DRE、ABRE等4种保守顺式作用元件;651 bp的CBF2基因包含了完整的AP2 DNA结合域以及特异的氨基酸序列PKKPA-GRKKFRETRHP和FADSAWR。同时,构建了由rd29A启动子调控的CBF2基因的植物表达载体。 展开更多
关键词 逆境胁迫 RD29A启动子 cbf2基因 植物表达载体
下载PDF
表达二穗短柄草CBF2基因拟南芥抗旱性分析 被引量:4
8
作者 张彦妮 焦孟月 刘奕佳 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1518-1525,共8页
以表达二穗短柄草(Brachypodium distachyon)CBF2基因的拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,通过模拟干旱胁迫分析其种子和幼苗对甘露醇渗透胁迫的响应和成苗对盆栽条件下水分胁迫的响应。结果表明,渗透压为-0.62MPa时种子萌发率开始下... 以表达二穗短柄草(Brachypodium distachyon)CBF2基因的拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,通过模拟干旱胁迫分析其种子和幼苗对甘露醇渗透胁迫的响应和成苗对盆栽条件下水分胁迫的响应。结果表明,渗透压为-0.62MPa时种子萌发率开始下降,转基因拟南芥种子萌发率略高于野生拟南芥,但差异不显著(P>0.05)。以根的增长量作为评价幼苗抗旱性的主要标准,当渗透压小于-0.37 MPa时,根长增长量随着胁迫强度的增加而明显减小,转基因株系根长增长量始终显著高于野生型拟南芥(P<0.05)。拟南芥成苗干旱胁迫至25d,野生拟南芥成活率为11.7%,转基因植株平均成活率为41.6%;随着干旱胁迫时间的延长,转基因拟南芥过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性均显著高于野生植株,丙二醛含量及相对电导率显著低于野生植株。结果表明,二穗短柄草CBF2基因提高了拟南芥幼苗及成苗的抗旱性。 展开更多
关键词 cbf2基因 二穗短柄草 拟南芥 抗旱性
下载PDF
过量表达棉花CBF2基因提高转基因拟南芥抗旱耐盐能力 被引量:6
9
作者 陈芸 郑勇 +2 位作者 刘霞 任羽 马刘峰 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期888-900,共13页
CBF/DREB是一类植物中特有的转录因子,在植物抵抗逆境胁迫过程中发挥重要功能。本研究从陆地棉(Gossypium hirsutum L.)Coker 312中克隆获得1个棉花CBF/DREB基因,命名为Gh CBF2,该基因编码一个由216个氨基酸组成的CBF蛋白。序列分析结... CBF/DREB是一类植物中特有的转录因子,在植物抵抗逆境胁迫过程中发挥重要功能。本研究从陆地棉(Gossypium hirsutum L.)Coker 312中克隆获得1个棉花CBF/DREB基因,命名为Gh CBF2,该基因编码一个由216个氨基酸组成的CBF蛋白。序列分析结果显示,Gh CBF2与其他植物的CBF蛋白类似,含有AP2转录因子典型的保守结构域。干旱或高盐胁迫处理明显增加了Gh CBF2基因的表达量。亚细胞定位分析结果发现Gh CBF2定位在细胞核中。将Gh CBF2基因构建到由35S启动子调控的植物表达载体p MD上并转化拟南芥(Arabidopsis thaliana L.),结果表明,在干旱和盐胁迫条件下,过量表达Gh CBF2基因拟南芥的成活率显著高于野生型,并且游离脯氨酸和可溶性糖含量也高于野生型,说明转Gh CBF2基因提高了拟南芥的耐盐抗旱能力。采用实时荧光定量PCR方法分析胁迫相关标记基因COR15A、RD29A和ERD6的表达情况,结果显示转基因株系中的表达量显著高于野生型,说明Gh CBF2参与调控拟南芥干旱和盐胁迫相关基因的表达。 展开更多
关键词 棉花 CBF基因 转基因拟南芥 干旱胁迫 盐胁迫
下载PDF
扁桃CBF2基因的克隆及原核表达
10
作者 郭淑朋 李疆 +3 位作者 张亮 李鹏 罗淑萍 陈婷婷 《中国农学通报》 2018年第13期31-37,共7页
为进一步研究扁桃CBF2目的蛋白功能,探明CBF2转录因子在扁桃中的抗寒分子机制,以新疆栽培扁桃(Amygdalus communis L.)‘双软’叶片为材料,通过PCR技术从基因组DNA中克隆CBF2基因,命名为AcCBF2,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+... 为进一步研究扁桃CBF2目的蛋白功能,探明CBF2转录因子在扁桃中的抗寒分子机制,以新疆栽培扁桃(Amygdalus communis L.)‘双软’叶片为材料,通过PCR技术从基因组DNA中克隆CBF2基因,命名为AcCBF2,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组质粒pET-AcCBF2并转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达;生物信息学推测显示该基因的开放阅读框(ORF)为717 bp,编码238个氨基酸,其分子量为26.59 kD,等电点为5.29。系统发育树分析结果显示,AcCBF2基因与扁桃CBF1、光核桃和桃的亲缘关系最近。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,该蛋白分子量约47 kD,与预期蛋白大小基本一致。AcCBF2基因在E.coli Rosetta中的最佳诱导条件为IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导4 h。 展开更多
关键词 扁桃 克隆 cbf2基因 生物信息学 原核表达
下载PDF
Isolation and expression characterization of CBF2 in <i>vitis amurensis</i>with stress 被引量:2
11
作者 Chang Dong Jianmin Tao +5 位作者 Meng Zhang Yang Qin Zhiying Yu Bailin Wang Binhua Cai Zhen Zhang 《Agricultural Sciences》 2013年第9期466-472,共7页
The transcription factor VaCBF2, which interacts with C-repeat/DRE and its promoter, was isolated from Vitis amurensis. The VaCBF2 amino acid sequence contained a conserved AP2 domain of 56 amino acids and a potential... The transcription factor VaCBF2, which interacts with C-repeat/DRE and its promoter, was isolated from Vitis amurensis. The VaCBF2 amino acid sequence contained a conserved AP2 domain of 56 amino acids and a potential nuclear localization sequence. The sequence of VaCBF2 showed a high level of homology with other CBF2 family members. Phylogenetic analysis showed that the amino acid sequences may be CBF2 proteins with evolutionary relationship. Quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction analysis indicated that the expression of VaCBF2 gene in tissues (roots, stems, leaves, and petioles) was induced by low temperature, high salinity, and application of abscisic acid and salicylic acid in a time-dependent manner but to different extents in the cold-hardy V. amurensis and the less cold-hardy Vitis vinifera. The presence of cis-elements such as MYC and ABRE in VaCBF2 promoter further confirmed that this promoter was a component of the CBF transduction pathway involved in plant response to multiple stresses. 展开更多
关键词 VITIS amurensis STRESS cbf2 EXPRESSION
下载PDF
The salt-activated CBF1/CBF2/CBF3-GALS1 module fine-tunes galactan-induced salt hypersensitivity in Arabidopsis 被引量:3
12
作者 Jingwei Yan Ya Liu +3 位作者 Jiawen Yan Zhihui Liu Heqiang Lou Jiasheng Wu 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2023年第8期1904-1917,共14页
Plant growth and development are significantly hampered in saline environments,limiting agricultural productivity.Thus,it is crucial to unravel the mechanism underlying plant responses to salt stress.β-1,4-Galactan(g... Plant growth and development are significantly hampered in saline environments,limiting agricultural productivity.Thus,it is crucial to unravel the mechanism underlying plant responses to salt stress.β-1,4-Galactan(galactan),which forms the side chains of pectic rhamnogalacturonan I,enhances plant sensitivity to high-salt stress.Galactan is synthesized by GALACTAN SYNTHASE1(GALS1).We previously showed that Na Cl relieves the direct suppression of GALS1 transcription by the transcription factors BPC1 and BPC2 to induce the excess accumulation of galactan in Arabidopsis(Arabidopsis thaliana).However,how plants adapt to this unfavorable environment remains unclear.Here,we determined that the transcription factors CBF1,CBF2,and CBF3 directly interact with the GALS1 promoter and repress its expression,leading to reduced galactan accumulation and enhanced salt tolerance.Salt stress enhances the binding of CBF1/CBF2/CBF3 to the GALS1 promoter by inducing CBF1/CBF2/CBF3 transcription and accumulation.Genetic analysis suggested that CBF1/CBF2/CBF3 function upstream of GALS1 to modulate salt-induced galactan biosynthesis and the salt response.CBF1/CBF2/CBF3 and BPC1/BPC2 function in parallel to regulate GALS1 expression,thereby modulating the salt response.Our results reveal a mechanism in which salt-activated CBF1/CBF2/CBF3 inhibit BPC1/BPC2-regulated GALS1 expression to alleviate galactan-induced salt hypersensitivity,providing an activation/deactivation fine-tune mechanism for dynamic regulation of GALS1 expression under salt stress in Arabidopsis. 展开更多
关键词 Arabidopsis thaliana BPC1/BPC2 CBF1/cbf2/CBF3 β-1 4-galactan GALS1 salt stress
原文传递
莲藕CBF2基因cDNA克隆及序列分析 被引量:1
13
作者 刘娴 张莉 +3 位作者 惠林冲 王亮羽 程立宝 李良俊 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期4-8,共5页
目的:克隆莲藕CBF2基因的c DNA全长并对其进行序列分析。方法:根据已有的ESTs序列,设计3'和5'端RACE引物,运用RACE技术克隆莲藕CBF2基因c DNA全长。结果:克隆得到全长为1 560bp c DNA序列,其中包括350bp的3'非编码区和124bp... 目的:克隆莲藕CBF2基因的c DNA全长并对其进行序列分析。方法:根据已有的ESTs序列,设计3'和5'端RACE引物,运用RACE技术克隆莲藕CBF2基因c DNA全长。结果:克隆得到全长为1 560bp c DNA序列,其中包括350bp的3'非编码区和124bp的5'非编码区及一个1 086 bp的完整开放阅读框,编码362个氨基酸,序列末端有poly(A)尾。其核苷酸序列与NCBI数据库中大豆DREB2C/CBF2、马铃薯DREB2A/CBF2、黄瓜DREB2A/CBF2及花生DREB2A/CBF2的同源性较高,分别为83%、77%、76%和76%,因此把该基因命名为Lr CBF2。氨基酸序列进化树分析表明该基因与葡萄相关基因亲缘关系较近。结论:分离克隆得到莲藕CBF2基因,为进一步研究莲藕中该基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 莲藕 LR cbf2 基因 c DNA 序列分析
原文传递
扁桃AcCBF2基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达分析 被引量:2
14
作者 郭淑朋 张亮 +3 位作者 李疆 李鹏 罗淑萍 陈婷婷 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期814-820,共7页
本研究根据扁桃生物信息学数据库,采用PCR的方法从扁桃(Amygdalus communis L.)中克隆了一个CBF转录因子基因,命名AcCBF2,基因开放阅读框(open reading frame,ORF)为717 bp,编码238个氨基酸,预测其分子量26.59 kD,等电点为5.29。氨基酸... 本研究根据扁桃生物信息学数据库,采用PCR的方法从扁桃(Amygdalus communis L.)中克隆了一个CBF转录因子基因,命名AcCBF2,基因开放阅读框(open reading frame,ORF)为717 bp,编码238个氨基酸,预测其分子量26.59 kD,等电点为5.29。氨基酸多重序列比对显示,AcCBF2基因编码的氨基酸与其它植物冷胁迫相关的CBF氨基酸序列具有高度同源性,含有一个AP2功能结构域和2个特征基序;系统发育树分析显示,AcCBF2基因属于DREB家族中的A-1亚族,荧光定量显示,AcCBF2基因只对低温和干旱胁迫有响应,对盐胁迫和ABA(脱落酸)没有明显响应。在低温胁迫下,表达量上调;而在干旱胁迫下,表达量先上调后下调。初步预测AcCBF2基因可能对扁桃非生物胁迫有重要的调控作用。 展开更多
关键词 扁桃 cbf2转录因子 低温胁迫 荧光定量PCR
原文传递
抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究 被引量:15
15
作者 刘晓静 郝凤 +2 位作者 张德罡 毛娟 于铁峰 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期193-200,共8页
本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下... 本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。 展开更多
关键词 抗冻基因cbf2 载体构建 农杆菌 紫花苜蓿 转化
下载PDF
三种不同抗冻性葡萄中CBF_2基因的生物信息学分析及植物表达载体构建 被引量:8
16
作者 张哲敏 孙萍 +3 位作者 王旺田 栗孟飞 李唯 王雅琳 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期82-88,共7页
从赤霞珠、贝达和山葡萄三种不同抗冻性葡萄的基因组DNA中分别克隆了CBF2全长基因,并利用生物信息学的方法进行了分析。结果显示:三种葡萄的CBF2基因长均为969bp,编码253个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸相似性在96.7%~97... 从赤霞珠、贝达和山葡萄三种不同抗冻性葡萄的基因组DNA中分别克隆了CBF2全长基因,并利用生物信息学的方法进行了分析。结果显示:三种葡萄的CBF2基因长均为969bp,编码253个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸相似性在96.7%~97.94%之间。生物信息学分析显示3种不同抗冻葡萄的CBF2基因具有连续的开放阅读框,推倒的氨基酸序列具有AP2结合域,初步判断克隆的CBF2具有诱导抗寒性产生的作用。但氨基酸序列、进化树、理化性质、疏水性/亲水性等在抗寒性较强的山葡萄、贝达与抗寒性较差的赤霞珠之间存在一些差异,与GenBank上的原始序列同源性最低的是赤霞珠,而且其CBF2N端7个氨基酸残基序列与山葡萄和贝达的氨基酸序列存在较大差异,且具有较强的疏水性,这些差异可能与赤霞珠较弱的抗寒特性有关。以带有35S启动子的载体pBI121为基础,成功构建了植物表达载体pBI121-CaMV35S-CBF2,为深入研究CBF2基因在葡萄抗寒性中的作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 葡萄 cbf2转录激活因子 生物信息学分析 克隆 表达载体构建
下载PDF
寒地冬小麦CBF转录因子的克隆与表达分析 被引量:4
17
作者 李卓夫 晁美丽 +1 位作者 王晓楠 付连双 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期30-35,共6页
研究以已经报道的抗寒相关基因CBF的序列设计引物,从冬小麦"东农冬麦1号"中进行PCR,克隆得到长482 bp的CBF2序列,并对该序列进行比对、功能预测和RT-qPCR分析。结果表明,克隆得到的序列与一粒小麦的COR/DREbindg fartor 2(AY9... 研究以已经报道的抗寒相关基因CBF的序列设计引物,从冬小麦"东农冬麦1号"中进行PCR,克隆得到长482 bp的CBF2序列,并对该序列进行比对、功能预测和RT-qPCR分析。结果表明,克隆得到的序列与一粒小麦的COR/DREbindg fartor 2(AY951945.1)、黑麦的CBFIVa-2B(ABY59787.1)和大麦的CBF(2ABE02653.1)相似度分别为100%、99%和100%;该序列N端40~60区域氨基酸表现为较强的疏水性;RT-qPCR结果表明,在小麦叶片中的CBF2表达量4℃作用6 h达到最高,24 h后降到最低;0℃作用2 h,CBF2表达量最高。 展开更多
关键词 寒地 冬小麦 抗寒基因 cbf2 实时荧光定量PCR
下载PDF
脂多糖刺激单核细胞上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达影响 被引量:3
18
作者 叶洁 邓辉 +2 位作者 徐春燕 王海燕 胡荣党 《口腔医学》 CAS 2011年第3期140-143,共4页
目的观察牙龈卟啉菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达的影响。方法收集经100 ng/ml Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后上清,以20%的稀释浓度的分别作用于MC3T3-E1细胞1、6、1... 目的观察牙龈卟啉菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达的影响。方法收集经100 ng/ml Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后上清,以20%的稀释浓度的分别作用于MC3T3-E1细胞1、6、12、24、48、72 h后,采用半定量RT-PCR与Western-Blot检测细胞Runx2/Cbfα1在基因与蛋白水平上的差异性表达。结果成骨细胞MC3T3-E1在20%稀释浓度的培养上清刺激后,半定量RT-PCR法发现Runx2/Cbfα1基因表达显著受抑制,且呈时间依赖性,72 h降到最低;Western-Blot检测显示细胞Runx2/Cbfαa1蛋白表达6 h后开始下降,72 h降至最低。结论 Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清能抑制小鼠成骨细胞Runx2/Cbfα1的表达且与时间呈一定相关。 展开更多
关键词 脂多糖 单核细胞 成骨细胞 Runx2/Cbfα1
下载PDF
核心结合因子α1过表达慢病毒载体的构建及鉴定
19
作者 曹金芳 李伟宏 +1 位作者 邓辉 王惠宁 《中国现代医生》 2010年第33期7-9,21,F0003,共5页
目的构建含人CBFα1/RUNX2基因的过表达慢病毒载体。方法采用PCR技术体外扩增人CBFα1/RUNX2,将扩增产物与慢病毒载体pGC-FU连接,构建重组质粒pGC-FU-hCBFα1/RUNX2,并进行酶切及测序鉴定。鉴定正确的克隆转染293T细胞,经荧光显微镜观察... 目的构建含人CBFα1/RUNX2基因的过表达慢病毒载体。方法采用PCR技术体外扩增人CBFα1/RUNX2,将扩增产物与慢病毒载体pGC-FU连接,构建重组质粒pGC-FU-hCBFα1/RUNX2,并进行酶切及测序鉴定。鉴定正确的克隆转染293T细胞,经荧光显微镜观察和Western Blot检测hCBFα1/RUNX2基因在293T细胞内的瞬时表达。再利用脂质体转染法将pGC-FU-hCBFα1/RUNX2、pHelper1.0和pHelper2.0三质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,并通过实时荧光定量PCR检测病毒滴度。结果重组质粒经测序证实,插入片段与人CBFα1/RUNX2基因序列完全一致。荧光显微镜观察以及Western Blot印迹均证实pGC-FU-hCBFα1/RUNX2中携有正确的hCBFα1/RUNX2基因,并能在293T细胞中瞬时表达。包装慢病毒后实时荧光定量PCR检测病毒滴度为(2.00×108)TU/mL。结论成功构建了携带hCBFα1/RUNX2基因的重组慢病毒载体,为进一步研究其在牙周组织再生中的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 CBFα1/RUNX2 慢病毒载体 转染
下载PDF
CBF310—2新型水环式真空泵在我公司的使用
20
作者 王占和 渠述立 李红卫 《纯碱工业》 CAS 2003年第5期42-43,共2页
干式罗茨真空泵用作吸收真空泵,因吸收尾气中含有腐蚀性介质,运行过程中腐蚀严重,造成打气量不足,无法满足生产。针对这些问题,采用了新型节能的CBF310-2型水环式真空泵,替代了原有的干式罗茨真空泵,使生产状况有了明显的改善,取得了良... 干式罗茨真空泵用作吸收真空泵,因吸收尾气中含有腐蚀性介质,运行过程中腐蚀严重,造成打气量不足,无法满足生产。针对这些问题,采用了新型节能的CBF310-2型水环式真空泵,替代了原有的干式罗茨真空泵,使生产状况有了明显的改善,取得了良好的社会效益和经济效益。 展开更多
关键词 CBF310—2型 水环式真空泵 干式罗茨真空泵 腐蚀 经济效益 纯碱生产
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部