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调脾增食颗粒对幼龄厌食大鼠血浆β-EP及CCK-8的影响
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作者 梁雪 李会影 于映霞 《中国中医药科技》 CAS 2024年第1期20-22,共3页
目的:探讨调脾增食颗粒对幼龄厌食大鼠血浆β-EP(β-内腓肽)及CCK-8(胆囊收缩素)的影响。方法:选取60只幼龄SD大鼠,随机分为6组,正常对照组,模型对照组,调脾增食颗粒高、中、低剂量组及阳性对照组,每组10只。除正常对照组喂饲常规鼠饲料... 目的:探讨调脾增食颗粒对幼龄厌食大鼠血浆β-EP(β-内腓肽)及CCK-8(胆囊收缩素)的影响。方法:选取60只幼龄SD大鼠,随机分为6组,正常对照组,模型对照组,调脾增食颗粒高、中、低剂量组及阳性对照组,每组10只。除正常对照组喂饲常规鼠饲料外,其余各组均采用特制高蛋白高脂饲料喂养1周,建立幼龄厌食大鼠模型。正常对照组和模型对照组给予蒸馏水,调脾增食颗粒高、中、低剂量组按33.86、16.93、8.47 g/(kg·d)剂量给药,阳性组给予健胃消食片0.675 g/(kg·d),连续给药4周;记录各组大鼠进食量,应用放射免疫法测定大鼠血浆β-EP及CCK-8的含量。结果:调脾增食颗粒中、高剂量组第3周和第4周的进食量明显多于模型对照组(P<0.05,P<0.01)。调脾增食颗粒中、高剂量组大鼠血浆β-EP含量明显高于模型组(P<0.05,P<0.01),CCK-8含量明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:调脾增食颗粒治疗厌食症与调节血β-EP及CCK-8的分泌与释放有关。 展开更多
关键词 调脾增食颗粒 厌食 进食量 Β-EP cck-8 幼龄大鼠
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中风星蒌通腑胶囊介导CCK-8调控IL-10/STAT3信号通路改善脑出血小鼠的炎症损伤
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作者 王思媛 张燕平 +5 位作者 严美茹 武雨幸 李祎 岳晓晴 王新志 刘向哲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期832-840,共9页
目的探讨中风星蒌通腑胶囊介导胆囊收缩素八肽(CCK-8)对白细胞介素10(IL-10)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对脑出血小鼠的脑部炎症反应的调控作用及机制。方法将110只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血组及中风... 目的探讨中风星蒌通腑胶囊介导胆囊收缩素八肽(CCK-8)对白细胞介素10(IL-10)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对脑出血小鼠的脑部炎症反应的调控作用及机制。方法将110只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血组及中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组,每组22只。采用胶原酶法建立脑出血模型,模型复制2 h后进行中风星蒌通腑胶囊混悬液灌胃(10 mL·kg^(-1)),假手术组与脑出血组灌以等量的生理盐水。记录小鼠的神经功能学评分及左转率;于术后72 h采用干湿质量法检测脑含水量;于术后72 h采用Western Blot法检测小鼠血肿周围肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)以及Janus激酶1(JAK-1)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)通路蛋白的相对表达水平;于术后第3、5天采用Elisa法检测小鼠CCK-8的相对表达水平;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测IL-10、STAT3的mRNA的表达水平。结果与脑出血组比较,中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组干预治疗后,第3天及第5天小鼠改良神经功能缺陷(NDS)评分明显降低(P<0.01),低剂量组第3天及第5天左转率降低(P<0.05),中剂量组第3天(P<0.05)及第5天(P<0.01)左转率降低,高剂量组第3天及第5天左转率明显降低(P<0.01)。低剂量组小鼠脑含水量减少(P<0.05),中、高剂量组小鼠脑含水量明显减少(P<0.01)。低剂量组促炎因子TNF-α、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),IL-1β表达减少(P<0.05),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01);中、高剂量组促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01)。低剂量组CCK-8的含量在用药后第3天增加(P<0.05),第5天含量明显增加(P<0.01);中、高剂量组CCK-8的含量在用药后第3天及第5天明显增加(P<0.01)。IL-10的mRNA相对表达水平在用药后均明显增高(P<0.01),STAT3 mRNA相对表达水平在用药后均明显降低(P<0.01)。结论中风星蒌通腑胶囊可以增加脑肠肽CCK-8的表达,调控IL-10/STAT3信号通路,从而减轻小鼠脑出血后的继发性炎症反应及细胞毒性脑水肿。 展开更多
关键词 脑出血 中风星蒌通腑胶囊 通腑法 胆囊收缩素八肽(cck-8) IL-10 STAT3 炎症 小鼠
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CCK-8法与MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的比较研究 被引量:32
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作者 万文婷 李宁 +1 位作者 刘静 金林红 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期3046-3048,共3页
目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量... 目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102~1×105个。结论 CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 cck-8 MTT法 检测时间 人前列腺癌 PC3细胞增殖 细胞增殖活性 比较研究 Cell Proliferation Experiment Study 抗肿瘤药物 研究对象 数量范围 实验条件 灵敏度高 检测波长 方法 准确性 阿霉素 试剂
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传统“热补”针法对实验性关节炎家兔的镇痛效应及脑脊液中-βEP、CCK-8含量的影响 被引量:18
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作者 杜小正 秦晓光 +2 位作者 赵彬元 尹少兰 刘世琼 《针刺研究》 CAS CSCD 2006年第2期86-89,共4页
目的:观察传统“热补”针法对实验性关节炎家兔的镇痛效应和探求其中枢作用机制。方法:以卵蛋白诱导的关节炎家兔为疼痛模型,连续治疗6 d后比较药物组、捻针组、电针组和热补组关节炎家兔关节局部痛阈和脑脊液中-βEP和CCK-8的含量。结... 目的:观察传统“热补”针法对实验性关节炎家兔的镇痛效应和探求其中枢作用机制。方法:以卵蛋白诱导的关节炎家兔为疼痛模型,连续治疗6 d后比较药物组、捻针组、电针组和热补组关节炎家兔关节局部痛阈和脑脊液中-βEP和CCK-8的含量。结果:治疗后各治疗组痛阈和-βEP含量均升高,热补组-βEP含量明显高于药物组和捻针组(P<0.01),但不及电针明显(P<0.05);各治疗组CCK-8含量均向正常水平恢复,热补组CCK-8含量比药物组和捻针组恢复明显(P<0.01),但不及电针组恢复显著(P<0.01)。结论:“热补”针法的镇痛效应和捻转针法、药物(痹冲剂)相同,但不及电针的镇痛效应;升高脑脊液中-βEP含量和促使CCK-8含量向正常水平恢复,可能是其镇痛的中枢机制之一。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 “热补”针法 针刺镇痛 Β-EP cck-8
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CCK-8与内源性阿片系统在吗啡依赖中的相互作用 被引量:13
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作者 文迪 马春玲 +4 位作者 丛斌 于海磊 于峰 倪志宇 李淑瑾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1445-1450,共6页
目的通过观察不同剂量的CCK-8对吗啡依赖SH-SY5Y细胞模型内源性阿片系统的影响,初步探讨CCK-8与内源性阿片系统在吗啡依赖过程的相互作用及其机制。方法建立吗啡慢性依赖SH-SY5Y细胞模型,应用放射配基结合技术观察μ阿片受体(MOR)结合特... 目的通过观察不同剂量的CCK-8对吗啡依赖SH-SY5Y细胞模型内源性阿片系统的影响,初步探讨CCK-8与内源性阿片系统在吗啡依赖过程的相互作用及其机制。方法建立吗啡慢性依赖SH-SY5Y细胞模型,应用放射配基结合技术观察μ阿片受体(MOR)结合特征,应用Real-Time PCR技术检测前脑啡肽原(PENK)、前阿黑皮质素原(POMC)基因的表达,并观察CCK-8对上述指标的影响。结果①10μmol·L-1吗啡作用于全反式维甲酸(RA)分化6d的SH-SY5Y细胞48h,成功建立了慢性吗啡依赖模型;②CCK-8可剂量依赖性地抑制MOR的结合,并且此抑制作用可被CCK1及CCK2受体拮抗剂(L-364,718,LY-288,513)翻转;③10-7、10-6mol·L-1CCK-8使PENK、POMC的表达较正常组分别增加(5.81±0.84)、(7.26±1.55)倍和(4.55±0.73)、(5.16±0.82)倍。吗啡依赖后,PENK、POMC表达较正常组下降(0.43±0.10)倍和(0.37±0.07)倍,10-8、10-7、10-6mol·L-1CCK-8使下调的PENK、POMC表达增加,PENK与正常组的相对表达值为(0.63±0.10)、(0.86±0.21)、(1.17±0.19),POMC与正常组的相对表达值为(0.46±0.10)、(0.60±0.11)、(0.96±0.11)。10-10、10-9mol·L-1CCK-8对PENK、POMC表达无影响。结论低剂量(10-10、10-9mol·L-1)CCK-8可通过激活CCK受体抑制MOR的结合力,对PENK、POMC的表达无影响;高剂量(10-8~10-6mol·L-1)的CCK-8可使PENK、POMC基因表达增加,促进内源性阿片肽的生成,并可改善吗啡依赖后内源性阿片系统的失衡。 展开更多
关键词 吗啡依赖 SH-SY5Y细胞 cck-8 Μ阿片受体 前脑啡肽原 前阿黑皮质素原
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MTT法和CCK-8法检测细胞活性之测试条件比较 被引量:144
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作者 熊建文 肖化 张镇西 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第5期559-562,共4页
利用HL60作为研究对象,对比了MTT法和CCK-8法在最佳检测时刻和检测波长等参数的差异。对于CCK-8法,最佳测试时刻在细胞液培养4 h后,最佳测试波长为490 nm。实验结果表明用CCK-8法检测的OD值与活细胞数的线性相关度要优于MTT法,是一种灵... 利用HL60作为研究对象,对比了MTT法和CCK-8法在最佳检测时刻和检测波长等参数的差异。对于CCK-8法,最佳测试时刻在细胞液培养4 h后,最佳测试波长为490 nm。实验结果表明用CCK-8法检测的OD值与活细胞数的线性相关度要优于MTT法,是一种灵敏度较高、重复性好的的细胞活性检测方法。 展开更多
关键词 MTT cck-8 标定曲线 细胞活性
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CCK-8对大鼠肺间质巨噬细胞cAMP-PKA信号通路的激活作用 被引量:10
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作者 高维娟 许顺江 +2 位作者 丛斌 李淑瑾 马春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期321-326,共6页
目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用。方法分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得。结果正常对照... 目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用。方法分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得。结果正常对照组大鼠静息状态下PIMscAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13)nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1。低浓度CCK-8[(10-12~10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较:P>0.05);高浓度CCK-8[(10-9~10-5)mol.L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较:P<0.05)。10mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1。不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同。CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4)mol·L-1。丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用最强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用最小。结论CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMscAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一。CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显。 展开更多
关键词 八肽胆囊收缩素 肺间质巨噬细胞 脂多糖 蛋白激 酶A 受体
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CCK-8和MTS法检测人羊膜上皮细胞增殖的比较 被引量:15
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作者 刘艳秋 张可华 +10 位作者 王运良 舒峻 来薛 吴立群 曹善霞 李鸿 徐扬 高艳 崔晓惠 左和鸣 蔡哲 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2012年第9期827-830,共4页
目的探讨CCK-8、MTS两种不同的四唑盐试剂在羊膜上皮细胞增殖检测中的最适实验条件,并比较两者细胞毒性。方法取体外培养对数生长期羊膜上皮细胞,用完全培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清)配制成不同浓度的细胞悬液加入96孔板中培养24 h,... 目的探讨CCK-8、MTS两种不同的四唑盐试剂在羊膜上皮细胞增殖检测中的最适实验条件,并比较两者细胞毒性。方法取体外培养对数生长期羊膜上皮细胞,用完全培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清)配制成不同浓度的细胞悬液加入96孔板中培养24 h,分别加入CCK-8、MTS后于450 nm、492 nm波长处测定光密度(OD)。在同一细胞浓度下,根据同一波长不同时间检测的OD确定CCK-8的最佳孵育时间。取体外培养的对数生长期羊膜上皮细胞分别用DMSO、CCK-8、MTS处理1 h、2 h、3 h和4 h后,继续培养24 h,在450 nm处以CCK-8检测细胞增殖,并通过台盼蓝染色计数活细胞数。结果 CCK-8法的最佳波长为450 nm,MTS法的最佳波长为492 nm。CCK-8法灵敏度稍低于MTS法。1~4 h内,CCK-8试剂与待检测细胞最佳孵育时间为4 h。CCK-8法对细胞增殖影响及细胞毒性均小于MTS法。结论 CCK-8法是一种更为方便、细胞毒性作用较小的试剂。 展开更多
关键词 MTS cck-8 羊膜上皮细胞 细胞增殖 细胞毒性
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CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究 被引量:18
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作者 邹颖 王文梅 +1 位作者 朱雅男 杨卫东 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期673-675,共3页
目的:CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究。方法:应用CCK-8比色法比较体外4种粘结材料(普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontalligament cell,HPDLC)的细胞毒性,... 目的:CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究。方法:应用CCK-8比色法比较体外4种粘结材料(普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontalligament cell,HPDLC)的细胞毒性,初步探讨4种粘结材料的生物学性能。结果:4种粘结材料对HPDLC的生物相容性影响结果相似,其中普通型玻璃离子及SuperBond C&B无细胞毒性,加强型玻璃离子具极轻微细胞毒性,SE BOND具轻微细胞毒性。结论:4种粘结材料均满足口腔材料临床应用的生物相容性要求。 展开更多
关键词 cck-8 粘结材料 人牙周膜成纤维细胞 细胞毒性
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台盼蓝拒染法、MTT法、CCK-8法在研究As_2O_3细胞毒性作用中的意义 被引量:32
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作者 陈冲 焦宁 +1 位作者 靖景艳 徐瑞荣 《中国医药导报》 CAS 2013年第12期24-26,共3页
目的筛选三氧化二砷(As203)对HL一60细胞毒性的有效剂量及作用时间的检测方法,并对其结果进行分析。方法采用台盼蓝拒染法、M1Tr法、CCK~8法测定不同浓度的As203,体外作用HL一60细胞株的细胞存活率.采用单因素方差分析其与剂量一... 目的筛选三氧化二砷(As203)对HL一60细胞毒性的有效剂量及作用时间的检测方法,并对其结果进行分析。方法采用台盼蓝拒染法、M1Tr法、CCK~8法测定不同浓度的As203,体外作用HL一60细胞株的细胞存活率.采用单因素方差分析其与剂量一时间依赖反应的关系。结果4.0、8.0μmol/L作用48、72h及8.0μmol/L作用24h被染细胞小于5%,其余均未观察到蓝染细胞。MTY法检测在1.0~8.0μmol/LAs20,剂量范围内培养24、48、72h(P〈0.05),各组均能够抑制HL-60细胞活性。CCK-8法检测在0.5~8.0μmol/LAs203剂量范嗣内培养24、48、72h(P〈0.05),各组均能够抑制HL-60细胞活性。HL-60细胞在不同时间、不同浓度均能出现细胞存活率明显降低,As20,的毒副作用呈现明显的剂量-时间依赖反应。结论在研究As203的细胞毒性时,用CCK-8法优于M11’法,均比台盼蓝法更为灵敏。 展开更多
关键词 台盼蓝拒染法 MTT法 cck-8 三氧化二砷 HL-60 线粒体
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CCK-8及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠额叶皮质、尾壳核、海马μ阿片受体的影响 被引量:6
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作者 文迪 马春玲 +5 位作者 丛斌 张雅静 杨胜昌 于峰 倪志宇 李淑瑾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期867-871,共5页
目的通过观察CCK-8及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠额叶皮质、尾壳核、海马μ阿片受体的影响,初步探讨CCK-8对吗啡戒断症状的影响及其受体机制。方法建立大鼠吗啡慢性依赖及纳络酮催促戒断模型,观察CCK-8及CCK1受体拮抗剂L-364,718、CCK2... 目的通过观察CCK-8及其受体拮抗剂对吗啡戒断大鼠额叶皮质、尾壳核、海马μ阿片受体的影响,初步探讨CCK-8对吗啡戒断症状的影响及其受体机制。方法建立大鼠吗啡慢性依赖及纳络酮催促戒断模型,观察CCK-8及CCK1受体拮抗剂L-364,718、CCK2受体拮抗剂LY-288,513慢性干预对戒断症状的影响,并采用放射配基结合法测定额叶皮质、尾壳核、海马μ阿片受体的结合活性,即受体数量(Bmax)及结合力(Kd)。结果①给予吗啡前腹腔注射CCK-8及CCK受体拮抗剂慢性干预均可减轻吗啡戒断症状;②慢性吗啡作用后,额叶皮质和海马μ阿片受体数量及结合力下降,而尾壳核μ阿片受体数量无变化,仅结合力降低;戒断后,额叶皮质、尾壳核μ阿片受体数量及结合力升高,而海马μ阿片受体数量无变化,仅结合力升高;③CCK-8及其受体拮抗剂慢性干预后,使吗啡戒断大鼠尾壳核μ阿片受体结合力降低、海马μ阿片受体数量增加,但是对额叶皮质μ阿片受体的结合活性无影响。结论 CCK-8及其受体拮抗剂可通过调节μ阿片受体减轻吗啡戒断症状,并具有脑区特异性。 展开更多
关键词 法医毒理学 吗啡戒断 cck-8 cck受体拮抗剂 Μ阿片受体 放射配基结合分析
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CCK-8法检测九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用 被引量:10
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作者 杨佳琪 檀军 +2 位作者 曹米兰 金道超 郭建军 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期193-197,220,共6页
为了明确九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,本文利用Bradford法检测九香虫血淋巴浓度,用不同浓度的九香虫血淋巴处理体外培养的MCF-7细胞,采用CCK-8法检测九香虫血淋巴对MCF-7细胞的抑制作用。结果表明:九香虫血淋巴能显... 为了明确九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,本文利用Bradford法检测九香虫血淋巴浓度,用不同浓度的九香虫血淋巴处理体外培养的MCF-7细胞,采用CCK-8法检测九香虫血淋巴对MCF-7细胞的抑制作用。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的生长,且对MCF-7的抑制率呈时间、剂量依赖关系。 展开更多
关键词 九香虫 血淋巴 乳腺癌 cck-8
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CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响 被引量:7
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作者 高维娟 许顺江 +2 位作者 丛斌 李淑瑾 马春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1156-1160,共5页
目的探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响。方法分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I... 目的探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响。方法分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I-cAMP放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,用放射激酶法测定PKA活性。结果单独应用PMA和SC-3088孵育大鼠PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性与正常对照组相比无明显变化(P>0.05)。PMA可升高LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性(P<0.01),SC-3088则可使LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01)。分别应用PMA、SC-3088与CCK共同孵育,则CCK+PMA组细胞内cAMP含量和PKA活性高于单独应用CCK组(P<0.01),CCK+SC-3088组则降低(P<0.01)。与LPS+CCK组相比,PMA+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性升高(P<0.01),而SC-3088+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01)。结论在LPS诱导的大鼠PIMs,CCK-8可通过激活cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用;DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用。 展开更多
关键词 八肽胆囊收缩素 肺间质巨噬细胞 脂多糖 DAG—PKC信号通路 cAMP-PKA信号通路
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CCK-8与MTT法检测左归丸含药血清干预BMSCs增殖条件的比较 被引量:7
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作者 刘飞祥 谭峰 +6 位作者 樊巧玲 李星 叶素敏 张明玥 柴毅 麦聪英 吴丹 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期6-10,共5页
目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8... 目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8与MTT试剂,检测两种方法的最佳波长、培养时间、灵敏度和增殖时间。结果CCK-8法与MTT法检测BMSCs的最佳波长分别为450 nm和550 nm,孵育时间分别为3 h和4 h,细胞接种密度分别为0.1×10^(4)/孔和0.25×10^(4)/孔。CCK-8法与MTT法在BMSCs接种密度分别高于0.25×10^(4)/孔和0.5×10^(4)/孔时,两种方法检测所得OD值均提早进入平台期,易出现假S型增长曲线。而当密度分别低于0.05×10^(4)/孔和0.1×10^(4)/孔时,细胞增加缓慢,难以形成S型增长曲线,不能反映出BMSCs的增殖特性。与CCK-8法相比较,在细胞密度低于0.1×10^(4)/孔或高于2×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量无明显变化,差异无统计学意义。而细胞密度为0.25×10^(4)/孔至1×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MTT法更适用于左归丸含药血清干预BMSCs增殖和分化的研究。 展开更多
关键词 cck-8 MTT法 骨髓间充质干细胞 左归丸
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CCK-8对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖的影响 被引量:5
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作者 韩冬艳 丛斌 +3 位作者 徐锦荣 李淑瑾 马春玲 倪志宇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1075-1078,共4页
目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞增殖的影响及相关机制。方法应用噻唑蓝(MTT)比色法检测CCK-8对IL-1β诱导RSC-364细胞增殖的影响;应用Westernblot检测CCK-8对IL-1β诱导RSC-364细胞p38MAPK磷酸化的影响。结果CC... 目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞增殖的影响及相关机制。方法应用噻唑蓝(MTT)比色法检测CCK-8对IL-1β诱导RSC-364细胞增殖的影响;应用Westernblot检测CCK-8对IL-1β诱导RSC-364细胞p38MAPK磷酸化的影响。结果CCK-8剂量依赖性(10-12、10-10、10-8、10-6mol.L-1)抑制IL-1β诱导的RSC-364细胞增殖;CCK-8剂量依赖性(10-10、10-8、10-6mol.L-1)抑制了IL-1β诱导的RSC-364细胞p38MAPK的磷酸化;且CCK-8A、B受体拮抗剂CR1409或CR2945均减弱了CCK-8的抑制效应。结论CCK-8剂量依赖性抑制了IL-1β诱导的RSC-364细胞增殖,该作用由CCK-AR和CCK-BR介导,并可能通过抑制p38MAPK磷酸化而实现的。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 滑膜细胞 白细胞介素- cck-8
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固定化酶催化合成CCK-8 C-端三肽衍生物 被引量:4
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作者 郭丽 张凌之 +1 位作者 吕子敏 徐正 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期406-410,共5页
报道胆囊收缩素 (CCK 8)C 末端片段三肽衍生物Phac Met Asp(OMe) Phe NH2 的固定化酶催化法合成 .以Phac Met OCam为起始原料 ,采用三种固定化酶———α 糜蛋白酶 /Celite 5 45、木瓜蛋白酶 /VA Epoxy、嗜热菌蛋白酶 /Celite 5 45 ,... 报道胆囊收缩素 (CCK 8)C 末端片段三肽衍生物Phac Met Asp(OMe) Phe NH2 的固定化酶催化法合成 .以Phac Met OCam为起始原料 ,采用三种固定化酶———α 糜蛋白酶 /Celite 5 45、木瓜蛋白酶 /VA Epoxy、嗜热菌蛋白酶 /Celite 5 45 ,经过三步酶促反应得到目标三肽化合物 .对酶的专一性、酶的固定化、溶剂选择和合成条件等进行了研究 。 展开更多
关键词 固定化酶 催化合成 cck-8 C-端三肽衍生物 胆囊收缩素
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CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中最佳实验条件的筛选 被引量:19
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作者 王瑾 马肖容 张王刚 《中国医药导报》 CAS 2018年第23期13-16,182,共4页
目的筛选CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法采用正交实验设计,对初始细胞浓度、培养时间、LPS浓度、显色时间这4个主要因素各水平对人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞增殖的影响进行试验研究,对各实验组合测得的刺... 目的筛选CCK-8法在淋巴细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法采用正交实验设计,对初始细胞浓度、培养时间、LPS浓度、显色时间这4个主要因素各水平对人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞增殖的影响进行试验研究,对各实验组合测得的刺激指数进行方差分析。结果 CCK-8检测人PBMC增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为2.5×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入CCK-8后孵育4.5 h;检测小鼠脾细胞增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为5.0×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入CCK-8后孵育4.5 h。结论 CCK-8法便捷、灵敏、重复性好,可作为检测淋巴细胞增殖的稳定方法。本研究建立的CCK-8最佳实验条件可为免疫调节作用的药物体外筛选和免疫药理学作用的研究提供依据。 展开更多
关键词 cck-8 PBMC 淋巴细胞增殖 正交实验
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CCK-8对LPS作用下巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响 被引量:3
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作者 张风华 李淑瑾 +7 位作者 丛斌 张正茂 朱桂军 马春玲 丛军 刘宁 倪志宇 付丽红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1271-1275,共5页
目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对LPS活化的巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响。方法用CCK-8(10^-12~10^-6)mol·L^-1和(或)脂多糖(LPS)孵育小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量... 目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对LPS活化的巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响。方法用CCK-8(10^-12~10^-6)mol·L^-1和(或)脂多糖(LPS)孵育小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量的变化,用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4^+T细胞,按4:1数量比与腹腔巨噬细胞[预先用LPS、CCK-8和(或)抗B7.1抗体、抗B7.2抗体、CCK1R拮抗剂CR1409、CCK2R拮抗剂CR2945孵育24h]共同体外培养,同时加入ConA5mg·L^-1,采用^3H参入法测定CD4^+T细胞增殖反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果CCK-8可以下调LPS诱导的巨噬细胞的B7.1和B7.2表达,抑制LPS活化的巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8的作用呈剂量依赖性,最大效应剂量在(10^-7-10^-9)mol·L^-1之间。CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用,且CR1409的作用较CR2945更明显。抗B7.1抗体和抗B7.2抗体可减轻LPS活化的巨噬细胞协同刺激活性。结论CCK-8通过下调LPS诱导的巨噬细胞B7.1和B7.2表达而抑制其协同刺激活性,该作用由CCK1R及CCK2R介导,其中CCK1R起主要介导作用。 展开更多
关键词 cck-8 B7.1 B7.2 LPS 巨噬细胞 协同刺激
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CCK-8在胆石症患者血浆中的水平变化及其临床意义 被引量:9
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作者 陈瑞新 王志伟 +1 位作者 黄健 沈洪薰 《放射免疫学杂志》 CAS 2004年第5期336-337,共2页
目的 :研究CCK - 8在胆石症患者血浆中水平的变化及临床意义。方法 :应用放射免疫分析了 6 0例胆石症患者组术前CCK - 8水平与对照组 (30例无胆囊结石 )患者血浆中CCK - 8水平 ;患者组术前及术后2周CCK - 8水平的比较。结果 :患者组血浆... 目的 :研究CCK - 8在胆石症患者血浆中水平的变化及临床意义。方法 :应用放射免疫分析了 6 0例胆石症患者组术前CCK - 8水平与对照组 (30例无胆囊结石 )患者血浆中CCK - 8水平 ;患者组术前及术后2周CCK - 8水平的比较。结果 :患者组血浆CCK - 8水平为 (4 2 91± 2 88) pmol/L ,显著地高于对照组 (31 5 0± 1 6 2 ) pmol/L ,P <0 0 5 ;患者组术前血浆CCK - 8水平为 (4 2 91± 2 88) pmol/L ,显著地高于术后 (34 2 1±2 5 6 )pmol/L ,P <0 0 5。结论 :胆石症血浆中CCK - 8术前水平为 (4 2 91± 2 88)pmol/L ,显著高于对照组(31 5 0± 1 6 2 ) pmol/L(P <0 0 5 ) ,可作为胆石症诊断指标之一。 展开更多
关键词 患者 血浆 胆石症 cck 对照组 术前 临床意义 水平 变化
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儿宝颗粒对幼龄厌食大鼠模型CCK-8的调节作用 被引量:4
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作者 张月萍 汪受传 +4 位作者 杜永平 史健 隆红艳 汪静 吴少华 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2000年第2期88-89,共2页
目的 研究幼龄厌食大鼠中枢及外周八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)的含量变化以及运脾方药对它们的调节作用。方法模拟小儿厌食症的主要病因制作幼龄厌食大鼠模型 ,用儿宝颗粒治疗 ,运用放免检测技术测定动物下丘脑及外周血中CCK -8的含量。... 目的 研究幼龄厌食大鼠中枢及外周八肽胆囊收缩素 (CCK - 8)的含量变化以及运脾方药对它们的调节作用。方法模拟小儿厌食症的主要病因制作幼龄厌食大鼠模型 ,用儿宝颗粒治疗 ,运用放免检测技术测定动物下丘脑及外周血中CCK -8的含量。结果 模型动物下丘脑和血浆CCK - 8浓度分别为 (12 2 .5 7± 31.79)pmoL/ g和 (5 0 6 .88± 113.32 ) pg/mL ,显著高于正常组 (89.15± 17.94) pmoL/g(P <0 .0 5 )和 (2 5 3.76± 6 5 .0 9) pg/mL(P <0 .0 5 ) ;摄食量明显下降 ,持续 3周以上 ;大小剂量治疗组摄食量均增加 ,下丘脑及血浆CCK - 8含量恢复正常。结论 幼龄厌食大鼠模型中枢和外周CCK - 8浓度增高 ,运脾方药对此有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 儿宝颗粒 八肽胆囊收缩素 中医药疗法 厌食 儿童
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