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The use of suicide gene systems in vascular cells in vitro
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作者 XU LING FEI DE HUA XU +3 位作者 KAI GE, ZHONG CHENG ZHENG LAN YIN SUN XIN YUAN LIU (Shanghai Institute of Biochemistry, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期73-78,共6页
To investigate the efficiency of suicide gene systems on vascular cells, HSV-tk/GCV and EC-CD/5-FC systems were established on vascular endothelial cells in vitro by retroviral transduction. Both modified cell lines w... To investigate the efficiency of suicide gene systems on vascular cells, HSV-tk/GCV and EC-CD/5-FC systems were established on vascular endothelial cells in vitro by retroviral transduction. Both modified cell lines were highly sensitive to prodrugs, the IC50 for GCV was less than 0.4 μM, and IC50 for 5-FC was less than 75 μM,while the parental endothelial cells were insensitive even at the highest concentrations of prodrugs in this experiment. Mixed cellular assay showed that significant bystander effect was exhibited in modified endothelial cells.When only 10% or 30% of the mixed cells were tk positive and exposed to 20 μM GCV for 6 days, more than 60% or 90% of the whole population was killed. Similar result was also found in CD positive cells. These results indicated that both HSV-tk/GCV and EC-CD/5-FC systems could efficiently suppress endothelial cell growth in vitro. 展开更多
关键词 Endothelial cell suicide gene HSV-tk/GCV system EC-cd/5-fc system bystander effect
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CD/5-FC自杀基因前药系统的研究进展
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作者 王廷峰 余波 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1034-1037,共4页
自杀基因前药系统是目前肿瘤基因治疗中的研究热点。其中CD/5-FC自杀基因前药系统是目前研究最多、进展最快的自杀基因系统之一。它对肿瘤细胞的杀死机制除了通过直接毒性作用和旁观者效应以外,还包括自杀基因联合使用、免疫细胞和免疫... 自杀基因前药系统是目前肿瘤基因治疗中的研究热点。其中CD/5-FC自杀基因前药系统是目前研究最多、进展最快的自杀基因系统之一。它对肿瘤细胞的杀死机制除了通过直接毒性作用和旁观者效应以外,还包括自杀基因联合使用、免疫细胞和免疫调节因子的参与、自杀基因与放射治疗联合作用等。本文就CD/5-F自杀基因前药系统的分子生物学基础、抗癌机制以及其在临床实验中面临的问题等研究进展进行综述。 展开更多
关键词 自杀基因前药系统 cd 5-fc 肿瘤
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腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究 被引量:5
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作者 徐舲飞 许德华 +3 位作者 戈凯 郑仲承 孙兰英 刘新垣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第3期171-174,共4页
本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自... 本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自杀基因的表达,测定原药对它们的杀伤.生长抑制试验表明,GCV对lGll/Ad-tk细胞杀伤的IG_(50)为0.2μmol/ L,5-FC对lGll/Ad-cd细胞杀伤的IC_(50)为20μmol/L.电镜下显示被原药杀伤的血管内皮细胞有明显的细胞凋亡现象.同时混合细胞实验证明两系统均存在明显的旁杀伤效应.从而在体外水平证明了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统杀伤增生血管内皮细胞的有效性. 展开更多
关键词 血管内皮细胞 腺病毒 载体 自杀基因 肿瘤
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PNP—CD融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究
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作者 彭友缘 严武 +1 位作者 蔡晓坤 尹震宇 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期624-627,共4页
目的分析PNP—CD融合自杀基因系统对肝癌细胞HepG2的杀伤作用并探讨其可能的机制。方法利用重组PCR定点诱变法制备融合基因PNP—CD。将PNP—CD插入真核表达载体pcDNA3.O中,构建融合自杀基因表达载体pcDNA3.0/PNP—CD。经酶切、PCR... 目的分析PNP—CD融合自杀基因系统对肝癌细胞HepG2的杀伤作用并探讨其可能的机制。方法利用重组PCR定点诱变法制备融合基因PNP—CD。将PNP—CD插入真核表达载体pcDNA3.O中,构建融合自杀基因表达载体pcDNA3.0/PNP—CD。经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染pcDNA3.0/PNP—CD的抗性细胞克隆。用RTPCR和Western Blotting法检测PNPCD基因在HepG2细胞中的表达。用台盼蓝排斥法检测细胞生长曲线,用MTT法检测细胞细胞克隆对相应前药敏感性及所导致的旁观者效应。结果融合基因片段PNP—CD正确插入了pcDNA3.0中,pcDNA3.0/PNPCD在HepG2细胞中实现了表达。细胞抗性克隆对特定的前药高度敏感。在两种前药联合作用下,pcDNA3.0/PNP—CD所致旁观者效应明显强于只给予MeP—dR一种前药所致旁观者效应。结论具有双自杀基因功能的PNPCD融合基因系统是肝癌基因治疗中一种高效治疗载体,对肝癌细胞有着良好的杀伤作用。 展开更多
关键词 肝细胞 PNP/MeP—dR系统 cd/5 FC系统 融合自杀基因 基因治疗
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^(131)I-c(RGD)_2环肽及其联合基因治疗对荷神经胶质瘤裸鼠模型肿瘤抑制作用
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作者 马欢 刘敏 +4 位作者 陈雪祺 孙宏伟 闫平 王荣福 张春丽 《肿瘤学杂志》 CAS 2017年第10期837-841,共5页
[目的]探讨^(131)I标记的c(RGD)_2 对荷神经胶质瘤裸鼠模型的治疗作用,并与放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀药物系统进行联合治疗,拟建立一种具有特异性和高效性的恶性肿瘤靶向治疗方式。[方法]建立荷神经胶质瘤U87裸鼠模型30只,瘤体... [目的]探讨^(131)I标记的c(RGD)_2 对荷神经胶质瘤裸鼠模型的治疗作用,并与放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀药物系统进行联合治疗,拟建立一种具有特异性和高效性的恶性肿瘤靶向治疗方式。[方法]建立荷神经胶质瘤U87裸鼠模型30只,瘤体直径约14mm时,随机分为6组,每组5只:(1)生理盐水组;(2)^(131)I-c(RGD)_2 11.1MBq组;(3)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq;(4)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq+LV组:连续2d,瘤体内注射方式将5×106U/25μl的重组慢病组载体E8-cod A-GFP LV转染至肿瘤,然后通过尾静脉将18.5MBq^(131)I-c(RGD)_2 注入到小鼠体内;(5)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq+LV+5-FC组:同(4),将同量慢病毒载体转染至瘤内,同时腹腔注射10 mg前体药物5-FC连续7d。(6)^(131)I-对照肽18.5MBq组(序列:YKAREC)。观察各组裸瘤肿瘤体积和质量的变化。[结果]治疗结束后,(2)、(3)、(4)、(5)、(6)组抑瘤率分别为36.75%、41.39%、43.63%、44.87%、3.31%。对瘤体质量进行比较,只有生理盐水组与(3)、(4)及(5)组之间差异有统计学意义(P<0.05),而(3)、(4)及(5)组之间差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]^(131)I-c(RGD)_2 能抑制U87神经胶质瘤的生长,对神经胶质瘤的治疗有潜在价值。但^(131)I-c(RGD)_2 联合放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀系统对于肿瘤细胞的治疗并没有达到统计学上的预期的效果,可能与开始治疗时的瘤体积过大或者样本量小有关。 展开更多
关键词 放射敏感性启动子 cd/5-fc自杀系统 基因治疗 131I-c(RGD)2
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