高品质杂交棉新组合CD135的选育与栽培技术

组合CD135是由W53×Q10杂交配组选育而成,其母本选自优质陆地棉C1×海岛棉35×97中间材料(回交多年)选系材料W53,其父本为自选的高品质、抗逆性强、丰产性好品系Q10。2011年选配出强优势杂交棉新品种(组合)CD135。经品比及多点大面积生产示范,并经枯萎病、黄萎病重病田圃鉴定及农业部棉花品质监督检验测试中心3年检测分析,表现出高品质、丰产性强、适应性广、抗逆性强、抗枯萎病、耐黄萎病等特点,并介绍了CD135的栽培要点。

人Flt3全长基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

目的克隆人Flt3全长基因,构建PGE/Plt3逆转录病毒表达载体。方法以人骨髓cDNA等基因文库为模板,采用分段克隆、人工PCR延伸及PCR连接等方法,获得了人Flt3全长基因,并构建Flt3基因的逆转录病毒表达载体。结果成功克隆Flt3全长基因和构建PGEZ/Flt3逆转录病毒表达载体。结论F1t3全长基因克隆及构建逆转录病毒表达载体的成功,为构建Flt3转基因细胞和制备抗人Flt3单克隆抗体和研究Flt3的生物学功能奠定了物质基础,也为低丰度和长片段基因克隆提供了有价值的经验。

“一箭双星法”构建Flt3转基因细胞株

目的构建稳定表达Flt3分子的转基因细胞株。方法将Flt3基因重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染能力的完整重组病毒载体,进而采用“一箭双星法”即同时感染BaF和L929细胞,构建Flt3转基因细胞株。结果成功获得稳定表达Flt3的转基因细胞株BaF/Flt3和L/Flt3。结论采用“一箭双星法”成功构建Flt3转基因细胞株,为以Flt3为靶分子的研究奠定了物质基础,也为类似的高难度的转基因细胞株的构建提供了有价值的经验。

急性髓系白血病患者FLT3表达及TKD点突变的研究

目的研究急性髓系白血病（AML）患者与正常人FMS样酷氨酸激酶3（FLT3）基因在骨髓中表达的差异以及FLT3基因酪氨酸激酶结构域（TKD）点突变与AML的关系。方法将AML初治患者和正常人的骨髓分别用CD135抗体标记后，应用三色流式细胞术检测并分析；采用RT-PCR结合限制性内切酶酶切，检测30例AML初治患者FLT3基因的TKD点突变。结果AML患者骨髓中CD135阳性率均〉20％，而正常人〈2％，二者差异有统计学意义（P〈0．05）；另外，30例AML患者中3例存在FLT3-TKD点突变，阳性率为10％，其中2例化疗后完全缓解（CR），缓解率66．7％，其他27例非点突变患者化疗后完全缓解率为84％，二者比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AML患者骨髓中FLT3基因表达显著高于正常人。AML患者FLT3-TKD点突变的阳性率为10％左右，FLT3-TKD点突变对患者化疗后CR率的影响有待进一步研究。