益气养阴活血中药对糖尿病肾病大鼠Notch/Hes1通路与血管内皮CD34、CD144的影响

目的观察益气养阴活血中药对糖尿病肾病大鼠Notch/Hes1通路与血管内皮CD34、CD144作用机制。方法采取左肾切除术+高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射STZ复制早期糖尿病肾病大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、西药贝拉普利组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,设正常对照组,药物干预8周。观察24 h尿白蛋白、HE染色肾组织病理、免疫组化肾组织Hes1、Western blot法检测CD34、CD144的表达。结果与正常组比较,模型组24 h尿白蛋白、Hes1、CD34、CD144的含量比较均有明显差异(P<0.05);与模型组比较,中药高剂量组、中剂量组能降低24 h尿蛋白(P<0.05),中药各剂量组均能明显降低肾组织Hes1、CD34含量(P<0.05),中药高剂量组均能明显降低肾组织CD144含量(P<0.05);与西药组比较,中药各剂量组均能降低CD34(P<0.05),中药低剂量组降低CD144(P<0.05)。病理观察模型组大鼠出现肾小球硬化、萎缩,系膜基质增多、系膜出现增厚增宽并可见结节样增生等改变;中药高、中剂量组对上述病理改变有积极改善。结论益气养阴活血中药可以降低模型大鼠肾组织Hes1和CD34、CD144,发挥对肾功能的保护作用,延缓DN的发展。

A549与b.End.3细胞共培养对血脑屏障相关的Epsin1、CD309和CD144分子表达的影响

目的:研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549与小鼠脑血管内皮细胞b.End.3共培养对b.End.3中Epsin1以及其他相关因子表达量的影响。方法:使用b.End.3小鼠脑血管内皮细胞与非小细胞肺癌A549细胞建立体外血脑屏障模型(blood brain barrier,BBB)、血瘤屏障(blood tumor barrier,BTB)模型。实验分为两组:BBB组、BTB组。使用流式细胞仪分选BTB组中的b.End.3细胞。使用q PCR和Western Blot的方法分别检测分选出的b.End.3细胞中Epsin1、CD309、CD144、Occludin转录和表达水平的变化。结果:与A549细胞共培养后,BTB组跨膜细胞电阻值(transendothelial electrical resistance,TEER)较BBB组下降(P<0.05)。共培养后分选出的b.End.3细胞中的Epsin1和CD309、CD144的表达量增高(P<0.05),Occludin的表达量下降(P<0.05)。结论:A549共培养后体外血脑屏障的开放可能与Epsin1及相关因子的表达增高有关。

CD144^+内皮微粒标志物与母婴血型不合新生儿溶血病患儿血管内皮损伤及功能障碍的相关性研究

目的:研究CD144+内皮微粒标志物与母婴血型不合新生儿溶血病患儿血管内皮损伤及功能障碍的相关性。方法:选取45例ABO新生儿溶血病患儿(ABO新生儿溶血病组)、20例Rh血型不合溶血病患儿(Rh血型不合溶血病组)和20例健康新生儿(对照组),收集所有患儿的外周血样本进行血液分析,检查红细胞(RBC)形态、网织红细胞计数和溶血标志物(乳酸脱氢酶LDH和间接胆红素),进行高灵敏度C-反应蛋白(CRP)检测、直接抗球蛋白试验(新生儿)和间接抗球蛋白试验(母亲),定量检测血管性血友病因子抗原(v WF:Ag),并进行抗CD144检测分析和内皮微粒分析,对检查结果进行统计学分析。结果:3组新生儿出生体重及胎龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。两溶血组患儿血红蛋白、LDH和间接胆红素水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),两溶血组组间比较差异无统计学意义(P>0.05),Rh血型不合溶血病组患儿直接抗球蛋白试验阳性率为100%,且网织红细胞计数较ABO新生儿溶血病组患儿高。两溶血组患儿v WF:Ag和治疗前内皮细胞来源的细胞微粒(EMP)水平均较正常组高,且ABO新生儿溶血病组最高(P<0.05);进行换血治疗和/或光线治疗后EMP水平较治疗前显著减低(P<0.05),且患有严重高胆红素血症的ABO新生儿溶血病组患儿经过换血治疗后EMP水平较换血治疗前EMP水平降低得更显著(P<0.05)。两溶血组患儿治疗前EMP水平与LDH、间接胆红素和v WF:Ag水平呈正相关,而治疗前EMP与血红蛋白水平呈负相关(P<0.05)。治疗前EMP和血红蛋白水平仅在ABO新生儿溶血病组呈正相关(P<0.05)。多重回归分析发现:血红蛋白、LDH和间接胆红素水平与ABO新生儿溶血病组患儿治疗前EMP水平独立相关(r2=0.834,P<0.05),Rh血型不合溶血病组患儿仅血红蛋白和LDH水平与治疗前EMP水平呈现独立相关性(r2=0.877,P<0.05)。结论:EMP在ABO新生儿溶血病患儿中的水平升高可用于反映Ig G抗体介导的内皮损伤,测量HDN新生儿的EMP水平有助于评估可能发生的严重血管功能障碍风险。

内皮微粒检测在慢性阻塞性肺疾病诊疗中的应用

血管内皮细胞是衬覆于血管内壁的单层扁平细胞,在保持血管内膜完整性和维持血管正常功能方面具有重要作用。微粒（MPs）是细胞脱落的小囊泡,来源于血小板、红细胞、白细胞及内皮细胞。它表达大量的细胞表面标志,富含mRNA,与多种生物学行为有关。它包含了前体细胞特有的细胞膜、细胞质和细胞核结构,在大小和组成上与其他亚细胞结构如凋亡体和外染色体不同,且功能各异。几乎所有类型的细胞都能释放MPs。

Ph阳性急性淋巴细胞白血病细胞株Sup-B15与基质细胞共培养后对伊马替尼敏感性的变化

目的 探讨基质细胞OP9能否影响ph＋急性淋巴细胞白血病细胞株Sup-B15细胞对伊马替尼的敏感性以及作用机制.方法 实验分为Sup-B15细胞组及基质细胞OP9与Sup-B15共培养组（即Sup-B15/OP9组）.采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率;流式细胞术检测Annexin V/7-AAD标记的细胞凋亡率、CD34＋CD38-细胞比例;荧光定量PCR检测细胞ALDH1、CD144、β-catenin mRNA水平;Western blot法检测细胞CD133、CD144、β-catenin蛋白表达水平;免疫共沉淀方法检测结合于CD144的β-catenin水平.结果 10～45 μmol/L伊马替尼对Sup-B15、Sup-B15/OP9细胞均有增殖抑制作用,其IC50值分别为26.3和35.8 μmol/L,两组差异有统计学意义（P＜0.05）.30 μmol/L伊马替尼作用于Sup-B15、Sup-B15/OP9细胞24h,细胞总凋亡率分别为（14.24±2.11）％和（3.45±0.68）％,两组差异有统计学意义（P＜0.05）.与Sup-B15组相比,Sup-B15/OP9组CD34＋CD38-细胞比例增高[（3.42±0.28）％对（2.16±0.15）％,P＜0.05],ALDH1 mRNA水平增高（0.097±0.012对0.046±0.010,P＜0.05）,CD133蛋白表达水平升高;CD144 mRNA水平增高（0.103±0.015对0.010±0.003,P＜0.05）,CD144蛋白表达水平亦明显增高;β-catenin mRNA水平无明显变化（P＞0.05）,其蛋白总量明显上升,转位到细胞核的β-catenin蛋白明显增加,结合于CD144的β-catenin蛋白增加.结论 与OP9细胞共培养后,Sup-B15细胞对伊马替尼敏感性下降,该作用可能与上调CD144表达、稳定CD144/β-catenin信号通路、增加β-catenin核转位有关.