老年原发性非小细胞肺癌患者外周血中CD28/CTLA-4 mRNA含量变化及临床意义

目的探讨外周血中CD28/CTLA-4 mRNA含量的增龄性改变与老年原发性非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展之间的联系。方法应用实时荧光定量PCR技术对63例老年NSCLC患者外周血单个核细胞CD28/CTLA-4 mRNA的含量进行检测,结果分别与老年健康组、老年肺良性病变组(老年非癌组)、年轻健康组、年轻肺良性病变组(年轻非癌组)以及年轻肺癌组进行对比分析,同时分析它们与临床病理特征之间的关系。结果老年肺癌组外周血中CD28 mRNA含量显著低于其余各组(P<0.01),而CTLA-4 mRNA含量则显著高于其余各组(P<0.01),老年健康组外周血中CD28 mRNA含量明显低于年轻健康组和年轻非癌组,而CTLA-4 mRNA含量则明显高于年轻健康组和年轻非癌组;老年非癌组与老年健康组比较,两者含量差异均无统计学意义。Logistic回归分析显示,年龄、CD28 mRNA含量、CTLA-4 mRNA含量均与肺癌的发生有统计学关联(均P<0.01),且CD28与CTLA-4的mRNA含量具有负相关性(r=-0.400,P<0.01)。另外,CD28及CTLA-4 mRNA的含量均与老年肺癌的临床TNM分期、细胞分化程度以及淋巴结转移状态密切相关(P<0.05,P<0.01),而与病理类型无关(P>0.05)。结论呈增龄性调节的CD28/CTLA-4 mRNA可能在老年人NSCLC的形成和演变过程中发挥着重要的调控作用。

CD28/CTLA-4在子痫前期发病中的作用

协同刺激分子被认为在维持免疫系统相对平衡方面起着重要作用，其中白细胞分化抗原28（CD28）／细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CTLA-4）最为重要。CD28／CTLA-4是T细胞活化的重要调节因子，也是影响T淋巴细胞活化、增殖的一个必要条件。CD28／CTLA-4的异常可导致T细胞亚群分类的异常，从而发生妊娠免疫耐受异常，导致子痫前期的发生。

实验性自身免疫性重症肌无力大鼠CD28/CTLA-4:B7表达水平的研究

目的探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)CD28/CTLA4B7的表达水平。方法健康、雌性Lewis大鼠24只,随机分为正常组、EAMG组、完全福(氏)佐剂(CFA)对照组。EAMG组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射丁(氏)双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体蛋白乳剂1mL,第4周再次注射上述乳剂免疫大鼠。CFA对照组只接受等量的CFA皮下注射。初次免疫后7周分离PBMC,应用RTPCR和流式细胞术分析方法,分别进行CD28、CTLA4mRNA及B71、B72蛋白表达水平检测。结果(1)正常组大鼠PBMCCD28、CTLA4mRNA表达水平较低,尤其CTLA4mRNA仅有极少量表达;前二者在EAMG组大鼠表达水平均明显增加(P<0001),而正常组和CFA对照组之间表达水平差异无显著性(P>005)。(2)正常大鼠B71、B72在PBMC上仅少量表达而EAMG组表达明显增加(P<0001),正常组与CFA对照组比较差异均无显著性(P>005)。结论EAMG大鼠存在PBMCCD28/CTLA4B7协同刺激分子的表达异常,CD28/CTLA4B7共刺激通路可能参与了机体异常免疫反应的诱导与维持,在重症肌无力(MG)的发生过程中发挥重要作用。

B7:CD28/CTLA-4共刺激分子及其在眼科的研究进展

大量实验证实B7家族分子与其受体CD2 8和CTLA 4结合后所产生的共刺激信号在T淋巴细胞激活中起重要作用 ,决定着受到抗原刺激的T细胞是分化、增殖为效应细胞 ,还是进入无反应状态。其在眼科的研究主要集中于眼科自身免疫性疾病、角膜和视网膜三个方面 ,阻断B7:CD2 8/CTLA 4通路可能为眼科自身免疫性疾病、角膜移植排斥反应和视网膜葡萄膜疾病的治疗提供新的途径。本文就其分子特性、功能及其在眼科的研究进展等方面的有关资料作一综述。

共刺激分子CD28/CTLA-4-B7与1型糖尿病

CD2 8/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 (CTLA) 4与B7的相互作用是T细胞活化的重要调节因子 ,在自身免疫性疾病的发生、发展中起着不同的作用。其中 ,CD2 8 B7的过度表达是自身免疫性 1型糖尿病发生的重要原因之一 ;而CTLA4可使CD2 8 B7共刺激信号中止 ,是T淋巴细胞活化的负性调节信号。因此 ,运用B7单克隆抗体阻断CD2 8 B7通路或通过加强B7 CTLA 4作用来抑制自身免疫活性T细胞 ,有可能成为治疗该病的新手段。

协同刺激分子CD28/CTLA-4,B7在实验性变态反应性神经炎发病中的动态变化

目的探讨CD2 8/CTLA 4,B7在小鼠实验性变态反应言神经炎 (EAN )中的变化规律及对发病的影响。方法于小鼠双后肢足垫皮下注射兔坐骨神经匀浆 ,建立EAN模型 ,用免疫组化观察外周淋巴细胞CD2 8,CTLA 4,B7 1和B7 2蛋白的表达 ;用RT PCR检测外周淋巴细胞B7 1和B7 2mRNA的表达。结果B7 1蛋白和mR NA及CTLA 4蛋白从潜伏期至发病高峰呈递增趋势 ,而B7 2蛋白和mRNA及CD2 8蛋白从潜伏期至发病初期明显增高 ,至发病高峰又下降。结论CD2 8/CTLA 4,B7与EAN的发病密切相关。B7 2可能与EAN的始发有关 ,而B7 1与EAN的进展及维持关系更密切。

子痫前期患者外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4的表达水平及意义

目的:探讨子痫前期外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4的表达水平与子痫前期发病的相关性。方法:选择住院确诊的子痫前期孕妇35例为实验组,以30例正常妊娠晚期孕妇为对照组,应用流式细胞术检测两组外周血CD28和CTLA-4在CD3+T细胞上的表达水平并比较。结果:实验组孕妇外周血CD28的表达水平较对照组差异无统计学意义(P>0.05);CTLA-4表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组中外周血CD28/CTLA-4值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期患者外周血CD28/CTLA-4表达异常,从而使T细胞亚群分类异常,免疫调节功能紊乱,免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生。

单纯多发性肌炎的临床、病理和CD28/CTLA-4:B7表达的研究

目的 研究单纯多发性肌炎 (SPM)的临床、病理特征和CD2 8/CTLA 4 :B7表达及其发病机制。方法 回顾性总结 14 1例SPM患者的临床资料 ,收集 6例治疗前症状高峰期PM病人的外周血 ,单色流式细胞术 (FCM)检测外周血淋巴细胞协同刺激分子CD2 8、CTLA 4、B7 1、BB 1和B7 2的表达 ,并与正常健康者对照。结果 本组主要表现肌无力、肌痛或肌捏痛 ,肌酸激酶 (CK)等血清肌酶谱增高 ,肌电图呈肌源性损害。肌肉病理主要表现为肌纤维变性坏死和再生 ,散在萎缩 ,肌内膜炎症细胞浸润。SPM组外周血淋巴细胞CD2 8、CTLA 4、B7 1、B7 2的表达增加 ,FCM显示CTLA 4及B7 1的平均荧光强度各自与对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,CD2 8及B7 2也有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,BB 1在SPM组与对照组表达量均极少。结论 肌肉病理检查是诊断SPM的重要依据 ,协同刺激分子CD2 8/CTLA 4 :B7可能是SPM发病的重要环节。

骨髓增生异常综合征患者骨髓CD4^+T细胞共刺激分子CD28/CTLA-4的变化

目的通过检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者CD3+CD4+T细胞表面CD28+和CTLA-4+分子水平,探讨两者在MDS发病机制中的作用。方法用流式细胞技术检测38例初治MDS患者和11例正常对照组外周血CD3+CD4+T细胞表面CD28+和CTLA-4+表达率。结果(1)MDS组CD3+CD4+CD28+表达率为(79.82±8.99)%[难治性贫血(RA)(78.65±10.4)%、伴原始细胞增多性难治性贫血(RAEB)/转变中的原始细胞增多性难治性贫血(RAEB-t)(80.10±7.28%)],低于正常对照组的(89.56±3.06)%,差异有高度统计学意义(P﹤0.01);(2)MDS组CD3+CD4+CTLA-4+表达率为(2.14±1.25)%[RA(1.51±0.80)%、RAEB/RAEB-t为(2.65±1.33)%],显著高于正常组的(0.11±0.12)%,差异有高度统计学意义(P﹤0.01);随MDS疾病的进展,RAEB/RAEB-t组CD3+CD4+CTLA-4+的表达率与RA组比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)CTLA-4/CD28免疫应答中相互拮抗的共刺激分子对比值在MDS-RA组中为2.14±0.97,RAEB/RAEB-t组为3.58±1.55,高于正常对照组的0.11±0.11,差异有高度统计学意义(P﹤0.01);并且RA组和RAEB/RAEB-t组之间的差异亦有高度统计学意义(P﹤0.01)。结论(1)MDS患者骨髓的CD3+CD4+T细胞表面的共刺激分子表达异常,CD28下调,CTLA-4上调,T细胞处于抑制状态;(2)随着MDS骨髓中原始细胞的增多,CD28/CTLA-4比值增高,进一步说明CD28/CTLA-4异常与MDS疾病的发生及进展相关。

子痫前期患者辅助性T淋巴细胞及协同刺激分子CD28/CTLA-4的表达

目的:探讨辅助性T淋巴细胞及协同刺激分子CD28/CTLA-4在子痫前期发病中的作用。方法:采集22例正常妊娠妇女(正常妊娠组)及45例子痫前期患者(子痫前期组,包括22例轻度和23例重度)外周血,用流式细胞技术分别检测外周血Th1、Th2及Th1/Th2比率及CD28和CTLA-4在CD4+T细胞的表达。结果:子痫前期组Th1、Th1/Th2、CTLA-4均高于正常妊娠组,且重度高于轻度(P<0.05);子痫前期组Th2、CD28/CTLA-4低于正常妊娠组,且重度低于轻度(P<0.05)。CD28与Th1呈负相关,r=-0.295;CTLA-4与Th1呈正相关,r=0.551,与Th2呈负相关,r=-0.363;CD28/CTLA-4与Th1/Th2呈负相关,r=-0.707。结论:子痫前期患者外周血协同刺激分子CD28/CTLA-4表达异常,高表达的CTLA-4促进CD4+T淋巴细胞过度活化并向Th1亚群分化,导致Th1/Th2比率失衡,这可能是子痫前期发生的重要原因之一。

CD28/CTLA-4:B7在特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞中的表达及意义

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)的表达及意义。方法:采用免疫荧光标记和流式细胞术检测41例ITP患者和40例健康对照者外周血CD3+CD28+细胞、CD3+CD152+细胞、CD80+CD19+细胞和CD86+CD19+细胞分别占淋巴细胞的比例及血小板表面相关抗体水平,进行2组对比、分析。结果:与正常对照组相比,急性ITP患者外周血CD3+CD28+细胞和CD3+CD152+细胞差异无统计学意义(P>0.05),CD80+CD19+细胞增多(P<0.05),CD86+CD19+细胞显著增多(P<0.01),慢性ITP患者CD86+CD19+细胞增多(P<0.05);急性ITP患者外周血CD86+CD19+细胞较慢性ITP患者增多(P<0.05);与正常对照组相比,急性ITP患者PAIg's、PAIgG和PAIgM水平显著增高,慢性ITP患者PAIgG水平增高;CD80、CD86表达与PAIgG水平之间存在显著的相关性(均P<0.01)。结论:ITP患者外周血B淋巴细胞上CD86和CD80表达均异常,可能与其发病相关。

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4分子表达的研究

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞CD28/CTLA-4分子和CD28/CTLA-4mRNA的表达。方法研究对象为SLE患者49例(活跃期30例、缓解期19例)及对照组23例。外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)经梯度密度离心法分离后分佛波醇乙酯(PMA)(10ng/ml)及伊屋诺霉素(500ng/ml)刺激组和不加刺激剂组两组培养。将PBMCs分别培养24、48、72及96小时。应用流式细胞计量术(flow cytometry,FCM)检测外周血淋巴细胞培养前后CD28及CTLA-4分子的表达。采用RT-PCR方法检测CD28mRNA和CTLA-4mRNA的表达。结果刺激前后SLE患者CD3+及CD8+T细胞上CD28分子表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。刺激前活跃期SLE患者CD3+T细胞上CTLA-4分子表达量较对照组明显降低[(0.78±0.51)%vs(1.34±0.76)%,P<0.05]。刺激后72小时SLE患者CD3+T细胞及CD8+T细胞上CTLA-4分子表达量仍低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。刺激前后PBMCs中CD28mRNA及CTLA-4mRNA表达情况与刺激前后CD3+T细胞上CD28及CTLA-4分子变化情况相似。刺激前SLE患者CD3+T细胞上CTLA-4分子表达量与SLE活动指数(SLEDAI)呈显著的直线负相关关系(P<0.001)。结论 SLE患者T细胞CTLA-4分子存在表达及上调机制障碍,提示CD28分子及CTLA-4分子存在功能失衡,这种失衡可能通过一定的机制参与SLE的发病过程。

CD28/CTLA-4在类风湿关节炎患者外周血和关节积液中的表达及意义

目的 探讨T细胞辅助刺激分子CD2 8和CTLA 4在类风湿关节炎 (rheumatoidarthritis ,RA)中的表达及其与疾病活动的相关性。方法 采集患者外周抗凝血和关节积液 ,通过淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离其中的淋巴细胞 ,采用流式细胞术双标染色技术 ,检测CD3 + CD2 8+ 和CD3 + CTLA 4+ 在淋巴细胞上的表达 ,通过Spearman相关进行统计分析 ,评价其与疾病活动的相关性。结果 ①RA患者外周血单个核细胞 (PBMC)CD3 + CD2 8+ 的表达显著低于正常对照组和RA患者关节积液 (SFMC)组 (P <0 0 1) ;②RA患者PBMC上CD3 + CTLA 4+ 的表达与正常组无差异 ,但显著低于SFMC组(P <0 0 5 )。③SFMC组CD3 + CD2 8+ 的表达与正常组无显著性差异 ,但CD3 + CTLA 4+ 的表达显著高于正常组 (P <0 0 1)④PBMC组、SFMC组CD3 + CD2 8+ 和CD3 + CTLA 4+ 的表达与反映疾病活动性的指标RF、抗CCP抗体存在相关关系。结论 RA患者外周血和关节积液中CD2 8+ 和CTLA4的表达异常是参与RA发病和病情进展的重要机制之一。

来氟米特对EAE豚鼠外周血CD28/CTLA-4共刺激分子表达的影响

目的通过观察来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)豚鼠外周血CD28/CTLA-4共刺激分子表达的影响,探讨来氟米特对EAE的防治作用及免疫学机制。方法将50只成年雌性豚鼠随机分为5组,每组各10只,分别为正常对照组、EAE对照组、低剂量、治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。低、中、高剂量治疗组于造模前7 d始按体质量分别予来氟米特10、20、40 mg/(kg·d)灌胃,均1次/天,至实验终止。流式细胞术检测各组外周血CD4+T细胞膜上CD28、CTLA-4共刺激分子表达情况并记录豚鼠发病情况。结果高、中剂量治疗组较EAE对照组潜伏期延长、进展期缩短、神经功能障碍评分降低,差异有统计学意义(P<0.05),以高剂量治疗组最明显(P<0.05)。EAE对照组较正常对照组发病高峰期外周血CD4+T细胞膜上CD28分子表达升高(P<0.05),而CTLA-4表达下降(P<0.05);高、中剂量治疗组较EAE对照组CD28分子表达下调(P<0.05),而CTLA-4表达升高(P<0.05);各治疗组间CD28分子的表达以高剂量治疗组下调最显著(P<0.05),CTLA-4分子的表达以高剂量治疗组上调显著(P<0.05)。相关分析显示EAE对照组、各治疗组外周血CD28/CTLA-4比值与神经功能障碍评分均呈正比(r=0.85,P=0.002;r=0.77,P=0.000)。结论来氟米特可减轻EAE豚鼠神经功能缺损症状,且剂量越高效果越好。其作用机制可能是通过下调外周血CD4+T细胞上CD28分子,上调CTLA-4分子的表达,使EAE豚鼠免疫失衡重新达到平衡,从而减轻炎性反应,调节免疫应答,减轻临床症状。

CD28/CTLA-4共刺激分子在实验性变态反应性脑脊髓炎发病机制中的作用

目的研究CD28/CTLA-4共刺激分子在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)发病机制中可能的免疫学作用。方法将60只成年雌性豚鼠随机分为3组各20只,分别为对照组、佐剂对照组及EAE模型组,流式细胞术检测各组外周血CD4+T细胞膜上CD28、CTLA-4共刺激分子的表达,ELISA法检测外周血单个核细胞分泌INF-γ及IL-4的量,并评测两者比值的相关性。结果 EAE模型组豚鼠外周血CD4+T细胞膜上CD28的表达率为(42.39±9.82)%,高于对照组及佐剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EAE模型组CTLA-4表达率为(2.31±1.27)%,低对照组及佐剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而对照组与佐剂对照组在CD28和CTLA-4两者的表达率上差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson直线相关分析发现:CD28/CTLA-4比值与IFN-γ/IL-4比值呈正相关(r=0.645,P=0.000)。结论 EAE豚鼠外周血CD4+T膜上CD28/CTLA-4共刺激分子表达失衡,并且影下游Th1/Th2的细胞因子分泌失衡,异常免疫反应持续增强,从而使EAE豚鼠发病。

CD28/CTLA-4在支气管哮喘疾病中的作用研究

本文首先阐述了支气管哮喘的免疫学变化,其主要表现为Th1/Th2亚群数目和(或)功能比例失衡。其次介绍了CD28/CT-LA-4的结构、功能和作用机制,CD28/CTLA-4是一对具有正负调节功能的重要共刺激分子,能对T细胞增殖分别产生促进/抑制作用,进而影响Th1/Th2亚群数目和(或)功能比例。最后全面系统的介绍了CD28/CTLA-4在支气管哮喘免疫反应中的作用,为今后基于CD28/CTLA-4的支气管哮喘疾病研究奠定了基础。

早发型重度子痫前期分娩前后CD28/CTLA-4的相关研究

目的:探讨白细胞分化抗原28/细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CD28/CTLA-4)与早发型重度子痫前期发病的关系。方法:采用流式细胞技术分别测定30例早发型重度子痫前期患者分娩前后的CD28、CTLA-4、CD28/CTLA-4表达水平,同时测量各组受试者血压及肝肾功能。结果:早发型重度子痫前期患者分娩前CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CTLA-4+高于分娩后,CD3+CD4+CD28+/CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CD28+/CD3+CD8+CTLA-4+低于分娩后,差异有统计学意义(均P<0.05)。CD3+CD4+CD28+/CD3+CD4+CTLA-4+、CD3+CD8+CD28/CD3+CD8+CTLA-4+两者无直线相关性(r=-0.037,P=0.844)。结论:早发型重度子痫前期患者分娩后较分娩前CTLA-4的表达下降,CD28/CTLA-4上升,可能提示CD28/CTLA-4免疫偏移与子痫前期的发生有关。

葡萄球菌肠毒素A诱导小鼠体内T细胞无能过程中CD28/CTLA-4的变化

目的在葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导小鼠体内T细胞无能的过程中,观察CD28和CTLA-4的变化规律及相互关系。方法单次(1×SEA组,n=4)或多次(2×SEA组,n=4;3×SEA组,n=4)向小鼠腹腔注射SEA,每次注射间隔3d,分别于末次注射后的第1、3、7、14天,将小鼠处死,制备小鼠脾淋巴细胞。通过流式细胞仪检测细胞膜表达CD28和CTLA-4、细胞内表达CTLA-4和IL-2的阳性率。结果1×SEA组,细胞膜CD28和细胞内IL-2的表达显著上升;而CTLA-4在细胞内和细胞膜表面的表达均降低且无明显变化;2×SEA组CD28和IL-2的表达稍有上升;CTLA-4在细胞内和细胞膜表面的表达均明显增加,胞内CTLA-4的增加尤为显著。3×SEA组,细胞膜CD28、细胞膜和细胞内CTLA-4的表达呈下降趋势,细胞内IL-2在第7天已经检测不到。结论SEA初次诱导小鼠脾淋巴细胞时,能显著促进T细胞的活化;经SEA多次(3次)刺激可诱导T细胞的无反应性。在无能的形成过程中,IL-2产生减少与CD28表达下调可能有着密切联系;CTLA-4的表达上调有利于无能的诱导,但可能不参与无能的维持。

CD28/CTLA-4及其配体的研究进展

Ｔ细胞上的ＣＤ２８分子通过介导非特异性辅助激活途径，可协同Ｔ细胞受体（Ｔｃｅｌｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＣＲ／ＣＤ３）激活途径使Ｔ细胞完全活化，分泌细胞因子进而增殖、分化。ＣＤ２８分子的类同物ＣＴＬＡ－４，不仅在分子结构上与之同源，而且两者有共同的天然配体，迄今发现有三种配体［１］存在于抗原提呈细胞（ＡＰＣ）上：Ｂ７－１，Ｂ７－２和Ｂ７－３。其相互作用的分子机理尚待深入研究。通过增强ＣＤ２８信号转导可用于抗肿瘤治疗或改善免疫反应低下的状况，而阻断此途径则可以用于抑制器官移植后的免疫排斥反应。

协同刺激分子CD28/CTLA-4:B7在胃癌患者中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4 (CTLA-4,CD152)及B7分子的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、CD152、CD3、CD4、CD8及B7分子的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较。结果胃癌患者外周血中CD3^+、CD4^+、CD3^+CD28^+、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)的表达水平及CD4^+/CD8^+低于健康对照组及良性肿瘤组,CD3^+、CD152^+和CD8^+水平显著增高。结论胃癌患者外周血淋巴细胞低表达CD28和B7分子,高表达CTLA-4分子,导致了胃癌患者B7:CD28/CTLA-4共刺激通路异常,影响了T细胞彻底清除肿瘤细胞,从而使肿瘤逃避机体的免疫监视、免疫抑制,发生转移。