川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓细胞PECAM-1/CD31分子表达与造血重建的作用

本研究通过观察骨髓移植后小鼠骨髓中血小板内皮细胞间黏附分子 (PECAM 1/CD31)的表达水平变化及川芎嗪对其表达的调节作用 ,进一步探讨川芎嗪促进骨髓造血微环境修复、改善造血重建的作用机制。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组 ,单纯BMT对照组和川芎嗪治疗组 (骨髓移植 +川芎嗪 ) ,接受 7.5Gy60 Coγ射线一次性全身均匀照射 ,照射后进行同基因小鼠骨髓移植 ,并分别胃饲等量生理盐水与川芎嗪注射液 ,2次 /天。骨髓移植后第 7,14 ,2 1天 ,采用流式细胞术检测小鼠骨髓有核细胞表面CD31分子表达水平 ,计数外周血白细胞、血小板及骨髓有核细胞数 ,并做骨髓组织学检查。结果表明 :骨髓移植后第 7,14 ,2 1天川芎嗪治疗组的CD31表达水平 ,外周血白细胞、血小板和骨髓有核细胞计数以及骨髓细胞增生程度均高于骨髓移植对照组 (P <0 .0 1或P<0 .0 5 )。结论 :川芎嗪可以明显促进骨髓移植后骨髓有核细胞表面黏附分子CD31的表达水平 ,这可能是其促进造血重建的作用机制之一。

经鼻给予降钙素基因相关肽促进蛛网膜下腔出血后大脑皮层CD31/PECAM-1表达

目的探讨经鼻应用降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下腔出血(SAH)后大脑皮层血小板内皮细胞粘附分子-1(CD31/PECAM-1)表达的影响。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池两次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。于第二次枕大池注血后3d,将大鼠经心灌注生理盐水后取脑制作冰冻切片,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层CD31/PECAM-1表达。结果行为学和解剖学观察证实大鼠SAH模型制作成功。第二次枕大池注血后3d,SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达进一步增强。结论经鼻应用CGRP可促进SAH后大脑皮层CD31/PECAM-1表达,从而在一定程度上促进血管新生,减轻继发性脑缺血。

甲状腺乳头状癌TGF-β_1、CD_(31)表达与肿瘤转移的关系

目的:研究甲状腺乳头状癌组织中TGF-β1和CD31的表达水平与甲状腺癌转移的关系。方法:分别应用原位杂交法和En VisionTM免疫组织化学法检测55例甲状腺乳头状癌和10例癌周组织TGF-β1mRNA、TGF-β1蛋白和CD31蛋白的表达;并计数CD31标记的肿瘤组织微血管密度。结果:甲状腺乳头状癌组织TGF-β1mRNA阳性为表达率为80.00%,甲状腺乳头状癌组织中TGF-β1阳性表达率为76.37%,均高于癌周组织,差异有统计学意义(P<0.01);微血管密度(MVD)与TGF-β1的表达之间存在正相关关系。结论:TGF-β1促进甲状腺癌肿瘤微血管形成,在肿瘤转移中起重要的作用。

探讨nm23-H1、VEGF-C和CD31在甲状腺乳头状癌中表达的相关性

目的探讨nm23-H1、VEGF-C和CD31联合检测在甲状腺乳头状癌(PTC)的诊断与淋巴结转移方面的作用及可能的分子机制。方法采用免疫组化方法检测110例PTC手术切除标本中nm23-H1、VEGF-C和CD31表达情况,同时以60例结节性甲状腺肿伴乳头状增生组织和20例正常甲状腺组织作为对照。结果nm23-H1、VEGF-C和CD31在PTC组织中阳性表达率分别为59.1%、68.2%和64.1%,明显高于良性乳头状增生组(35%、33.3%和43.1%),其中nm23-H1在无淋巴结转移组的阳性率(73.5%)明显高于淋巴结转移组(35.7%)(P<0.05);而VEGF-C和CD31在淋巴结转移组的阳性率(90.5%和78.1%)明显高于无淋巴结转移组(54.4%和51%)(P<0.05)。且PTC组织中nm23-H1的表达与VEGF-C的表达呈负相关(r=-0.63,P<0.05)。结论在PTC组织中,nm23-H1可能通过对G蛋白的控制来影响VEGF-C、CD31的表达及淋巴结的转移,三者联合检测为早期判断PTC有/无淋巴结转移及转移潜能提供重要依据。

食管鳞癌中T淋巴瘤侵袭转移诱导基因1、血管内皮生长因子和CD31的表达及其相关性研究

目的检测食管鳞癌中T淋巴瘤侵袭转移诱导基因1(Tiam1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达特点,关注其对CD31标记的血管生成的作用。方法以87例食管鳞癌标本作为观察组,72例正常食管黏膜组织作为对照组,采用流式细胞技术,分别检测二组中Tiam1、VEGF和CD31的表达,探讨其在不同临床特征中的表达差别及相关性。结果 Tiam1、VEGF和CD31蛋白在食管鳞癌中高表达,Tiam1、VEGF和CD31的表达与食管癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移及PCNA的增殖指数密切相关;线性相关性分析显示Tiam1、VEGF和CD31的表达之间均呈正相关性。结论 Tiam1、VEGF和CD31在食管鳞癌中高表达,二者对肿瘤进展有重要作用,Tiam1和VEGF可能对促进CD31标记的新生血管内皮细胞的增殖有一定作用,联合检测Tiam1、VEGF和CD31蛋白可能与预后有关。

慢性粒细胞性白血病患者骨髓源bcr/abl融合基因阳性Flk1^+CD31^-CD34^-干细胞体外抗STI571机制的初步研究

为进一步了解STI571对慢性粒细胞性白血病(CML)患者体内bcr/abl融合基因阳性的原始及定向白血病干/祖细胞分化及增殖的影响,更深入阐明部分CML患者在经历一段血液学甚至是细胞遗传学水平上的完全缓解后复发及对STI571的耐药机制,利用从CML患者骨髓分离到的具有血管母细胞特性、bcr/abl融合基因阳性、免疫表型为Flk1+CD31-CD34-细胞,体外检测了STI571对其在造血集落培养基中的分化及处于分化阶段时的增殖抑制作用。结果显示:浓度为5μmol/LSTI571,维持作用96小时(病人体内维持96小时的STI571浓度只可能达到1-2μmol/L),即可有效抑制定向造血祖细胞的增殖。没有充分的证据显示,相对原始的bcr/abl融合基因阳性、免疫表型为Flk1+CD31-CD34-细胞的分化及增殖受到明显的抑制作用。结论:CML患者体内的原始白血病干/祖细胞对STI571具有一定的抗性,临床上所观察到的CML患者在运用STI571一段时间后出现正常的造血恢复现象,可能仅仅是因为STI571杀死或抑制了定向恶性白血病祖细胞的增殖,但随着时间的推移,在经历了短暂的血液学甚至是细胞遗传学水平上的缓解后,对STI571耐药的原始白血病干/祖细胞终究会再次导致CML的复发。

骨髓间充质干细胞SCA-~1+/CD45^+/CD31^+亚群的归巢能力

背景:自2003年,美国FDA率先批准自体骨髓干细胞移植治疗心肌梗死性疾病以来,已有大量临床及基础研究报道,但报道结果却不尽相同,其中很重要的一点就是干细胞无法有效到达心肌损伤部位(即干细胞归巢)。目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞各亚群在心肌修复中的归巢能力。方法:以小鼠心肌干细胞表面分化抗原筛查小鼠骨髓间充质干细胞,再以CD45、CD31为标准分选得到小鼠骨髓间充质干细胞4个亚群。采用Transwell小室检测各亚群组细胞的归巢能力。将各亚群细胞注入心肌梗死48 h小鼠体内,注射后48,96 h及7 d处死小鼠取其心脏完成小动物活体成像并检测其荧光强度。结果与结论:小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群归巢能力优于其他亚群。小动物活体成像提示干细胞注射48 h,96 h及7 d时SCA-1+/CD45+/CD31+亚群平均荧光强度优于其他亚群,SCA-1+/CD45+/CD31+亚群迁移率最高,说明SCA-1+/CD45-/CD31-群体有向受损心肌归巢的趋势。

微波辐照对血管内皮细胞CD31表达、分布及其磷酸化的影响

目的:研究微波辐照对血管内皮细胞血小板-内皮细胞粘附分子-1(platelet-endothelialcelladhesionmolecule,PECAM-1/CD31)表达、分布、磷酸化的影响,探讨微波辐照引起单核细胞浸润的分子机制。方法:培养的大鼠肺血管内皮细胞接受30W/cm2微波辐照,在辐照后不同时间,分别检测CD31mRNA和蛋白表达及磷酸化,观察CD31和细胞骨架蛋白F-actin分布,检测单核样HL-60细胞在单层内皮细胞上迁移及CD31单抗的干预。结果:微波暴露4h后CD31mRNA表达上调,8h后CD31蛋白表达开始上调,此时单核样HL-60细胞在受照内皮细胞上的迁移数显著增多,而加入CD31单抗可明显干预HL-60细胞迁移。CD31磷酸化在暴露后2h达到峰值。微波暴露还引起CD31在细胞连接间隙处分布减少和F-actin分布紊乱。结论:一定剂量微波暴露引起诱导的单核样HL-60细胞在内皮细胞上迁移增多,与辐照诱导内皮细胞CD31表达上调、CD31分布改变和磷酸化增强有关,拮抗CD31表达有减少细胞浸润作用,是防治微波暴露后细胞浸润的策略之一。

LYVE-1和CD31在非小细胞肺癌中的表达及与肿瘤转移的相关性研究

目的本研究探讨LYVE-1和CD31在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与肿瘤转移的关系.方法采用En Vision显色系统免疫组化方法检测40例NSCLC癌组织和40例癌周组织LYVE-1和CD31的表达,并计数LYVE-1和CD31标记的癌组织及癌旁组织中的微淋巴管(MLVD)和微血管密度(MVD).结果NSCLC癌组织与正常肺组织和癌旁组织中MLVD差异有统计学意义(P<0.001);癌组织中MLVD在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较差异有统计学意义(P<0.001);癌组织中MLVDⅠ期+Ⅱ期与Ⅲ期+Ⅳ期比较差异有统计学意义(P<0.001);但NSCLC癌组织中MLVD与性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关(P>0.05).NSCLC癌旁组织MVD显著高于癌组织MVD,差异有统计学意义(P<0.001);NSCLC有淋巴转移组MVD高于无淋巴转移组,比较无统计学意义(P>0.05);NSCLCⅢ期+Ⅳ期MVD高于Ⅰ期+Ⅱ期,比较无统计学意义(P>0.05).相关性分析统计表明,MLVD/MVD在NSCLC癌周组织中的表达无相关性(r=0.034,P>0.05).结论NSCLC中LYVE-1和CD31表达水平可作为判断病情进展和肿瘤转移的指标之一.

甲状腺乳头状癌nm23-H1、CD31表达与肿瘤转移关系的研究

[目的]研究甲状腺乳头状癌组织中nm23-H1和CD31的表达水平与甲状腺癌转移的关系。[方法]应用EnVisionTM免疫组织化学法检测55例甲状腺乳头状癌和10例癌周组织nm23-H1蛋白和CD31蛋白的表达;并计数CD31标记的肿瘤组织微血管密度。[结果]甲状腺乳头状癌组织中nm23-H1阳性表达率为65.46%,均高于癌周组织,差异有统计学意义(P<0·01);微血管密度(MVD)与nm23-H1的表达之间存在负相关关系。[结论]nm23-H1抑制甲状腺癌肿瘤微血管形成,在抑制肿瘤转移中起重要的作用。

冠心病患者血小板CD31及血浆纤维蛋白原表达水平的测定及其意义

目的检测冠心病(CHD)患者血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)及血浆纤维蛋白原(FIB)水平,分析其与CHD严重程度的相关性并探讨其临床意义。方法入选研究对象97例,分为稳定型心绞痛(SAP)组(21例),急性冠脉综合征(ACS)组(43例)和正常对照组(33例)。采用流式细胞术检测血小板CD31,凝固法测定血浆FIB的表达水平。结果 ACS组血小板表面活性标志物CD31[(93.85±14.84)%],血浆FIB水平[(3.66±0.91)g/L]均明显高于对照组[(78.69±27.09)%,(3.06±0.62)g/L]和SAP组[(82.80±28.00)%,(3.14±0.56)g/L(均为P<0.05)];而对照组与SAP组CD31、FIB表达水平差异无统计学意义(均为P>0.05)。相关分析显示CD31与FIB呈显著正相关(r=0.337,P<0.01)。结论检测CHD患者CD31、FIB水平,能较好地反映CHD严重程度,对临床有重要的应用价值。

TGF-β1和CD_(31)在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨TGF-β1与CD31在甲状腺乳头状癌的表达及临床意义。方法分别应用免疫组织化学方法和Western-Blot法检测TGF-β1、CD31在甲状腺乳头状癌及癌旁正常组织中的表达变化。结果 TGF-β1甲状腺乳头状癌组织主要分布于胞浆和胞外基质中,在胞浆中表达明显降低,而在基质中表达升高;而CD31在肿瘤组织周围间质的血管内皮表达均较强;且与正常组织相比,TGF-β1与CD31蛋白表达均明显升高。结论 TGF-β1在细胞外基质的高表达,及CD31的过表达提示二者均与肿瘤的侵袭、转移有关,可能在甲状腺乳头状癌的临床诊治中具有重要意义。

LYVE-1和CD31在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的检测淋巴管内皮细胞特异性标志物LYVE-1和内皮细胞标记物CD31在卵巢上皮性肿瘤中的表达情况,探讨其与肿瘤转移的关系。方法采用EnVision免疫组织化学二步法,分别检测卵巢上皮性癌30例,交界性卵巢肿瘤8例和良性卵巢囊腺瘤15例中的LYVE-1和CD31的表达,计数LYVE-1的阳性淋巴管数即MLC和CD31的微脉管密度即MVD。结果卵巢上皮性癌LYVE-1和CD31的表达即MLC和MVD显著高于卵巢交界性肿瘤和良性肿瘤(P<0.01)。卵巢上皮性癌中组织学分级G3患者的MLC和MVD显著高于G1-G2(MLC,P<0.05;MVD,P<0.01);临床分期Ⅲ-Ⅳ期患者的MLC和MVD显著高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.01);有淋巴结转移的MLC和MVD显著高于无淋巴结转移者(P<0.01);卵巢上皮性癌MLC和MVD在不同的组织学类型中无显著性差异(P>0.05)。结论LYVE-1和CD31在卵巢上皮性癌中的表达水平说明肿瘤组织中存在新生淋巴管和血管,它们在肿瘤转移过程中起重要作用。MLC和MVD可作为肿瘤转移的生物学指标,并且对卵巢上皮性肿瘤临床预后的评估有重要的指导意义。

正畸牙移动过程中Piezo1通道对张力侧血管生成和成骨的影响

目的 探讨正畸牙移动过程中Piezo1通道对张力侧血管生成及成骨改建的影响,为加速正畸牙周组织改建提供实验依据。方法 本实验已获得单位实验动物伦理委员会批准。选取60只健康雄性SD大鼠以上颌双侧中切牙为支抗,使用镍钛拉簧施加0.5 N力近中移动大鼠上颌右侧第一磨牙构建正畸牙齿移动模型,随机分成3组,每组20只,加力后0、8 d时在右侧上颌第一磨牙颊、腭侧黏膜下分别注射等量生理盐水(对照组)、100μmol/L Piezo1通道激动剂(Yoda1组)、48μmol/L Piezo1通道抑制剂(GsMTx4组),分别在第1、3、7、14天测量牙齿移动距离并每组各处死5只大鼠,获取上颌组织标本。通过HE染色观察张力侧牙周组织病理生理变化,免疫组化染色标记张力侧血小板内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)阳性细胞计数以进行微血管定量,检测张力侧骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达情况。结果牙齿移动距离测量结果显示,Yoda1组第3、7、14天牙齿移动距离分别为(0.238±0.008)mm、(0.406±0.011)mm、(0.746±0.013)mm,与对照组相比显著增加(P<0.05);GsMTx4组第7、14天牙齿移动距离分别为(0.282±0.011)mm、(0.578±0.008)mm,与对照组相比显著减少(P<0.05)。HE染色结果显示,3组张力侧牙周膜间隙随加力时间增加逐渐增宽,其中对照组及Yoda1组加力第7天时可见成骨细胞,第14天时随后牙周膜间隙逐渐恢复到正常。CD31阳性细胞计数微血管定量分析结果显示,与对照组相比,Yoda1组第3天(8.027±0.225)、第7天(14.320±0.471)血管数量显著增多(P<0.05),在第7天达到峰值,随后逐渐下降;GsMTx4组加力第3天(6.013±0.177)、第7天(9.187±0.678)、第14天(12.613±0.334)张力侧牙周膜内血管数量增加显著减少(P<0.05)。免疫组化结果显示,与对照组相比,Yoda1组加力后各时间点OCN表达显著增强(P<0.05),GsMTx4组加力第7天、第14天的OCN表达减弱(P<0.05)。结论 Piezo1通道激活会促进正畸牙齿移动,促进张力侧血管生成及成骨改建,抑制Piezo1通道则产生相反的效果。

HIF-1α及CD31促进晚期肝癌转移及侵袭的分子机制

缺氧是实体肿瘤微环境(TME)的重要生物学特征,与肿瘤的侵袭转移密切相关。由于正常组织的氧供无法为肿瘤细胞提供充足的生长条件,肿瘤细胞内部会加速新生血管的形成进一步加重缺氧。低氧诱导因子(HIF-1α)被认为是在低氧条件下激活的关键转录调节因子,相关研究表明HIF-1α在肝癌组织中呈高度表达,促进血管生成及肿瘤的侵袭和转移,并维持着肿瘤细胞的代谢,是肝细胞癌发生、发展过程中重要的调控蛋白之一,与HIF-1α相关的HCC治疗也取得了快速地进展。与此同时,研究发现TME可以通过血小板内皮细胞粘附因子1 (PECAM-1/CD31)发挥作用,推动晚期转移进展,并在肿瘤进展的前终末阶段中起关键作用,且HIF-1α与CD31表达具有相关性。本综述重点总结HIF-1α及CD31促进晚期肝癌(HCC)转移及侵袭的分子机制。

CD31在主动脉夹层形成中的潜在作用及其研究进展

近年来,生活节奏日益加快,心源性猝死发生的比例逐渐升高,人类面临重要挑战,这其中法医病理学工作具有重要意义。主动脉夹层是具有起病急骤、进展迅速、病史不详和死亡率高等特征的一类心源性猝死,易引起家属的质疑及医患纠纷。目前主动脉夹层发生的分子病理学机制尚未完全阐明,CD31作为血管内皮细胞的一种特异性标记物,存在于血管内皮细胞及紧密连接处,对血管的生成和维持血管内膜结构稳定性起着重要作用。本文综述CD31分子在主动脉夹层形成中的可能作用及潜在影响,为后续探讨主动脉夹层发生的分子病理学机制提供参考和借鉴。

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘血管PECAM-1的表达及意义

目的 :探讨妊娠肝内胆汁淤积症 (ICP)患者胎盘血管血小板 -内皮细胞粘附分子 (PECAM 1)表达的变化。方法 :采用S P免疫组化方法。结果 :(1)光镜下发现ICP患者胎盘绒毛水肿、绒毛间隙狭窄、绒毛血管合体膜增厚。 (2 )ICP患者胎盘和正常孕妇胎盘血管内皮上均有PECAM 1的表达 ,但ICP组胎盘血管表达PECAM 1的平均血管密度值以及强度显著大于正常孕妇组 (P <0 0 1) ,并且随着ICP组分度的加重 ,表达增强。结论 :ICP患者胎盘粘附分子PECAM 1表达的异常可能是导致ICP胎盘病理改变的一个原因。

细胞间黏附分子CD146的研究进展

细胞间通过一些连接复合体彼此联系，在维持细胞极性、组织完整性、参与细胞各种生理和病理功能等方面发挥着重要的作用。这些主要的连接包括：粘着连接（adherens junctions）、紧密连接（tight junctions）、缝隙连接（gapjunction）等；此外细胞还表达一些跨膜蛋白结构的黏附分子（如PECAM-1，VE—cadherin，CD34等），它们在促进细胞间联系、维持组织形态、调节细胞生长和信号传导等多方面发挥重要的作用。CD146（又称Mel—CAM，MUC18，A32，S—Endo-1）也属于这一类细胞间连接的黏附分子。CDl46最初是在黑色素瘤细胞上发现的，能促进肿瘤的生长和转移，是肿瘤进展的标志。国外的研究发现CD146有着更广泛的组织分布，它不仅在所有人内皮细胞上组成性表达，在平滑肌细胞、活化的T细胞、小脑皮层等组织中都有表达。更深入的研究认为CD146除有“分子胶水”功能以外，还参与了肿瘤、炎症等一些疾病的发生、发展。本文阐述这一细胞间连接的黏附分子与疾病关系的新进展。

AMD3100对局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质血管再生的影响

目的探讨AMD3100阻断SDF-1/CXCR4轴后,对局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血半暗带血管再生的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(IR组)、AMD3100组(IRA组)、生理盐水组(IRN组)。采用线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,缺血2h后将IR、IRA和IRN组分为再灌注12h,1、3和7d四个亚组。HE染色观察局灶脑缺血/再灌注后大脑皮质病理变化。免疫组化法检测CD31在缺血半暗带表达。荧光定量PCR检测外周血中AC133mRNA表达。结果与IRN组比较,IRA 12h外周血中AC133mRNA显著升高,第1d升高达峰值(P<0.01),IRA 3dAC133mRNA表达比IRA1d显著减少(P<0.05);与IRN组比较,IRA组CD31阳性血管密度在第1d无显著变化(P>0.05),第3和7d血管密度显著减少(P<0.01);IRA 7d梗死区由大量坏死神经细胞和泡沫细胞填充,坏死较严重。结论持续注射AMD3100能动员干/祖细胞快速进入外周血,但可能抑制局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血半暗带血管再生,加重梗死区坏死。