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免疫磁珠分选白血病KG1a细胞中CD34^+CD38^-干细胞及其特性研究 被引量:2
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作者 王国征 李慧 +3 位作者 吴远彬 李达 贺艳杰 周雪云 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第3期181-184,共4页
目的从白血病KG1a细胞中分选CD34+CD38-干细胞并研究其生物学特性。方法免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞,流式细胞术分析细胞表面膜抗原、细胞周期,甲基纤维素培养体系观察其克隆性;以HL60、K562、CD34+CD38+细胞为对照,甲基偶氮唑蓝法检... 目的从白血病KG1a细胞中分选CD34+CD38-干细胞并研究其生物学特性。方法免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞,流式细胞术分析细胞表面膜抗原、细胞周期,甲基纤维素培养体系观察其克隆性;以HL60、K562、CD34+CD38+细胞为对照,甲基偶氮唑蓝法检测柔红霉素对CD34+CD38-细胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接种,观察体内成瘤能力。结果分选的CD34+CD38-细胞纯度达95%以上,(69.03±3.25)%处于G0期,克隆形成率为(38.64±2.68)%,明显抵抗柔红霉素;不同浓度柔红霉素作用后,CD34+CD38-、CD34+CD38+、HL60、K562细胞的活性差异有统计学意义(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率显著高于CD34+CD38+细胞(P<0.05)。结论免疫磁珠法分选白血病干细胞简单易行,分选的细胞符合白血病干细胞生物学特性。 展开更多
关键词 细胞株kg1a 白血病干细胞 免疫磁珠细胞分选 cd34+cd38-细胞
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High frequency of CD34+CD38-/low immature leukemia cells is correlated with unfavorable prognosis in acute myeloid leukemia 被引量:1
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作者 Adriana Plesa Charles Dumontet +19 位作者 Eve Mattei Ines Tagoug Sandrine Hayette Pierre Sujobert Isabelle Tigaud Marie Pierre Pages Youcef Chelghoum Fiorenza Baracco Helene Labussierre Sophie Ducastelle Etienne Paubelle Franck Emmanuel Nicolini Mohamed Elhamri Lydia Campos Claudiu Plesa Stéphane Morisset Gilles Salles Yves Bertrand Mauricette Michallet Xavier Thomas 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2017年第12期227-234,共8页
AIM To evaluate the importance of the CD34+CD38-cell population when compared to the CD34+CD38+/low and CD34+CD38+/high leukemic cell sub-populations and to determine its correlations with leukemia characteristics and... AIM To evaluate the importance of the CD34+CD38-cell population when compared to the CD34+CD38+/low and CD34+CD38+/high leukemic cell sub-populations and to determine its correlations with leukemia characteristics and known prognostic factors, as well as with response to therapy and survival.METHODS Two hundred bone marrow samples were obtained at diagnosis from 200 consecutive patients with newly diagnosed acute myeloid leukemia(AML) were studied between September 2008 and December 2010 at our Institution(Hematology Department, Lyon, France). The CD34/CD38 cell profile was analyzed by multiparameter flowcytometry approach using 8 C panels and FACS CANTO and Diva software(BD Bioscience).RESULTS We analyzed CD34 and CD38 expression in bone marrow samples of 200 AML patients at diagnosis, and investigated the prognostic value of the most immature CD34+CD38-population. Using a cut-off value of 1% of CD34+CD38-from total "bulk leukemic cells" we found that a high(> 1%) level of CD34+CD38-blasts at diagnosis was correlated with advanced age, adverse cytogenetics as well as with a lower rate of complete response after induction and shorter disease-free survival. In a multivariate analysis considering age, leukocytosis, the % of CD34+ blasts cells and the standardized cytogenetic and molecular risk subgroups, a percentage of CD34+CD38-leukemic cells > 1% was an independent predictor of DFS [HR = 2.8(1.02-7.73), P = 0.04] and OS [HR = 2.65(1.09-6.43), P = 0.03].CONCLUSION Taken together, these results show that a CD34/CD38 "backbone" for leukemic cell analysis by multicolour flowcytometry at diagnosis provides useful prognostic information. 展开更多
关键词 cd34+cd38-/low IMMUNOPHENOTYPING Leukemic stem cells Acute myeloid leukemia PROGNOSIS
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Hes1对急性髓系白血病患者骨髓CD34^+CD38^-细胞的作用及其机制研究
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作者 田晨 贾勇圣 +1 位作者 胡冬至 张翼鷟 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第22期1422-1425,共4页
目的:研究Hes1对急性髓系白血病(AML)患者骨髓CD34+CD38-细胞的作用及其机制。方法:收集初治AML患者及正常供者骨髓样本后,通过密度梯度离心法获取单个核细胞,流式细胞术检测CD34+CD38-细胞比例及其细胞周期。通过免疫磁珠法分选CD34+CD... 目的:研究Hes1对急性髓系白血病(AML)患者骨髓CD34+CD38-细胞的作用及其机制。方法:收集初治AML患者及正常供者骨髓样本后,通过密度梯度离心法获取单个核细胞,流式细胞术检测CD34+CD38-细胞比例及其细胞周期。通过免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞后,体外集落形成实验(CFC)检测其增殖能力,并通过Realtime PCR检测其Hes1的表达量。构建Hes1过表达逆转录病毒载体,感染正常供者骨髓CD34+细胞后,流式细胞术分析其细胞周期的改变,CFC检测其增殖的改变。结果:AML患者骨髓CD34+CD38-细胞比例明显低于正常对照,流式细胞术结果显示患者来源CD34+CD38-细胞大多数进入静止期,CFC结果显示患者CD34+CD38-细胞体外扩增能力下降。Realtime PCR结果发现患者CD34+CD38-细胞中Hes1表达上调。提高正常供者CD34+细胞中Hes1的表达后,细胞增殖减少,进入静止期。结论:在AML中CD34+CD38-细胞比例下降,进入静止期,与Hes1的表达上调有关。 展开更多
关键词 AML白血病 cd34+cd38-细胞 HES1 细胞周期增殖
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人参皂苷Rg1对白血病干细胞衰老的影响 被引量:3
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作者 耿珊 陈雄斌 +2 位作者 湛斌 季遥鹰 谢宝芬 《局解手术学杂志》 2018年第3期168-172,共5页
目的对比健康人群造血干细胞(HSCs)与白血病患者HSCs衰老的生物学特征,并探讨人参皂苷Rg1对促进白血病干细胞衰老的效果,为白血病的防治提供新的思路和方法。方法取正常人骨髓15例(正常组),慢性髓细胞白血病患者骨髓16例(白血病组),正... 目的对比健康人群造血干细胞(HSCs)与白血病患者HSCs衰老的生物学特征,并探讨人参皂苷Rg1对促进白血病干细胞衰老的效果,为白血病的防治提供新的思路和方法。方法取正常人骨髓15例(正常组),慢性髓细胞白血病患者骨髓16例(白血病组),正常组与白血病组分别再分为对照组与Rg1组。对照组进行常规培养;Rg1组在培养体系中加10μg/m L的人参皂苷Rg1,其他条件同对照组。2 d后提取各组人骨髓单个核细胞(BMNCs),免疫磁性吸附细胞分选法(MACS)分离纯化出CD34^+/CD38^-细胞群,流式细胞术检测细胞纯度,台盼蓝染色检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期时相,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各组阳性细胞百分比,CCK-8检测各组CD34^+/CD38^-增殖能力。结果分选前每1×106个BMNCs中CD34^+/CD38^-细胞群比例为(1.76±0.34)%;免疫磁性分选后每1×106个细胞中CD34^+/CD38^-细胞群比例为(91.15±2.41)%。白血病Rg1组人骨髓CD34^+/CD38^-细胞的SA-β-gal染色阳性率明显高于白血病对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);正常对照组与正常Rg1组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均高于白血病对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。CCK-8结果显示,白血病对照组CD34^+/CD38^-细胞增殖速度明显增加,高于其余各组,差异具有统计学意义(P<0.05)。各组人骨髓CD34^+/CD38^-细胞存活率可达99.1%以上。细胞周期时相结果显示,白血病对照组CD34^+/CD38^-细胞G1期阻滞明显低于其余3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论慢性髓细胞白血病患者骨髓CD34^+/CD38^-细胞增生活跃,出现明显逆衰老现象,这可能是造成一些慢性髓细胞白血病的原因之一,而人参皂苷Rg1可以通过促进白血病干细胞衰老延缓这一过程。 展开更多
关键词 cd34+/cd38-造血干/祖细胞 人参皂苷RG1 CCK-8 慢性髓细胞白血病 细胞周期时相
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急性髓系白血病干细胞NOD/SCID小鼠白血病模型的建立 被引量:5
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作者 李蓉蔚 王诗韵 +4 位作者 董慧娟 陈菲莉 史鹏程 郭绪涛 徐兵 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第3期213-217,共5页
目的探讨用非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠和经流式细胞仪分选出的KG1a中CD34+CD38-的干细胞亚群建立白血病干细胞(LSCs)动物模型,为靶向治疗LSCs的药物筛选奠定体内实验基础。方法 18只雌性NOD/SCID小鼠,体质量18~20... 目的探讨用非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠和经流式细胞仪分选出的KG1a中CD34+CD38-的干细胞亚群建立白血病干细胞(LSCs)动物模型,为靶向治疗LSCs的药物筛选奠定体内实验基础。方法 18只雌性NOD/SCID小鼠,体质量18~20 g,鼠龄6~8周龄。实验组12只,应用流式细胞仪分选KG1a细胞中具有LSCs特性的CD34+CD38-亚群,以2×106个/只尾静脉注射经全身X射线照射2Gy的NOD/SCID小鼠;正常对照组6只,只注射磷酸盐缓冲溶液。观察两组小鼠的一般情况和白血病发生情况,应用形态学、组织病理检查、流式细胞术、骨髓染色体检查等检测实验组小鼠的外周血、骨髓、肝脏、脾脏的白血病细胞标志。结果接种2周后实验组小鼠外周血可见白血病细胞,接种30 d实验组小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解;外周血、骨髓、肝、脾中均可发现大量的白血病细胞浸润;实验组小鼠骨髓细胞中CD13抗原阳性率15.47%~23.66%,并可见KG1a细胞的核型特征。结论尾静脉接种流式细胞仪分选后的CD34+CD38-KG1a细胞于全身亚致死量X射线照射后的NOD/SCID小鼠,能成功建成全身播散的白血病模型,为进一步研究LSCs的靶向治疗药物奠定实验基础。 展开更多
关键词 白血病干细胞 急性髓系白血病 小鼠 cd34+cd38- kg1a细胞 动物模型
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