CD40siRNA对实验性自身免疫性心肌炎大鼠Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17与白细胞介素-23的作用

目的探讨CD。小分子干扰RNA（CD40siRNA）对实验性自身免疫性心肌炎（EAM）大鼠的心肌病理改变、心肌组织中Th17细胞及外周血中IL-17、IL-23水平的影响。方法选取40只健康雄性6—8周龄Lewis大鼠，体质量185—210g，随机分为对照组、EAM组、CD。siRNA组及小分子干扰RNA（siRNA）组，每组10只。EAM组、CD40siRNA组及siRNA组以猪心肌球蛋白与完全弗氏佐剂的混合液0．2mL大鼠足垫区皮下注射，对照组大鼠足垫区皮下注射PBS0．2mL。CD40siRNA组与siRNA组免疫后第8天分别尾静脉注射CD40siRNA表达载体、siRNA表达载体。免疫后21d处死所有大鼠，光镜下观察心肌病理变化并计算心肌组织病理积分；实时荧光定量-PCR法检测心肌组织Th17细胞分化的特异性转录因子基因RORCmRNA表达水平，ELISA法检测外周血IL-17、IL-23水平。结果1．CD40siRNA组心肌组织病理积分较EAM组明显下降（2．34±0．60比3．40±0．35，P〈0，05）；2．C040siRNA组RORCmRNA较EAM组明显下降（2．13±0．28比2．93±0．36，P〈0，05）；3．CD40siRNA组IL-17水平较EAM组明显下降（114．38±8．29比148．70±5．04，P〈0，05）；4．CD40siRNA组IL-23水平较EAM组明显下降（107．00±7．69比136．98±23．16，P〈0，05）。结论CD40siRNA可减轻EAM大鼠心肌炎症，其机制可能与抑制EAM大鼠Th17细胞分化特异性转录因子基因RORCmRNA的表达、减少IL-17及IL-23的分泌有关。

CD40siRNA对EAM大鼠的作用及其对CD4^+ CD25^+ Treg的影响

目的探讨CD40siRNA对EAM大鼠的治疗作用及对CD4+CD25+Treg的影响。方法 40只雄性Lew is大鼠随机分成4组,正常组、EAM模型组、CD40siRNA治疗组和siRNA治疗组,每组10只。于实验第1天、第8天正常组大鼠双后肢足垫区皮下注射PBS缓冲液,0.2 mL/只;另3组大鼠双后肢足垫区皮下注射充分混合的猪心肌球蛋白,0.2 mL/只。第8天CD40siRNA治疗组尾静脉注射25μL CD40siRNA慢病毒表达载体;siRNA治疗组尾静脉注射25μL siRNA慢病毒表达载体。第21天处死所有大鼠,用光学显微镜观测心肌病理积分;流式细胞仪分析大鼠脾脏中CD4+CD25+Treg的表达。结果各组大鼠均无死亡,心肌组织病理积分CD40siRNA治疗组(11.70±2.95)明显低于EAM模型组(17.00±1.76)(P<0.05),CD4+CD25+Treg的表达较EAM模型组明显上调[(40.7±4.0)%vs(12.2±1.1)%,P<0.05]。结论 CD40siRNA可减轻EAM大鼠的心肌炎症,其机制可能与上调CD4+CD25+Treg的表达有关。