E-cadherin、N-cadherin与CD44^+/CD24^(-/low)表型在乳腺癌中表达的相关性及其意义

背景与目的:上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)可以诱导上皮细胞来源的肿瘤表达CD44+/CD24-/low表型细胞,上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)和神经性钙黏蛋白(N-cadherin)是分别表达于上皮细胞和间质细胞的两个重要钙黏蛋白,癌细胞从E-cadherin表达向N-cadherin表达转移是EMT的一个重要机制,此钙黏蛋白转移增加了癌细胞的侵袭转移性。本研究旨在探讨CD44+/CD24-/low表型、E-cadherin及N-cadherin在乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学检测15例正常乳腺组织、20例乳腺癌癌旁组织(癌边缘2～5cm)、58例乳腺癌组织及18例腋窝转移淋巴结组织中CD44+/CD24-/low表型、E-cadherin及N-cadherin的表达,分析其与乳腺癌发生及浸润转移的关系。结果:正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织和腋窝转移淋巴结组织中CD44+/CD24-/low表型表达率分别为6.7%、10.0%、41.4%和44.4%,E-cadherin阳性表达率分别为100%、90.0%、51.7%和33.3%,N-cadherin阳性表达率分别为0、15.0%、44.8%和55.6%,3种蛋白在正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织和腋窝转移淋巴结组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CD44+/CD24-/low表型表达与E-cadherin及N-cadherin表达有显著差异,且与E-cadherin表达关联程度较强,与N-cadherin表达关联程度相对较弱。E-cadherin表达与N-cadherin表达有显著差异,且具有高度相关性(P<0.05)。结论:CD44+/CD24-/low表型表达增加、E-cadherin蛋白表达降低及N-cadherin蛋白反常表达与乳腺癌的发生及浸润转移有密切的关系;在乳腺癌发展过程中,E-cadherin向N-cadherin转化及CD44+/CD24-/low表型表达增加可能发挥重要作用。

三阴性乳腺癌组织中肿瘤干细胞相关标记物CD44^+/CD24^(-/low)和ALDH1+的表达及意义

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenases l,ALDH1)和CD44^+/CD24^(-/low)的表达及其与临床预后的关系。方法:通过免疫组织化学SP法检测ALDH1和CD44^+/CD24^(-/low)等生物学指标在30例三阴性乳腺癌(TNBC)术后石蜡切片组织和30例非三阴性乳腺癌术后石蜡切片组织中的表达,并分析其与TNBC的临床预后因素的关系。结果:TNBC组织中ALDH1+表达率为46.67%,CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率为56.67%;非三阴性乳腺癌组织中ALDH1+表达率为16.67%,CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率为26.67%,TNBC组织中ALDH1和CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率明显高于非三阴性乳腺组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。腋窝淋巴结转移率在CD44^+/CD24^(-/low)与ALDH1均阳性表达组和非阳性表达组中分别为66.67%和23.81%(χ~2=4.983,P=0.035);局部复发和/或转移率分别为33.34%和0(χ~2=7.778,P=0.021)。结论:TNBC组织中ALDH1+和CD44^+/CD24^(-/low)过表达,可以作为判断TNBC患者预后的标记物。

CD44^+/CD24^(-/low)在乳腺癌中的表达及其与含蒽环类药物化疗方案敏感度的关系

目的研究乳腺癌中CD44+/CD24-/low的表达及其与含蒽环类药物化疗方案敏感度的关系。方法 91例乳腺癌接受含蒽环类药物的术前新辅助化疗,2～4个疗程后进行效果评价;采用双染免疫组织化学方法检测化疗前后CD44+/CD24-/low的表达,t检验分析化疗前后CD44+/CD24-/low细胞比例的变化,χ2检验分析乳腺癌CD44+/CD24-/low表型与乳腺癌临床病理参数及化疗疗效的关系。结果乳腺癌中CD44+/CD24-/low阳性表达率为39.6%(36/91),在接受含蒽环类药物的新辅助化疗后乳腺癌中CD44+/CD24-/low细胞比例较化疗前明显增加(P=0.028)。CD44+/CD24-/low阳性组ER阳性率明显低于CD44+/CD24-/low阴性组(25.0%vs.47.3%,P=0.033)。三阴性乳腺癌中CD44+/CD24-/low阳性率明显高于非三阴性乳腺癌(61.9%vs.32.9%,P=0.017)。CD44+/CD24-/low表型与年龄、肿瘤大小、临床分期、病理类型、组织学分级等乳腺癌临床病理参数无明显关系(P>0.05)。CD44+/CD24-/low阳性组的总有效率高于CD44+/CD24-/low阴性组,但两组之间差异无统计学意义(75%vs.69.1%,P=0.542);CD44+/CD24-/low阳性组的病理完全缓解率明显高于CD44+/CD24-/low阴性组(38.9%vs.18.2%,P=0.028)。结论 CD44+/CD24-/low细胞仅存在于部分乳腺癌,CD44+/CD24-/low表型与ER(﹣)、三阴性乳腺癌相关,CD44+/CD24-/low表型与乳腺癌对含蒽环类药物化疗方案的敏感度相关,CD44+/CD24-/low表型可能成为乳腺癌临床化疗疗效的预测指标之一。

三阴乳腺癌CD44^+/CD24^(-/LOW)细胞与CXCR4表达的临床意义

目的探讨CD44+/CD24-/low表型在三阴乳腺癌中的临床病理意义以及与CXCR4表达的相关性。方法根据ER、PR、Her-2表达情况将118例乳腺癌分为三阴及非三阴组,应用免疫组织化学检测其CD44、CD24及CXCR4表达情况,分析CD44+/CD24-/low表型及CXCR4在三阴乳腺癌中表达情况及其与临床病理的关系。结果 34例三阴乳腺癌肿瘤细胞CD44+/CD24-/low表型阳性率为55.9%,CD44+/CD24-/low阳性与一般临床特征不相关,但与远处转移或复发密切相关。CXCR4的表达与CD44+/CD24-/low阳性细胞成正相关。结论三阴乳腺癌的复发和远处转移可能与CD44+/CD24-/low较高的表达率有关,并且可能是由CXCR4介导的。

外周血中CD44^+CD24-/^(low)乳腺癌干细胞对化疗药物反应性的临床研究

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞对化疗药物的反应性。方法分别采集30例健康志愿者和30例初治乳腺癌患者化疗前后的外周静脉血液各10ml,流式细胞术(FCM)检测CD44+CD24-/low细胞含量,比较⑴健康志愿者与乳腺癌患者CD44+CD24-/low细胞数量的差异;⑵乳腺癌患者化疗前后CD44+CD24-/low细胞数量的变化。结果⑴30例健康志愿者外周血中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞为0～21个/105,中位数为13个/105;⑵30例初治乳腺患者化疗前、后,其外周血中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例和中位数,分别为5～35个/105和21个/105、2～48个/105和33个/105;⑶健康志愿者与乳腺癌患者,以及乳腺癌患者化疗前后,外周血中CD44+CD24-/low细胞数量的差异皆有统计学意义(P<0.05)。结论⑴乳腺癌患者外周血中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例高于健康志愿者;⑵化疗药物可使乳腺癌患者外周血中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例升高;⑶乳腺癌患者外周血中CD44+CD24-/low细胞比例可能会成为一项临床治疗效果的判断指标。

CD44^+/CD24^-表型与BRCA1及basal-like乳腺癌的相关性

目的探讨CD44+/CD24-表型与BRCA1及basal-like乳腺癌的相关性。方法收集经病理诊断为乳腺癌患者的手术切除石蜡标本共217例,根据免疫学标志物把217例乳腺癌划分为5类分子亚型:basal-like型、luminalA型、luminal B型、Her2过表达型和normalbreast-like型。应用免疫组织化学检测CK5/6、BRCA1和CD44/CD24双染的情况,分析CD44+/CD24-表型与basal-like乳腺癌及BRCA1相关性乳腺癌的关系。结果 217例乳腺癌标本例中,luminalA型130例、luminal B型15例、HER2过表达型21例、basal-like型29例、Normalbreast-like型22例。BRCA1相关性乳腺癌57例。basal-like乳腺癌组织中BRCA1缺失率86%(25/29),明显高于乳腺癌其他分子亚型(P<0.001)。basal-like乳腺癌组织中含CD44+/CD24-肿瘤细胞者20例(20/29,69%),明显高于乳腺癌其他分子亚型(P=0.003);BRCA1相关性乳腺癌中含CD44+/CD24-肿瘤细胞者53例(53/57,93%)。结论 BRCA1基因突变与basal-like乳腺癌有关;CD44+/CD24-干细胞表型主要存在于basal-like乳腺癌及BRCA1相关性乳腺癌中。

探讨CD44^+/CD24^-细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达

目的:探讨CD44^+/CD24~细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达。方法:随机选取2011年1月-2013年6月笔者所在医院收治的乳腺癌患者30例,将其作为乳腺癌组,另选取笔者所在医院同期收治的30例乳腺良性病患者为良性组,对两组患者不同时期外周血中CD44^+/CD24~细胞表达情况进行分析。结果:乳腺癌组化疗后和淋巴结阳性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达均显著高于良性组,差异有统计学意义(P<0.05),但术前、术后、淋巴结阴性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达和良性组之间差异均无统计学意义(P>0.05),而化疗后患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达显著高于术前、术后,差异有统计学意义(P<0.05),淋巴结阳性患者外周血中CD44^+/CD24~细胞表达显著高于淋巴结阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:检测CD44^+/CD24~细胞在乳腺癌患者不同时期外周血中的表达能够为临床患者病情的评估及预后的判断工作提供有效依据,值得临床充分重视。

CD44^+/CD24^-表型在乳腺癌分子亚型中的表达和分布

目的:研究CD44+/CD24-表型在乳腺癌中的表达并探讨其与乳腺癌各分子亚型的相关性.方法:根据免疫学标志物(ER,PR,HER2,CK5/6,P53)把217例乳腺癌划分为5类分子亚型:basal-like型、LuminalA型、LuminalB型、Her2过表达型和Normalbreast-like型.应用双重免疫组织化学检测CD44/CD24双染的情况,分析CD44+/CD24-表型与乳腺癌5个分子亚型的相关性.结果:217例乳腺癌病例中,luminalA型130例、luminalB型15例、HER2过表达型21例、basal-like型29例、Normalbreast-like型22例.38%的乳腺癌组织表达CD44+/CD24-表型,CD44+/CD24-表型在basal-like型、Lu-minalA型、LuminalB型、Her2过表达型、Normalbreast-like型乳腺癌中表达率分别为69.0%,36.2%,26.7%,19.0%,31.8%.CD44+/CD24-表型在乳腺癌各分子亚型中的表达具有显著差异性(P=0.003),高表达在basal-like乳腺癌中(69%).结论:CD44+/CD24-乳腺癌干细胞与basal-like乳腺癌有相关性;其他乳腺癌干细胞标志物仍需得到进一步鉴定.

CD44^+/CD24^-和CK5/6在乳腺浸润性导管癌、乳腺普通型导管增生和低级别导管原位癌中的表达

目的探讨乳腺浸润性导管癌、普通型导管增生和低级别导管原位癌组织中CD44^+/CD24^-和CK5/6的表达和意义。方法采用免疫组织化学染色检测30例乳腺浸润性导管癌中CD44^+/CD24^-、CK5/6和P63的表达、30例乳腺普通型导管增生组织中CD44^+/CD24^-、CK5/6、34βE12和CK8的表达和30例低级别导管原位癌中CD44^+/CD24^-、CK5/6的表达。结果 30例乳腺浸润性导管癌中24例呈CD44^+/CD24^-,30例普通型导管增生中9例呈CD44^+/CD24^-和30例低级别导管原位癌中19例呈CD44^+/CD24^-,3组相比具有统计学意义。浸润性导管癌中CD44^+/CD24^-表型与患者的年龄、月经状况、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级、ER、PR和HER^-2无相关性。30例乳腺浸润性导管癌中6例表达CK5/6,30例乳腺普通型导管增生中全部表达CK5/6,30例低级别导管原位癌中8例表达CK5/6,3组相比具有统计学意义。结论 CD44^+/CD24^-和CK5/6联合使用可用于鉴别乳腺浸润性导管癌、普通型导管增生和低级别导管原位癌。

CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例和p63的表达强度对甲状腺乳头状癌细胞体外转移侵袭能力的影响

目的探讨CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例和p63的表达强度对甲状腺乳头状癌细胞(PTC)体外转移侵袭能力的影响。方法选取PTC 4个细胞株TPC-1、GLAG-66、BCPAP、NPA和正常甲状腺细胞株Nthyori 3-1进行体外实验,采用流式细胞术检测CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例,Western印迹法检测p63蛋白的表达情况,Transwell侵袭实验检测细胞的转移侵袭能力,细胞计数实验(CCK-8法)观察化学治疗药物多柔比星对不同侵袭能力肿瘤细胞生长的抑制作用,定量反转录(qRT)-PCR检测全长型p63(TAp63)和N端截短型p63(ΔNp63)mRNA的表达。结果 PTC细胞株TPC-1、BCPAP、GLAG-66、NPA和正常甲状腺细胞株Nthy-ori3-1的CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例分别为(34.59±1.88)%、(0.28±0.02)%、(44.15±1.42)%、(56.96±1.94)%和(0.25±0.01)%,PTC 4个细胞株间CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例的差异均有统计学意义(P值均<0.01),TPC-1、GLAG-66和NPA与Nthy-ori 3-1间CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。PTC各细胞株中均有p63蛋白表达,正常甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1中几乎无p63蛋白表达。NPA、GLAG-66、TPC-1、BCPAP穿过人工基底膜的细胞数分别为(126.00±2.31)、(71.00±1.95)、(36.00±3.05)和(12.00±2.40)个/高倍镜视野,4组间差异有统计学意义(P值均<0.05);正常甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1未见穿过人工基底膜的细胞。不同浓度的多柔比星溶液对PTC细胞株NPA、GLAG-66、TPC-1、BCPAP和正常甲状腺细胞株Nthy-ori3-1均有不同程度的抑制作用,且在同一浓度下(除浓度为0.04\mmol/L外),对各细胞株的生长抑制率由低至高依次为NPA、GLAG-66、TPC-1、BCPAP、Nthy-ori 3-1。PTC细胞株TPC-1、BCPAP、GLAG-66、NPA中ΔNp63 mRNA的表达水平分别为0.000 570±0.000 160、0.000 057±0.000 007、0.000 800±0.000 085、0.001 300±0.000 091,4组间的差异有统计学意义(P值均<0.05);PTC细胞株TPC-1、BCPAP、GLAG-66、NPA中TAp63mRNA几乎无表达。结论 PTC细胞株的转移、侵袭能力可能与CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例和p63表达强度有关,高CD44^+/CD24^(-/low)亚群比例和p63表达强度的细胞株对化学治疗药物有较强的耐药性,CD44和p63对于未来靶向治疗的靶点选择具有一定参考意义。

盐霉素通过TGFβ1/Smad信号通路抑制MMP-2、9降低CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力

目的分析盐霉素对CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其影响机制。方法通过有血清和无血清培养技术培养人乳腺癌MCF-7细胞株,收集两种细胞,对其CD24、CD44标志物进行荧光染色,采用流式细胞仪检测CD44^+ /CD24^(-/low)亚群细胞的比例;盐霉素培养MCF-7细胞株和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,MTT法筛选出引起CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞细胞凋亡低于IC50的浓度;Transwell技术检测MCF-7和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞的迁移和侵袭能力,以筛选出的浓度诱导CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,以排除盐霉素对该细胞增殖抑制作用的影响,Transwell技术检测该细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、pSmad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平的变化。结果 CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞在无血清培养和有血清培养中的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.01),CD44^+ /CD24^+ 表型细胞的比例分别是(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)%(P<0.01);MTT法筛选出低于IC50的浓度是1、3、5、7μmol/L;Transwell技术检测CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力明显高于MCF-7细胞株,并随盐霉素浓度的上升呈下降趋势(P<0.05)。Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平下调(P<0.01)。结论盐霉素可能通过TGFβ1/Smad信号通路下调MMP-2、MMP-9蛋白水平,从而降低CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力。

三阴性乳腺癌组织中干细胞CD44+/CD24-/low表型与预后的关系

目的:探讨CD44+/CD24-/low表型在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的表达情况及其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。方法从青岛市中心医疗集团乳腺癌数据库中筛选出2008年1月至2009年12月53例三阴性乳腺癌病人的石蜡标本,同时随机选取53例同时期相应临床分期的非三阴性乳腺癌(NTNBC)病人的石蜡标本。应用免疫组化技术进行CD44、CD24染色,将CD44+/CD24-/low表型在两组病人中的表达情况进行统计学分析,探讨其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。结果 CD44+/CD24-/low(+)在TNBC组中为54.71%,明显高于NTNBC组(45.28)(P<0.05)。在TNBC组,临床病理分期Ⅲ期在 CD44+/CD24-/low(+)中有15例(28.30%),高于CD44+/CD24-/low(-)(9.43%)(P<0.05);局部复发率在CD44+/CD24-/low(+)和CD44+/CD24-/low(-)中分别为24.52%和5.66%(P<0.05);远处转移率分别为16.98%和3.77%(P<0.05)。TNBC组中,CD44+/CD24-/low(+)5年OS(62.00%)、DFS(51.00%)均低于CD44+/CD24-/low(-)5年OS(80.00%)、DFS(75.00%),两组间的差异有统计学意义。结论 CD44+/CD24-/low的高表达可能与三阴性乳腺癌的复发、转移及预后差有相关性。

CD44+/CD24-/low及ALDH1+与早期乳腺癌预后相关性比较

目的比较CD44^+/CD24^-/low及ALDH1+与早期乳腺癌预后的相关性。方法回顾性选取我科2007年4月至2008年2月因早期乳腺癌行手术患者510例,收集其术后石蜡包埋肿瘤标本,用免疫组化检测其CD44、CD24及ALDH1的表达情况,比较CD44^+/CD24^-/low组及ALDH1+组同总生存的相关性。结果 CD44^+/CD24^-/low的比例为22.9%,ALDH1+的比例为11.1%。在多因素Cox比例风险模型控制混杂变量后,CD44^+/CD24^-/low组总生存同非CD44^+/CD24^-/low组无显著性差异(HR=1.335,95%CI:0.812-2.193,P=0.254);ALDH1+组总生存低于ALDH1-组(HR=1.736,95%CI:0.385-0.864,P=0.008)。结论 ALDH1+可作为早期乳腺癌预后不良的标志物,而CD44^+/CD24^-/low表型不能作为早期乳腺癌预后不良的标志物。

三阴性乳腺癌组织中CD44＋/CD24-/low 表型表达与其预后的关系

背景：三阴性乳腺癌为雌激素受体，孕激素受体和人表皮生长因子受体阴性，CD44＋/CD24-/low表型与三阴性乳腺癌有密切关系。目的：探讨CD44＋/CD24-/low表型在三阴性乳腺癌（TNBC）中的表达情况及其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。方法：从青岛市中心医疗集团乳腺癌数据库中筛选出2008年1月至2009年12月三阴性乳腺癌患者53例，同时随机选取53例同时期相应临床病理分期的非三阴性乳腺癌患者做对照组。应用免疫组化技术进行CD44、CD24染色，将CD44＋/CD24-/low表型在两组病人中的表达情况进行统计学分析，探讨其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。结果与结论：CD44＋/CD24-/low（＋）在三阴性乳腺癌组中为54．7％，明显高于non-TNBC组（30．2％）（P〈0.05）。在三阴性乳腺癌组，临床病理分期Ⅲ期在CD44＋/CD24-/low中有15例（28．3％），高于CD44＋/CD24-/low（-）（9．4％）（P〈0．05）；局部复发率在CD44＋/CD24-/low（＋）和CD44＋/CD24-/low（-）中分别为24．5％和5．7％（P〈0．05）：远处转移率分别为17％和3．8％（P〈0．05）。三阴性乳腺癌组中，CD44＋/CD24-/low（＋）5年总生存率（62％）、无病生存率（51％）均低于CD44＋/CD24-/low（-）（P〈0．05）。结果证实，CD44＋/CD24-/low的高表达可能与三阴性乳腺癌的复发、转移及预后差有相关性。

悬浮培养与贴壁培养对乳腺癌MCF-7细胞形态及CD44、CD24表达的影响

目的采用悬浮培养和贴壁培养两种方法分别孵育人乳腺癌MCF-7细胞株,观察细胞形态及干细胞标志物CD44、CD24的变化。方法将乳腺癌MCF-7细胞株同时进行第一代悬浮培养和贴壁培养,用倒置显微镜观察悬浮细胞及贴壁细胞形态及生长方式,收集贴壁细胞及第二代悬浮细胞,对其表面分子CD24及CD44进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察细胞表面标志物的表达,同时采用流式细胞术检测不同亚群的细胞数量。结果悬浮细胞以大小不等的微球方式进行生长,并在第二代悬浮培养中维持此生物学特性;贴壁细胞呈单层贴壁簇状生长。与贴壁细胞相比,CD44分子在悬浮细胞中表达含量增高,CD24分子表达含量减少。CD44+/CD24-/low表型细胞在悬浮细胞和贴壁细胞中所占比例分别为(87.0±0.43)%和(40.1±1.05)%(P<0.05);CD44+/CD24+表型所占比例分别为(11.7±0.39)%和(57.2±0.75)%(P<0.05)。结论悬浮培养法可使乳腺癌MCF-7细胞株贴壁细胞去分化,可富集CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞。

乳腺浸润性微乳头状癌中CD44^+/CD24^(-/low)和CD24^+表型细胞的研究

目的研究乳腺浸润性微乳头状癌(invasive micropapillary carcinoma,I MPC)的干细胞表型,从干细胞和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)角度探讨I MPC高侵袭、高转移恶性生物学行为的原因。方法选取术前未经放化疗治疗患者的I MPC82例和乳腺非特殊型浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma nototherwise specified,IDC-NOS)80例石蜡包埋组织标本切片,通过免疫组织化学双染技术检测两组肿瘤组织中CD44+/CD24-/low(CD24-)和CD24+的表达、定位和分布情况,并分析其与各临床病理学特征之间的关系。定量资料采用Student'st检验,定性资料采用Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis检验、χ2检验或校正χ2检验。两组之间相关性采用Spearman's秩相关分析。结果(1)I MPC组肿瘤细胞的CD44+/CD24-/low阳性表达率(48.8%,40/82例),明显高于IDC-NOS组(31.3%,25/80例)(χ2=5.180,P=0.023)。(2)53.7%(44/82例)的I MPC微细间质组织内见单个散在的CD44+/CD24-/low肿瘤细胞,且该细胞免疫组织化学染色Vi mentin及α-SMA阳性,E-Cadherin阴性。IDC-NOS间质内罕见CD44+/CD24-/low肿瘤细胞。(3)I MPC微乳头结构中CD44+/CD24-/low与间质内的CD44+/CD24-/low阳性表达细胞呈明显正相关(r=0.516,P<0.001),并且I MPC微乳头结构及间质中CD44+/CD24-/low阳性表达在有无淋巴管侵犯和有无淋巴结外软组织浸润方面的差异均有统计学意义(P<0.050),即有淋巴管侵犯及淋巴结外软组织浸润者CD44+/CD24-/low阳性表达率较高。(4)I MPC组中CD24+细胞阳性表达率79.3%(65/82例),明显高于IDC-NOS组(60.0%,48/80例)(χ2=7.126,P=0.008),且I MPC中淋巴结转移阳性组CD24的表达高于阴性组,差异有统计学意义(χ2=8.834,P=0.003)。结论I MPC肿瘤细胞中干细胞的存在及上皮间质转化可能是I MPC高淋巴管侵犯、高淋巴结转移及耐药等恶性生物学行为的重要原因。研发针对乳腺癌干细胞的药物也可作为治疗乳腺癌的一个方法。

化疗对三阴性乳腺癌CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群的影响

目的:观察化疗对三阴性乳腺癌CD44+CD24-/low细胞亚群的影响。方法:用0.2、1、5倍药物血浆峰浓度(peak plasma concentration,PPC)的紫杉醇、多西紫杉醇、氟尿嘧啶、表柔比星、长春瑞滨和吉西他滨分别作用人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48和72h后,MTT法检测细胞生长情况;FCM法检测1倍PPC的各药物作用48h以及细胞复苏后CD44+CD24-/low细胞含量的变化;另外,FCM法检测10例转移性三阴性乳腺癌患者在化疗前后,外周血中CD44+CD24-/low细胞的含量变化。结果:6种药物均可抑制MDA-MB-231细胞增殖。1倍PPC的各药作用后,CD44+CD24-/low细胞含量未明显升高,以氟尿嘧啶组含量降低最为明显(P<0.05)。转移性三阴性乳腺癌患者在化疗后,外周血中CD44+CD24-/low细胞含量降低(P<0.05)。结论:化疗药物紫杉醇、多西紫杉醇、氟尿嘧啶和表柔比星可降低MDA-MB-231细胞株中CD44+CD24-/low细胞亚群的含量。化疗可使转移性三阴性乳腺癌患者外周血中CD44+CD24-/low细胞含量降低。

乳腺癌患者外周血ALDH1^(high)CD44^+CD24^(-/low)细胞含量变化及其临床意义

目的:检测乳腺癌患者外周血ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量的变化,探讨其与乳腺癌发生的关系及临床意义。方法:观察对象为46例Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期乳腺癌患者和12名健康女性志愿者(对照组)。采用流式细胞仪检测、分析各组外周血中ALDH1high细胞和ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量及其变化情况。结果:①所有样本均能检出ALDH1high细胞,各组间均数比较差异无统计学意义(P>0.05);②Ⅳ期乳腺癌组的外周血ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而其他各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);③Ⅳ期乳腺癌患者原发癌灶免疫组化结果各不相同,但均可在外周血中检出ALDH1highCD44+CD24-/low细胞。结论:①各组中的ALDH1high细胞含量无显著差异,说明ALDH1具有普遍干细胞性质;②ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量与乳腺癌的发生有明显相关性。③ALDH1highCD44+CD24-/low细胞与乳腺癌的免疫分型无相关性。

DADS抑制CD44^+、CD24^-人胃癌干细胞特性的作用研究

胃癌是现阶段对人类健康威胁最大的恶性肿瘤之一,国际癌症研究机构（ICRG）的一项统计数据显示,2008年胃癌死亡病例占全球因肿瘤死亡患者的9.7%,仅次于肺癌,因此胃癌的治疗与控制是肿瘤研究的重点与难点.肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）是肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞,被认为是肿瘤发生、复发及转移的根源,其中CD44^＋与CD24^-具有无限增殖分化潜能,是胃癌形成与放、化疗抵抗的主要原因.本文将阐明二烯丙基二硫（diallyl disul-fide,DADS）对CD44^＋与CD24^-细胞生长的抑制作用及对细胞周期的影响,为DADS的抗胃癌功效提供参考依据.

三阴性乳腺癌干细胞的富集及CD44+CD24-/low、CXCR4表达测定

目的:探讨MDA-MB-231细胞经无血清培养富集三阴性乳腺癌干细胞,观察再成球、集落形成及CD44+CD24-/low、CXCR4表达。方法:将MDA-MB-231乳腺癌细胞进行微球体培养,取培养第7-9天的微球体,判断干细胞富集的程度;比较不同细胞浓度对癌球细胞成球率影响;流式细胞仪测定CD44+CD24-/low含量;Western blot法分析CXCR4蛋白表达;单个癌球细胞再成球能力;观察癌球与贴壁细胞集落形成。结果:1).在含20 ng/m L EGF,10 ng/m L b FGF,2%b27无血清培养基中可培养三阴性乳腺癌癌球,1×104/m L、2×104/m L、3×104/m L、4×104/m L、5×104/m L细胞浓度癌球细胞成球率分别为(5.61±0.02)%、(3.23±0.54)%、(2.28±0.48)%、(1.05±0.13)%、(0.91±0.01)%,组间比较差异有统计学意义P值均<0.05。2).贴壁MDA-MB-231细胞与癌球细胞CD44+CD24-/low含量分别为(38.54±2.00)%VS(66.35±2.06)%,差异有统计学意义P=0.003。3).癌球细胞CXCR4蛋白表达高于贴壁MDA-MB-231细胞,灰度扫描分析差异有统计学意义,P=0.03。4).单个癌球细胞具有再成球能力。5).软琼脂糖集落形成能力癌球需200个细胞即可见集落形成,而贴壁细胞需1 000个MDA-MB-231细胞。结论:1.通过无血清培养可以富集三阴性乳腺癌干细胞,低细胞密度有利于癌球形成。2.癌球中CD44+CD24-/low含量高于贴壁MDA-MB-231细胞。3.CXCR4在癌球中表达高于贴壁MDA-MB-231细胞。