(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究

目的探讨(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原(procalcitonin,PCT)、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究。方法回顾性选取我院2020年1月—2022年6月住院的120例艾滋病患者为研究对象。依据实验室结果,将其分为马尔尼菲篮状菌感染确诊组(血或组织液培育养出马尔尼菲篮状菌),简称A组(62例),及马尔尼菲篮状菌感染临床诊断组[根据临床症状、体征、血常规及(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞多指标诊断],简称B组(58例)。检测患者(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞的表达水平,采用受试者工作特征(receiver-operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the curve,AUC)评估上述指标联合检测对艾滋病患者感染马尔尼菲篮状菌的诊断效能。结果A组的(1-3)-β-D葡聚糖和PCT水平均高于B组,CD4^(+)T淋巴细胞个数低于B组(P<0.05);(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC为0.933,(1-3)-β-D葡聚糖单独检测的AUC是0.812,PCT单独检测的AUC为0.883,CD4^(+)T淋巴细胞单独检测的AUC是0.810,(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC皆优于三项单独检测,表明(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的诊断价值皆优于单一指标诊断,且联合检测的特异度、约登指数分别为92.43%和0.580,均高于三项单独检测。结论(1-3)-β-D葡聚糖联合PCT和CD4^(+)T淋巴细胞多指标对艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常高的临床诊断价值,能够帮助医生分析出高危风险患者,及时制定治疗方案,同时也承担预后效果的判断依据,对治疗艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常重要的研究价值。

CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的:探讨CD8^(+)CD28^(-)T细胞对单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法:回顾性分析60例行haplo-HSCT的血液病患者移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与aGVHD的关系,并比较不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间慢性移植物抗宿主病(cGVHD)、感染及预后的差异。结果:60例行haplo-HSCT患者中有40例发生aGVHD,发生率为66.67%,中位发生时间为32.5(20-100)天。Haplo-HSCT后30天,aGVHD组CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数显著低于无aGVHD组(P=0.03)。ROC曲线表明移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测aGVHD的易感性。移植后30天低细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数<0.06/μl)患者的aGVHD发生率显著高于高细胞计数组(CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数≥0.06/μl,P=0.011)。多因素Cox回归分析进一步验证了移植后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数是aGVHD发生的独立风险因素,低细胞计数组aGVHD的发生风险是高细胞计数组的2.222倍(P=0.015)。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组间cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染的发生无统计学差异。不同CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数组的总生存率、非复发相关死亡率、复发率没有显示出明显的统计学差异。结论:行haplo-HSCT后30天CD8^(+)CD28^(-)T细胞延迟重建的患者更易发生aGVHD,并且CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数在一定程度上可预测其易感性。单倍型造血干细胞移植后CD8^(+)CD28^(-)T细胞绝对计数与cGVHD、真菌感染、EB病毒感染、巨细胞病毒感染无关,且与移植后的生存预后无显著相关。

乳酸/白蛋白比值、白细胞介素-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者短期预后的预测价值

目的探讨乳酸/白蛋白比值(LAR)、白细胞介素-6(IL-6)、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。方法选择2022年1月至2023年6月郑州大学附属郑州中心医院呼吸重症医学科(RICU)收治的73例重症肺炎并脓毒症患者为研究对象,依据患者28 d生存结局将其分为生存组(n=43)和死亡组(n=30)。通过查阅电子病历收集患者的临床资料,包括:年龄、性别及合并高血压、糖尿病、冠状动脉性心脏病(CHD)情况,入住RICU治疗时的序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理与慢性健康状态评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、平均动脉压(MAP)、英国胸科协会改良肺炎评分(CURB-65)、总胆红素(Tbil)、血肌酐(Scr)、血小板计数(PLT)、白细胞(WBC)计数、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)。入住RICU后第1、3、7天,抽取患者动脉血,应用全自动血气分析仪检测乳酸水平;抽取患者外周静脉血,应用酶联免疫吸附试验检测患者血清中白蛋白和白细胞介素-6(IL-6)水平,流式细胞仪检测CD4^(+)T淋巴细胞亚群计数;计算2组患者第1、3、7天的LAR。比较2组患者的临床资料及第1、3、7天的LAR、IL-6及CD4^(+)T淋巴细胞计数水平,应用logistic回归分析重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的影响因素,受试者操作特征(ROC)曲线评估各影响因素对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果2组患者的性别、年龄、合并高血压占比、合并糖尿病占比、合并CHD占比、RICU住院时间以及入住RICU时的Tbil、MAP、PLT、Scr、WBC、PCT、CRP比较差异均无统计学意义(P>0.05);死亡组患者的APACHEⅡ评分、CURB-65评分显著高于生存组(P<0.05)。第1、3、7天,死亡组患者的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著低于生存组,SOFA评分显著高于生存组(P<0.05)。第1天,死亡组与生存组患者的LAR、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);第3、7天,死亡组患者的LAR及IL-6水平显著高于生存组(P<0.05)。生存组患者第3、7天的LAR、IL-6、SOFA评分显著低于第1天,第7天的LAR、IL-6、SOFA显著低于第3天(P<0.05);生存组患者第3、7天的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著高于第1天(P<0.05);生存组患者第7天与第3天的CD4^(+)T淋巴细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组患者第7天的IL-6水平显著低于第1、3天(P<0.05),第1天的IL-6水平与第3天比较差异无统计学意义(P>0.05);LAR、CD4^(+)T淋巴细胞计数、SOFA评分各时间点间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,第3天,重症肺炎并脓毒症患者LAR、IL-6水平与SOFA评分呈显著正相关(r=0.385、0.394,P<0.05);第7天,LAR、IL-6与SOFA评分亦呈显著正相关(r=0.418、0.402,P<0.05);第3、7天,CD4^(+)T淋巴细胞计数与SOFA评分均呈显著负相关(r=-0.451、-0.454,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数是重症肺炎并脓毒症28 d死亡的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,APACHEⅡ评分,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及三者联合,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合对重症肺炎并脓毒症患者的28 d死亡均有一定预测价值(P<0.05);第3天的LAR、IL-6和CD4^(+)T淋巴细胞计数联合预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.891,APACHEⅡ评分预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的AUC值为0.769,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.795、0.757、0.770,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.743、0.802、0.888。结论入院3 d LAR、3 d IL-6、3 d CD4^(+)T淋巴细胞计数以及7 d IL-6、7 d CD4^(+)T淋巴细胞计数是影响重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的相关因素;联合检测第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数能够更好地评估患者病情严重程度及预后。

血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用及与Hp-IgG表达的关系

目的 探究血清微小RNA-133a(miR-133a)、可溶性CD44变体6(sCD44v6)和胃泌素-17在胃癌和癌前病变筛查中的应用,并研究其与幽门螺杆菌-免疫球蛋白G(Hp-IgG)表达的关系。方法 回顾性选取2020年1月至2023年1月在重庆市开州区人民医院就诊的胃癌患者103例(胃癌组)、癌前病变患者112例(癌前病变组)及同期在本院进行体检的健康志愿者100名(对照组)作为本次研究对象。收集各组对象的血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平,并探究其对胃癌及癌前病变筛查的诊断价值。比较癌前病变组及胃癌组患者Hp-IgG检测结果,并分析胃癌组及癌前病变组Hp-IgG阳性率与血清miR-133a、sCD44v6、胃泌素-17水平的相关性。结果 癌前病变组、胃癌组患者血清miR-133a相对表达水平低于对照组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于对照组,且胃癌组血清miR-133a相对表达水平低于癌前病变组,sCD44v6、胃泌素-17水平高于癌前病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断癌前病变的曲线下面积(AUC)值分别为0.621、0.932、0.945(P<0.05)。血清miR-133a相对表达水平、sCD44v6、胃泌素-17水平诊断胃癌的AUC值分别为0.864、0.876、0.845(P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率为79.61%,高于癌前病变组(41.07%),差异有统计学意义(P<0.05)。癌前病变组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性(r=-0.065,P>0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.404、0.344,P<0.05)。胃癌组患者的Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平呈负相关(r=-0.693,P<0.05),与sCD44v6、胃泌素-17水平呈正相关(r=0.765、0.766,P<0.05)。结论 在胃癌和癌前病变中,血清miR-133a的相对表达水平较低,而sCD44v6和胃泌素-17的水平较高,且具有一定诊断价值,可用于胃癌和癌前病变的筛查。胃癌患者的Hp-IgG阳性率较高,并且与血清miR-133a呈负相关,与sCD44v6和胃泌素-17呈正相关。在癌前病变患者中,Hp-IgG阳性率与血清miR-133a相对表达水平无明显相关性,但与sCD44v6和胃泌素-17的水平呈正相关,应密切关注Hp-IgG在患者中的表达情况。

血小板、D-二聚体、纤维蛋白原、白细胞介素-37和CD24对上皮性卵巢癌的诊断及预后评估价值

目的探讨血小板(PLT)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、白细胞介素-37(IL-37)和CD24对上皮性卵巢癌(EOC)的诊断及预后评估价值。方法选取60例EOC患者、60例卵巢良性肿瘤患者和60例健康体检者,分别作为EOC组、良性组和健康组,比较3组受试者及不同预后EOC患者血浆PLT、D-D、FIB水平和血清IL-37、CD24水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估PLT、D-D、FIB、IL-37、CD24单独及联合检测对EOC的诊断效能,以及对EOC患者预后的预测效能。结果EOC患者PLT、D-D、FIB、IL-37和CD24水平均高于良性组和健康组(P﹤0.05),良性组患者PLT、D-D、FIB、IL-37和CD24水平均高于健康组(P﹤0.05)。ROC曲线显示,PLT+D-D+FIB+IL-37+CD24五者联合检测诊断EOC的灵敏度、特异度、准确度均高于各指标单独检测,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。随访6个月,60例EOC患者中,生存48例,死亡12例。死亡EOC患者血浆PLT、D-D、FIB水平和血清IL-37、CD24水平均高于生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。ROC曲线显示,PLT+D-D+FIB+IL-37+CD24五者联合检测预测EOC患者预后的灵敏度、准确度均高于各指标单独及联合检测,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论PLT、D-D、FIB、IL-37和CD24联合检测诊断EOC及预测预后的灵敏度、特异度和准确度均较高,对EOC诊断及预后评估的价值较高。

ALDH^1+、CD44^+/CD24^-重叠与乳腺癌基因亚型和临床因素的相关性研究

目的比较ALDH1+和CD44+/CD24-作为人乳腺癌干细胞标志物时在基因亚型中的分布及与临床相关因素相关方面的异同,并了解两种标志物互补后在基因亚型中的分布和临床因素的相关性。方法采用免疫组织化学单染、双染技术检测203例未接受放化疗乳腺癌患者肿瘤组织中重叠表达ALDH1+、CD44+/CD24-表型的情况。结果所有乳腺癌组织中重叠表达ALDH1+/CD44+/CD24-表型为5%,主要存在于HER-2(18%)型和Triple negativ型(45%),病理类型主要为浸润性导管癌,其2年无病生存率低于其他表型(P<0.05)。结论少数乳腺癌患者(5%)为ALDH1+/CD44+/CD24-/low表型,主要存在于Triple negative型,病理类型主要为浸润性导管癌,2年无病生存率低于其他表型。ALDH1+和CD44+/CD24-可能标志不同层次的乳腺癌干细胞,未来采用免疫组织化学技术互补检测ALDH1+和CD44+/CD24-可能预测患者预后。

肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制研究

目的:探究肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制。方法:将16HBE exo、A549 exo、H522 exo、H460 exo、miR-NC exo、miR-24-3p exo与CD8^(+)T细胞共孵育(16HBE exo组、A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组、miR-NC exo组、miR-24-3p exo组),与PBS共孵育组(PBS组)作为对照,CD8^(+)T与miR-24-3p exo共孵育后转染FGF11质粒(miR-24-3p exo+FGF11组)。CCK8法检测CD8^(+)T细胞的增殖能力。双荧光素酶报告基因实验验证miR-24-3p和FGF11的靶向关系。将各组CD8^(+)T细胞与A549细胞以20∶1的比例共孵育4 h(16HBE exo/CD8^(+)T组、A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组、miR-NC exo/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo/CD8^(+)T组、PBS/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组),Elisa检测共孵育后细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度,LDH法检测CD8^(+)T细胞对A549细胞的杀伤能力。结果:相比于PBS组,A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度显著下降(P<0.001),CD8^(+)T细胞杀伤能力亦显著下降(P<0.001)。双荧光素报告基因检测结果显示FGF11为miR-24-3p的靶基因。miR-24-3p exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著低于miR-NC exo组,miR-24-3p exo+FGF11组CD8^(+)T细胞增殖能力显著高于miR-24-3p exo组(P<0.05)。miR-24-3p exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力均显著低于miR-NC exo/CD8^(+)T组(P<0.001), miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力显著高于miR-24-3p exo/CD8^(+)T组(P<0.001)。结论:肺癌细胞外泌体miR-24-3p可通过靶向抑制FGF11而抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤功能。

CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性

背景:肿瘤干细胞与肿瘤的复发、转移以及耐药等之间存在十分密切的联系。目的:探讨CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性。方法:运用免疫磁珠法从多药耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中分选出CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞。流式细胞仪测定分选后CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞亚群比例和细胞膜P-gp荧光强度,RT-PCR法检测多药耐药基因MDR m RNA表达水平。结果与结论:(1)获得的CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞比例在90%以上;(2)CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群成球比例明显强于non-CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群;(3)CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群的细胞膜P-gp荧光强度显著高于MFC-7/ADR细胞株(P<0.05);(4)CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群的MDR mRNA表达水平显著高于MFC-7/ADR细胞株(P<0.05);(5)结果表明,分选得到的CD44^+CD24^(-/low)乳腺癌干细胞具有很强的体外成球能力,高表达P-gp蛋白和MDR mRNA可能是导致多药耐药的原因之一。

E-cadherin、N-cadherin与CD44^+/CD24^(-/low)表型在乳腺癌中表达的相关性及其意义

背景与目的:上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)可以诱导上皮细胞来源的肿瘤表达CD44+/CD24-/low表型细胞,上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)和神经性钙黏蛋白(N-cadherin)是分别表达于上皮细胞和间质细胞的两个重要钙黏蛋白,癌细胞从E-cadherin表达向N-cadherin表达转移是EMT的一个重要机制,此钙黏蛋白转移增加了癌细胞的侵袭转移性。本研究旨在探讨CD44+/CD24-/low表型、E-cadherin及N-cadherin在乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学检测15例正常乳腺组织、20例乳腺癌癌旁组织(癌边缘2～5cm)、58例乳腺癌组织及18例腋窝转移淋巴结组织中CD44+/CD24-/low表型、E-cadherin及N-cadherin的表达,分析其与乳腺癌发生及浸润转移的关系。结果:正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织和腋窝转移淋巴结组织中CD44+/CD24-/low表型表达率分别为6.7%、10.0%、41.4%和44.4%,E-cadherin阳性表达率分别为100%、90.0%、51.7%和33.3%,N-cadherin阳性表达率分别为0、15.0%、44.8%和55.6%,3种蛋白在正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织和腋窝转移淋巴结组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。CD44+/CD24-/low表型表达与E-cadherin及N-cadherin表达有显著差异,且与E-cadherin表达关联程度较强,与N-cadherin表达关联程度相对较弱。E-cadherin表达与N-cadherin表达有显著差异,且具有高度相关性(P<0.05)。结论:CD44+/CD24-/low表型表达增加、E-cadherin蛋白表达降低及N-cadherin蛋白反常表达与乳腺癌的发生及浸润转移有密切的关系;在乳腺癌发展过程中,E-cadherin向N-cadherin转化及CD44+/CD24-/low表型表达增加可能发挥重要作用。

不同类型乳腺组织中CD44^+/CD24^-细胞的数量与分布

目的检测CD44+/CD24-细胞在乳腺正常组织及良恶性肿瘤中的数量与分布特点,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP双染法,检测了30例乳腺正常组织(normal tissue,NT),30例乳腺纤维腺瘤(fibroadenoma,FA),60例乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中的CD44及CD24的共表达情况。结果在乳腺NT及FA中,可见CD44+/CD24+,CD44+/CD24-,CD44-/CD24-3种表型,而在IDC中,除上述3种表型外,尚可见CD44-/CD24+表型。从NT,FA到IDC,CD44+/CD24-细胞的阴性率(-,阳性率<1%)依次降低(40.0%→36.7%→35.0%);而强阳性率(▲,阳性率>60%)依次升高(0.0→6.7%→21.7%)。结论 CD44+/CD24-可能作为一种阶段性祖细胞标记,参与了正常乳腺的分化及乳腺肿瘤的发展过程。

CD44~＋/CD24^-细胞在乳腺癌组织中比例与乳腺癌远处转移关系

目的:旨在探讨CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中的比例与乳腺癌远处转移之间关系。方法:随机选取2003年1月至2004年10月于天津医科大学肿瘤医院确诊的乳腺癌患者60例,并将其分为30例转移组及30例非转移组(对照组)。免疫组织化学双重染色技术检测60例患者石蜡切片中CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中所占比例,分析其与远处转移之间关系。结果:转移组与对照组中CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中所占比例具有显著性差异(χ2=11.334,P<0.05)。骨转移中CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中比例有显著性差异(χ2=9.250,P=0.01)。CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中5年无瘤生存期比例有显著性差异(χ2=8.058,P=0.005)。结论:CD44+/CD24-细胞在乳腺癌组织中所占比例与乳腺癌远处转移密切相关,特别是骨转移。

核基质结合区结合蛋白SATB1上调乳腺癌干细胞表型CD44^+/CD24^-的表达

目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siRNA)双链寡核糖核酸干扰MDA-MB-231细胞;pEGFP-N1-SATB1-GFP真核表达质粒瞬时转染MCF7细胞后,流式细胞术检测SATB1对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-表达的影响。结果 MCF7细胞转染SATB1后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显升高;MDA-MB-231细胞在SATB1-siRNA干扰后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显降低(P<0.05)。结论 SATB1可能在形成并维持乳腺癌肿瘤干细胞特性中起重要作用。

乳腺癌中CD44^+/CD24^-表型及乳腺癌分子亚型的分布及意义

目的探讨CD44+/CD24-表型在乳腺癌中的临床病理意义和乳腺癌分子亚型在中国人群中的分布。方法回顾分析217例乳腺癌患者,根据ER、PR、Her-2及CK5/6的水平划分为5个分子亚型。应用双重免疫组织化学检测其CD44/CD24双染的情况,分析CD44+/CD24-表型在乳腺癌中表达情况及其与临床病理的相关性;分析乳腺癌分子亚型在中国人群中的分布情况。结果 217例乳腺癌病例中,luminal A型130例,luminal B型15例,Her-2过表达型21例,basal-like型29例,Normalbreast-like型22例。CD44+/CD24-表型在所有乳腺癌阳性表达率为38%。CD44+/CD24-表型与患者年龄、肿瘤大小、组织分级、淋巴结转移等无关(P>0.05)。结论乳腺癌干细胞表型(CD44+/CD24-)在乳腺癌中只占一小部分,在人类乳腺癌中CD44+/CD24-表型无临床病理意义;5种分子亚型中luminal A型所占比例最高,其他亚型所占比例较低。

乳腺癌及癌旁组织中CD44^+/CD24^-表达的差异及临床意义

收集我院经手术治疗、有明确病理诊断的初治乳腺浸润性导管癌患者的石蜡标本(112例),免疫组织化学检测CD44+/CD24-的表达,分析其与临床病理特征的相关性。结果发现CD44+/CD24-在乳腺癌组织的表达高于癌旁正常组织(P<0.05),其表达情况与组织学分级有关(P<0.05),与月经状况、年龄、脉管癌栓、肿瘤大小、分期、雌激素受体、孕激素受体、HER-2、P53、Ki67表达无关(P>0.05)。因此认为CD44+/CD24-在乳腺癌组织的表达高于癌旁正常组织,其表达情况与组织学分级有关,而与其他临床病理特征无关。

LncRNA LINC01137通过诱导CD8^(+)T细胞耗竭促进非小细胞肺癌进展的机制研究

目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LINC01137在非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)免疫逃逸中的生物学功能及其潜在的调节机制。方法采集24例健康志愿者和24例NSCLC患者血液样本,并收集NSCLC肿瘤组织和癌旁组织检测LINC01137水平。利用Starbase数据库预测LINC01137与miR-22-3p的结合位点,荧光素酶报告基因分析进行验证。采用A549细胞来源的外泌体和/或sh-LINC01137干扰序列转染A549细胞,检测细胞增殖和侵袭能力;收集转染后的细胞上清液培养CD8^(+)T细胞,检测CD8^(+)T细胞耗竭标志物干扰素-γ(interfereron-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、颗粒霉素B(granzyme B)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平,以及PD-1+Tim3^(+)CD8^(+)T细胞百分比。采用外泌体和/或miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)转染CD8^(+)T细胞,检测PD-1蛋白水平。结果与癌旁组织相比,NSCLC肿瘤组织中LINC01137表达(3.357±0.548 vs 1.011±0.371)明显升高;与健康志愿者相比,NSCLC患者外周血LINC01137表达(3.216±0.342 vs 1.007±0.313)亦明显升高,差异具有统计学意义(t=-17.367,-17.147,均P<0.001)。肿瘤组织LINC01137表达与外周血中LINC01137表达呈正相关(r=0.755,P<0.05)。在A549细胞来源的外泌体中LINC01137显著富集。与Exo+sh-NC组相比,Exo+sh-LINC01137组细胞活力(65.852%±4.715%vs 100.153%±11.934%)及细胞侵袭(21.464%±3.481%vs 43.126%±1.447%)能力显著降低,差异具有统计学意义(t=4.630,9.953,均P<0.01)。NSCLC患者外周血中LINC01137表达和CD8^(+)T细胞百分比呈负相关(r=-0.520,P<0.05)。与Exo+sh-NC组相比,Exo+sh-LINC01137组IFN-γ(3865.314±543.852 pg/ml vs 1786.971±105.982 pg/ml),TNF-α(4631.930±510.715pg/ml vs 1973.242±379.623pg/ml),Granzyme B(3876.496±312.438pg/ml vs 1879.439±287.584pg/ml)和IL-2 mRNA水平(3.286±0.437 vs 1.015±0.314)升高,PD-1+Tim3^(+)CD8^(+)T细胞百分比(7.680%±2.185%vs 18.952%±3.216%)降低,差异具有统计学意义(t=-6.497,-7.237,-8.146,-7.310,5.021,均P<0.01)。miR-22-3p是LINC01137的靶基因。与Exo+NC mimic组相比,Exo+miR-22-3p组PD-1蛋白水平(0.384±0.087 vs 1.003±0.147)显著降低,差异有统计学意义(t=6.277,P<0.01)。结论NSCLC患者肿瘤组织及外周血中LINC01137表达显著上调;NSCLC细胞来源的外泌体中LINC01137通过靶向CD8^(+)T细胞中miR-22-3p并抑制其表达,诱导CD8^(+)T细胞耗竭,促进NSCLC细胞免疫逃逸。

Hedgehog信号通路在乳腺癌CD_(44)^+ CD_(24)^-细胞中激活

目的了解Hedgehog信号通路在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用免疫磁珠法从无血清培养的乳腺癌悬浮细胞中分选CD44+CD24-细胞和非CD44+CD24-细胞,分别接种于NOD/SCID鼠乳腺脂肪垫内,观察成瘤情况。采用real-time RT-PCR技术检测Hedgehog信号通路分子SMO和GLI1在CD44+CD24-细胞和非CD44+CD24-细胞中的表达情况。结果分选出的CD44+CD24-细胞约占细胞总数的2.25%,SMO mRNA和GLI1 mRNA在CD44+CD24-细胞中的表达均高于其在非CD44+CD24-细胞中的表达(P均<0.05)。CD44+CD24-组乳腺癌发生率为100%(3/3),发生肺转移、淋巴结和肺转移、肝脏和淋巴结转移各1只;非CD44+CD24-细胞组乳腺癌发生率为50%(2/4),未见有转移发生。结论在乳腺癌CD44+CD24-细胞中Hedgehog信号通路分子表达增强,其与乳腺癌的浸润转移关系密切。

三阴乳腺癌CD44^+/CD24^(-/LOW)细胞与CXCR4表达的临床意义

目的探讨CD44+/CD24-/low表型在三阴乳腺癌中的临床病理意义以及与CXCR4表达的相关性。方法根据ER、PR、Her-2表达情况将118例乳腺癌分为三阴及非三阴组,应用免疫组织化学检测其CD44、CD24及CXCR4表达情况,分析CD44+/CD24-/low表型及CXCR4在三阴乳腺癌中表达情况及其与临床病理的关系。结果 34例三阴乳腺癌肿瘤细胞CD44+/CD24-/low表型阳性率为55.9%,CD44+/CD24-/low阳性与一般临床特征不相关,但与远处转移或复发密切相关。CXCR4的表达与CD44+/CD24-/low阳性细胞成正相关。结论三阴乳腺癌的复发和远处转移可能与CD44+/CD24-/low较高的表达率有关,并且可能是由CXCR4介导的。

三阴性乳腺癌组织中肿瘤干细胞相关标记物CD44^+/CD24^(-/low)和ALDH1+的表达及意义

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenases l,ALDH1)和CD44^+/CD24^(-/low)的表达及其与临床预后的关系。方法:通过免疫组织化学SP法检测ALDH1和CD44^+/CD24^(-/low)等生物学指标在30例三阴性乳腺癌(TNBC)术后石蜡切片组织和30例非三阴性乳腺癌术后石蜡切片组织中的表达,并分析其与TNBC的临床预后因素的关系。结果:TNBC组织中ALDH1+表达率为46.67%,CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率为56.67%;非三阴性乳腺癌组织中ALDH1+表达率为16.67%,CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率为26.67%,TNBC组织中ALDH1和CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达率明显高于非三阴性乳腺组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。腋窝淋巴结转移率在CD44^+/CD24^(-/low)与ALDH1均阳性表达组和非阳性表达组中分别为66.67%和23.81%(χ~2=4.983,P=0.035);局部复发和/或转移率分别为33.34%和0(χ~2=7.778,P=0.021)。结论:TNBC组织中ALDH1+和CD44^+/CD24^(-/low)过表达,可以作为判断TNBC患者预后的标记物。

CD44^+/CD24^(-/low)在乳腺癌中的表达及其与含蒽环类药物化疗方案敏感度的关系

目的研究乳腺癌中CD44+/CD24-/low的表达及其与含蒽环类药物化疗方案敏感度的关系。方法 91例乳腺癌接受含蒽环类药物的术前新辅助化疗,2～4个疗程后进行效果评价;采用双染免疫组织化学方法检测化疗前后CD44+/CD24-/low的表达,t检验分析化疗前后CD44+/CD24-/low细胞比例的变化,χ2检验分析乳腺癌CD44+/CD24-/low表型与乳腺癌临床病理参数及化疗疗效的关系。结果乳腺癌中CD44+/CD24-/low阳性表达率为39.6%(36/91),在接受含蒽环类药物的新辅助化疗后乳腺癌中CD44+/CD24-/low细胞比例较化疗前明显增加(P=0.028)。CD44+/CD24-/low阳性组ER阳性率明显低于CD44+/CD24-/low阴性组(25.0%vs.47.3%,P=0.033)。三阴性乳腺癌中CD44+/CD24-/low阳性率明显高于非三阴性乳腺癌(61.9%vs.32.9%,P=0.017)。CD44+/CD24-/low表型与年龄、肿瘤大小、临床分期、病理类型、组织学分级等乳腺癌临床病理参数无明显关系(P>0.05)。CD44+/CD24-/low阳性组的总有效率高于CD44+/CD24-/low阴性组,但两组之间差异无统计学意义(75%vs.69.1%,P=0.542);CD44+/CD24-/low阳性组的病理完全缓解率明显高于CD44+/CD24-/low阴性组(38.9%vs.18.2%,P=0.028)。结论 CD44+/CD24-/low细胞仅存在于部分乳腺癌,CD44+/CD24-/low表型与ER(﹣)、三阴性乳腺癌相关,CD44+/CD24-/low表型与乳腺癌对含蒽环类药物化疗方案的敏感度相关,CD44+/CD24-/low表型可能成为乳腺癌临床化疗疗效的预测指标之一。

CD44^+/CD24^(-/low)和ALDH1与浸润性乳癌分子亚型及预后的相关性

目的探讨肿瘤干细胞标志物CD44^+/CD24^(-/low)和乙醛脱氢酶1(ALDH1)在浸润性乳癌组织中的表达及其与乳癌分子亚型和预后的关系。方法制备组织芯片,使用罗氏Ventana Benchmark XT autostainer仪器,采用免疫组化法检测259例乳癌手术切除标本中CD44、CD24和ALDH1的表达。结果乳癌病例中CD44^+/CD24^(-/low)的阳性表达率为37.1%,其在乳癌各分子亚型中的表达差异具有统计学意义(χ~2=17.84,P<0.01),在Her-2型及三阴性乳癌(TNBC)中阳性表达率较高。乳癌病例中ALDH1的阳性表达率为22.8%,其在乳癌各分子亚型中的阳性表达率差异具有统计学意义(χ~2=28.11,P<0.01),在TNBC中阳性表达率较高。乳癌病例中CD44^+/CD24^(-/low)与ALDH1+的联合表达率为5.8%,其在乳癌各分子亚型中的阳性表达率差异具有统计学意义(χ~2=18.07,P<0.01)。CD44^+/CD24^(-/low)与ALDH1的表达无明显相关性(r=-0.11,P>0.05)。CD44^+/CD24^(-/low)阳性表达的乳癌病人5年无病生存率(DFS)为55.2%,较阴性表达病人显著降低(χ~2=10.34,P<0.01);ALDH1阳性表达的乳癌病人5年DFS为61.0%,较阴性表达病人显著降低(χ~2=12.28,P<0.01)。结论乳癌干细胞标志物CD44^+/CD24^(-/low)和ALDH1在乳癌组织中的表达不高,在乳癌各分子亚型中的表达有差异,联合检测这些标志物有可能预测病人预后。