苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞RAW264.7表达CD91、CD13和分泌TNF-α的抑制作用

目的探讨苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞RAW264.7表达CD91、CD13和分泌TNF-α的抑制作用。方法(1)用6孔板培养巨噬细胞RAW264.7,制作细胞爬片,然后与不同浓度(0、12.5、25、50、100、200mg/L)的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱共培养,细胞爬片免疫组化染色,检测CD91和CD13的表达情况,并采用MediaCybernetics公司的图像分析系统进行定量分析,测量积分光密度(IOD)值。(2)6孔培养板培养巨噬细胞RAW264.7,加入不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱与巨噬细胞共培养1d后,收集培养孔中的培养液,采用ELISA方法检测培养液中TNF-α的含量。结果苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱均能抑制巨噬细胞表达CD91和CD13,其抑制作用随浓度变化也有不同,苦参碱更明显。不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞分泌TNF-α有抑制作用,苦参碱对巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-α的抑制作用更明显。结论苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞表达CD91、CD13和分泌TNF-α有明显的抑制作用。

新发β-地中海贫血基因突变(CD87～CD91或CD88～CD92)1例

1资料 男性，29岁，汉族，为本站孕前优生健康检查对象，在地中海贫血（简称地贫）筛查中，疑为13一地贫基因携带者。Hb129g／L，RBC6．80×10化／L，MCH19pg，MCV62fl，红细胞渗透脆性（一管法）44％。HbA26．08％。Hb（A＋F）93．92％。

乌头碱与新乌头碱对巨噬细胞RAW 264.7的作用研究

目的:探索乌头碱、新乌头碱对巨噬细胞RAW264.7活性、分泌TNF-α和表达CD91、CD13的抑制作用。方法:加入不同浓度的乌头碱、新乌头碱与巨噬细胞RAW264.7共培养1 d后,采用MTT法检测巨噬细胞活性,采用ELISA方法检测培养液中TNF-α的含量。制作细胞爬片,与不同浓度的乌头碱、新乌头碱共培养,细胞爬片免疫组化染色,检测CD91和CD13的表达情况,采用图像分析系统对细胞爬片免疫组化染色图像进行分析,测量IOD值。结果:不同浓度的乌头碱、新乌头碱对巨噬细胞活性有不同程度的抑制作用,抑制巨噬细胞分泌TNF-α,浓度越大,抑制作用越强。乌头碱和新乌头碱均能抑制巨噬细胞表达CD91和CD13,其抑制作用随浓度变化而不同,20 mg/100 ml对巨噬细胞表达CD91和CD13的抑制作用最强。结论:乌头碱、新乌头碱均能抑制巨噬细胞RAW264.7的活性及分泌TNF-α,对巨噬细胞表达CD91和CD13有明显的抑制作用。

热休克蛋白在天然免疫和适应性免疫中的作用

热休克蛋白 (HSP)是细胞中普遍存在的胞内蛋白 ,不仅是维持细胞正常生命活动所必须的 ,而且在天然免疫和适应性免疫中也起到重要作用。HSPs通过模式识别受体 (PRR)传递信号给天然免疫系统 ,激活效应细胞产生免疫应答。HSPs还具有结合并呈递抗原肽的作用 ,HSP 肽复合物能够激活CD8+ T细胞特异性免疫应答 ,这种特异性识别作用是由CD91受体介导的。热休克蛋白的免疫学特性为肿瘤和感染性疾病的免疫治疗提供新途径 ,在动物实验和临床研究中已获得了一定的成功。

ME491/CD63对小鼠胚胎发育及着床的影响

目的:研究ME491/CD63对小鼠胚胎体外发育及着床的影响,以及ME491/CD63mRNA及蛋白在假孕D1～8小鼠子宫中的表达规律.方法:①将小鼠8-细胞胚胎培养于含不同浓度ME491/CD63抗体的培养液中,观察胚胎发育,记录囊胚形成及脱透明带的情况.②妊娠D4小鼠宫角注射ME491/CD63抗体,于妊娠D8观察小鼠胚胎植入数量.③用RT-PCR及免疫组织化学技术观察ME491/CD63mRNA及蛋白在假孕小鼠子宫的表达规律.结果:①ME491/CD63抗体可影响胚胎在体外的发育.与对照组相比,在ME491/CD63抗体浓度为1∶400及以上时,囊胚的形成率明显降低(P<0.05);在抗体浓度为1∶800及以上时,胚胎脱带率显著下降(P<0.05),ME491/CD63抗体对胚胎发育的影响具有浓度依赖性.②宫角注射一定量的ME491/CD63抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数[(5.8±2.3)vs(4.1±1.8),P<0.05].③ME491/CD63mRNA在假孕D1～8小鼠子宫中均有表达,于D6表达最丰富.ME491/CD63蛋白在假孕D1～8的子宫腺上皮细胞均有表达,假孕D1～5腔上皮细胞无表达,假孕D6～8,子宫腔上皮细胞阳性表达.结论:①ME491/CD63在小鼠胚胎发育和着床过程中发挥重要作用.②ME491/CD63在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的,其表达量的变化可能与胚胎存在与否有一定关系.

热休克蛋白gp96作为抗原载体的研究进展

gp96是存在于真核生物细胞内质网中的分子量约为 96kD的热休克蛋白 (又称GRP94)。它属于HSP90家族 ,是胞质HSP90的旁系同源蛋白。研究证实从小鼠肿瘤组织中分离的gp96注射小鼠后 ,可使小鼠获得针对该肿瘤细胞的特异细胞免疫力。随后发现这种特异性免疫不是由gp96引起 ,而是由其结合的小肽诱发。gp96受体的发现给这种现象的解释提供了线索。人们提出了多种假说来解释这种现象 ,其中一些得到了广泛的支持。另外 ,gp96还参与免疫调节过程。