5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对人结肠癌细胞系LoVo增殖的抑制

目的:检测已构建的缺氧反应元件(hypoxia response element,HRE)和人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控CDX2基因表达的载体pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)对人结肠癌细胞系LoVo增殖的影响。方法:复苏前期筛选的转染pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(hC)的LoVo细胞(hC/LoVo)、转染pLVX-5HREhTERTp-3FLAG(5Hh)的LoVo细胞(5Hh/LoVo)、转染pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)的LoVo细胞(5HhC/LoVo)及空白LoVo细胞,各组细胞均在常氧条件和缺氧条件(加入缺氧模拟剂CoCl2)展开实验。MTT检测细胞增殖情况,平板克隆实验观察细胞集落形成,流式细胞术分析细胞周期。结果:成功复苏转染5HhC的LoVo细胞及各组对照LoVo细胞。hC/LoVo、5HhC/LoVo细胞增殖显著低于LoVo及5Hh/LoVo,且缺氧微环境下的5HhC对于LoVo细胞的增殖速度抑制更为明显[细胞增殖率,第5天,常氧vs缺氧:(48.62±3.32)%vs(36.81±2.83)%,P<0.05;第7天,常氧vs缺氧:(56.44±2.28)%vs(38.51±3.21)%,P<0.05]。hC/LoVo、5HhC/LoVo组的平板克隆数显著低于LoVo及5Hh/LoVo组,且缺氧微环境下的5HhC对LoVo细胞集落形成能力的抑制较常氧环境下更为显著[集落数:(44.2±3.5)个vs(90.8±9.3)个,P<0.05];hC/LoVo、5HhC/LoVo组G1期细胞比例较LoVo细胞及5Hh/LoVo组明显提高[(63.59±0.55)%、(64.82±2.22)%vs(51.38±0.70)%、(51.59±0.38)%,P<0.05],且在缺氧微环境下,5HhC/LoVo组G1期细胞比例提高更加显著[(71.38±3.02)%vs(64.82±2.22)%,P<0.05]。结论:治疗载体5HhC可使人结肠癌细胞系LoVo发生G1期阻滞,增殖及集落形成能力受到抑制,且在缺氧诱导下5HhC的抑制能力更为显著。

cdx2基因在儿童白血病的表达及临床意义研究

本研究旨在探讨cdx2基因在儿童急性白血病骨髓及外周血单个核细胞中的表达及临床意义。采取33例初发儿童白血病患儿骨髓及外周血,运用RT-PCR方法检测cdx2基因在各型白血病及正常对照组中的表达,随访25例并观察其与疗效的关系。结果发现,病例组中30例急性白血病(AL)患儿cdx2表达阳性25例(83.3%),30例中21例急性淋巴细胞白血病(ALL)和9例急性髓细胞白血病(AML)cdx2表达阳性分别为20例(95.2%)和5例(55.6%),两组相比有统计学意义(p<0.05);3例慢性粒细胞白血病(CML)中1例cdx2表达阳性。对照组20例健康体检者外周血cdx2表达阴性,与病例组比较差异有统计学意义(p<0.01)。25例AL患儿cdx2阳性21例(ALL17例,AML4例)与阴性者4例(ALL1例,AML3例)经治疗后均达到完全缓解(CR)。cdx2是否阳性表达可能与CR率无相关关系。对8例cdx2表达阳性AL患儿治疗后动态观察,结果初诊cdx2阳性表达在CR时仍阳性,但随着CR延长cdx2表达逐渐转为阴性,而初诊时cdx2阴性表达在骨髓CR时仍为阴性。结论:cdx2在儿童AL患者中广泛高表达,ALL者该基因表达阳性率高于AML患儿。CML患儿中也有cdx2表达;cdx2基因表达与AL患者CR率无明显相关。

CDX2基因在胃癌癌前病变不同中医证型中的表达

目的通过检测胃癌癌前病变(PLGC)不同中医证型患者胃黏膜组织CDX2基因的表达,探讨不同中医证型与CDX2基因表达之间的相关性及CDX2表达与不同病理类型之间的关系。方法将24例健康人及120例PLGC患者分为健康对照组、脾虚气滞证组、阴虚有热证组、胃络瘀阻证组,每例取新鲜胃黏膜6块,包括胃体、胃角和胃窦各2块,经免疫组织化学染色观察CDX2基因的表达。结果 CDX2基因阳性表达在脾虚气滞证中为16.67%(6/36),阴虚有热证中为52.17%(24/46),胃络瘀阻证中为63.16%(24/38),健康对照组无表达;其在Ⅰ型肠化生表达为33.33%(18/54),Ⅱ型肠化生表达为25.93%(14/54),Ⅲ型肠化生表达为27.78%(15/54),异型增生表达为12.96%(7/54)。结论 CDX2基因的表达与病理类型有关,在不同中医证型的表达有统计学意义,可为PLGC的中医证型客观化提供依据。

循环型m icroRNA-92a在先天性巨结肠中的表达及上调CDX2基因的研究

目的探讨循环型micro RNA-92a(mi R-92a)在先天性巨结肠(HD)中的表达,以及通过上调尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因抑制肠神经干细胞(ENSCs)增殖的可能机制。方法选取2013年1月-2015年12月在山东省临沂市沂水中心医院行先天性巨结肠根治术16例HD患儿的术前血清标本。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测血清mi R-92a m RNA的表达。提取孕15 d胎鼠肠管ENSCs,通过免疫学方法鉴定ENSCs;免疫磁珠法分选Nestin+ENSCs,脂质体转染使Nestin+ENSCs内过表达mi R-92a,噻唑蓝法检测细胞的增殖活性,q RT-PCR、Western blot检测CDX2基因的表达。结果 HD患儿血清中mi R-92a m RNA的相对表达量为(23.5±4.66),高于对照组(t=12.661,P=0.000);ENSCs细胞培养早期Nestin染色阳性,具有向Tuj-1阳性、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分化的潜能;ENSCs过表达mi R-92a后,CDX2 m RNA的相对表达为(13.024±3.882),高于对照组(F=47.212,P=0.000),CDX2蛋白表达为(0.436±0.0828),高于对照组(F=48.793,P=0.000),细胞的增殖活性在转染后24、48和72 h明显受抑制。结论 mi R-92a通过上调CDX2基因的表达,抑制ENSCs的增殖,可能促进HD发生、发展。

5'-Aza-CdR对HT-29和LoVo结直肠癌细胞株中CDX2基因甲基化状态、mRNA表达及蛋白表达的影响

目的:探讨甲基化酶抑制剂5'-氮杂-2'-脱氧胞苷(5'-Aza-2'-deoxycytidine,5'-Aza-CdR)对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中CDX2基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响.方法:用不同浓度5'-Aza-CdR处理结直肠癌细胞株HT-29和LoVo.应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法、SYBR Green PCR方法及蛋白印迹实验(Western blot)检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中CDX2基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达.结果:Methylight检测HT-29和LoVo细胞中C D X2蛋白在药物作用异常甲基化未得到逆转;实时荧光定量PCR和Western blot检测到0.5、1.0、1.5μmol/L 5'-Aza-CdR处理后C D X2基因m R N A和蛋白重新表达,实时荧光定量PCR检测对照组和不同浓度实验组在HT-29细胞株mRNA相对表达量分别为1.000±0.000、0.973±0.024、1.014±0.019和1.094±0.020;在LoVo细胞株相对表达量分别为1.000±0.000、0.966±0.038、1.050±0.029和1.007±0.019.Western blot检测CDX2蛋白在对照组和不同浓度实验组中HT-29细胞株相对表达量分别为0.454±0.049、0.501±0.041、0.340±0.050和0.531±0.046;LoVo细胞株相对表达量分别为0.527±0.037、0.415±0.037、0.432±0.040和0.626±0.046.以上作用无时间、剂量依赖性,但CDX2基因mRNA在HT-29细胞株表达(F=25.146,P=0.000)和LoVo细胞株表达(F=5.470,P=0.024)具有统计学差异,C D X2蛋白表达在HT-29细胞株表达(F=9.700,P=0.005)和LoVo细胞株表达(F=17.701,P=0.001)亦具有统计学差异.结论:结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中CDX2基因mRNA和蛋白表达不受中DNA甲基化的表观遗传修饰的调控.

Hsa-miR-9在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及与CDX2基因的相关性研究

目的:探讨人类微小RNA-9(Hsa-miR-9)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及对尾侧型同源盒基因(CDX2)的调节作用。方法:收集本院近5年诊治的130例初治ALL患儿的临床资料,并选取同时期同年龄段于本院行健康体检的健康人群60例作为对照;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCT)分别测定2组儿童Hsa-miR-9的表达量及ALL患儿不同治疗阶段CDX2基因的表达量,分析Hsa-miR-9的表达与患者临床病理特征及患者生存时间的关系,并探讨Hsa-miR-9与CDX2基因表达之间的关系。结果:Hsa-miR-9在ALL患儿中的表达量较健康对照组显著降低(P<0.001);ALL患儿Hsa-miR-9的表达与血清WBC、浸润淋巴结、脾肿大及危险程度分级有关(P<0.05);高表达Hsa-miR-9的ALL患儿的中位生存时间显著长于低表达组(P<0.001);不同治疗阶段ALL患儿的Hsa-miR-9表达均与CDX2基因的表达呈显著相关(rB-ALL初治期=0.54,rB-ALL缓解期=0.94,rT-ALL初治期=0.74)(P<0.05)。结论:Hsa-miR-9在ALL患儿中表达降低,高表达Hsa-miR-9的ALL患儿可获得更长的总体生存时间,Hsa-miR-9在ALL患儿中的表达与CDX2基因密切相关。

锯齿状病变患者组织中CDX2基因启动子中上游区域的甲基化

目的:观察锯齿状病变组织中CDX2基因甲基化状态和CDX2蛋白表达,探讨临床病理意义和在癌变通路中的作用,同时探讨CDX2基因在不同年龄层段甲基化状况.方法:应用Taqman探针qPCR(MethyLight)方法检测实验组225例锯齿状病变(包括96例增生性息肉(hyperplastic polyp,HP)、61例广基(无蒂)锯齿状腺瘤/息肉(sessile serrated adenoma/polyp,SSA/P)和68例传统型锯齿状腺瘤(traditional serrated adenoma,TSA)、对照组54例管状腺瘤(tubular adenoma,TA)、69例结直肠癌(colorectal cancer,CRC)和42例正常组织中CDX2基因CpG岛甲基化状态,并通过测序法验证扩增序列,同时应用免疫组织化学方法检测实验组116例锯齿状病变(包括52例HP、41例SSA/P、23例TSA)、对照组20例TA、24例CRC和24例正常组织中CDX2蛋白的表达情况.结果:CDX2基因启动子甲基化率在对照组正常组织与实验组HP(P=0.019)、SSA/P(P=0.015)和TSA(P=0.002),对照组CRC与实验组HP(P=0.000)、SSA/P(P=0.000)和TSA(P=0.000),对照组TA与实验组TSA(P=0.027)均有显著性差异;CDX2蛋白阳性率在对照组CRC与实验组HP(P=0.001),对照组TA与实验组HP(P=0.005),实验组HP和TSA(P=0.038)均有显著性差异;C D X2基因启动子甲基化率和CDX2蛋白阳性率的相关性比较中,实验组HP、SSA/P和TSA中P=0.652,r=-0.064(极弱相关);P=0.238,r=-0.182(极弱相关);P=0.519,r=-0.142(极弱相关),但两者有负相关趋势;CDX2基因启动子甲基化频率和不同年龄层段相关性比较实验组HP、SSA/P和TSA中P=0.002,r=0.312(弱相关);P=0.000,r=0.473(中等程度相关);P=0.001,r=0.392(弱相关),对照组TA中P=0.001,r=0.440(中等程度相关).结论:组织中CDX2基因启动子中上游区域甲基化状态比较复杂,极少部分甲基化状态可能有诱导CDX2蛋白表达下调,在锯齿状通路的发生发展中影响作用也甚微;大部分甲基化可能随着年龄增加而逐渐增加.

shRNA干扰CDX2基因表达对裸鼠结直肠癌肝转移瘤的影响

目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响。方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表达细胞株和阴性病毒细胞株;将稳定干扰CDX2基因表达的结直肠癌细胞(SW480-KD、HT29-KD)、空白对照细胞(SW480-CON、HT29-CON)和阴性对照细胞(SW480-NC、HT29-NC)接种到裸鼠脾下极包膜内,建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,每天称量裸鼠体质量并观察其摄食、活动及精神情况;50 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝转移瘤情况。结果:成功构建裸鼠结直肠癌肝转移模型,H-E染色确认为结直肠癌肝转移。各细胞干扰组(SW480-KD、HT29-KD)裸鼠体质量明显低于相应空白对照组和阴性对照组[SW480-KD:(15.02±2.00)vs(18.00±2.48)、(18.03±2.05)g;F=3.761,P<0.05;HT29-KD:(15.39±2.16)vs(17.96±2.48)、(18.30±1.87)g;F=3.721,P<0.05]。SW480-KD组肝转移瘤数目明显多于SW480-CON组和SW480-NC组[(57.83±22.56)vs(29.50±16.90)、(28.20±15.40)个;F=4.197,P<0.05];HT29-KD组肝转移瘤数目明显多于HT29-CON组和HT29-NC组[(56.83±29.16)vs(26.40±12.76)、(21.00±11.50)个;F=4.467,P<0.05)]。结论:脾注射法裸鼠肝转移模型可作为体内研究基因功能的理想模型;干扰CDX2基因表达可促进结直肠癌SW480和HT29细胞在体内的转移。

急性髓系白血病CDX2和β-catenin基因表达的相关性

目的研究急性髓系白血病(AML)患者CDX2与β-catenin基因表达的相关性。方法实时定量PCR方法检测92例初诊AML、30例非恶性血液病患者(对照)CDX2及β-catenin m RNA表达,Western blot检测其中的26例AML、8例非恶性血液病患者CDX2、β-catenin蛋白表达。结果 AML组CDX2 m RNA和蛋白表达阳性率分别为84.78%和76.92%,对照组未检测到表达(P<0.01);β-catenin m RNA和蛋白在两组均表达,但AML组显著高于对照组(P<0.01)。CDX2、β-catenin m RNA表达均与初诊时白细胞数、LDH水平呈正相关(P<0.01)。AML患者获得完全缓解时,CDX2 m RNA转阴、β-catenin m RNA表达显著下降,复发时两者均增高。AML患者CDX2与β-catenin无论在m RNA和蛋白水平表达均呈显著正相关(P<0.01)。结论 AML患者存在CDX2基因过表达及Wnt/β-catenin信号通路激活,且CDX2与β-catenin表达呈显著正相关。

维生素D受体基因CDX2多态性与阿达木单抗治疗中重度斑块型银屑病疗效相关性研究

目的探讨维生素D受体(VDR)基因位点多态性与阿达木单抗治疗斑块型银屑病疗效的关联性,以期对生物制剂治疗银屑病效果进行预测。方法采用中高通量单核苷酸多态性(SNP)分型技术,对达到和未达到银屑病面积与严重程度指数改善75%(PASI75)的2组患者VDR基因CDX2(rs11568820)位点多态性进行检测,比较2组CDX2基因型和等位基因分布频率差异。结果有效组和无效组VDR基因CDX2位点的基因型和等位基因的分布频率相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 VDR基因CDX2位点多态性与阿达木单抗治疗中重度斑块型银屑病疗效无相关性。

肠道上皮细胞特异转录因子CDX2研究进展

CDX2是一种新发现的肠道上皮细胞特异性核转录因子,在调节肠道基因表达与肠道发育及对肠道上皮细胞分化、增殖方面具有重要调节作用。笔者就有关CDX2的研究进展作一综述。

PTEN与CDX2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的通过对张力蛋白同源物基因(PTEN)和同源盒转录因子(CDX2)在大肠癌中表达的研究,探讨PTEN和CDX2的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测58例大肠癌组织及20例正常大肠组织中PTEN和CDX2的表达。结果大肠癌组织中PTEN与CDX-2蛋白表达显著低于正常大肠组织中表达(P<0.01),且与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。结论在调节肠上皮细胞增殖分化方面PTEN对CDX2有调控作用。CDX2与PTEN在结直肠癌发生、发展中起着重要作用。

斑贞1号联合TMP、5-FU对人胃癌细胞CDX2基因表达影响

目的探讨斑贞1号联合TMP、5-FU逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与CDX2相关性。方法从2015年6—12月在包头医学院第一附属医院中心实验室进行SGC7-901/ADR细胞培养,设1空白对照组、25-FU组、3斑贞1号组、45-FU+斑贞1号组、55-FU+斑贞1号+TMP组观察细胞毒性,选取各个药物组作用浓度分别提取总m RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)监测人胃癌细胞SGC-7901/ADR细胞在不同药物组的尾型同源基因2(caudal-re lated hom e-odom aintranscription factor 2,Cd X2)m RNA的表达情况。结果对照组CDX2 m RNA表达量为(2.01±0.26),5-FU组CDX2m RNA表达量为(1.94±0.24),5-FU组与阴性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而5-FU联合斑贞1号及TMP处理组CDX2 m RNA表达量为(0.44±0.07),与其他组明显降低比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论斑贞1号联合TMP及5-FU逆转人胃癌SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与CDX2基因相关。

Cdx2蛋白在不同亚型肠上皮化生中的表达及其与H. pylori感染的关系

目的探讨胃黏膜肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)中尾型同源异型盒基因2(caudal type homeobox genes 2,Cdx2)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(helicobacter pylori,H.pylori)感染的关系。方法选取内镜下活检的18例正常胃黏膜和53例IM胃黏膜。采用高铁二铵-爱先蓝-过碘酸雪夫反应(HID-AB-PAS)将胃黏膜IM分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,然后用Cdx2单克隆抗体进行免疫组织化学染色,检测Cdx2在正常胃黏膜及不同亚型IM中的表达。采用一分钟快速尿素酶实验及甲苯胺蓝染色检测H.pylori感染。结果Cdx2蛋白在正常胃黏膜中不表达,IM中Cdx2阳性表达率为83.02%(44/53),其中Ⅰ型IM阳性率为95.45%(21/22),Ⅱ型为83.33%(15/18),Ⅲ型为61.53%(8/13),三者间Cdx2蛋白表达有显著性差异(P=0.036)。IM中H.pylori感染阳性率为47.17%(25/53),其中Ⅰ型IM中H.pylori感染阳性率为27.27%(6/22),Ⅱ型为55.56%(10/18),Ⅲ型为69.23%(9/13),三者间H.pylori感染率亦有显著性差异(P=0.038)。Cdx2蛋白表达主要集中于H.pylori感染阴性者,但H.pylori感染阳性者和阴性者Cdx2表达无统计学差异(P>0.05)。结论Cdx2蛋白异常表达可能参与了胃黏膜IM向胃癌的转变,检测其表达有助于预测胃黏膜IM向胃癌转变的可能性。

肠化生黏膜微细结构与肠化亚型及CDX2、MUC2、MUC5AC异常表达的关系

目的探讨胃黏膜肠化生组织的表面小凹结构与肠化生亚型及尾部同源异型盒基因2(CDX2)、黏蛋白2(MUC2)、黏蛋白5AC(MUC5AC)之间的关系。方法随机选择拟行胃镜检查的84例门诊患者进行美蓝色素放大内镜检查,观察美蓝染色阳性区域的肠化生黏膜的小凹结构特点。于相关部位取检,共取得标本91份,标本进行苏木精-伊红染色(HE)、奥辛蓝/过碘酸-雪夫染色(AB/PAS)、高铁二胺/奥辛蓝(HID/AB)染色,同时进行CDX2、MUC2、MUC5AC免疫组化染色。分析黏膜小凹结构与肠化生亚型及肠化生细胞中CDX2、MUC2、MUC5AC表达之间的关系。结果美蓝放大胃镜下肠化生黏膜表面小凹结构可分为四类:不规则斑点型(16例)、网格型(30例)、短棒型(23例)和绒毛型(22例),其中不规则斑点型与绒毛型两组中均表现为MUC5AC高表达,但不规则斑点型多提示为不完全性肠化生,而绒毛型表型多提示为完全性肠化生;网格型及短棒型是MUC5AC阴性肠化生黏膜的主要表型,MUC5AC在肠化生细胞内的表达与AB/PAS染色相关,而与HID/AB染色无关;CDX2、MUC2在所有肠化生标本中均为阳性表达(100%,91/91)。结论肠化生黏膜小凹结构的表型对初步判断肠化生亚型及其内黏蛋白的异常表达有一定的提示作用。

Ascl2转录调控人结肠癌上皮细胞内CDX2基因表达的研究

目的探讨Ascl2对人结肠癌上皮细胞中CDX2基因的转录调控作用。方法预测CDX2启动子的转录因子结合位点,构建包含8个不同长度的CDX2近端启动子的荧光素酶报告基因质粒,分别命名为pGL3-CDX2-C1-8;将各质粒分别转染到shRNA-Ascl2/LS174T和shRNA-Ctr/LS174T细胞中,检测细胞中的双荧光素酶活性。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术,用Ascl2抗体免疫沉淀与CDX2启动子区DNA片段相结合的Ascl2,PCR扩增CDX2启动子的特异性序列。结果转录因子数据库预测到CDX2近端启动子区含多个E-box结合位点和潜在的Nkx-2、GATA-1、CdxA、Sox-5、SRY等顺式作用元件。双酶切及测序结果证实pGL3-CDX2-C1-8重组质粒插入片段序列均正确。重组质粒在shRNAAscl2/LS174T细胞中的荧光素酶活性明显高于shRNA-Ctr/LS174T细胞(P<0.01)。随着CDX2启动子片段的缩短,荧光素酶活性呈升高趋势。ChIP实验证实在CDX2近端启动子存在与Ascl2相结合的片段,在shRNA-Ascl2/LS174T细胞中,Ascl2与CDX2启动子区域中-841^-646、-291^-134、-7^+138片段结合的DNA片段明显少于对照shRNA-Ctr/LS174T细胞。结论 Ascl2在结肠癌上皮细胞中可能通过与CDX2近端启动子的直接结合而达到转录阻遏CDX2基因表达的目的。

CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的研究进展

目的观察分析CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的状态。方法选取该院在2011年3月—2015年7月期间收治的450例结直肠锯齿状病变患者(136例TSA,122例SSA/P,192例HP),并选取82例正常组织作为对照组,采用METHYLIGHT方法分析结直肠锯齿轮病变中CDX2基因甲基化状态,并采用免疫分析法分析CDX2基因的表达情况,收集相关的临床资料,分析CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的状态和相关因素情况。结果正常对照组CDX2基因甲基化率53.38%(44/84),SSA/P组75.41%(92/122),HP组72.97%(140/192),TSA组80.88%(110/136);HP组与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.009);TSA组与与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.005);SSA/P组与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.002)。结论结直肠锯齿状病变中CDX2基因启动子Cp G岛中上游区域基化程度高,蛋白表达阳性率高,两者相关性不强,极少部分甲基化状态有可能有诱导CDX2蛋白表达下调的作用。

CDX2基因高表达对胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因过表达对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移、凋亡等生物学特征的影响。方法采用脂质体转染法建立CDX2基因过表达的胃癌BGC-823稳定细胞株,分别采用RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学等方法检测转染重组表达载体pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因及其蛋白的表达。MTT法检测CDX2基因过表达对细胞的增殖能力的影响;划痕实验检测CDX2过表达对细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测CDX2过表达对细胞的凋亡的影响;应用基因芯片技术检测转染前后相关基因的差异表达。结果 RT-PCR及Western blotting检测结果显示,与对照组相比,转染pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因和蛋白均呈高表达;CDX2过表达能明显降低转然组BGC-823细胞增殖能力和迁移能力;但对细胞凋亡影响不明显;基因芯片结果提示CDX2基因高表达能影响某些基因的表达。结论 CDX2过表达能明显抑制胃癌细胞增殖、降低迁移能力,提示CDX2在胃癌中可能发挥抑癌基因的作用。

同源异型框基因Cdx2在胃癌发展中的作用

同源异型框基因及相关蛋白可分为两大家族:HOX及PRAHOX家族.前者包括HOX-A,HOX-B,HOX-C及HOX-D4类,后者包含GsH,Pnx和cnx(CDX l,CDX2,CDX4)。其中CDX2调节着肠上皮细胞的增殖、分化及肠表型的维持,对结肠和小肠上皮的发育起着关键的作用。近年来CDX2在胃癌发生发展中的作用日益受到人们的关注,对上述作用作一综述。

PTEN和Cdx2在溃疡性结肠炎和结直肠癌中的表达

背景:PTEN具有磷酸酶活性,能调控细胞的增殖、迁移和凋亡。Cdx2是一种肠道特异性转录因子,在调节肠上皮细胞分化、增殖中起关键作用。近年溃疡性结肠炎(UC)与结直肠癌之间的关系日益受到关注。目的:观察UC和结直肠癌组织中PTEN和Cdx2的表达,探讨两者在UC癌变进程中的作用。方法:在上海瑞金医院1997年1月～2007年10月诊断的UC患者中收集经病理检查确诊者的蜡块标本,其中UC组17例,UC相关结直肠癌组7例,另收集非UC相关结直肠癌标本35例和正常肠黏膜标本15例,以免疫组化方法检测PTEN和Cdx2表达。结果:PTEN和Cdx2在正常结直肠组织中基本呈阳性表达,阳性率分别为93.3%和100%,UC组织两者表达阳性率显著降低,均仅为6.7%。UC相关结直肠癌组PTEN和Cdx2表达阳性率显著低于非UC相关结直肠癌组(PTEN:28.6%对83.9%,Cdx2:42.9%对90.3%,P<0.01)。结论:UC与结直肠癌之间可能存在相关性。PTEN和Cdx2在调控肠上皮分化、增殖的过程中可能有相似的调节点或具有协同作用,两者可能共同参与了对UC癌变进程的调控。