应用单克隆抗体-免疫磁珠分离系统分离纯化再生障碍性贫血骨髓CD_(34)^+细胞

目的 分离、纯化再生障碍性贫血 (简称AA)患者骨髓CD3 4+ 细胞 ,探讨其发病机制。方法 对4 2例AA患者 ,以常规方法进行骨髓液采集和有核细胞分离 ,用单克隆抗体 免疫磁珠分离系统 (MACS)分离、纯化骨髓CD3 4+ 细胞 ,用碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶 (APAAP)法作CD3 4+ 细胞的纯度检测。结果 骨髓CD3 4+ 细胞纯度达 95 %～ 99% ,AA患者骨髓CD3 4+ 细胞多呈单个、散在分布 ,着色较淡 ;而对照组骨髓CD3 4+ 细胞多呈均匀或丛簇状分布 ,着色较深。结论 应用MACS分离AA骨髓CD3 4+ 细胞 ,特异性强、纯度高 ,是研究AA骨髓CD3 4+ 细胞功能、形态的最直接、客观。

CD_(34)抗体对特发性血小板减少性紫癜患者巨核系祖细胞作用的观察

应用CD_(34)抗体结合骨髓巨核系祖细胞(CFU—Meg)培养法观察了22例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CFU—Meg的产率及CD_(34)抗原的表达。结果表明:ITP患者的巨核细胞产率与10例正常对照者差异不显著(P>0.05);CD_(34)抗体在体外对ITP及正常人CFU—Meg均有识别抑制作用,二者之间差异不显著。从而推测ITP的发病机理不在干细胞及祖细胞水平。

抗CD_(20)嵌合抗体Fab’片段在大肠杆菌中高效表达

利用PCR方法从抗CD2 0 ScFv表达载体上扩增重链可变区 (VH)、轻链可变区(VL)基因 ,然后将VH、VL 基因重组到Fab’表达载体中 ,构建成抗CD2 0 嵌合抗体Fab’片段表达载体 pYZFcd2 0 ,用pYZFcd2 0转化大肠杆菌 16C9,在 16C9菌中分泌表达可溶性抗CD2 0 Fab’片段 ,经分离纯化获得具有CD2 0 抗原特异结合活性的Fab’片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,抗CD2 0 Fab’片段能竞争性抑制亲本鼠源性抗CD2 0 单克隆抗体HI4 7和Daudi细胞CD2 0

HI_(47)(CD_(20))单克隆抗体对B细胞活化增殖的影响

CD_(20)单克隆抗体(HI_(47))能够抑制SAC诱导B细胞~3H-TdR掺入。进一步研究发现HI_(47)也能抑制SAC诱导B细胞~3H-UdR掺入和母细胞化,但对PHA和Anti-Ig引起的B细胞活化和T、B及髓细胞系的增殖无影响。用相同免疫球蛋白亚类的无关抗体及HI_(47)F(ab′)_2片段试验表明HI_(47)的抑制活性是抗体的特异性作用,与Fc片段无关。通过观察HI_(47)抗原表达与B细胞活化的关系,结果提示HI_(47)对SAC活化途径的抑制作用可能与CD_(20)抗原表达有关。

急性髓系白血病免疫治疗的研究进展与展望

大多数急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者化疗诱导缓解后不可避免地面临复发。异基因造血干细胞移植作为AML最有效的治疗,通过免疫介导的移植物抗白血病效应根除白血病细胞,能有效预防AML复发。移植技术和单倍体移植模式进展使得"人人都能进行造血干细胞移植"。靶向治疗,如基因工程T细胞(嵌合抗原受体T细胞)、单克隆抗体、新型双特异性单抗,能特异性杀伤表达特殊抗原的白血病细胞,而不伤害正常细胞,将成为AML免疫治疗的新策略。研究发现高表达于急性单核细胞白血病细胞的新抗原急性单核细胞白血病相关抗原-34(monocytic leukemia associated antigen-34,MLAA-34)具有抗白血病细胞凋亡作用,且MLAA-34多肽可诱导特异性CTL杀伤活性,具有较强的免疫原性,MLAA-34可作为急性单核细胞白血病免疫治疗新的理想靶抗原。总之,新近进展有价值的免疫治疗白血病相关抗原的鉴定有可能根除化疗后白血病微小残留病变,有望降低AML复发,延长AML患者生存。