Advances in the Researches on the Blocking Effect of Chinese Drugs on Tumors

Malignant tumors are caused by multiple carcinogenic factors undergoing several stages. The occurrence and development of tumors may be prevented and blocked if some effective interference factors are brought into play.1 At present, there are two main subjects for the researches, that is, blocking the precancerous lesions and blocking the develop-ment of tumors. The former focuses on the removing of carcinogenic factors and on the chemoprophylaxis of cancer, while the latter on the inhibition of cancer cell infiltration and cancerometastasis. These are summarized as follows.

不同抗癌药物对乳癌MCF-7细胞增殖及端粒酶活性的影响

目的 研究乳癌细胞MCF 7在不同抗癌药物存在的情况下端粒酶活性的变化规律。方法 运用细胞记数、台盼蓝染色和MTT法测定细胞增殖能力及其活性 ,同时用TRAP法测定细胞端粒酶活性。观察细胞在不同情况下端粒酶活性变化及其影响因素。结果 在无药物存在时 ,细胞增殖与端粒酶活性增加呈正相关 (r=0 .90 1)。阿霉素、紫杉醇和顺铂都能有效抑制细胞生长 ,以剂量依赖方式和时间依赖方式降低端粒酶活性 ,这种降低与活性细胞减少密切相关。结论 阿霉素、紫杉醇和顺铂抑制MCF 7细胞生长 ,其机制可能与降低端粒酶活性及细胞活性有关。

三氧化二砷对肝癌细胞系HLE的影响

目的 观察不同浓度的三氧化二砷 (AT)在不同时间对肝癌细胞的影响 ,并探讨其作用机制。方法 应用不同浓度的AT作用后观察肝癌细胞HLE的存活、形态学改变及细胞凋亡的情况。结果 不同浓度的AT作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性 ,发生作用后细胞生长有明显的凋亡特征性改变 :细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成 ;琼脂糖凝胶电泳显示肝癌细胞存在G2 /M期阻滞 ,在G1峰前出现明显的凋亡峰 ;且出现明显的凋亡特征性梯状条带。结论 AT可明显抑制肝癌细胞的生长 ,其机制主要是诱导肝癌细胞凋亡。

针灸对肿瘤患者化疗后血细胞和消化道反应的影响

目的 :对比针灸与药物对肿瘤患者化疗后血细胞和消化道反应的作用。方法 :将 10 2例化疗患者按 2∶1随机分为针刺治疗组 (穴取内关、中脘、足三里等 )和服药对照组 (口服VitB6 、吗丁啉等 )进行研究。结果 :治疗组和对照组均可升高化疗患者的血细胞水平 ,但治疗组作用明显好于对照组 (P <0 0 5 ) ;在改善化疗后主要症状和体征方面 ,治疗组总有效率为 82 3% ,对照组为 6 7 6 %(P <0 0 5 )。结论 :针灸可拮抗化疗药的副作用 ,对化疗机体具有良好的保护作用。其作用与取穴、刺激量、治疗方法及治疗时机密切相关。

槐耳清膏治疗肝癌的实验研究

目的 探讨槐耳清膏对人胎脐静脉内皮细胞的作用 ,以及其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌的抑制作用及其可能机制。方法 用不同浓度的槐耳清膏作用于人胎脐静脉血管内皮细胞 ,观察其对细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成的影响 ,同时观察其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌过程的影响。结果 槐耳清膏≥ 2mg/ml时可显著降低肿瘤组织的血管内皮细胞增殖能力 ,减少血管形成 ,抑制血管内皮细胞的迁移、黏附 ,从而降低微血管密度。槐耳清膏 ( 3g/kg) +MMC( 5 0 0 μg/kg)同时作用于裸鼠的肝癌组织 ,其抑瘤作用最强 ,后依次为MMC组 ,槐耳清膏 ( 3g/kg)组。结论 槐耳清膏对肝癌有抑制作用 ,其可能机制是作用于血管内皮细胞 ,影响血管内皮细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成 ,从而抑制肝癌组织的血管生成 。

抗癌膏穴位贴敷对Lewis肺癌模型小鼠癌细胞周期移行的影响

目的:探索抗癌膏穴位贴敷治疗癌症的作用机制。方法:用C57BL/6近交系小鼠,瘤细胞悬液皮下接种法造模,造模5日后用抗癌膏贴敷接种部位及“肺俞”穴,隔日治疗1次,治疗7次后,用流式细胞技术进行癌细胞周期分析。结果:抗癌膏使G1期细胞比例显著增加（P<0.05）,S期细胞比例显著减少（P<0.01）,细胞增殖指数显著下降（P<0.05）,癌细胞周期移行在G1期到S期之间发生阻滞。结论:抗癌膏通过抑制癌细胞增殖起到抗癌作用。

肝症口服液含药血清对TGFα诱导SMMC-7721细胞增殖和ERK蛋白的影响

目的观察肝症口服液含药血清对 TGFα诱导人肝癌细胞增殖和信号传导因子 ERK 影响.方法采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,应用 MTT比色法观察中药鼠血清对 TGFα诱导人肝癌细胞 SMMC-7721增殖的抑制作用.用免疫组化方法检测中药血清对信号传导因子 ERK 蛋白表达影响.结果中药血清作用24h 对 SMMC-7721细胞抑制率达25%,P<0.05;作用48h 抑制率达30%,P<0.001;中药血清作用24h 对1μg·L^(-1)TGFα诱导的 SMMC-7721细胞增殖抑制率为12.3%,P>0.05;作用48h 抑制率为16%,P<0.05;中药血清作用24h 对5μg·L^(-1)TGFα诱导的 SMMC-7721细胞增殖抑制率为8.9%,P>0.05,作用48h 抑制率为17.2%,P<0.001.中药血清对 TGFα诱导的肝癌细胞 SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抑制效应呈时间依赖性.中药血清能抑制 ERK 蛋白在细胞核中的表达.结论肝症口服液含药血清能够抑制 TGFα诱导的人肝癌细胞增殖,阻断 TGFα在细胞内的信号传导.

γ-干扰素对肝癌细胞株Hep-G2 Fas,Bcl-2表达的影响

目的 观察γ 干扰素 (γ IFN)对肝癌细胞株Hep G2细胞 (Hep G2 )表达Fas ,Bcl 2的影响。方法 应用γ IFN预处理Hep G2 ,用阿霉素诱导凋亡 ,MTT法分析细胞死亡率 ,电镜观察凋亡 ,免疫组织化学法研究γ IFN作用于Hepp G2细胞过程中Fas ,Bcl 2的表达情况。结果 γ IFN预处理的Hep G2表达Fas增强 ,表达Bcl 2减弱 (P <0 .0 5 ) ;γ IFN预处理后Hep G2细胞对阿霉素的敏感性提高 (P <0 .0 5 )。结论 γ IFN对肝癌细胞株Hep G2Fas ,Bcl 2表达有影响 ,并可提高肝癌细胞对阿霉素的敏感性。

抗p185^(erbB2)单抗的制备及其生物学活性

目的 :制备抗 p185 erbB2 单克隆抗体 ,并研究其对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法 :用NIH3T3 erbB2细胞免疫BALB/c小鼠 ,制备抗p185 erbB2 单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Westernblot及免疫组化检测单抗的结合特异性。并用MTT比色法检测所获抗体对表达 p185 erbB2 肿瘤细胞的生长抑制作用。结果 :经筛选获得 1株对表达 p185 erbB2 细胞反应阳性 ,不表达 p185 erbB2 细胞反应阴性的单克隆抗体1H3 ;免疫沉淀、Westernblot均表明 1H3可与p185 erbB2 分子特异性结合 ;免疫组化结果显示 1H3对c erbB2阳性的乳癌组织呈特异性着染 ;MTT比色法检测表明 1H3对不同的 p185 erbB2 阳性肿瘤细胞均有不同程度的生长抑制作用。结论 :单克隆抗体 1H3能与p185 erbB2 特异结合 ,并可不同程度地抑制NIH3T3 erbB2或SKBR3细胞的生长 ,除可应用于临床对 p185 erbB2 的检测外 ,尚具有肿瘤生物治疗的潜在应用开发价值。

反义核酸hTERT对大肠癌细胞的抑制作用

目的 :构建人端粒酶逆转录酶组分 (humantelomerasereversetranscriptase ,hTERT)反义cDNA逆转录病毒载体 ,观察其对大肠癌细胞HT2 9端粒酶活性和细胞增殖的抑制作用 ,探讨以hTERT为靶的大肠癌基因治疗的可行性。方法 :RT PCR扩增hTERTmRNA 5′起始端 835bp的cDNA ,分别正向和反向插入到逆转录病毒表达载体 pLXSN质粒中 ,转染包装细胞PT6 7后获得重组病毒 ,病毒感染大肠癌HT2 9细胞。处理前后采用Westernblot检测hTERT蛋白表达 ,TRAP法检测端粒酶活性 ,倒置显微镜观察细胞形态变化 ,绘制细胞生长曲线 ,流式细胞仪和DNA片段电泳观察凋亡情况。结果 :反义hTERT作用大肠癌HT2 9细胞后hTERT表达下降 ,端粒酶活性被抑制 ,细胞增殖受到抑制并出现明显的细胞凋亡。结论 :反义hTERT对大肠癌细胞HT2 9端粒酶活性具有明显的抑制作用 ,抑制细胞生长 ,促进细胞凋亡 ,hTERT有可能成为大肠癌基因治疗靶点。

幽门螺杆菌培养上清液对大鼠胃黏膜上皮细胞增殖的影响

目的 :研究幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)的代谢产物在胃黏膜上皮细胞增殖中的作用。 方法 :用液体培养的方法培养产毒Hp菌株NCTC116 37,然后提取上清液 ,用浓缩上清液 (concentratedbrothculturesuper natant,CCS)灌鼠胃。采用放射免疫方法测定血请胃泌素 ,用免疫组织化学SP(streptavidin/ perosidase)法检测胃黏膜增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA)和表皮生长因子受体 (epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达。结果 :灌服CCS组与对照组比较 ,胃黏膜PCNA标记指数阳性率升高、差异具有显著性 ,胃黏膜细胞表皮生长因子受体在灌服CCS组有 4/ 8阳性 ,对照组无 1例阳性 ;血清胃泌素升高 ,但统计学上差异无显著性。结论 :产毒Hp培养上清液可以促进胃黏膜上皮细胞的增殖 。

L-缬氨酸浓度对胃癌细胞增殖影响的初步研究

采用噻唑蓝(MTT)活细胞染色法(简称MTT法)观察改变培养基中L-缬氨酸(L-Val)含量对胃癌细胞及成纤维细胞增殖的影响,发现在小牛血清培养基中不加L-Val可抑制胃癌细胞增殖;增加L-Val含量并不加快胃癌细胞的增殖。改变L-Val含量对正常二倍体成纤维细胞生长影响不大。该结果为配制胃癌不平衡氨基酸治疗液提供了理论依据。

二甲肼致大肠上皮细胞转化过程中的基因谱改变研究

目的探讨二甲肼对大肠上皮细胞的作用和基因表达谱改变影响。方法以前期建立的永生化正常大肠上皮细胞为模型,采用软琼脂克隆形成实验探讨二甲肼的诱导转化作用,并用基因芯片技术揭示转化过程中的基因谱变化,实时荧光定量PCR和Western blot技术进行验证。结果经二甲肼作用后大肠上皮细胞在软琼脂中出现细胞克隆,与正常对照细胞比较,转化细胞有265个基因表达发生明显改变,包括148个上调基因和117个下调基因。分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)在转录和蛋白水平上均发生明显上调。结论二甲肼能诱导永生化正常大肠上皮细胞发生恶性转化,初步揭示了转化过程中基因表达谱的改变,为认识大肠癌发生的分子机制提供了有益线索。

类黄酮衍生物DMF诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的实验研究

目的:检测3-(2-氯苯基)-1-(2-羟基-4,6-二甲氧基-3-((-N,N-甲基乙基胺)甲基)苯基)-丙-2-烯-1-酮(DMF)对人前列腺癌PC3细胞的抗肿瘤活性,并对相关作用机制进行研究。方法:采用MTT法测定DMF对PC3细胞增殖的体外抑制作用;流式细胞术检测PC3细胞凋亡率;JC-1染色观察线粒体ΔΨm变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白表达。结果:DMF对PC3细胞具有显著的抗增殖作用。流式细胞术结果表明,这种抗增殖作用是通过诱导细胞凋亡实现的。DMF可诱导PC3细胞的线粒体膜电位(ΔΨm)下降,并呈明显的时间和剂量依赖效应。Western blot结果显示,DMF促进PC3细胞内procaspase-3活化及其下游底物PARP降解。同时,DMF还促进Bax蛋白表达上调和Bcl-2蛋白表达下调,使Bax/Bcl-2比值明显增加。此外,DMF可抑制PC3细胞内p38蛋白的磷酸化。结论:DMF可显著抑制PC3细胞增殖,其促凋亡作用可能是通过线粒体信号转导途径实现的。

VP16对S-180和S-180-R细胞凋亡的作用

①目的探讨ＶＰ１６对细胞凋亡的作用。②方法用两种剂量（３．１２，６．２５μｍｏｌ）的ＶＰ１６处理腹腔接种Ｓ－１８０瘤细胞和抗阿霉素瘤细胞（Ｓ－１８０－Ｒ）的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠。０，６，９ｈ分别取腹水，用流式细胞仪测定细胞相对ＤＮＡ含量。③结果ＶＰ１６在３．１２，６．２５μｍｏｌ剂量时，均可诱导Ｓ－１８０细胞凋亡，而剂量效应并不明显。在６．２５μｍｏｌ时，也可诱导Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡，且ＶＰ１６诱导Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ两种细胞凋亡差别不明显。④结论ＶＰ１６是Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的诱导剂。ＶＰ１６诱导的凋亡与其抗药表型关系不大，但与免疫机制似乎有一定的关系。

TGF-β介导间充质干细胞对肝癌干细胞的调控

目的观察间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对SMMC-7721肝癌细胞中肿瘤干细胞的调控作用及其相关机制。方法将MSCs与肝癌细胞混合注入裸鼠体内,观察种植瘤生成情况。用MSCs条件培养上清体外培养肝癌细胞,流式细胞仪检测其CD133+细胞比例改变情况。ELISA检测MSCs条件培养上清中TGF-β的浓度。TGF-β处理肝癌细胞,流式细胞仪检测其CD133+细胞比例改变情况。结果裸鼠种植瘤实验显示MSCs在体内可以促进肝癌生成。体外用MSCs条件培养上清培养SMMC-7721肝癌细胞株可上调其中CD133+细胞比例,呈时间依赖性。MSCs分泌TGF-β至培养上清,TGF-β处理肝癌细胞可上调其中CD133+细胞的比例,并亦呈时间依赖性。结论 MSCs对肝癌干细胞具有调控作用,TGF-β参与介导MSCs的这一作用。

β-榄香烯术前区域动脉灌注对乳腺癌组织的抑制作用及其对细胞凋亡和增殖的影响

目的 :观察中药莪术有效提取物 β -榄香烯术前区域动脉灌注对乳腺癌组织的抑制作用及其对细胞凋亡和增殖的影响。方法 :临床观察给药后肿块的改变并应用末端转移酶介导的脱氧核苷酸末端标记法(TUNEL法 )和增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化检测方法 ,观察术前 β -榄香烯治疗组 14例和一期手术组 17例乳腺癌标本的凋亡指数、增殖指数和分裂指数的差异。结果 :β -榄香烯治疗组凋亡指数 (7.97±1.50 )明显高于一期手术对照组 (2 .2 6± 0 .4 9) ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;β -榄香烯治疗组增殖细胞核抗原指数 (4 4 .54± 9.99)与对照组 (4 2 .80± 6 .78)比差异无显著性 (P >0 .0 5) ;治疗组的分裂指数(3.92± 1.4 4 )与对照组 (3.88± 1.0 8)比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5)。 14例术前 β -榄香烯治疗组等级相关分析凋亡指数与肿块缩小程度呈正相关 (r=- 0 .72 9)。结论 :给乳腺癌患者术前区域动脉灌注 β

乳腺癌上皮间质转化与耐药关系的研究进展

肿瘤上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是指肿瘤在各种因素作用下上皮细胞转变为具有高侵袭、转移能力间质表型的过程。EMT与细胞上皮表型标志物E-钙黏蛋白表达下调、间质表型标志物上调和相关基因表达改变有关。EMT的发生能够促进乳腺癌侵袭、转移和干细胞特性获得,诱导乳腺癌细胞对化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗产生获得性耐药。同时研究发现,乳腺癌耐药细胞能够发生EMT,并获得干细胞表型。因此,针对乳腺癌细胞EMT的相关研究可以帮助人们在肿瘤抗耐药治疗中找到新的策略。本文旨在对EMT与乳腺癌发生获得性耐药之间关系的最新研究进展作一综述。

氦氖激光对体外人肝癌和胃癌细胞增殖的影响

目的：研究氦氖激光的生物学效应。方法：用３４．５～１３８Ｊ／ｃｍ２的氦氖激光照射体外培养的人肝癌ＳＭＭＣ７７２１和人胃癌ＳＧＣ７９０１细胞，间日１次，共６次。结果：６９Ｊ／ｃｍ２和１３８Ｊ／ｃｍ２的氦氖激光照射人肝癌细胞后７２小时和９６小时内、３４．５～１３８Ｊ／ｃｍ２的氦氖激光照射人胃癌细胞后７２小时内有促进增殖的作用（Ｐ＜０．０５）。结论：较大剂量的氦氖激光照射人癌细胞后在一定时间内有促进其生长的作用，在临床应用上应避免该副作用的发生。

非小细胞肺癌对EGFR-TKIs产生获得性耐药后发生小细胞肺癌转化的研究进展

小细胞肺癌转化是非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitors，TKIs）产生获得性耐药的机制之一。据报道，小细胞肺癌转化的发生率为2％～14％。目前，小细胞肺癌转化的发生机制尚不十分明确。有些NSCLC可直接转化成小细胞癌，还是初诊时即为复合性小细胞癌，尚存在争议。报道显示，NSCLC仅有部分病灶发生小细胞癌转化，转化的小细胞癌与原发性小细胞肺癌在细胞形态及蛋白表达上尚未见明显差异，但多有与初始NSCLC相同的EGFR基因突变型；而且，经典的抗原发性小细胞肺癌的放化疗方案对转化的小细胞肺癌一般也有较好的疗效。本文对近年来有关小细胞肺癌转化的发生机制、临床特点及处理策略进行综述。