黄芪多糖在体内对小鼠CFU-E和BFU-E生成的影响

以甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖在体内对小鼠红系集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ）和红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）生成的影响。结果显示，剂量２０ｍｇ／ｋｇ和１００ｍｇ／ｋｇ的黄芪多糖均能提高ＣＦＵ－Ｅ的生成（均为Ｐ＜００１），也促进ＢＦＵ－Ｅ的生长（分别为Ｐ＜００１和Ｐ＜００５）；与环磷酰胺（ＣＴＸ）同步注射，黄芪多糖能缓解ＣＴＸ对ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的抑制作用（均为Ｐ＜００１）；对ＣＴＸ已形成的ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ抑制，高剂量的黄芪多糖对ＣＦＵ－Ｅ的恢复有作用（Ｐ＜００１），低剂量的作用不明显；对ＢＦＵ－Ｅ的恢复，则高低剂量均无作用。提示：黄芪多糖对小鼠ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的生成有促进作用，对ＣＴＸ引起的ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ抑制也有一定的保护或缓解作用，这些作用与黄芪多糖的剂量。

CFU-E和其分化细胞的生物物理特性

用可诱发小鼠贫血的病毒(anemia-inducing strain friend’s virus,FVA)感染BALB/c小鼠,13 d后取其脾脏,用Ficoll-Urografin分层液(1.070)分离出红系集落形成单位(colony forming unit-erythroid.CFU-E)细胞,用Wright-Giemsa染液染色并用透射电镜进行形态学观察,在培养液加细胞因子,如促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、白介素3(interleukin-3,IL-3)、干细胞刺激因子(stem cell factor,SCF),诱导其分化的情况下培养12、24和36h,分别对0、12、24和36 h的细胞进行电泳率、膜的流动性和变形性的测量及红系特异转录因子GATA-1表达(0、12、24和48 h)的检测,发现CFU-E细胞随着分化培养时间增加,其电泳率不断减少,膜的流动性不断增大,细胞的变形性和取向性逐渐变好;CFU-E在0、12和24 h GATA持续高水平表达,而48 h后,其表达明显降低。

rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响

目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50～1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100～400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100～400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。

RhIL-2对人骨髓CFU-GM,CFU-E和BFU-E的影响

采用甲基纤维素体外半固体培养法证明，50～1000U／mlrhIL－2单用对人骨髓造血祖细胞的CFU－CM，CFU－E及BFU－E无直接刺激增生作用；当与GM－CSF联用时．100～400U／mlrhIL－2其CFU－GM集落形成率明显高于单用GM－CSF的对照组（P＜0．05）；当与EPO联用时，其CFU－E及BFU－E集落形成率也明显高于单用EPO对照组（P＜0．05），而1000U／mlrhIL－2其3种集落形成数目呈下降趋势，可能有抑制作用。说明100～400U／mlrhIL－2可应用于协同GM－CSF及EPO体外扩增骨髓干／祖细胞以进行骨髓移植是有重要意义的。

重组人红细胞生成素对骨髓增生异常综合征患者CFU-E的作用

应用CFU-E培养技术观察28例骨髓增生异常综合征(MDS)患者对EPO的反应,表明MDS患者CFU-E的形成能力明显低于正常人,其中反应好者,加入EPO后CFU-E可达正常水平,占观察组17.3％;反应差者,即使加入足量EPO后,CFU-E增殖仅为对照组的20％以下;CFU-E对EPO还有剂量依赖性。通过EPO对MDS患者CFU-E不同反应,可能与MDS病因、发病机理有关,或部分患者病变发生在BFU-E或其以上水平,故对EPO无反应。

G-CSF和GM-CSF体外对骨髓增生异常综合征患者CFU-GM和CFU-E的作用

用造血祖细胞体外培养方法观察G－CSF和GM－CSF对36例MDS患者造血相细胞的作用，结果发现：①MDS患者CFU－E、CFU－GM明显低于非血液病对照患者；②RA型患者CFU－GM数量明显低于RAEB、RAEB－T型；③G－CSF和GM－CSF体外可明显刺激非血液病对照患者和MDS患者CFU－GM数量增加，在一定范围内作用与剂量呈正相关；④患者自身的CFU－GM增殖能力愈差，对小剂量G－CSF或GM－CSF的反应愈差，但大剂量时这种差异不明显。以上结果提示G－CSF和GM－CSF可成为治疗MDS伴粒细胞减少的有效药物。

骨髓内皮细胞无血清条件培养液对CFU-E和BFU-E生成的影响

利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ,且在 2 %～ 6% (V/V ,下同 )范围内集落产率随浓度增加而增加 ;而分子量 <1 0 0 0 0组分对CFU E ,BFU E有明显抑制作用 ,且在 1 0 %～ 40

离子对反相HPLC测定小鼠骨髓BFU-E、CFU-E中PRPP合成酶活性

采用离子对反相高效液相色谱法 ( IPr HPLC)的单液等度洗脱 ,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位 ( BFU- Es)与红系集落形成单位 ( CFU- Es)的 PRPP合成酶活性 .方法学研究表明 ,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵 ( TBAHS)后 ,ADP谱峰分离完全 ,其反应增加量易于计算 .本法的批内变异系数平均值为 - 2 .30 %～ - 1 .0 6%与 1 .0 6%～ 2 .30 % ,平均相对偏差为 0 .81 %～ 1 .74% ,回收率为 93.9%～ 98.5% ,能达到操作简便、灵敏和准确的要求 .采用本法测得 2 0只正常昆明小鼠的 BFU- E和 CFU- E中该酶活性各为 ( 0 .563± 0 .0 2 7)μmol/( min·g· m L- 1)与 ( 0 .41 6± 0 .0 2 6) μmol/( min·g·m L- 1) .

前列腺素E1对慢粒白血病CFU-GMCFU-E及PPC的影响

慢粒白血病患者周围血的MNC经与前列腺素E1(1×10^(-6)M)预先孵育后,能使CFU-GM、CFU-E及PPC分别增加163.6%,169.0%及216.6%,此结果证实了PGE的阳性造血调节作用.

鸡血藤单体化合物对造血祖细胞增殖的调控作用研究

目的研究从中药鸡血藤(spatholobus suberectus dunn,SSD)中提取的9个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响,明确鸡血藤补血活血作用的主要物质基础。方法采用血清药理学方法,通过造血祖细胞培养观察9个化合物对骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用。结果腹腔注射鸡血藤各单体后的含药血清对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的生长有较强的刺激作用:各单体化合物(除焦性粘液酸、芒柄花苷外)含药血清均可刺激CFU-GM的生长(P<0.01);儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸、表儿茶素的含药血清对CFU-E、BFU-E和CFU-Meg的刺激增殖作用与对照组比较亦差异有显著性(P<0.05)。结论从中药鸡血藤中提取的单体化合物可刺激骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖,缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷,其中儿茶素的刺激增殖活性相对最强,可能是鸡血藤补血活血的主要物质基础。

鸡血藤活性成分SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的作用

目的:研究鸡血藤单体成分SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞(CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg)增殖的影响。方法:采用甲基纤维素半固体培养法,通过对长期接受SS8治疗后的骨髓抑制小鼠造血祖细胞的培养,观察SS8对CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg生长的作用。结果:SS8可显著刺激骨髓抑制小鼠CFU-GM,CFU-E,BFU-E,CFU-Meg生长,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。随时间延长、剂量增加,刺激作用逐渐加强。结论:SS8对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有明显刺激作用,且有时间、剂量相关性。

鸡血藤单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响(英文)

背景：机体造血主要依靠造血祖细胞来扩增，当受到放射线、化学药物等损伤时，即会发生造血功能障碍。目的：观察从传统中药鸡血藤中提取的九个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响。设计：随机对照实验。单位：中国人民解放军总医院临床药理研究室。材料：实验于2002-11／2003-02在中国人民解放军总医院药理研究室完成，选用348只健康昆明种小鼠，体质量22～25g，清洁级，雌雄各半，由解放军军事医学科学院实验动物中心提供，许可证号码为SCXK-2001-001。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。鸡血藤由中国人民解放军总医院中药房提供，单体化合物没食子儿茶素、芒柄花素、儿茶素、焦性粘液酸、丁香酸、Demethylvestitol、间苯三酚、芒柄花甙、表儿茶素由中国医学科学院药物研究所从鸡血藤乙酸乙酯部位中分离。TGL-16型离心机为上海医疗器械六厂生产，CO2培养箱为日本SANYO公司产品，MK型倒置显微镜为日本OLYMPUS公司产品。方法：①实验分组：随机抽签法将小鼠分为29组：鸡血藤九种单体化合物没食子儿茶素、芒柄花素、儿茶素、焦性粘液酸、丁香酸、Demethylvestitol、间苯三酚、芒柄花甙、表儿茶素高剂量组、中剂量组及低剂量组共27组，同时设立正常组及对照组，每组12只。②实验干预：除正常组外，小鼠均给予全身^60Co γ射线照射，剂量为4Gy。照射后第3天，9种单体化合物高、中、低剂量组小鼠分别腹腔注射2，0．4，0．08g/L相应单体化合物药液0．5mL，正常组和对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。③实验评估：给药30min后分别取正常组及对照组各8只及其他组全部小鼠静脉血制备正常、对照及各单体含药血清，取对照组剩余4只小鼠的骨髓细胞进行造血祖细胞培养，培养分为对照组和九个单体化合物高、中、低剂量组，分别在各组培养体系中加入对照及各单体含药血清，另取正常组小鼠4只进行骨髓造血祖细胞培养作为细胞培养的正常组，通过计数各组CFU—E、BFU-E、CFU-GM、CFU—Meg集落数来观察九个单体化合物对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响。主要观察指标：各组CFU—E、BFU-E、CFU-GM、CFU—Meg集落数。结果：纳入小鼠348只，均进入结果分析，无脱失值。①CFU-E集落数：儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸、表儿茶素高剂量组CFU—E显著高于对照组（P〈0．05～0．01），儿茶素中、低剂量组及没食子儿茶素中剂量组CFU-E也显著高于对照组（P〈0．05）。②CFU—GM集落数：除焦性粘液酸、芒柄花甙各剂量组外，鸡血藤其余单体化合物各剂量组CFU-GM均较对照组明显增加（P〈0．01）。③BFU-E集落数：儿茶素、没食子儿茶素、丁香酸各剂量组及表儿茶素高、中剂量组的BFU-E较对照组明显增加（P〈0．05）。④CFU-Meg集落数：儿茶素和表儿茶素各剂量组、丁香酸高、低剂量组及没食子儿茶素低剂量组的CFU-Meg显著高于对照组（P〈0．05）。对照组所有集落数均明显少于正常组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论从中药鸡血藤中提取的单体化合物可刺激骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖，其中儿茶素的刺激增殖活性相对最强。

烧伤后血清对骨髓红系造血的影响

目的：烧伤所致造血系统的变化是烧伤的重要病理生理反应之一，它与烧伤感染以及烧伤免疫功能密切相关，直接影响病程的转归和预后。对烧伤后贫血的研究已有诸多报道，但关于机体在烧伤后红系造血调控机制的改变尚待深入研究。方法：本文以 １５％ ＴＢＳＡⅢ°烧伤昆明种小鼠为动物模型，通过祖细胞集落培养法观察烧伤后 １－２小时、１天、３天、５天、７天和 １０天血清对正常小鼠骨髓红系造血的影响，同时采用放免法检测血清ＥＰＯ浓度的变化，以探讨烧伤后红系造血功能的改变与造血刺激因子 ＥＰＯ的关系。结果： １５％ Ⅲ°烧伤小鼠在烧伤后早期（ １２小时到 ５天）的血清对红系祖增殖有显著高于正常的刺激活性；烧伤后血清ＥＰＯ浓度在伤后早期显著升高。血清ＥＰＯ浓度与烧伤后血清红系刺激活性呈正相关，提示血清ＥＰＯ升高是烧伤后血清红系刺激活性增强的主要原因。

鸡血藤活性成份对造血祖细胞增殖的调控作用

目的:探讨从中药鸡血藤Spatholobus suberectus Dunn中提取的几种单体(SS8、SS9、SS12、SS17)对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响.方法:采用血清药理学方法,通过造血祖细胞培养观察几种单体对骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用.结果:中药鸡血藤中各单体的含药血清可刺激骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的生长,与空白血清对照组相比有显著差异(p＜0.05).结论:从中药鸡血藤中提取的几种单体对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有刺激活性,可缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷,其中以SS8的活性最强.

黄芪多糖对体外人骨髓造血祖细胞生成的影响

应用甲基纤维素半固体培养法观察了黄芪多糖 (AstragalusPolysaccharides ,APSs)在体外对人骨髓粒单集落 (CFU GM )、红细胞集落 (CFU E)和爆式红细胞集落 (BFU E)生成的影响。结果显示 :APSs 5mg/L对人骨髓CFU GM和CFU E的生成具有促进作用 (均为P <0 .0 5 ) ,在APSs 12 5mg/L时 ,能促进BFU E的生成 (P <0 .0 5 ) ;在CFU GM的培养体系中 ,如果没有GM CSF ,APSs在 5mg/L的终浓度时 ,仍能促进CFU GM的生成 (P <0 .0 5 ) ,过高或过低的浓度无效。在培养CFU E时 ,不含EPO ,则APSs对CFU E无刺激作用。骨髓细胞与APSs孵育 2小时后 ,再进行造血祖细胞培养 ,则CFU GM、CFU E和BFU E的生成均略有下降 ,但与孵育时APSs的浓度高低无关。提示浓度合适的APSs在体外能促进人骨髓细胞中红细胞系和粒细胞系祖细胞的生成 ,这种促进作用在造血因子存在时 ,才能发挥 ,或发挥的作用最大 ,并且这种促进作用的发挥需APSs的持续刺激 ,短时间的刺激无效。

骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究

目的 :观察成纤维细胞集落形成单位 (CFU- F)贴壁层的形成、体外传代培养、扩增的情况 ,研究各阶段 (CFU- F)对粒 -单核细胞集落形成单位 (CFU- GM)和红细胞集落形成单位 (CFU- E)生长及细胞因子对造血的支持作用 ,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力。方法 :利用改进的液体培养法 ,培养骨髓基质细胞并传代 ,利用甲基纤维素半固体培养法 ,培养人骨髓细胞 ,观察 CFU- GM、CFU- E集落数。结果 :人骨髓基质细胞在体外可以传代培养 4代并能扩增 2 8倍 ,其中 F3代对 CFU- GM和 CFU-E的促进增殖作用最强 ,且对骨髓有核细胞的粘附能力最强。结论

当归多糖（APS）对造血生长因子受体表达调控的实验研究

当归多糖(APS)是当归的主要成分之一。我们既往研究证明：APS是当归“补血”或促进血细胞发生的有效成分：APS对小鼠造血干细胞(CFU-S)、小鼠与人髓系造血祖细胞(BFU-E、CFU-E、CFU-GM、CFU-MK)的增殖分化有显著促进作用。为进一步阐明当归“补血”的生物学机理，本研究采用造血祖细胞体外培养，免疫细胞化学技术，

肉鸡骨髓造血祖细胞体外培养及增殖功能研究

对肉鸡骨髓红系和粒单系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ—ＧＭ的培养条件和生长情况进行了探讨，并观察了不同日龄肉鸡骨髓造血祖细胞体外增殖能力。结果表明：（１）培养体系中加入灭活鸡血清，其集落产率较加小牛血清为高，其生长分裂也迅速，说明同源血清优于异源血清。（２）肉鸡骨髓ＣＦＵ—Ｅ培养体系最适ｐＨ值为７．８～８，０；ＣＦＵ—ＧＭ最适ｐＨ值为７．２～７．３。（３）试验使用鸡脾细胞条件培养液作为集落刺激因子，ＣＦＵ—ＧＭ生长良好。（４）７日龄肉鸡ＣＦＵ—Ｆ为１５３±８．１５，ＣＦＵ—ＧＭ为１６２±３．９４．４２日龄肉鸡ＣＦＵ—Ｅ为６２±２．１２，ＣＦＵ—ＧＭ为８３±３．２４。两种日龄红系、粒系集落产率均有明显差异（Ｐ＜０．０１），表明肉鸡骨髓造血祖细胞功能状态不同，呈现日龄差异。

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。