水解酪蛋白对诱导苜蓿愈伤组织的影响

以两个苜蓿品种新牧1号和新疆大叶苜蓿无菌苗的幼叶为外植体,研究了4种诱导培养基对愈伤组织的影响,增殖培养基中添加水解酪蛋白对愈伤组织增殖的影响,以及分化培养基中KT对愈伤组织分化的影响。结果表明:①叶片愈伤组织诱导培养基以MS+2,4-D 2.00 mg/L+NAA 1.00 mg/L+KT 1.00 mg/L为宜,新牧1号和新疆大叶苜蓿的出愈率分别为100%,95.5%;②增殖培养基中附加CH 0.15 g/L有利于新牧1号愈伤组织的生长,附加CH 1.00 g/L有利于新疆大叶苜蓿的愈伤组织的生长;③分化培养培养基中附加KT 4.00 mg/L,两品种的分化率最高分别为新牧1号25.0%、新疆大叶苜蓿13.2%。

不同附加物对甘草愈伤组织培养中黄酮类化合物形成的影响

目的研究了酵母提取物、水解酪蛋白、真菌诱导子、茉莉酸及稀土元素等对甘草愈伤组织中甘草黄酮类化合物合成的影响。方法在培养基中添加各种附加物,研究其对甘草黄酮类化合物合成的影响。结果 0．1％的酵母提取物可使培养物中黄酮类化合物的含量提高76．8％,甘草查尔酮含量比对照提高7．5倍。水解酪蛋白在0．05％时,培养物中黄酮类化合物含量达最大值,为对照的1．7倍,其中甘草查尔酮的含量在0．1％时最高,为对照的3．2倍。50 mL培养基中加入真菌诱导子2 mL,甘草培养物中黄酮类化合物的含量为149．58μg·g-1,比对照(85．26μg·g-1)增加75％。10．0μmol．L-1茉莉酸使黄酮类化合物的含量比对照提高了41％。低浓度的稀土元素Eu3+对黄酮类化合物的生物合成具有明显的促进作用,培养基中添加0．1 mg·L-1的稀土元素Eu3+最有利于黄酮类化合物的积累。此时,黄酮类化合物的含量为对照的2．7倍,其中甘草素的含量是对照的4倍。结论在甘草愈伤组织培养过程中,添加酵母提取物、水解酪蛋白、真菌诱导子、茉莉酸及稀土元素等是提高黄酮类化合物的有效手段之一。

水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮培养细胞生长的促进作用

报道了水解酪蛋白对烟草愈伤组织和悬浮细胞生长的促进作用,并确定了水解酪蛋白的适宜用量。

新麦草幼穗愈伤组织诱导影响因素研究

[目的]探讨愈伤组织诱导取材时间、培养基筛选、激素调节及幼穗成熟度对新麦草幼穗愈伤组织诱导的影响。[方法]以新麦草2个品种幼穗为外植体接种于附加不同激素的MS和N6培养基上进行愈伤组织诱导培养。[结果]2种培养基诱导的愈伤组织质地无明显差异。山丹新麦草幼穗最佳诱导培养基为N6添加2,4-D2mg/L,P8401为MS添加2,4-D6mg/L。ABA添加于MS培养基可显著促进愈伤组织生长。山丹新麦草幼穗愈伤组织培养添加ABA适宜浓度为1.5mg/L,P8401为0.3mg/L。CH仅具有加速愈伤生长的效果,但对新麦草愈伤组织诱导促进作用不大。P8401新麦草1～2cm新生幼穗材料作为愈伤诱导外植体最为理想,山丹新麦草5～6cm较成熟幼穗在MS上愈伤诱导率高于幼嫩小穗。[结论]2种培养基均可用于新麦草幼穗愈伤组织诱导。外植体的取材时间在组织培养中是关键因素。

酸枣仁提取物、龙眼肉提取物、γ-氨基丁酸和酪蛋白水解物复配制剂改善睡眠功能

本文通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验以及巴比妥钠睡眠潜伏期实验,研究了酸枣仁提取物、龙眼肉提取物、γ-氨基丁酸和酪蛋白水解物复配制剂对小鼠睡眠的改善效果。实验选取48只小鼠作为研究对象,随机分成对照组、高、中、低剂量组,灌胃复配制剂4周后,测定相应指标。结果显示,该复配制剂在高、中、低三个剂量下均可显著延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间,高剂量组睡眠时间为3793±1100 s,中剂量组睡眠时间为3591±1589 s,低剂量组睡眠时间为3218±582 s,而对照组的睡眠时间仅为1556±686 s。复配制剂的高中低剂量组均可缩短巴比妥钠催眠小鼠的入睡潜伏期,入睡潜伏期分别为171±58 s、165±40 s和184±52 s,对照组的入睡潜伏期为300±155 s。复配制剂所有剂量组均对直接睡眠无明显作用,对小鼠体重均无显著性影响。

脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的优化研究

目的探索A群、C群脑膜炎球菌多糖疫苗培养基的适宜配方。方法通过筛选改良培养基(配方2)中酸水解酪蛋白替代培养基配方1中原50%盐酸酪蛋白水解液制备相应的培养基,培养A群、C群脑膜炎球菌一定时间后,以收获的细菌浓度和复合多糖量来确定培养基的配比,并比较该培养基在不同温度条件下培养细菌的结果。结果在A群、C群脑膜炎球菌多糖疫苗不同培养基的细菌培养过程中,用酸水解酪蛋白制备的改良培养基(配方2)培养的细菌浓度和多糖收获量均高于其他培养基(配方1和配方3),用酸水解酪蛋白培养基能提高脑膜炎球菌的产量。结论以酸水解酪蛋白为主要原料(配方2)的改良培养基能作为流脑A群、C群细菌的最适培养基,且细菌在(37±0.2)℃培养情况良好。

水解酪蛋白和水杨酸对百里香生理代谢及精油提取率的影响

目的研究水解酪蛋白和水杨酸对离体培养的百里香不定芽增殖以及不定芽中生理代谢和精油含有量的影响。方法添加不同质量浓度的水解酪蛋白或水杨酸后,测定百里香不定芽可溶性糖、可溶性蛋白含有量、相关酶活性以及百里香精油含有量。结果水解酪蛋白和水杨酸都能不同程度促进不定芽的增殖,其中以添加300 mg/L水解酪蛋白和0.5 mg/L水杨酸的增殖效果最佳,增殖系数分别比对照显著增加51.05%、20.71%。与对照处理相比,可溶性糖含有量降低,可溶性蛋白则增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性上升,多酚氧化酶(PPO)活性下降。从增殖的不定芽中水蒸气蒸馏出精油,百里香不定芽的精油提取率分别达到0.38%,0.41%,对照组为0.31%。结论水解酪蛋白和水杨酸不仅提高了百里香不定芽的增殖,而且还促进了百里香次生代谢产物的积累和合成。

酪蛋白水解物对乳酸菌的促生长作用

研究了酪蛋白的木瓜蛋白酶水解物对乳酸菌(嗜热链球菌:保加利亚杆菌=1:1)的促生长作用。通过比较不同水解度的酪蛋白水解物的增值作用,发现酪蛋白经木瓜蛋白酶水解8 h后的水解物具有最强的促进乳酸菌生长作用。本试验进一步考察了该水解物对酸乳乳酸菌代谢产物(乳酸和胞外多糖)的产量及活菌数变化的影响。结果表明木瓜蛋白酶酪蛋白水解液能将乳酸菌乳酸和胞外多糖的产量分别提高33.1%和30.4%。

酶解酪蛋白法测定猪回肠内源性氨基酸排泄量的研究

分别从超滤管用于酶解酪蛋白测定的可行性、不同规格超滤管对酶解酪蛋白测定的影响、酶解酪蛋白的适宜添加量、酶解酪蛋白应用的动物试验步骤以及酶解酪蛋白测定效果等方面,对酶解酪蛋白方法测定猪回肠内源性氨基酸排泄量进行了综述。

三种氨基酸添加下酶法修饰酪蛋白水解物的ACE抑制活性

采用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备水解度为12.4%、IC50为42.19μg/mL的酪蛋白水解物。在添加外源氨基酸的情况下对水解物进行类蛋白反应修饰,并响应面法研究氨基酸添加量、酶添加量、反应温度及3种氨基酸的影响。结果表明:氨基酸添加量、反应温度、氨基酸种类对修饰反应影响显著,而酶添加量的影响不大;分别添加苯丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸制备3个酪蛋白水解物修饰产物,其IC50降低至21.03～25.13μg/mL,表明添加外源氨基酸可提高修饰产物的体外ACE抑制活性,但添加不同氨基酸的影响不显著。

激素组合与水解蛋白对番茄花药愈伤增殖的影响

以4个番茄F1杂交种(C1、C2、C8、C10)和1个番茄纯系(2052)花药培养的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合对愈伤组织增殖的影响,以及不同浓度水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)对愈伤组织增殖的影响。结果表明:MS(NLN)+1.00mg/L IAA+1.00mg/L 6-BA+30g/L蔗糖和MS(NLN)+0.50mg/L NAA+0.50mg/L KT+30g/L蔗糖这2种激素组合的培养基中愈伤组织生长最快,其中材料C8的增殖系数最高达0.61;愈伤组织增殖最适浓度为5.00g/L CH和0.50g/L LH,且在5个材料中C8愈伤增殖系数最大,分别为1.00和0.91。

酪蛋白水解物与γ-氨基丁酸复配制剂改善睡眠功能的研究

目的研究酪蛋白水解物与γ-氨基丁酸的复配制剂对小鼠改善睡眠功能的作用研究。方法 18~22 g健康雄性小鼠,按体重随机分组。按照人体推荐剂量的5倍、10倍、30倍为低、中、高3个剂量,即0.1、0.2和0.6 g/kg bw,另设对照组。观察睡眠指标。结果 3个剂量组入睡动物数及睡眠时间均为0,各剂量组动物入睡数与对照组进行比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。该制剂与对照组比较可延长中、高剂量组小鼠戊巴比妥钠催眠的时间（P〈0.05）,可缩短巴比妥钠催眠的中、高剂量组小鼠的入睡潜伏期,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论根据《保健食品检验与评价技术规范》对改善睡眠保健食品的判定依据,酪蛋白水解物与γ-氨基丁酸的复配制剂具有一定的改善睡眠作用。

不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖产量的影响

目的 探索不同酸水解酪蛋白对W135群与Y群脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)荚膜多糖产量的影响。方法 分别以NaCl质量分数为37%和14%的酸水解酪蛋白作为有机氮源配制改良半综合高盐培养基和低盐培养基,利用全自动细菌发酵罐分别在两种培养基里培养W135群和Y群脑膜炎球菌,比较这两种菌株在两种培养基中的生长时间、收获液菌密度( A 600 nm 值)、收获液去菌体后与去复合多糖后上清中的荚膜多糖含量,以及纯化后的精糖产量;比较高盐培养基收获液及其2倍稀释液中不同终含量的十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide, CTAB)溶液对多糖沉淀效果的影响。结果 W135群与Y群脑膜炎球菌在两种培养基中的培养时间差异无统计学意义( P >0.05),但高盐培养基收获液的菌密度、收获液去菌体后上清液中的多糖含量均高于低盐培养基收获液,差异有统计学意义( P < 0.05),而高盐培养基收获液纯化后的精糖产量低于低盐培养基,差异有统计学意义( P <0.05)。高盐培养液2倍稀释后,在CTAB终体积分数为0.04%时,W135群与Y群脑膜炎球菌多糖全部沉淀,而未稀释高盐培养液即使CTAB终体积分数提高到0.14%,依然也不能完全沉淀 W135群与Y群脑膜炎球菌多糖。结论 不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎球菌的生长密度和荚膜多糖产量有影响,用CTAB溶液沉淀荚膜多糖时需控制收获液盐含量。

体外法探究不同氨基酸形式酪蛋白水解物对猪小肠微生物的影响

【目的】通过体外法探究猪小肠不同肠段肠腔微生物和肠壁微生物对两种不同氨基酸形式的酪蛋白水解物的发酵特性。【方法】以生长猪的十二指肠、空肠、回肠肠腔食糜或者肠壁微生物为接种物,分别以酸水解酪蛋白(以游离氨基酸为主)和酶水解酪蛋白(以小肽为主)为底物,37°C厌氧培养发酵,于0、3、6、12 h采样,测定微生物蛋白(MCP)以及用real time-PCR进行菌群分析。【结果】(1)肠腔微生物发酵不同酪蛋白水解物:十二指肠和回肠酶水解酪蛋白组MCP的含量显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05)。十二指肠酶水解酪蛋白组总菌、Firmicutes数量显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05)。回肠发酵6 h后,酶水解酪蛋白组Escherichia coli和Firmicutes的数量显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05);发酵12 h后,酶水解酪蛋白组总菌、Lactobacillus、E.coli的数量均显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05)。(2)肠壁微生物发酵不同酪蛋白水解物:发酵12 h后,十二指肠和回肠酶水解酪蛋白组MCP含量显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05)。十二指肠酶水解酪蛋白组Lactobacillus、Firmicutes数量分别极显著、显著高于酸水解酪蛋白组;回肠Firmicutes数量在酶水解酪蛋白组显著高于酸水解酪蛋白组(P<0.05)。【结论】十二指肠和回肠的肠腔和肠壁微生物都能够利用小肽,且在一定程度上对小肽的利用更具优势。