双壳贝类CK1基因家族的鉴定及表达分析

酪蛋白激酶1 (CK1)是一种重要的蛋白激酶家族,其在DNA损伤应答和修复、细胞增殖和凋亡、胚胎发育和稳态等重要的生物学过程中都具有复杂多样的调控作用。为了理解CK1基因家族在双壳贝类中的特征、进化及生物学功能,实验采用比较基因组学及生物信息学的方法对双壳贝类CK1基因家族进行了鉴定分析,通过虾夷扇贝高温应激实验,研究了CK1基因家族在高温应激时的表达规律。结果显示,在虾夷扇贝、栉孔扇贝、长牡蛎与侏儒蛤中均存在CK1α,CK1αlike,CK1δ,CK1γ3,并发现CK1ε,CK1γ1,CK1γ2在双壳贝类中发生了丢失。时空表达分析发现,双壳贝类CK1基因均在胚胎发育早期集中表达,并以多细胞/囊胚期为界呈现出母源/合子特异性表达模式。CK1为关键基因的基因共表达模块显著富集在错配修复、核苷酸剪切修复等相关通路上,暗示了CK1基因在双壳贝类胚胎发育过程中参与调控DNA损伤修复过程,从而维持早期胚胎发育时的基因组稳定性。双壳贝类CK1基因在成体中呈现组织特异的表达模式,主要在鳃和雄性性腺中具有相对较高的表达量。虾夷扇贝受到高温应激后,其鳃中PyCK1α, PyCK1αlike和PyCK1δ在前3 h显著上调,但在12 h后趋于下调,而PyCK1γ3在高温应激不同时间点均表现出下降趋势,表明双壳贝类CK1基因参与响应高温应激反应。此项研究有助于理解双壳贝类CK1基因的功能和进化,为解析双壳贝类胚胎发育稳态维持和应激调节机制提供理论基础。

慢性紫外线损伤小鼠模型皮肤角质形成细胞中CK1和CK10的表达研究

目的:观察慢性紫外线(UV)损伤对小鼠角质形成细胞(KC)角蛋白(CK)1和CK10表达的影响。方法:将实验小鼠随机分为空白对照组(20只)和UV损伤组(20只),采用UV光疗仪模拟日光中的长波紫外线(UVA)和中波紫外线(UVB)照射实验小鼠。照射从最小红斑量起始,UVB为0.07 J/cm^2,UVA为0.7 J/cm^2;每日1次,每周5 d,每周增加0.5个红斑量,连续照射9周,UVB累计照射剂量达9.45 J/cm^2,UVA累计照射剂量达94.5 J/cm^2。通过苏木精-伊红(HE)染色和间苯二酚-碱性品红染色(Weigert染色法)确定皮肤损伤,通过免疫组化方法分别对照射前(W0)、后(W9)CK1和CK10的表达进行检测。应用配对t检验和独立样本t检验对相关数据进行统计分析。结果:空白对照组小鼠W0及W9时,CK1和CK10的表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。UV损伤组小鼠W0和W9时,CK1和CK10的表达差异均有统计学意义(P均<0.05)。且UV损伤组小鼠CK1和CK10的表达呈明显的定位改变。结论:多次UV照射能导致小鼠模型中CK1和CK10的表达明显上调且定位异常。

拟南芥CK1A基因功能初步研究

利用RT-PCR方法从拟南芥中分离了1个CK基因家族成员CK1A,该基因的ORF全长2112bp,编码一条703个氨基酸残基的多肽。构建了CK1A基因的植物表达载体35S:GFP:CK1A,采用基因枪法进行的洋葱表皮细胞GFP瞬时表达实验表明,荧光信号主要分布在细胞核上,显示CK1A基因的产物可能在细胞核上发挥作用。半定量RT-PCR分析表明:CK1A基因在花中表达量最大,其次是茎和根,在叶和叶柄中表达量较弱。蓝光使CK1A基因的表达升高,12h时表达量明显增加,24h时表达量下降。酵母双杂交结果显示CK1A蛋白在蓝光下能与CRY2蛋白发生相互作用,暗示CK1A基因可能参与拟南芥的蓝光信号传导途径。

血清中巨CK1、巨CK2和CK-BB的临床意义

血清中巨ＣＫ１、巨ＣＫ２和ＣＫ－ＢＢ的临床意义李小冬吴杰许绍辉作者单位：２００００３上海，第二军医大学长征医院ＣＫ－ＭＢ测定作为诊断急性心肌梗死或心肌坏死的特异性指标，已广为临床和检验界所关注，随着ＣＫ－ＭＢ测定的频率增加，在血清中发现巨ＣＫ１、巨Ｃ...

CK1δ与COX-2在食管鳞状细胞癌的表达及其意义

目的:探讨CK1δ与COX-2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达与食管癌临床病理特征之间的关系。方法:用免疫组织化学方法(SP法)检测了63例食管鳞状细胞癌手术切除的癌组织、癌旁组织(30例正常食管上皮、19例轻度不典型增生、14例重度不典型增生组织)中的CK1δ与COX-2的蛋白的表达。并采用流式细胞术对其中随机选取的40例癌组织、18例轻度不典型增生组织、12例重度不典型增生组织和20例正常食管上皮组织进行上述两种蛋白的定量分析,采用SPSS 11.5软件进行统计学处理。结果:在正常食管上皮组织中CK1δ和COX-2蛋白的表达显著低于轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织和癌组织(P<0.01),轻度不典型增生组织显著低于癌组织(P<0.01),轻度不典型增生组织与重度不典型增生组织比较差异无显著(P>0.05),重度不典型增生组织和癌组织的比较差异无显著性(P>0.05)。在癌组织中,淋巴结转移组中CK1δ蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组(P<0.01),CK1δ蛋白的表达与分化程度和有无纤维膜的侵及无关(P>0.05);淋巴结转移组中COX-2蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组(P<0.01),有纤维膜侵及组中COX-2蛋白的表达显著高于无纤维膜侵及组(P<0.01),COX-2蛋白的表达与分化程度无关(P>0.05)。在食管鳞癌组织中CK1δ蛋白与COX-2蛋白之间呈显著正相关(r=0.482,P<0.01)。结论:CK1δ、COX-2蛋白的异常表达可能共同参与了食管鳞癌的发生、发展与转移,有望成为评价食管癌恶性程度和转移的指标。

白血病源树突状细胞表达DC-CK1的初步研究

目的:观察体外诱导的白血病源树突状细胞(DC)表达树突状细胞趋化因子1(DC-CK1)的水平,为白血病免疫治疗寻找新的途径。方法:分离初诊急性髓细胞白血病(AML)患者10例、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者7例、慢性粒细胞白血病(CML)患者8例及健康志愿者10例外周血单个核细胞,用重组人粒-巨噬核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合培养,通过细胞形态及免疫表型对培养的DC进行鉴定;半定量PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测DC-CK1mRNA及DC-CK1的表达水平。结果:培养后的细胞均呈现典型的DC形态,且白血病源DC的免疫表型均与正常DC相似,差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR和ELISA检测显示AML-DC、CML-DC及ALL-DC表达的DC-CK1mRNA及DC-CK1的水平分别为0.26±0.025、(152.32±34.74)pg/ml,0.27±0.020、(163.06±40.97)pg/ml和0.29±0.034、(173.80±40.44)pg/ml,均明显低于正常DC的0.43±0.032、(325.36±39.23)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞因子诱导产生的白血病源DC表达的DC-CK1的水平明显低于正常DC。

DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达

目的:检测DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体的表达变化,探讨其在ALS纹状体病变中的作用,为ALS研究提供新的实验依据。方法:将发病早期、中期和晚期(即95 d、108 d和122 d)的成年野生型小鼠和SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠分别处死取材,运用免疫荧光技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的表达水平进行检测,运用RT-PCR技术对小鼠纹状体内DDX3和CK1ε的m RNA水平进行检测,运用Western Blot行蛋白水平变化检测。结果:野生型小鼠和SOD1-G93A突变型转基因小鼠纹状体中均可检测到DDX3和CK1ε阳性细胞。DDX3和CK1ε在神经元表达,但在星形胶质细胞不表达。在发病的中期和晚期,DDX3在ALS转基因小鼠纹状体中的m RNA和蛋白表达与野生型鼠相比均升高。CK1εm RNA在ALS发病的早期不变化,在中期、晚期较野生型鼠降低;而在ALS发病的早期转基因小鼠纹状体中CK1ε蛋白表达量较野生型鼠升高,在中期、晚期降低。结论:DDX3和CK1ε在SOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠纹状体中表达异常与ALS纹状体的病变密切相关。

缺氧条件下CK1δ和PER1可调控BV2细胞的线粒体形态

目的本研究拟验证CK1δ、PER1对缺血性脑卒中的调控是否通过调控线粒体的功能实现。方法本实验以小鼠小胶质细胞(BV2细胞)为研究对象,用氯化钴(Co Cl2)处理细胞模拟脑卒中时细胞的缺氧状态,通过抑制、敲低和过表达CK1δ来检测PER1及线粒体的功能。结果 200μmol/L Co Cl2处理BV2细胞24 h后CK1δ和Per1的总体表达水平降低。缺氧条件下,抑制和沉默CK1δ会引起细胞核中PER1蛋白的积累,增加Mfn1的表达量,并抑制Drp1的表达。过表达CK1δ造成Mfn1的表达量降低及Drp1的表达量增加。此外,CK1δ抑制剂组和敲低组线粒体的线状占比增加,而CK1δ过表达组的点状占比明显增加。结论缺氧条件下,CK1δ和PER1可以调控BV2细胞的线粒体形态,进而实现其对缺血性脑卒中的调控。

galectin-3、CK19和CD56在甲状腺乳头状癌诊断中的价值

目的了解galectin-3、CK19和CD56在甲状腺良恶性病变中的表达情况,探讨其在甲状腺乳头状癌诊断中的价值。方法采用免疫组织化学EnVision法检测47例甲状腺乳头状癌、30例结节性甲状腺肿和32例甲状腺滤泡状腺瘤中galectin-3、CK19和CD56的表达。结果 galectin-3和CK19在甲状腺乳头状癌中均呈中等或强阳性表达,仅1例甲状腺乳头状癌galectin-3呈弱阳性表达。在结节性甲状腺肿和甲状腺滤泡状腺瘤中galectin-3和CK19均呈阴性表达,仅1例结节性甲状腺肿局部CK19弱阳性。CD56在甲状腺乳头状癌中呈阴性表达,在结节性甲状腺肿和甲状腺滤泡状腺瘤中均呈阳性表达。结论甲状腺乳头状癌中galectin-3和CK19表达有增高,而CD56表达缺失。3种蛋白联合标记对甲状腺乳头状癌的诊断有价值。

CK1交流接触器的可靠性分析

采用接触器可靠性试验装置 ,对常熟开关厂的CK1型交流接触器进行了失效率等级的定级试验 ,确定了该接触器的可靠性等级 ,并对其可靠性特征量进行了估计。

CK1交流接触器的可靠性分析

采用交流接触器可靠性试验装置 ,对常熟开关厂的CK1型交流接触器进行了失效率等级定级试验 ,确定了此接触器的可靠性等级 。

CK1δ/ε抑制剂,PF-670462治疗慢性淋巴细胞白血病的效果

酪蛋白激酶（CK）1δ/ε是非经典Wnt信号通路的关键组成成分,既往研究已证实其可促进慢性淋巴白血病（CLL）的病程进展。现研究人员对CK1δ/ε抑制对原发性CLL细胞的影响进行全面的研究,并用两种Eμ-TCL1诱导的白血病小鼠模型系统分析其治疗潜能。研究人员证实CK1δ/ε抑制剂PF-670462可显著阻滞CLL所有主要亚型的原发性CLL细胞的微环境互作（趋药性、侵袭性以及与基质细胞的交流）。

CK1α表达与糖尿病心肌病细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡的关系研究

目的探究CK1α表达与糖尿病心肌病细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡的关系。方法构建新生心肌细胞(NCM)脂毒性模型以及2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分别进行体外研究以及体内研究,体外研究中将心肌细胞脂毒性模型分为腺病毒介导CK1α基因高表达组、阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组,体内研究的20只2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分为CK1α过表达db/db组、注射对照组,并选取10只C57BL/Ks正常小鼠纳入正常小鼠组,对比各组的细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡指标差异。结果⑴Beclin-1蛋白主要在胞浆及细胞核中分布,阴性对照组的CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA比3MA组高(P<0.05);⑵腺病毒介导CK1α基因高表达组的CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA、Beclin-1蛋白绿色荧光强度最高,其次是阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组(P<0.05);⑶腺病毒介导CK1α基因高表达组的脂滴数量、二酰甘油及神经酰胺含量、细胞凋亡水平最低,其次是阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组(P<0.05);⑷CK1α过表达db/db组的LVIDd、LVIDs最低,FS、EF%水平更高,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05);⑸CK1α过表达db/db组具有最低的脂滴数量、二酰甘油及神经酰胺含量、细胞凋亡水平,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05);⑹CK1α过表达db/db组中CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA表达水平最高,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05)。结论CK1α表达高表达会增强细胞自噬,CK1α表达可通过增强自噬能力途径改善糖尿病心肌病的脂质沉积、抑制细胞凋亡以及改善心功能的作用,可将CK1α与细胞自噬作为后续糖尿病心肌病治疗的新方向。

精彩CK1 国内首测光阳次重跑车

与青春同在，与活力同行。有CK1的摩托生活更加精彩…… 记得我问过一个±了年纪的车友，为伺年过七旬还在铁骑驰骋。老骑士答日：“为了寻找年轻时精彩的摩托生活，每当骑上摩托车，整个人仿佛都年轻了”。有回忆的晚年是美好的，有精彩回忆的晚年是幸福的。

“轻跑”之王 光阳“CK1”激情上市

有一款车型,只是动力系统的研发就耗资2亿新台币;有一款车型,存在的目的只是为了满足车迷群体中活力、时尚一族的所有需求……有备而来的CK1,将会成为都市街头最靓丽的风景……

追风“猎路者” 光阳CK1 150

在许多人眼中，光阳好像就是踏板车的代名词，是专业生产踏板车的厂家。事实上，光阳在跨骑车领域也颇有建树，只是其中的许多车型并没有投放大陆市场，曾经推出的部分车款表现低调而已。现在，光阳用全新CK1切入高端跨骑车领域，凭借技术含量较高的动力平台和高端配置，再一次向业界证明了自己的实力……

用基因芯片的方法对人酪蛋白激酶CK1γ1基因进行表达谱和聚类分析

将人酪蛋白激酶基因CK1γ1的cDNA与 40 96个胎脑cDNA一起点在玻璃介质的基因芯片上 ,用 16种不同组织或细胞系的mRNA分别杂交该基因芯片 ,以正常人混合组织mRNA作共同对照 ,检测CK1γ1基因的表达谱变化 ,结果显示人CK1γ1基因在 15种组织表达没有变化 ,但在肝癌组织中的表达却显著下调 .采集的 7例肝癌标本的cDNA与正常肝组织的cDNA重复 7次芯片杂交 ,结果肯定了CK1γ1基因在肝癌组织中表达下调 .同时 ,对芯片杂交结果通过聚类分析 ,按基因表达谱特征将CK1γ1基因与其他 7种基因聚类在一起 ,提示CK1γ1基因可能在生物学作用方面与这 7种基因有某种相关性 .

CKS1B在肺癌耐药机制中的研究进展

肺癌是全球常见的恶性肿瘤之一,极大地威胁着人们的健康和生命。化疗仍然是大部分肺癌晚期患者的主要治疗方法,但是耐药是治疗失败的主要原因,如何克服肿瘤耐药是今后研究的方向,CDC28蛋白激酶调节亚基1B(CKS1B)是CKS家族的一员,可与CDK催化亚基结合,调节细胞周期功能。近年来研究发现,CKS1B在多种肿瘤中是一种促癌因子,可促进肿瘤的发生,并且与患者预后不良密切相关。本文综述了CKS1B对肺癌细胞的影响机制及作为治疗靶点的最新研究。

“双打击”多发性骨髓瘤的研究进展

“双打击”多发性骨髓瘤(MM)是一种近年来提出的基于细胞遗传学异常的特殊类型,旨在发现高危、极高危患者,目前尚无统一的界定标准,且缺乏标准的治疗方案。以往的回顾性分析显示,“双打击”MM的预后极差,复发及死亡风险很高。2019年,WALKER等针对“双打击”MM提出了明确的定义:TP53双等位基因失活或在ISSⅢ期的前提下CKS1B(1q21)扩增拷贝数≥4的患者。本文针对WALKER等提出的“双打击”MM定义,对其诊断、临床特征、预后及治疗等方面的最新研究进展作一综述。