小鼠肝脏中细胞角蛋白19阳性细胞的肝向分化特性

目的明确小鼠肝脏中的细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)阳性(CK19^+)细胞是否可分化为成熟肝细胞。方法利用CK19^(CreERT)小鼠和Rosa26-GFP小鼠杂交得到CK19^(CreERT)/Rosa26-GFP双转基因小鼠,注射他莫昔芬(tamoxifen,TM)后检测小鼠肝脏中CK19^+细胞的GFP标记情况。在此基础上分别构建3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶和四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝脏损伤模型,采用肝脏组织冰冻切片结合免疫荧光染色检测肝脏中GFP标记的CK19^+细胞的分化情况。结果获得CK19^(CreERT)/Rosa26-GFP双转基因小鼠,免疫荧光染色结果显示CK19^+细胞可被GFP标记。在DDC肝脏损伤模型小鼠中检测到增生性小胆管内有GFP^+细胞,这些GFP^+细胞表达胆管上皮细胞标志物CK19,且DDC肝损伤模型小鼠中GFP^+胆管细胞比例高于未损伤对照组[(63.5±6.3)%vs(53.6±4.8)%,P<0.05];在CCl4肝损伤模型组小鼠中检测到肝脏实质细胞中有GFP^+细胞,这些GFP^+细胞表达成熟肝细胞标志物白蛋白(ALB),且CCl4肝损伤模型组小鼠肝脏中GFP^+细胞比例高于未损伤对照组[(0.15±0.02)%vs(0.008±0.003)%,P<0.01]。结论小鼠肝脏内的CK19^+细胞群体中存在具有肝向分化潜能的前体细胞,可能为真正的肝干细胞的识别鉴定提供一个新线索。