肺癌患者外周血CK19mRNA、CEA、NSE、TPA联合检测的意义

背景及目的:细胞角蛋白作为检测循环癌细胞的指标,越来越得到人们的重视。CK19mRNA作为微转移检测的基因标记有较高的应用价值,但其特异性及敏感度都不够理想。本实验旨在评价外周血CK19mRNA与肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇酶(NSE)和组织多肽抗原(TPA)水平的联合测定对肺癌临床诊断的价值。方法:用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR)检测外周血有核细胞CK19mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光法(TRF)测定91例肺癌、33例良性肺病患者和50例健康人的血清CEA、NSE和TPA水平,数据统计用t检验和χ2检验分析。结果:肺癌组外周血CK19mRNA和血清CEA、NSE、TPA的阳性检出率(分别为49.5%、65.9%、67.0%、83.5%)明显高于良性肺病组(分别为24.2%、9.0%、15.2%、9.0%)和健康对照组(分别为10.0%、4.0%、8.0%、6.0%)(P<0.01)。在不同的组织类型中CK19mRNA阳性检出率无统计学差异。随着临床分期逐步升高,Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期CK19mRNA的阳性检出率分别为44.4%、48.4%、54.2%呈上升趋势,但无显著性差异(P>0.05)。在Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期血清CEA水平犤(μg/L)/阳性率(%)犦分别为3.5/27.8、5.1/35.5、8.5/58.3,血清NSE水平犤(μg/L)/阳性率(%)犦分别为12.5/33.3、15.3/41.9、24.7/58.3,血清TPA?

肺癌患者外周血CK19mRNA与微转移的实验研究

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CK19mRNA的表达情况,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。方法:选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT-PCR方法检测外周血CK19mRNA,相对定量分析结果。结果:肺癌组与健康对照组CK19mRNA阳性表达率分别为72.5%(29/40)、14.0%(7/50),差异显著(P<0.05);相对表达量分别为1.69±0.44、0.28±0.12,有显著差异(P<0.05)。阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性;相对表达量在中央型、T3+T4、Ⅲ期+Ⅳ期及低分化患者数值较高,但不具有统计学意义,鳞癌患者高于腺癌,且有显著差异(P<0.05)。结论:CK19mRNA作为Real-timeRT-PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标记物,具有一定临床应用价值,但特异性仍需提高,应进一步扩大样本进行研究及随访。相对定量分析是一种值得推荐、准确简便的荧光实时相对定量方法。

乳腺癌患者CK19mRNA表达的意义及辅助化疗对骨髓微转移的影响

目的探讨乳腺癌患者外周血、淋巴结和骨髓的微转移情况,以及辅助化疗对骨髓微转移的影响。方法采用RT-PCR技术同时检测可手术的69例乳腺癌患者的外周血、淋巴结和骨髓中CK19 mRNA的表达,并观察辅助化疗对骨髓微转移的影响。结果骨髓微转移24例(34.8%),外周血CK19mRNA阳性11例(15.9%)。淋巴结微转移阳性40例(58.0%),其中淋巴结病理学检查阳性的35例中,32例(91.4%)淋巴结微转移阳性,在淋巴结病理学检查阴性的34例中,8例(23.5%)淋巴结微转移阳性。淋巴结微转移阳性的40例中,18例(45.0%)骨髓微转移阳性。24例骨髓微转移阳性的患者在接受6个周期的CAF方案辅助化疗后,有7例骨髓微转移转阴(29.2%)。结论CK19 mRNA的表达可作为评价乳腺癌微转移的指标。外周血微转移的检测,其敏感性和特异性较骨髓差;骨髓微转移的检测可作为评价辅助化疗敏感性的指标之一。

肺癌外周血CK19mRNA表达的临床意义

目的:应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中的表达情况,并探讨其表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法检测67例肺癌患者外周血CK19 mRNA表达。结果:66例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例,阳性率53.0%,统计结果显示外周血CK19mRNA的表达与性别、年龄、病理类别、临床分期无关,在不同分化程度、淋巴结转移状态间有显著差异。结论:CK19mRNA可作为RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床治疗。

CK19mRNA检测在判断IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结微转移中的作用

目的检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结中的表达,探讨其在判断早期宫颈癌淋巴结微转移中的作用。方法应用荧光定量PCR检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈鳞癌前哨及非前哨淋巴结中的表达,比较CK19mRNA检测与常规组织病理学检查检出前哨淋巴结微转移的阳性率;分析前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达与宫颈癌患者临床、病理参数的关系;比较CK19mRNA在前哨与非前哨淋巴结中的阳性表达率。结果 30例IA2-IB2期宫颈鳞癌患者共检出前哨淋巴结86枚,荧光定量PCR与常规组织病理学检测前哨淋巴结微转移的阳性率分别为32.6%和12.8%(P﹤0.05);前哨淋巴结CK19mRNA的阳性表达与宫颈癌患者的临床分期、肿瘤浸润深度、肿瘤直径大小及脉管间隙浸润有关(P<0.05),与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达率明显高于非前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达率(32.6%和4.5%,P<0.05)。结论与传统组织病理学检查比较,检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结中的表达能显著提高微转移检出率,可能成为准确评估早期宫颈癌患者淋巴结微转移的指标和方法,进而能更恰当地指导术后辅助治疗并改善患者的预后。

肺癌患者外周血CK19mRNA和CyFRA21-1水平的相关性研究

目的 研究肺癌患者外周血细胞角蛋白 1 9(CyFRA2 1 1 )水平和CK1 9mRNA表达水平的相关性 ,并评价其对肺癌临床诊断的价值。方法 用逆转录多聚酶链反应法 (RT PCR)和酶联免疫吸附法 (ELISA)分别测定 91例肺癌、33例良性肺病患者、50例健康人外周血CK1 9mRNA的表达水平和血清CyFRA2 1 1水平。结果 肺癌组患者CK1 9mRNA阳性率和CyFRA2 1 1水平明显高于良性肺病组 (P <0 .0 1 )和健康人组 (P <0 .0 1 )。而且临床分期越晚CK1 9mRNA阳性率和CyFRA2 1 1水平越高 ,CK1 9mRNA对肺癌早期较为敏感。各组织类型间CK1 9mRNA阳性率无显著差异 (P >0 .0 5) ,而CyFRA2 1 1对鳞癌敏感性高于其他类型。结论 肺癌患者外周血细胞角蛋白 1 9(CyFRA2 1 1 )水平和CK1 9mRNA表达水平呈正相关性 。

CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

【目的】研究非小细胞肺癌外周血CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA的表达及联合检测的临床意义。【方法】采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测59例NSCLC患者、31例肺良性疾病患者及20例健康志愿者外周血CK19mRNA、LUNXmRNA及巢式RT-PCR检测CEAmRNA的表达。【结果】59例NSCLC患者外周血CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA阳性率分别为23.7%(14/59)、33.8%(20/59)、57.6%(34/59)。31例肺良性疾病及20例健康志愿者外周血上述三者的阳性率分别为3.2%(1/31)、12.9%(4/31)、0%(0/31);0%(0/20)。统计结果显示:LUNXmRNA与临床分期、细胞分化程度有关,CEAmRNA与病理类型有关。【结论】CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标志物。CEAmRNA对判断病理类型有一定临床意义。LUNXmRNA表达阳性率与肺癌TNM分期、细胞分化程度有关。

荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血CK19mRNA表达

目的 应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerasechain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中微转移情况。方法 用荧光定量RT-PCR方法检测57例肺癌患者外周血CK19mRNA表达。结果 57例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性19例,阳性率33.3％,统计结果显示外周血CK19mRNA的表达与性别、年龄、病理类别无关,在不同分化程度、淋巴结转移状态、临床分期间有显著差异。结论 以CK19mRNA为分子标记,用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血微转移具有很高的灵敏度,有助于亚临床转移的早期发现。

荧光定量RT-PCR检测食管癌外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达

目的应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测食管癌外周血中微转移情况。方法用荧光定量RT-PCR方法检测38例食管癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果38例食管癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性14例,阳性率36.84%;CK20mRNA检测阳性6例,阳性率15.79%;两者任一阳性18例,阳性率47.37%。结果显示外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关,与性别、年龄、病理类别无关。结论用荧光定量RT-PCR法联合检测食管癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA有助于筛选亚临床转移和指导临床治疗方案的制定。

良、恶性胸腔积液联检Survivin、HnRNP、TUM2-PK、CK19mRNA的价值探讨

目的:通过检测不同性质胸腔积液中Survivin、HnRNP、TUM2-PK、CK19mRNA的表达,探讨它们在胸腔积液性质鉴别诊断中的价值。方法:选取60名胸腔积液患者,抽取胸腔积液后分别进行Survivin、HnRNP、TUM2-PK、CK19mRNA检测。采用ELISA。结果:Survivin、HnRNP、TUM2-PK、CK19mRNA在恶性胸腔积液中的检测结果明显高于良性胸腔积液中结果,差异有显著意义(P<0.05)。结论:恶性胸腔积液中的Survivin、HnRNP、TUM2-PK、CK19mRNA的水平明显高于良性胸腔积液中的表达,差异有显著意义。联检Survivin+HnRNP、Survivin+TUM2-PK有较理想的敏感性和特异性。四项联检虽然敏感性有提高,但特异性下降明显,可能会影响实际应用。

SCCAg、CK19mRNA与早期宫颈癌前哨淋巴结微转移的相关性研究

目的探讨鳞状细胞癌抗原(SCCAg)联合细胞角蛋白(CKs)19mRNA在预测IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结微转移中的价值及相关性。方法 IA2-IB2期宫颈癌患者为研究组,CIN患者及健康妇女为对照组。用ELISA法检测宫颈癌患者术前及对照组血清中SCCAg含量,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测宫颈癌患者前哨淋巴结CK19mRNA的表达,分析两项指标的临床价值及两者间的关系。结果宫颈癌组血清SCCAg较CIN组及健康体检组明显增高;荧光定量PCR检测CK19mRNA检出前哨淋巴结微转移的阳性率(32.6%)比常规病理检查(12.8%)高;血清SCCAg与CK19mRNA表达呈正相关。结论检测CK19mRNA能显著提高IA2-IB2期宫颈癌前哨淋微转移的检出率;联合检测IA2-IB2期宫颈癌患者血清SCCAg及前哨淋巴结CK19mRNA可能成为预测早期宫颈癌前哨淋巴结发生微转移的一种有价值的方法。

非小细胞肺癌患者外周血CK19mRNA检测的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)患者外周血CK19mRNA检测的临床意义。方法运用巢式逆转录聚合酶链反应方法(nestedreversetranscriptionpolymerasechainreaction,NestedRTPCR)检测78例NSCLC患者和32例肺良性疾病患者外周血CK19mRNA的表达,另选取20例健康成年人外周血作为对照。结果NSCLC患者外周血CK19mRNA表达阳性率为692%,肺良性疾病患者为63%(χ2=36014,P<001),20例健康成年人无一表达。NSCLC患者外周血微转移与组织学类型、细胞分化程度及TNM分期均存在密切关系(P<005或P<001)。结论CKl9mRNA是一种诊断NSCLC外周血微转移的特异性标记物,NestedRTPCR方法是检测外周血CK19mRNA表达的灵敏可靠技术,NSCLC微转移的诊断对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义。

肾癌患者围手术期CK19mRNA和CK20mRNA的定量分析

[目的]探讨肾癌患者围手术期外周血CK19mRNA和CK20mRNA的变化。[方法]采用RT-PCR方法检测141例肾癌患者术前血液样本,分析CK19mRNA和CK20mRNA与临床、病理因素的关系;检测103例肾癌患者术前、术中和术后三个时间点的血液标本,并对三组标本进行比较。[结果]CK19mRNA、CK20mRNA的表达与患者的性别、年龄和肿瘤大小无关(P均>0.05);术后外周血CK19mRNA的拷贝数(5.68±3.08)高于术前(4.97±3.58),差异有统计学意义(P<0.05);肾癌患者外周血CK20mRNA的拷贝数低于CK19mRNA。[结论]检测肾癌患者循环肿瘤细胞CK19mRNA,可反映肿瘤的血源性播散,判断病情。

胸腔镜辅助小切口手术治疗肺癌对患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的影响

目的 胸腔镜辅助小切口手术治疗肺癌对患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的影响.方法 90例肺癌患者分为两组,对照组45例,观察组45例,对照组采用开胸手术,观察组采用胸腔镜辅助小切口治疗,采用RT-PCR测定患者手术前后血CK19mRNA和LunxmRNA的表达.结果 手术后两组患者血清CK19mRNA和LunxmRNA阳性例数均明显减少（t=19.682、12.784、7.824、7.085,均P＜0.01）,且观察组减少更显著（t=1.900、1.438,均P＜0.05）.结论 胸腔镜辅助小切口手术可以明显降低肺癌患者血清CK19mRNA和LunxmRNA的表达,减少患者微转移.

检测胃癌患者腹腔冲洗液CK19 mRNA和CEA mRNA用于预测腹膜微转移

目的探索检测胃癌患者腹膜微转移的方法。方法收集67例胃癌和9例胃良性病变患者腹腔冲洗液以及临床病理资料,分别采用巢式RT PCR检测腹腔冲洗液中角蛋白19(CK19)mRNA、癌胚抗原(CEA)mRNA、角蛋白20(CK20)mRNA表达;采用时间分辨荧光(TRF)检测腹腔冲洗液上清液中CEA蛋白(P CEA)含量;采用H E染色进行腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查。结果患者腹腔冲洗液中CK19mRNA和CEAmRNA的阳性检出率分别为62.7%和52.2%,明显高于P CEA(35.8%)、CK20mRNA(34.3%)和PLC(31.3%)(P<0.01),且阳性率随肿瘤浸润深度、TNM分期及腹膜受累程度增加而增加。结论巢式RT PCR联合检测胃癌患者腹腔冲洗液中CK19及CEA基因,可提高检测腹腔游离肿瘤细胞的灵敏性,适用于预测胃癌患者腹膜微转移。

荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血CK19、CK20 mRNA表达

目的应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中微转移情况。方法用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例,阳性率33.98%;CK20mRNA检测阳性17例,阳性率16.50%,其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性。统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关,与性别、年龄、病理类别无关。结论用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性,有助于早期筛选亚临床转移。

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义。方法:采用RT-PCR技术对47例Ⅰa～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测。结果:在Ⅰa～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89%(7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0%(0/37)。在Ⅰa～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P<0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P>0.05)。结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标。

CK19 mRNA逆转录聚合酶链反应检测循环乳腺癌细胞

目的评估细胞角质蛋白CK19mRNA检测对乳腺癌诊断的应用价值。方法Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者各77例,40例非肿瘤志愿者。每例取1.5ml外周静脉血,小量血总RNA快速抽提纯化,RT PCR扩增产物作琼脂糖凝胶电泳并测序,对比其在不同分期乳腺癌中的阳性率。结果琼脂糖凝胶电泳和测序证实扩增产物为目的片段。Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19mRNA阳性率分别为19.48%(15/77)和40.26%(31/77),显著高于正常对照的5%(2/40)(P=0.037,P=0.001),且Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19mRNA阳性率显著高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者(P=0.005)。结论CK19RT PCR是检测乳腺癌循环肿瘤细胞的较好方法,对治疗决策可能有指导意义。