腹腔镜下胃癌根治术患者外周静脉血CK_(20) mRNA的检测及其临床意义

目的检测腹腔镜胃癌根治术患者外周静脉血CK20mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测44例行腹腔镜辅助下胃癌根治术和29例开腹胃癌根治术患者外周静脉血的CK20mRNA。结果TNM分期Ⅲ期胃癌患者外周静脉血的CK20mRNA显著高于Ⅰ期、Ⅱ期患者(P<0.05)。腹腔镜辅助下胃癌根治术患者CK20手术开始时阳性率为22.7%(10/44),手术结束时阳性率为27.3%(12/44),两组之间无显著性差异(P>0.05),手术前后和开腹组无显著差异(P>0.05)。结论胃癌患者外周静脉血CK20mRNA的水平和TNM分期有关,腹腔镜胃癌根治术并不增加外周静脉血CK20mRNA的阳性率。

MUC_1和CK_(20) mRNA在早期宫颈癌外周血中的表达及临床意义

目的:研究早期宫颈癌患者外周血中MUC1 mRNA和CK20 mRNA的表达及临床意义。方法:采用RT-PCR法检测40例ⅠA～ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MUC1 mRNA和CK20 mRNA的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系。结果:40例早期宫颈癌患者外周血中MUC1 mRNA和CK20 mRNA的阳性表达率分别为37.5%和30.0%,而在子宫肌瘤患者中的阳性表达率均为0。MUC1 mRNA和CK20 mRNA的单独阳性表达率、任一阳性表达率和双阳性表达率与淋巴结转移和脉管浸润显著相关(P<0.05),与宫颈癌的预后因素如年龄、分期、分化、组织类型及肿瘤大小均无相关(P>0.05),但随着肿瘤分期及肌层浸润深度的增加,其表达有逐步上升的趋势。结论:MUC1和CK20可作为检测早期宫颈癌外周血微转移的生物学指标,但对预后的意义有待进一步研究。

胃肠道癌外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信使核糖核酸(CK20mRNA)的表达,了解胃肠道癌血行播散转移情况及在围手术期综合治疗中的意义。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(Nest-RT-PCR)检测62例胃肠道癌患者手术前后外周血CK20mRNA的表达状况。结果:62例样本中,34例(54.3%)术前CK20mRNA检测为阳性,31例(50.0%)术后CK20mRNA检测为阳性,对照组10例正常人及12例良性胃肠病患者CK20mRNA测定均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CK20mRNA阳性率依次为37.5%、36.3%、66.7%、100.0%。Ⅰ、Ⅱ期患者与Ⅲ、Ⅳ期患者比较,两者间CK20mRNA的阳性率(分别为36.9%和83.3%)有显著性差异(P<0.05)。胃肠道癌的分化程度及癌栓的形成与外周血CK20mRNA的表达无关。有局部淋巴结转移患者与无淋巴结转移患者的阳性表达率有显著性差异(P<0.01)。手术前后外周血CK20mRNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA检测可作为胃肠道癌微转移的判断指标之一,对临床正确分期及治疗起指导作用。

CK20 mRNA和hTERT mRNA在大肠癌围手术期血行微转移中的转录特征

目的探讨细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,并对不同分化程度、不同Dukes分期的大肠癌患者CK20mRNA和hTERTmRNA的表达进行比较。结果40例大肠癌患者外周血CK20mRNA和hTERTmRNA的表达率,术前分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),术中为70.0%(28/40)和70.0%(28/40),术后为10.0%(4/40)和32.5%(13/40)。除术后hTERTmRNA阳性率与术前无显著差异(P>0.05)外,术中外周血CK20mRNA、hTERTmRNA阳性率和表达强度(与内参照β-actin比值)均显著高于术前(P<0.01,P<0.05),术后明显低于术前和术中(P<0.01)。hTERTmRNA在低分化肿瘤的表达明显高于高、中分化组(P<0.05),而CK20mRNA在低分化肿瘤的表达强度低于高、中分化组(P<0.01)。大肠癌围手术期DukesB期和C+D期之间CK20mRNA和hTERTmRNA均无显著性差异(P>0.05)。结论大肠癌患者围手术期血行微转移的发生几率较高,病理分化程度低者更易发生,但与Dukes分期无明显相关,CK20mRNA和hTERTmRNA联合检测对大肠癌血液微转移具有较高的敏感性和特异性,是判断围手术期血行微转移的良好标志物。

早期宫颈癌患者外周血CK19和CK20mRNA的检测及临床意义

目的:研究早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20 mRNA的表达及其临床意义.方法:采用RT-PCR法术前检测250例ⅠA～ⅡA期宫颈癌患者和50例妇科良性肿瘤患者及18名健康自愿者外周血中CK19、CK20 mRNA的表达,并分析其与临床病理因素的关系.结果:250例早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20 mRNA的阳性表达率分别为36%和24%,而在妇科良性肿瘤中分别为3.0%和0%,18例健康自愿者无一例表达CK19、CK20 mRNA阳性(P<0.01);CK19、CK20 mRNA的单独阳性表达率除与脉管瘤栓显著相关外(P<0.01),与宫颈癌的预后因素如分期、分化、组织类型、淋巴结转移、肿瘤大小均无关(P>0.05),而CK19、CK20mRNA双阳性表达与淋巴结转移和脉管浸润及近期盆腔外的转移显著相关(P<0.01).结论:外周血中CK19、CK20 mRNA的表达可以作为检测早期宫颈癌微转移的生物学指标,但对预后的意义有待于进一步研究.

结肠癌患者外周血VEGF-C和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系

目的探讨结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR检测80例结肠癌患者、30例结肠良性肿瘤患者、30例健康人外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达。结果 VEGF-C mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为52.5%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率分别为10.0%、0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。CK20 mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为60.0%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率均为0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。结论结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移相关。

CK20mRNA RT-PCR检测诊断胃癌微小转移

目的:观察胃癌患者骨髓、门静脉和外周血CK20mRNA的RT-PCR检测在诊断胃癌微小转移的意义.方法:采用RT-PCR方法检测47例胃癌患者和8例非恶性病手术患者骨髓、门静脉及外周血CK20mRNA的表达.结果:CK20mRNA在胃癌患者骨髓、门静脉及外周血中阳性表达率分别为41/47;40/47;33/47,随临床分期进展阳性表达率升高.骨髓和门静脉血阳性表达率稍高于外周血(P>0.05);外周血与骨髓和门静脉血阳性表达符合率分别为88.4%和91.2%.8例对照患者均无阳性表达.结论:CK20mRNA是较特异的胃癌微小转移指标,外周血与骨髓和门静脉血有相近的CK20mRNA阳性表达率和较高的符合率.可成为方便的检测指标,作为指导综合治疗、判断疗效及预后的因素之一.

β趋化因子CCL20及其受体CCR6 mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达

目的:探讨β趋化性细胞因子家族中CC趋化因子配体20(CCL20)及其受体CC趋化因子受体6((3CR6)mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达情况。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应(RT—PCR)方法检测35例寻常性银屑病患者皮损和18例正常人皮肤中CCL20和CCR6mRNA的表达。结果:与正常人皮肤相比,寻常性银屑病患者皮损中CCL20与CCR6mRNA的表达水平均明显增高(P<0.001)。结论:寻常性银屑病患者皮损中CCL20和CCR6 mRNA表达水平的上调可能与银屑病的发病有关。

CK20mRNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的:以CK20mRNA作为靶产物,检测大肠癌病人外周血中的癌细胞即微转移,并探讨其存在的临床意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测20例健康志愿者和47例大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达,同时检测20例大肠癌新鲜组织标本中CK20mRNA的表达。结果:20例大肠癌组织标本均扩增出370bp的条带,结肠腺癌HT-29细胞系作为阳性对照亦扩增出370bp的条带,20例正常人外周血中CK20mRNA表达均阴性;全组47例大肠癌病人,19例外周血中表达CK20mRNA,总阳性率为40.4%(19/47),CK20mRNA的表达与肿瘤Dukes分期、最大直径、肝转移有关。结论:CK20mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标;外周血中CK20mRNA的检测有助于识别出具有复发或远处转移倾向的高危大肠癌病人。

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

临床上根据转移瘤和原发瘤形态结构近似的这一生物学特性对诊断转移瘤十分有帮助,通常采用免疫组织化学技术显示特殊成分 CK 及其单克隆抗体以识别上皮性肿瘤.近年来,一些学者应用靶向 CK20 mRNA 的逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测结直肠癌患者外周血中的肿瘤细胞.我们采用巢式逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,以 CK20 mRNA为靶基因,检测32例大肠癌患者外周血中 CK20 mRNA 表达,CK20 mRNA 阳性表达可作为癌细胞血行播散的临床指标,结果如下.1 材料和方法1.1 材料大肠癌患者32例均为本院普外科住院病例,男19例,女13例.年龄27岁～74岁,平均55.7岁.32例均行手术治疗,其中大肠癌根治术21例,非根治性切除术组11例(姑息性切除术者8例,剖腹探查者3例),均经病理组织学证实.癌细胞分化程度:高分化者3例,中分化者17例,低分化者12例.Dukes 分期:A 期12例,B 期6例,C 期7例,D 期7例.有淋巴结转移者13例(40.6%),有远处转移者7例(21.8%).治愈出院者27例(84.4%),病情无明显变化者5例(15.6%).对照组10例(直肠息肉3例,胆囊结石3例,其他4例),分别于术前、术后48 h,7 d～14 d 抽取患者的外周血标本,采用 RT-PCR 法检测.另外还检测了3例原发性肝细胞肝癌患者外周血标本.1.2 方法从外周静脉中抽取血液4mL,置于肝素化的试管内立即混匀送实验室.有核细胞的制备采用密度梯度离心法.提取细胞总 RNA,采用 Trizal 抽提法.合成 cDNA,应用

RT-PCR检测膀胱移行细胞癌患者尿CK20 mRNA表达的研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)患者尿细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 1例TCCB患者、19例非肿瘤患者及 11例健康志愿者尿脱落细胞CK2 0mRNA。结果 6 1例TCCB患者中 5 2例尿脱落细胞CK2 0阳性表达 ,阳性率为 85 .3% ,对照组 30例中 2例表达 ,阳性率为 6 .7%。各分期尿CK2 0mRNA阳性率T1为 83.9% (2 6 / 31) ,T2 4期 86 .7% (2 6 / 30 ) ,两者差异无统计学意义 ;分级G1为 82 .8% (2 4 / 2 9) ,G2 85 .0 % (17/ 2 0 ) ,G3 91.7% (11/ 12 ) ,三者之间差异无统计学意义。行保留膀胱手术患者 5 1例 ,其中 4 2例术前尿CK2 0mRNA表达阳性 ,术后36例阴性 ,术后转阴率 85 .7%。 5 1例中有 2 9例 (术后尿脱落细胞CK2 0阳性表达 4例 )随访 6个月 ,4例CK2 0阳性表达者有2例 (5 0 % )复发 ,2 5例CK2 0阴性表达有 1例 (4 % )复发 ,两者复发率比较有统计学差异 (P <0 .0 0 5 )。结论 RT PCR检测尿脱落细胞CK2 0mRNA表达是诊断TCCB一种简便方法 ,其敏感性为 85 .3% ,特异性为 93.3% ,有助于膀胱TCCB的早期诊断和预后观察 。

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达及其意义

目的 探讨大肠癌患者外周血CK2 0mRNA的表达及其意义。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌患者术前、术后外周血及 2 0例大肠癌患者新鲜癌组织标本中CK2 0mRNA的表达 ,另以 2 0例健康成年自愿者作对照。结果 4 2例大肠癌患者外周血CK2 0mRNA呈阳性表达者术前为 19例(45 .2 4 % ) ,术后为 14例 (33.33% ) ;2 0例大肠癌患者新鲜癌组织中CK2 0mRNA表达均为阳性。而正常对照组2 0例外周血CK2 0mRNA表达均为阴性。且大肠癌外周血CK2 0mRNA阳性表达与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ,但与有无淋巴结转移、肝转移及Dukes分期有关 (P<0 .0 5 )。结论 检测外周血中CK2 0mRNA表达将有助于大肠癌的早期诊断、预后的判断及治疗方案的制定。

腹腔镜和开腹结直肠癌根治手术患者外周血中CK20mRNA的表达及意义

目的研究结直肠癌患者外周血角蛋白20(cytokeratin20,CK20)mRNA的变化,探讨腹腔镜在结直肠癌手术治疗中的应用价值。方法采用反转录-聚合酶链(RT-PCR)法检测37例行根治手术治疗的结直肠癌患者和8例非恶性病变腹部手术患者的外周血CK20mRNA的表达。结果8例良性病变腹部手术患者外周血CK20mRNA无明显表达。37例结直肠癌患者总的CK20mRNA阳性表达率为39.6%(44/111),且术前、术中和术后CK20mRNA的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。16例开腹手术组和21例腹腔镜组术前、术中、术后相比,各组间CK20mRNA阳性表达率差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论开腹手术和腹腔镜手术2种手术方式对CK20mRNA在结直肠癌患者的外周血中的表达差异无统计学意义。

FQ-PCR法检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周血CK20 mRNA变化

目的检测腹腔镜结直肠癌根治术患者外周静脉血CK20 mRNA的表达,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对术后肿瘤细胞血循环微转移的影响。方法应用FQ-PCR方法检测24例行腹腔镜辅助下结直肠癌根治术患者(腹腔镜组)和31例传统开腹结直肠癌根治术患者(开腹组)外周静脉血CK20 mRNA表达的变化。结果腹腔镜组CK20 mRNA术前阳性率为29.17%(7/24),术后阳性率为37.50%(9/24),两者之间无显著性差异(P>0.05);腹腔镜组和开腹组手术前后比较,也无显著差异(P>0.05)。结论腹腔镜结直肠癌根治术和传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20 mRNA的阳性率,即不增加术后肿瘤血循环微转移的危险性。

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与胃癌患者外周血微转移的研究

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA定性和半定量表达。结果:1)CK20 mRNA和hTERT mRNA在胃癌患者中阳性率分别为52.50%(21/40)和65.00%(26/40),相对系数分别为0.81±0.17和0.78±0.17;在胃良性病变患者阳性率均为5.26%(1/19),相对系数分别为0.12和0.11;在健康体检者中均为0。胃癌患者与胃良性病变患者、健康体检者相比,两项指标均有统计学差异(P<0.01)。2)CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和相对系数与临床分期、淋巴结转移、远处转移均有关(P<0.05),阳性者生存率低于阴性者(P<0.05)。3)CK20 mRNA、hTERT mRNA与CEA、CA199表达呈正相关(P<0.05),其阳性率高于CA199(P<0.05)。结论:胃癌患者外周血中存在CK20 mRNA和hTERT mRNA表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示两项指标能预测外周血微转移和判断预后,其诊断外周血微转移优于CA199。

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的 :分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK2 0mRNA的表达水平 ,探讨其临床病理意义。方法 :随机选择和收集 5 3例上皮性恶性肿瘤患者的外周血 ,应用巢式RT PCR法联合检测其CK19、CK2 0mRNA表达情况。另取 15例上皮性肿瘤组织为阳性对照 ,15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果 :5 3例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为 3 5 .8% (19/5 3 ) ,CK2 0阳性率 41.5 % (2 2 /5 3 ) ,两者至少 1项阳性者 69.8% (3 1/5 3 )。 15例肿瘤组织中CK2 0阳性率为 10 0 % (15 /15 ) ,CK19阳性率 86% (13 /15 ) ;15例阴性对照CK19阳性 2例 ,CK2 0阳性 1例。结合肿瘤的临床病理资料分析 ,肿瘤患者外周血CK19、CK2 0mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移间存在明显的相关性 ,而与肿瘤患者的年龄、性别、肿瘤分化程度无明显相关。结论 :CK19、CK2 0mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK2 0mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。

核基质蛋白22、细胞角质素20和存活素mRNA对膀胱癌诊断价值的研究

目的探讨核基质蛋白22(NMP22)、细胞角质素20(CK20)和存活素mRNA在膀胱癌诊断中临床应用价值。方法选择因血尿和膀胱刺激症状到该院泌尿外科诊治的患者107例,分为对照组(44例)和观察组(63例)。观察组中按照肿瘤TNM分期和WHO分级,包括T1s^T1 44例,T2~T4 19例;G1 14例,G2 31例,G3 18例;另外选择45例健康志愿者作为健康组。通过ELISA方法检测所有志愿者尿液中NMP22水平,通过RT-PCR方法检测对照组和观察组受试者尿液中CK20和存活素mRNA表达量,比较这3种检测方法的灵敏度和特异度,以评估对膀胱癌诊断的价值。结果观察组患者尿液中NMP22的水平(37.92U/mL)显著高于健康组(4.31U/mL)和对照组(7.04U/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22检测指标的灵敏度和特异度分别为82.54%和61.36%,与肿瘤分期和分级无明显相关性;CK20和存活素mRNA检测指标的灵敏度和特异度分别为83.70%、63.64%和85.71%、90.91%,与肿瘤分期有显著的相关性;T2~T4亚组患者CK20和存活素mRNA检测灵敏度高于T1s^T1亚组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论尿液NMP22、CK20和存活素mRNA检测对膀胱癌的诊断均有较高的灵敏度和特异度,是诊断膀胱癌较好的无创性手段。

结直肠癌腹腔转移与CK20 mRNA、CD44v6和P53表达及意义

目的 研究结直肠癌腹腔转移与CK2 0mRNA、CD44v6和P5 3的表达及意义。方法 采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,对 5 0例结直肠癌进行腹腔渗液CK2 0mRNA测定 ,并且对癌组织行免疫组化检测CD44v6和P5 3。结果 CK2 0mRNA阳性表达与癌组织中P5 3和CD44v6之间存在显著性差异。结论 检测腹腔渗液中的CK2 0mRNA并结合癌组织中P5 3和CD44v6的检测 ,对于预测结直肠癌腹腔转移和指导术后治疗具有重要参考价值。

CK20mRNA、CD44v6和PCNA对大肠癌早期肝转移预测的研究

目的:研究CK20mRNA、CD44v6和PCNA与大肠癌肝转移的关系,探讨临床预测大肠癌早期肝转移的客观指标。方法:应用荧光定量RT-PCR法检测50例大肠癌患者回流门静脉血中 CK20mRNA,同时应用免疫组织化学方法测定大肠癌癌组织中CD44v6、PCNA的表达,并与对照组比较。结果:大肠癌患者门静脉血CK20mRNA、癌组织中CD44v6、PCNA表达阳性率明显高于良性病变对照组(P<0．01)和正常对照组(P<0．01);大肠癌组织中CD44v6及PCNA的表达与门静脉中 CK20mRNA的表达有显著相关性(γ1=0．933,γ2=0.906,P<0．05);肝转移组CK20mRNA、CD44v6、 PCNA阳性表达率均高于非肝转移组(P<0.05)。结论:联合检测CD44v6、PCNA及CK20mRNA预测大肠癌肝转移,可显著提高预测的灵敏度及特异性,对于大肠癌早期肝转移监测具有很高的临床价值。