CMTM6、RASAL2在前列腺癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系

目的分析含家族成员6的趋化因子样奇迹跨膜结构域(CMTM6)、大鼠肉瘤蛋白活化因子2(RASAL2)在前列腺癌组织中的表达,分析其与前列腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集驻马店市中心医院泌尿外科2018年2月-2020年2月手术切除的前列腺癌组织及癌旁正常组织各80例。免疫组化法测定前列腺癌组织和癌旁组织中CMTM6、RASAL2阳性表达情况;分析其与前列腺癌患者临床病理特征的关系;使用Kaplan-Meier法绘制前列腺癌患者生存曲线;多因素Cox回归分析前列腺癌患者预后的影响因素。结果CMTM6在前列腺癌组织中的阳性表达率为67.50%,显著高于癌旁组织38.75%(χ^(2)=13.277,P<0.001)。RASAL2在前列腺癌组织中的阳性表达率为47.50%,显著低于癌旁组织73.75%(χ^(2)=11.546,P=0.001)。CMTM6、RASAL2表达与前列腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织分化程度无明显相关性(P>0.05),与TNM分期、Gleason评分、淋巴结转移、术前前列腺特异性抗原(PSA)水平相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示:CMTM6阳性表达患者3年存活率为61.11%(33/54),显著低于CMTM6阴性表达患者[88.46%(23/26),(χ^(2)=5.940,P=0.015)];RASAL2阳性表达患者3年存活率为81.85%(31/38),显著高于RASAL2阴性表达患者[59.52%(25/42),(χ^(2)=4.887,P=0.027)]。Cox多因素回归分析结果显示:Gleason评分、淋巴结转移、术前PSA水平、CMTM6及RASAL2的表达情况均是影响前列腺癌患者预后的独立因素(P<0.05)。结论前列腺癌组织中CMTM6阳性表达率显著高于癌旁组织,RASAL2阳性表达率显著低于癌旁组织,二者可能与前列腺癌患者临床病理特征及预后相关。

Expression and Clinical Significance of CMTM6 and PD-L1 in Colorectal Cancer

Objective: To study the expression of CMTM6 in colorectal cancer tissues and explore its relationship with tumor stage, lymph node metastasis, and prognosis. Methods: All patients underwent surgical resection and histopathological examination, and the collected tissue specimens were pathologically classified and divided into 41 cases in the cancer group and 75 cases in the paracancerous group to observe and analyze the expression of CMTM6 and PD- L1. Results: There was no statistically significant difference in the comparison of gender, age, disease duration, and other data between the two groups (P > 0.05);the high expression rate of CMTM6 in the tissues of the cancer group and the 2 groups of the paracarcinoma group was 82.93% and 1.33%, respectively, with statistically significant differences (P < 0.05), and the high expression rate of PD-L1 in the tissues of the cancer group and the 2 groups of the paracarcinoma group were 85.37% and 8.00%, respectively, with statistically significant differences (P < 0.05). The relationship between high expression of CMTM6 and PD-L1 and tumor diameter, differentiation degree, distant metastasis, and lymphatic metastasis was not statistically significant when compared between groups (P > 0.05). Conclusion: CMTM6 and PD-L1 are one of the factors predicting poor prognosis of colorectal cancer, and can be used as one of the reference indexes for treatment selection of colorectal cancer patients.

CMTM6和PD-L1在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨CMTM6和PD-L1在宫颈鳞癌(CSCC)组织中的表达、相互关系及临床意义。方法采用免疫组化法检测20例正常子宫颈、26例子宫颈癌前病变和46例早期宫颈鳞癌组织中CMTM6和PD-L1表达,分析CMTM6和PD-L1表达与早期宫颈鳞癌临床病理特征及预后的关系。结果CMTM6在正常宫颈、宫颈癌前病变、宫颈鳞癌组织中高表达分别为0%(0/20)、11.54%(3/26)、60.87%(28/46),三者差异有统计学意义(χ^(2)=31.08,P<0.01);PD-L1在3组中高表达分别为10%(2/20)、15.38%(4/26)、71.74%(33/46),差异有统计学意义(χ^(2)=32.58,P<0.01)。McNemar检验CMTM6、PD-L1表达在早期宫颈鳞癌中差异无统计学意义(P>0.05);Kappa检验CMTM6和PD-L1在早期宫颈鳞癌中的表达呈一致性且密切相关(P<0.01,Kappa值0.472)。CMTM6高表达的早期宫颈鳞癌患者脉管癌栓、宮旁浸润和淋巴转移发生率增高(P<0.01),PD-L1表达则对其无明显影响(P>0.05);通过Kaplan-Meier分析,CMTM6高表达的早期宫颈鳞癌患者5年无病生存期下降,而PD-L1高表达的早期宫颈鳞癌患者5年无病生存期无明显改变。结论CMTM6和PD-L1在早期宫颈鳞癌患者中表达增高且两者呈一致性,CMTM6可能是早期宫颈鳞癌浸润、转移预警及生存预后评估的指标。

CMTM4在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用及机制研究

目的探讨CMTM4对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的影响。方法采用免疫组织化学法分析CMTM4在OSCC组织中的表达情况,卡方检验及费希尔精确概率检验分析CMTM4表达差异与患者各临床病理参数的关系。在OSCC细胞系HN6和CAL27中分别转染CMTM4过表达质粒及敲低质粒,观察CMTM4过表达和敲低时对细胞表型行为的影响。通过CCK8实验、平板克隆形成实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分析HN6及CAL27细胞生物学行为的变化。通过蛋白免疫印迹实验检测CMTM4改变后细胞周期相关蛋白及AKT通路蛋白的变化情况。裸鼠皮下成瘤实验进一步验证CMTM4对OSCC体内成瘤的作用。结果与癌旁组织相比,CMTM4在OSCC组织中高表达,且CMTM4表达差异与患者的年龄、临床分期及病理分级显著相关(P<0.001)。在HN6和CAL27细胞中,与对照组相比,CMTM4过表达后细胞的增殖速度变快,迁移和侵袭能力更强。相对应地,当CMTM4敲低后,与对照组相比,HN6和CAL27细胞的增殖、迁移、侵袭能力均下降。过表达CMTM4后细胞周期相关蛋白CDK4、CDK6和Cyclin D1以及AKT通路相关蛋白pAKT表达也有所升高。CMTM4敲低后这些蛋白表达水平明显降低。动物实验结果显示,与对照组相比,CMTM4过表达后OSCC细胞体内成瘤体积增大,CMTM4敲低后成瘤体积明显减小。结论CMTM4在OSCC组织中高表达,可以促进OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力,可能通过调控细胞周期及AKT通路发挥作用。

CMTM2基因对于雄性动物生殖的影响机理研究进展

CMTM2基因在雄性动物的睾丸组织中高度表达,其可以通过一系列的分子机制来影响繁殖性能,如通过调节雄激素受体在睾丸组织中的表达来影响精子发生;CMTM2的异常表达会引起睾酮分泌异常,导致睾丸萎缩,最终导致雄性不育。为此,本文首先介绍了CMTM2基因及其表达特征,综述了该基因对雄性动物生殖系统的影响以及它与雄性动物不育之间的关系,以期为动物的品种选育及繁殖率的提高提供新思路。

胃癌中CMTM6和PD-L1的表达及其临床意义

目的探讨CMTM6和PD-L1在胃癌中的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法收集103例胃癌患者的临床资料,采用免疫组化MaxVision两步法检测胃癌组织中CMTM6和PD-L1的表达,分析两者表达与临床病理特征的关系。结果103例胃癌组织中CMTM6高表达70例(68.0%),低表达33例(32.0%);PD-L1高表达66例(64.1%),低表达37例(35.9%)。正常胃黏膜组织中CMTM6高表达39例(37.9%)、低表达64例(62.1%);PD-L1高表达35例(34.0%)、低表达68例(66.0%);两组相比差异有显著性(P<0.001)。CMTM6表达与肿瘤分化程度、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和PD-L1表达相关(P<0.05)。PD-L1表达与患者性别、脉管浸润、神经侵犯和TNM分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,CMTM6高表达与胃癌患者不良预后相关(P=0.008)。Cox单因素生存分析显示,胃癌患者的预后与肿瘤最大径、浸润深度、脉管浸润、远处转移、淋巴结转移、TNM分期和CMTM6表达相关(P<0.05);Cox多因素生存分析表明,CMTM6表达是胃癌患者的独立预后因素(P<0.05)。结论CMTM6和PD-L1高表达的胃癌患者预后较差,CMTM6可作为判断胃癌患者预后的标志物。

胶质瘤CMTM 1、CMTM 6的表达及其临床意义

目的探讨趋化素样因子超家族(CMTM)1、CMTM6表达水平与胶质瘤病人预后的关系。方法收集2016年1月~2019年6月手术切除的胶质瘤组织96例和颅脑损伤内减压术中切除的非肿瘤脑组织40例(对照组),采用免疫组织化学染色检测CMTM1、CMTM6的表达水平。随访24个月,记录胶质瘤病人生存情况。结果胶质瘤组CMTM1和CMTM6高表达率[分别为64.58%(62/96)、67.71%(65/96)]明显高于对照组[分别为25%(10/40)、20.00%(8/40);P<0.01]。胶质瘤组织CMTM1与CMTM6表达水平呈正相关(r=0.837,P<0.001)。本文96例随访2年,死亡37例,生存59例。多因素Cox比例回归风险模型分析显示,CMTM1过表达、CMTM6高表达是胶质瘤预后不良的独立危险因素(P<0.05)。生存曲线分析显示,CMTM1、CMTM6高表达组2年累积生存率(分别为50.15%、52.05%)明显低于表达组(分别为79.85%、84.95%;P<0.05)。结论胶质瘤组织CMTM 1、CMTM 6呈高表达,与病人的不良生存预后有关。

CMTM8与E-cadherin在原发性和转移性肾透明细胞癌中的表达

目的:探讨CMTM8及E-cadherin在原发性和转移性肾透明细胞癌组织中的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学方法检测17例原发性肾透明细胞癌组织、8例癌旁正常肾组织、9例肾透明细胞癌肺转移组织和10例肾透明细胞癌骨转移组织的CMTM8及E-cadherin表达。结果:CMTM8和E-cadherin在正常肾小管上皮细胞膜上呈强阳性表达;在低级别肾透明细胞癌的细胞膜上表达强度明显下降,但仍呈完整连续的细胞膜表达;在高级别的肾透明细胞癌中,其在细胞膜上的表达强度进一步减弱,表达不连续,同时开始出现细胞浆的表达。CMTM8在肾透明细胞癌肺转移及骨转移组织中的细胞膜表达水平进一步下降,以细胞浆表达为主。E-cadherin在转移癌组织中的表达可为阴性,也可为细胞膜和细胞浆的弱阳性。CMTM8和E-cadherin均与肾透明细胞癌的进展和转移有显著负相关(r值分别为-0.841和-0.732,P<0.001),两者间也有显著相关性(r值为0.694,P<0.001)。结论:CMTM8和E-cadherin与肾透明细胞癌的发生和进展存在明显的负相关性,两者在细胞中表达的部位和强度对判断肿瘤预后有重要意义。

抗CMTM4多克隆抗体的制备、纯化和鉴定

目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能。方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联。其中第1、2、3条多肽为3种剪接体共有,混合后免疫家兔,制备Ab1;而第4条多肽为CMTM4-v1所特有,单独免疫家兔,制备Ab2。ELISA法检测抗体效价。免疫亲和层析法纯化后,进行West-ern blot和免疫组织化学检测,鉴定这2种抗体的特异性与适用范围。结果:得到兔抗人CMTM4多肽抗体Ab1和Ab2,效价分别达1∶105和1∶106。纯化后的Ab1用于Western blot可特异识别超表达的CMTM4-v1和v2,并可用于免疫组织化学实验;而Ab2仅可用于Western blot,特异性识别超表达的CMTM4-v1。Ab1还可特异识别小鼠内源性Cmtm4。结论:用多肽免疫家兔制备的2种抗CMTM4抗体不仅具有较高的效价以及特异性,并且Ab1还可以特异识别小鼠Cmtm4,为CMTM4的功能研究提供了有力的支持。

CMTM5基因rs723840单核苷酸多态性与阿司匹林治疗下血小板高反应性的相关性研究

目的：探讨趋化素样因子超家族成员5（CKLF-like MARVEL transmembrane member 5,CMTM5）基因rs723840单核苷酸多态性与阿司匹林治疗下血小板高反应性的相关关系。方法：采用临床单组观察试验研究设计方法,共入选210例北京大学第一医院老年内科住院患者,采用光学比浊法测定0.5 g/L花生四烯酸（arachidonic acid,AA）诱导的血小板聚集率（platelet aggregation ratio,PR）,阿司匹林治疗下血小板高反应性（high on aspirin platelet reactivity,HAPR）定义为PR≥3/4 PR界值。将入选患者按照PR分为HAPR组和非血小板高反应性组（NoHAPR）。采用焦磷酸测序法测定CMTM5基因rs723840单核苷酸多态性在HAPR组和No-HAPR组的基因型及等位基因分布频率,采用卡方检验统计分析基因型与等位基因在两组间的差异。结果：CMTM5基因rs723840多态在两组间基因型分布频率皆符合Hardy-Weinberg平衡定律,3种基因型（CC型、CT型和TT型）分布频率在HAPR组和No-HAPR组分别为48.4%、51.6%、0.0%和73.7%、22.9%、0.034%,3种基因型在两组间分布频率差异存在统计学意义（P=0.004）,C、T等位基因分布频率在两组间差异亦有统计学意义（P=0.031,OR=2.002,95%CI：1.056~3.793）。Logistic回归校正了年龄、性别、体重指数、吸烟、高血压、糖尿病及高脂血症等冠心病易患因素后,CMTM5基因rs723840单核苷酸多态性仍与冠心病患者HAPR的发生存在显著相关性。结论：CMTM5基因单核苷酸多态位点rs723840与冠心病患者血小板高反应性发生存在显著相关性。

CMTM5通过下调HER2抑制前列腺癌的肿瘤行为

目的:CMTM5是一种在多种肿瘤中发生下调的抑癌分子,有可能影响跨膜信号转导。现有的临床试验证实,与其他上皮来源、具有HER2基因表达的肿瘤不同,针对表皮生长因子受体(EGFR)的靶向治疗在前列腺癌中并不奏效,提示前列腺肿瘤中HER2可能有其他的促癌机制。本文的目的在于观察CMTM5与HER2在促进前列腺肿瘤的发生中可能存在的联系,以期发现新的治疗靶点。方法:通过芯片技术观察了不同分级肿瘤的HER2及CMTM5的表达水平。比较转染了CMTM5-v1之后前列腺癌细胞系PC3中HER2水平的变化以分析两者之间可能存在的关联性。结果:随着肿瘤分级升高,HER2水平升高而CMTM5水平降低。PC3细胞系中CMTM5过表达可以降低HER2的蛋白水平进而减少细胞周期调控蛋白CyclinD1的水平,从而抑制细胞分裂。结论:前列腺癌中,HER2很有可能不是通过EGFR发挥促癌作用,因而目前针对EGFR的靶向治疗对前列腺癌效果不佳。在肿瘤中降低的CMTM5作为一种新发现的HER2抑制分子有可能成为新的治疗靶点。

CMTM5与表皮生长因子受体在前列腺癌中的表达及意义

目的:通过检测CMTM5(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 5)及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在前列腺癌中的表达,分析其在前列腺癌发生及发展中可能存在的联系。方法:免疫组织化学检测前列腺癌和良性前列腺增生(benigh prostatic hyperlasia,BPH)组织中CMTM5的表达,分析其与前列腺癌临床病理学特征的关系;免疫组织化学检测EGFR在前列腺癌组织中的表达,并分析其与CMTM5在前列腺癌中表达水平的关系;Western blot检测CMTM5和EGFR在BPH组织及各前列腺癌细胞系的表达。结果:免疫组织化学结果显示,CMTM5在75%(27/36)BPH和35.9%(23/64)前列腺癌组织中高表达,差异有统计学意义(P=0.000 2)。CMTM5的表达水平与年龄、临床分期、有无转移之间无明显关系(P>0.05),在中高度分化(Gleason评分≤7)的肿瘤组织中,CMTM5的表达水平高于低度分化(Gleason评分≥8)的肿瘤组织,差异有统计学意义(P=0.003)。EGFR在57.8%的前列腺癌组织中高表达(37/64),其与CMTM5表达水平的差异有统计学意义(P=0.021)。23例前列腺癌组织CMTM5低表达且EGFR高表达,占35.9%。Western bolt结果显示CMTM5在BPH组织中表达,但在各前列腺癌细胞系中均表达缺失,而EGFR在BPH组织中的表达低于各前列腺癌细胞系,特别是激素非依赖性细胞系PC3和DU145。结论:CMTM5的表达缺失与EGFR的过表达可能同时参与了前列腺癌的发生与发展。

CMTM2改善环磷酰胺致转基因小鼠模型生殖毒性作用并影响StAR蛋白的表达

目的:探讨在转基因小鼠模型中CMTM2能否改善环磷酰胺(CP)引起的生殖毒性作用以及其对固醇合成快速调节蛋白(StAR)表达的影响。方法:随机选取CMTM2转基因小鼠20只分成2组:CMTM2+CP[CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和CMTM2+NS(CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组,另取同源野生型C57BL/6J小鼠20只分成2组:WT+CP[野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和WT+NS(野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组。30 d后各组小鼠处死取相应标本,放免法检测血清睾酮水平,分析各组小鼠精子浓度、精子活动率差异,Western印迹检测睾丸StAR蛋白表达。结果:对比CMTM2+NS组,CP能够降低CMTM2+CP组小鼠的血清睾酮含量[(42.98±3.25)nmol/L vs(46.74±3.38)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(24.68±0.95)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(85.14±1.12)%](P<0.05),表现出明显的生殖毒性;对比WT+CP组,CMTM2+CP组小鼠血清睾酮[(42.98±3.25)nmol/L vs(37.97±4.17)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(12.75±1.02)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(50.52±1.37)%]下降程度均明显减弱(P<0.05),而CMTM2+CP组的StAR蛋白表达水平则较高(1.16±0.07 vs 0.69±0.08,P<0.05)。结论:CMTM2可能通过调节StAR蛋白表达对抗CP引起的生殖毒性,从而在生殖系统中发挥一定的保护作用。

CMTM5对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨CMTM5(CKLF-like MARVEL transmembrance domain containing)对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探索其作用机制。方法:13只雄性裸鼠连续腹腔注射环磷酰胺2.5 mg/(d.只),建立裸鼠皮下前列腺移植瘤模型,3周后11只裸鼠种植部位可见肿瘤,随机将其分成两组:实验组(6只),对照组(5只)。实验组肿瘤局部注射CMTM5腺病毒,对照组不作处理。每日监测裸鼠体重和肿瘤大小,2周后处死。取出完整肿瘤组织,利用免疫组化方法检测过表达CMTM5对裸鼠前列腺移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。结果:CMTM5组肿瘤体积为(573.39±175.24)mm3明显小于对照组(1482.50±327.86)mm3,P=0.03。CMTM5组肿瘤重量为(0.55±0.11)g明显小于对照组(1.31±0.29)g,P=0.027。免疫组化法检测结果显示,与对照组比较,CMTM5组VEGF和NF-κB蛋白的表达明显降低。结论:CMTM5抑制前列腺癌的生长,其作用机制可能通过下调与肿瘤细胞增殖密切相关的血管内皮生长因子VEGF和核转录因子NF-κB的表达相关。

多发性骨髓瘤病人骨髓细胞中Cmtm5基因异常低表达

本研究检测cmtm5(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing member5)基因在多发性骨髓瘤(MM)骨髓细胞中的表达水平,并探索其与临床特征的关系。应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,RQ-RT-PCR)技术检测MM患者骨髓细胞、MM细胞系及正常人骨髓细胞cmtm5基因的表达。以cmtm5拷贝数与abl拷贝数的比值表示cmtm5基因的相对表达水平。结果表明,51例初治及难治复发MM患者骨髓细胞cmtm5表达量(0.047±0.062)显著低于20例正常人骨髓细胞cmtm5表达量(0.255±0.333,p<0.01)。ISSⅢ期患者组cmtm5基因表达量(0.034±0.034)显著低于ISSⅠ期患者组的表达量(0.103±0.109,p<0.01)。两种人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226及CZ1的cmtm5基因表达量(为0.014±0.009、0.004±0.006)均低于正常人骨髓细胞。15例治疗有效患者的cmtm5基因表达量与治疗前及复发时相比显著升高(0.020±0.005;0.227±0.038,p<0.01)。cmtm5基因的表达量与骨髓浆细胞比例呈负相关(r=-0.307,p<0.05),而与性别、年龄、血红蛋白水平、M蛋白量、免疫球蛋白分型、IgH是否阳性等没有明显的相关性。结论:多发性骨髓瘤患者骨髓细胞cmtm5基因表达水平降低,且与ISS分期有关,与骨髓浆细胞数呈负相关,此结果说明cmtm5基因在MM的发病机制中发挥一定作用。

CMTM2转基因小鼠的构建及其血清睾酮水平的变化

目的:建立系统性表达CMTM2的转基因小鼠模型,研究CMTM2表达对小鼠生殖系统的影响。方法:通过显微注射pRevTRE-CMTM2表达载体建立CMTM2转基因小鼠;PCR鉴定CMTM2转基因小鼠基因型;RT-PCR、Western印迹、IHC方法检测CMTM2在转基因小鼠睾丸的表达情况;放免法检测转基因小鼠血清睾酮水平。结果:成功构建高表达CMTM2蛋白的转基因小鼠,并可以稳定传代;CMTM2转基因小鼠的血清睾酮水平较野生型小鼠提高[(46.04±3.72)nmol/L vs(42.43±3.80)nmol/L,P<0.05]。结论:成功构建CMTM2高表达的转基因小鼠,初步提示CMTM2基因可能对转基因小鼠睾酮的生成和分泌有一定影响。

长江三角洲白山羊优质笔料毛关键基因CMTM3启动子区甲基化分析

为进一步明确趋化素样因子3(CMTM3)基因在优质笔料毛性状形成过程中的调控作用,以长江三角洲白山羊为研究对象,采用亚硫酸氢盐处理后测序法,研究关键基因CMTM3在优质笔料毛羊群体中的表达水平,分析CMTM3基因甲基化状况与优质笔料毛性状之间的相关性。结果表明:CMTM3基因在优质笔料毛羊群体中的表达量极显著低于非优质笔料毛羊群体,而优质笔料毛羊群体的甲基化水平则高于非优质笔料毛羊群体,优质笔料毛羊群体的甲基化水平为84.7%~87.4%,非优质笔料毛羊群体为80.0%~81.6%;CMTM3基因的甲基化水平与其表达量呈负相关,相关性达显著或极显著水平。这一研究提示CMTM3基因参与了优质笔料毛性状的形成过程。

重症肌无力患者胸腺组织CMTM8、CKLF1及相关趋化因子的表达

目的:比较重症肌无力(MG)患者与非自身免疫对照组胸腺组织CMTM8、CKLF1、相关趋化因子及受体的表达,为揭示MG胸腺异常及其发生机制提供理论依据。方法:用基因芯片筛选差异表达的趋化因子基因,采用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法分别检测正常胸腺和MG胸腺中CMTM8 mRNA的表达,用免疫组织化学方法对CKLF1蛋白的表达和分布进行检测。结果:增生型MG胸腺组织中CMTM8 mRNA的表达明显高于正常人胸腺(2-△△Ct=8.3),差异有统计学意义;CKLF1蛋白在正常胸腺、MG胸腺中的均有广泛的表达,阳性细胞主要为胸腺基质细胞;CXCR6、CCL2、CCL8、CX3CL1、CXCL10和CCR1在MG患者胸腺表达水平显著低于对照组;CCL22、CCL3、CXCL12、CCR5、CCR7和CCR9基因在MG患者胸腺表达水平显著高于对照组。结论:CMTM8及多种趋化因子基因在增生型MG胸腺的表达明显高于对照组胸腺,可能在MG患者T细胞异常发育的某些阶段起重要作用。

CMTM1-v17/CKLFSF1-v17多克隆抗体的制备、亲合纯化与鉴定

目的：CMTM1-v17是我室克隆的人类新基因，为进一步研究CMTM1-v17的功能，需制备高纯度的CMTM1-v17的抗体。方法：根据生物信息学分析的结果，用PCR法扩增人CMTM1-v17分子C端的cDNA片段（编码118～149位氨基酸），亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX-4T-2上。将重组质粒pGST-CMTM1-v17导入大肠杆菌BL21，诱导表达GST-CMTM1-v17 C端融合蛋白，经GST亲合层析、凝血酶切割后获得CMTM1-v17 C蛋白作为抗原免疫家兔制备抗血清。抗血清经抗原亲合层析后用Western blot和免疫组化方法进行鉴定。结果：通过重组表达获得抗原蛋白，免疫家兔并纯化抗血清得到特异的抗CMTM1-v17抗体，该抗体能检测到CMTM1-v17超表达和细胞内源性的蛋白。结论：成功制备了抗CMTM1-v17的多克隆抗体，对进一步研究CMTM1-v17的功能提供了一个有用的工具。

CMTM3在幽门螺杆菌感染慢性胃炎中的表达及其意义

背景:趋化素样因子超家族(CMTM)参与炎症、肿瘤等多种疾病的发生、发展过程。目前对CMTM3的研究主要集中在其肿瘤抑制作用方面。目的:探讨CMTM3在幽门螺杆菌(Hp)感染慢性胃炎中的表达及其意义。方法:选取Hp阳性和阴性慢性胃炎患者各30例,以免疫组化法检测胃黏膜CMTM3和白细胞介素-6(IL-6)表达,分析两者表达的相关性。结果:与Hp阴性慢性胃炎患者相比,Hp阳性慢性胃炎患者胃黏膜中CMTM3和IL-6阳性表达率均显著增高(CMTM3:63.3%对30.0%,P<0.05;IL-6:73.3%对13.3%,P<0.01)。在Hp阳性慢性胃炎患者中,CMTM3与IL-6的共表达率为53.3%(16/30),且两者表达部位一致;相关性分析显示两者呈显著正相关(r=0.58,P<0.05)。结论:CMTM3在Hp感染慢性胃炎胃黏膜中呈高表达,其可能与IL-6等炎症细胞因子共同参与了Hp感染慢性胃炎的发生、发展。Hp感染可能是引起CMTM3表达上调的机制之一。