痰和肺泡灌洗液CMV-DNA检测的临床意义探讨

目的寻找早期诊断巨细胞病毒肺炎的指标。方法选取实验50例小儿肺炎病例,所有患儿血CMV-Ig M均为阳性,分为婴儿组及幼儿组,收集痰液及肺泡灌洗液,采用荧光实时定量PCR技术检测CMV-DNA,分析对比痰液及肺泡灌洗液巨细胞病毒检出情况;对照组为12例血CMV-Ig M为阳性的非肺炎病例,完善肺泡灌洗液CMV-DNA检测,比较实验组和对照组的肺泡灌洗液CMV-DNA检测结果。结果⑴对比实验组和对照组的肺泡灌洗液CMV-DNA检测结果,两组比较,差异有统计学意义（χ^2=12.402,P〈0.001）。⑵实验组中,对比痰及肺泡灌洗液CMV-DNA检测结果,两组比较,差异无统计学意义（χ^2=1.000,P=0.317）。同时对比痰及肺泡灌洗液高载量组（CMV-DNA〉1×105copies/ml）,两组比较,差异有显著统计学意义（χ^2=19.385,P〈0.001）。⑶婴儿组与幼儿组痰CMV-DNA高载量组阳性率进行对比,两组比较,差异有统计学意义（χ^2=5.965,P〈0.05）;婴儿组与幼儿组肺泡灌洗液CMV-DNA高载量组阳性率进行对比,两组比较,差异有统计学意义（χ^2=3.861,P〈0.05）。结论肺泡灌洗液CMV-DNA检测结果较痰CMV-DNA检测结果更有意义,不同年龄段巨细胞病毒肺炎的检出率不同。

定量分析巨细胞病毒肝炎婴儿尿液CMV-DNA的临床意义

目的 定量分析巨细胞病毒肝炎婴儿尿液CMV -DNA的含量与其临床症状轻重之间的关系。方法 将 4 2例黄疸的婴儿根据临床表现及肝脏功能检查分为肝炎、畸形组 ;肝炎组 ;对照组 (单纯间接胆红素升高组 )。采用荧光定量PCR技术检测尿液CMV -DNA。结果 3组尿液CMV -DNA含量组间比较无显著差异 ,P >0 0 5。尿液CMV -DNA水平与总胆红素、直接胆红素及ALT无相关性 ,r值分别为 0 0 91 ,- 0 0 0 2 ,0 0 5 7。结论 尿液CMV -DNA水平与患儿病情的轻重无关 ,与肝功能的改变无关。更昔洛韦的治疗可以使尿液中CMV -DNA的排毒量降低。

AIDS合并不同类型巨细胞病毒视网膜炎抗病毒治疗前后房水中CMV-DNA含量变化分析

目的 探讨更昔洛韦局部联合全身治疗艾滋病(AIDS)合并不同类型巨细胞病毒视网膜炎(CMVR)前后房水中CMV-DNA含量变化,为AIDS合并CMVR的治疗提供更为有利的实验室依据。方法 回顾性选取2017年1月至2019年1月在首都医科大学附属北京佑安医院眼科和感染中心确诊的AIDS合并CMVR患者共58例78只眼,其中中心型35只眼,周围型43只眼。分别在玻璃体注射更昔洛韦第1针时和最后1针时抽取前房水进行聚合酶链式反应(PCR)检测CMV-DNA含量,比较中心型CMVR和周围型CMVR局部和全身更昔洛韦治疗前后房水CMV-DNA含量的差异和注射次数的差别。结果 中心型CMV-DNA含量:治疗前:最高值为8.34×10 4 copies/ml,最低值为2.06×10 3 copies/ml,平均值为1.77×10 4±3.21×10 4 copies/ml;治疗后:最高值为7.68×10 3 copies/ml,最低值<500 copies/ml(阴性,<500 copies/ml为检测下限),平均值为2.59×10 3±2.71×10 3 copies/ml;治疗后检测为阴性者为13眼;平均玻璃体注药4.9±1.06次。周围型CMV-DNA含量:治疗前:最高值为4.04×10 4 copies/ml,最低值为1.06×10 3 copies/ml,平均值为7.58×10 3±8.92×10 3 copies/ml;治疗后:最高值为7.16×10 3 copies/ml;平均值为7.89×10 2 ±1.54×10 3 copies/ml;治疗后检测为阴性者为31眼;平均玻璃体注药3.7±1.41次。结论 PCR为诊断AIDS合并CMVR提供可靠的实验室诊断方法,并可以根据治疗后房水CMV-DNA数值变化指导临床治疗。中心型CMVR在治疗前和治疗后房水CMV-DNA数值及玻璃体注药次数比周围型高,在临床中要区别对待。

CMV-DNA和IgM抗体检测对慢性重型乙型肝炎患者活动性巨细胞病毒感染的诊断价值评估

目的评估CMV-DNA和IgM抗体检测对慢性重型乙型肝炎患者活动性巨细胞病毒感染的诊断价值。方法 100例慢性重型乙型肝炎(CSHB)患者采用免疫组化二步法检测CMV-pp65抗原、荧光定量PCR法检测CMV-DNA及酶联免疫吸附反应法(ELISA)检测CMV-IgM抗体,以CMV-pp65抗原为对照,分析比较不同检测方法的差异性。结果 100例CSHB患者CMV-DNA阳性27例,阳性率为27%(27/100);CMVpp65抗原阳性45例,阳性率为45%(45/100);差异有统计学意义(P<0.05)。CMV-IgM抗体阳性4例,阳性率为4%(4/100),明显低于CMV-pp65抗原和CMV-DNA阳性率(均P<0.05)。CMV-pp65与CMVDNA诊断一致性分析采用Kappa检验,Kappa值为0.483,在0.4~0.7之间,表示吻合程度一般。CMVDNA诊断巨细胞病毒感染的灵敏度为0.486,特异度为0.906;CMV-IgM抗体诊断巨细胞病毒感染的灵敏度为0.064;特异度为0.981。CMV-DNA诊断巨细胞病毒感染的ROC曲线下面积(AUC)为0.687,P=0.001;IgM抗体诊断巨细胞病毒感染的AUC为0.522,P=0.699。结论 CMV-DNA诊断慢性重型乙型肝炎患者合并活动性巨细胞病毒感染的价值不如CMV-pp65抗原,但CMV-DNA可作为CMV-pp65抗原诊断的对照和补充,而CMV-IgM抗体无诊断价值。

监测反复自然流产者尿CMV-DNA的研究

犤目的犦探讨反复自然流产与巨细胞病毒感染的关系。犤方法犦采用PCR方法对212例反复流产(RAS)妇女及2602例无流产史早孕妇女的尿液进行CMV-DNA检测。犤结果犦RAS组CMV-DNA阳性率1.89%,对照组CMV-DNA阳性率0.46%,两者有显著性差异(x2=7.05,P<0.05)。犤结论犦RAS与巨细胞病毒感染有一定的相关性。

CMV-IgM、CMV-DNA联合LDH对婴幼儿巨细胞病毒肺炎的诊断价值

目的探讨巨细胞病毒抗体M(CMV-IgM)、CMV-DNA联合乳酸脱氢酶(LDH)检测在婴幼儿巨细胞病毒(CMV)肺炎诊断中的价值。方法回顾性选取2019年6月至2020年10月在阳江市人民医院就诊接受治疗的已确诊为CMV肺炎患儿97例(病例组)、健康体检婴幼儿103例(对照组)为研究对象。记录2组血清CMV-IgM、CMV-DNA阳性率及生化指标水平并进行比较,结合受试者工作特征(ROC)曲线评价CMV-IgM、CMV-DNA联合LDH在CMV肺炎患儿中的诊断价值。结果病例组中血清CMV-IgM、CMV-DNA阳性率为85.0%、77.3%,高于对照组的14.6%和2.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。病例组中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、LDH及C反应蛋白(CRP)水平分别为(67.99±8.64)U/L、(52.17±5.82)U/L、(424.78±19.27)U/L和(19.84±2.19)mg/L,明显高于对照组[(33.86±6.18)U/L、(27.67±7.46)U/L、(201.47±38.15)U/L和(8.60±0.88)mg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。经ROC曲线分析CMV-IgM、CMV-DNA联合LDH检测的曲线下面积、灵敏度、特异度和准确度分别为0.978、95.9%、92.2%和100.0%,均高于各单一指标及CMV-IgM、CMV-DNA联合检测。结论CMV-IgM、CMV-DNA联合LDH检测在CMV肺炎患儿的诊断中具有较高的临床应用价值。

婴儿巨细胞病毒性肝炎抗病毒治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA变化

目的研究婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA的变化及临床意义。方法选择CMV肝炎患儿46例,CMV无症状性感染患儿20例,健康查体婴儿20例,比较3组间尿CMV DNA含量和血T细胞亚群的差异。比较46例CMV肝炎患儿治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA的水平。结果 CMV肝炎患儿组尿CMV DNA含量明显高于CMV无症状性感染组和健康对照组,差异有统计学意义(t=2.375、P<0.05;t=16.27、P<0.01)。CMV肝炎患儿组CD4+T淋巴细胞的水平和CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值较无症状性感染组和健康对照组均降低,CD8+T淋巴细胞水平较其他组升高,差异有统计学意义。CMV肝炎患儿抗病毒治疗后,尿CMV DNA含量明显下降,CD4+T淋巴细胞的水平和CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值较治疗前升高,差异有统计学意义,CD8+T淋巴细胞水平较治疗前明显下降,差异有统计学意义。结论 CMV肝炎患儿细胞免疫功能受损。抗CMV治疗能有效改善患儿的细胞免疫功能,治疗前后监测血T细胞亚群和尿CMV DNA变化对判断预后和指导临床治疗有重要意义。

巨细胞病毒DNA早期抗原与巨细胞病毒-IgM、IgG滴度一致率的对比研究

目的 :正确认识巨细胞病毒 (CMV)DNA及CMV早期抗原 (EA)的病毒学意义及临床价值。方法 :检查 34例急性黄疸性肝炎患儿和 19例健康儿童的血白细胞CMV DNA、尿CMV DNA、血白细胞CMV EA ,并与其同时检测的CMV IgM、CMV IgG双份血清 (急性期 /恢复期 )滴度有 4倍以上升高 (IgG升高 )相比较。结果 :CMV DNA与CMV IgM及CMV IgG升高的一致率都低于 5 0 % ;CMV EA与CMV IgM的一致率为 6 6 .7% (肝炎患儿 )、6 8.4% (健康儿童 ) ,显著高于血CMV DNA( 37.7% ,P <0 .0 1)和 CMV DNA( 4 4.4% ,P <0 .0 5 )与CMV IgM的一致率 ,但CMV EA与CMV IgG升高无相关性 ;CMV DNA与CMV EA在肝炎患儿和健康儿童中的检出率无显著差异性。结论 :CMV DNA定性检查不适于做为CMV活动性感染的指标 ,而CMV EA更能反映CMV的活动性感染。联合开展CMV的多种抗原检查以及定量检查CMV

百合病毒的DNA芯片检测技术研究

根据已知的黄瓜花叶病毒,百合无症病毒、百合斑驳病毒基因核苷酸序列,设计引物和探针,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记核苷酸引物,不对称RT-PCR扩增产物与芯片上的寡核苷酸探针杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。研究制备的基因芯片能够检测侵染百合的3种重要病毒核酸的特异性荧光信号,该项技术具有特异、灵敏、快速的优点。

巨细胞病毒DNA在性病患者中的检测

目的调查巨细胞病毒在性病患者中感染情况。方法应用聚合酶链反应对１１０例性病患者尿道和７０例已婚健康者尿道或宫颈分泌物进行了巨细胞病毒检测。结果性病患者ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率约为１４．５４％，明显高于已婚健康者４．２９％（Ｐ＜０．０５）。其中女性患者阳性率２２％，高于男性患者８．３３％，且ＣＭＶ检出率以ＮＳＧＩ最高（１９．６１％），其次为ＣＡ（１６．０％），再其次为淋病８．３３％，而健康已婚男、女阳性率分别是３．３３％和５．０％。结论性病患者常伴有ＣＭＶ呈现，这ＣＭＶ是性病患者自身原潜伏感染释放的病毒，或是外源性ＣＭＶ感染所产生。

多源化巨细胞病毒DNA定量检测在异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒肺炎诊断中的应用

目的研究不同来源[血浆、痰液、支气管肺泡灌洗液(BALF)]标本的巨细胞病毒(CMV)DNA定量检测对异基因造血干细胞移植后CMV肺炎的诊断价值。方法回顾性分析接受异基因造血干细胞移植的405例受者的临床资料,其中诊断为CMV肺炎的19例受者设为CMV肺炎组,选择同期仅发生CMV血症的229例受者、接受纤维支气管镜镜检的11例非CMV肺炎受者及根据病原学证据确诊细菌或真菌性肺炎进行痰培养的16例受者,分别设为对照A、B、C组。总结CMV肺炎的发生情况;分析CMV肺炎受者不同来源(血浆、痰液、BALF)标本的CMV DNA载量;总结CMV肺炎受者的预后情况。结果405例异基因造血干细胞移植受者中有19例发生了CMV肺炎,CMV肺炎总体发生率为4.7%(19/405)。CMV肺炎受者的血浆、痰液、BALF的CMV DNA载量均分别高于对照A、B、C组(均为P<0.05)。19例受者中,有12例经抗病毒治疗后治愈,7例治疗失败死亡(其中3例放弃治疗),病死率为37%(7/19)。结论血浆、痰液、BALF的CMV DNA定量检测可提高CMV肺炎的诊断率,从而改善异基因造血干细胞移植受者的预后。

鼠巨细胞病毒IE-1核酸疫苗和灭活疫苗联合免疫抗病毒感染的研究

巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)在人群中感染普遍,对婴幼儿及免疫低下人群中造成严重疾病,目前还没有针对该病毒的商品化疫苗。本研究以BALB/c小鼠为动物模型,探讨鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)IE-1 DNA疫苗和MCMV灭活疫苗联合免疫抗MCMV感染的免疫保护效果。将编码IE-1基因的DNA疫苗(pIE-1)通过肌肉注射辅以电穿孔的方式对小鼠进行初免,再用全病毒灭活疫苗单独或者辅以MF59佐剂进行加强免疫,分别通过ELISA和ELISPOT方法检测到联合免疫策略在免疫组小鼠体内诱导了MCMV特异性的抗体应答和CTL应答;免疫两周后用3×LD50致死剂量MCMV感染小鼠,疫苗对小鼠的免疫保护通过检测小鼠存活率、重要器官中的病毒滴度及体重丢失率来评价。结果显示,与单独免疫DNA疫苗或灭活疫苗相比,IE-1 DNA疫苗联合灭活疫苗组能同时在小鼠体内诱导体液免疫和细胞免疫应答,并提供小鼠完全保护;而且MF59辅以灭活疫苗免疫小鼠能增强疫苗的免疫效果。

尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测对婴儿巨细胞病毒感染的诊断价值研究

目的:研究探索在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的诊断价值,评估其临床意义。方法:选择2014年2月-2015年5月本院收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿为研究对象,采用尿液巨细胞病毒DNA和血清巨细胞病毒特异抗体对患儿进行检测,比较单一检测及联合检测与治疗前后患儿检测结果。结果:尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率58.89%(53/90)、特异性62.22%(56/90)与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率51.11%(46/90)、特异性61.11%(55/90)比较差异均无统计学意义(P>0.05);联合检测的阳性率78.89%(71/90)、特异性91.11%(82/90)与两种单一检测比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,患儿尿液巨细胞病毒DNA和血清巨细胞病毒特异抗体含量均低于治疗前(P<0.05)。结论:在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的临床效果理想,值得推广应用。

尿液CMV-DNA联合血清CMV-IgM检测对婴幼儿巨细胞病毒感染的诊断价值

目的：研究尿液巨细胞病毒DNA（CMV-DNA）联合血清巨细胞病毒特异抗体（CMV-IgM）检测对婴儿巨细胞病毒（CMV）感染的诊断价值。方法：选取2012年8月~2014年8月聊城市人民医院疑似CMV感染的婴幼儿70例,应用化学发光法检测血清CMV-IgM,采用实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测尿液CMV-DNA,比较抗病毒治疗前后的检测结果。结果：单独检测尿CMV-DNA的阳性率为62.86%（44/70）,单独检测血清CMV-IgM的阳性率为55.71%（39/70）,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两者联合检测的阳性率为77.14%（54/70）,与两种方法单独检测比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;抗病毒治疗后两种检测结果均显著降低,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：尿液CMVDNA联合血清CMV-IgM检测能显著提高婴儿CMV感染的阳性率。

冠心病患者外周血单个核细胞HCMV-DNA的荧光定量PCR检测

目的了解冠心病（CHD）患者外周血单个核细胞（PBMCs）人巨细胞病毒（HCMV）-DNA存在情况并探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR（real time FQ-PCR）方法,对62例CHD患者,29例其他心血管疾病患者和30例健康体检者的PBMCs内HCMV-DNA进行定量检测。结果 CHD患者PBMCs的HCMV-DNA检出率41.9%,其他心血管疾病组10.3%,正常对照组10.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。CHD组HCMV-DNA载量介于103~105拷贝/ml者为12例,占阳性例数的46.1%（12/26）,介于105~106拷贝/ml者为8例,占阳性例数的30.7%（8/26）。结论 CHD患者PBMCs的HCMV感染可能在其致动脉粥样硬化性发病过程中发挥重要作用。

CMV-DNA与CMV-IgM对婴幼儿巨细胞感染的诊断价值

目的:研究尿液CMV-DNA联合血清CMV-Ig M检测对婴儿巨细胞感染的诊断价值。方法:选取2012年8月到2014年8月期间我院疑似巨细胞感染的婴幼儿70例,应用化学发光法检测血清CMV-Ig M,采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)来检测尿液CMV-DNA,并比较经抗病毒治疗前和治疗后检测结果的变化。结果:单独检测尿CMV-DNA的阳性率为62.8%(44/70),单独检测血清CMV-Ig M的阳性率为55.7%(39/70),两者比较差异无统计学意义(P>0.05);两者联合检测的阳性率为77.1%(54/70),与两种方法单独检测比较差异具有统计学意义(P<0.05);经抗病毒治疗以后两种检测结果均显著降低,与治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:尿液CMV-DNA联合血清CMV-Ig M检测能显著提高婴儿巨细胞感染的阳性率。

脾氨肽联合更昔洛韦治疗对小儿巨细胞病毒感染的T淋巴细胞亚群及CMV-DNA载量影响

研究脾氨肽联合更昔洛韦治疗对巨细胞病毒感染患儿血清T淋巴细胞亚群及尿液CMV-DNA载量的影响。样本为巨细胞病毒感染患儿98例,按照随机数字法将其均分为观察组和对照组,每组49例。所有患儿入院后均接受对症支持治疗,并给予更昔洛韦静脉滴注抗感染治疗,在此基础上,观察组患儿给予口服脾氨肽联合治疗,疗程均为4周。结果显示,观察组患儿的治疗总有效率为89.80%,对照组患儿的治疗总有效率为73.47%(χ2=4.36,P=0.04);两组患儿血清CD4+T细胞和CD4+/CD8+T细胞明显高于治疗前,且观察组高于对照组,CD8+T细胞水平明显低于治疗前,且观察组低于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.01);两组患儿治疗前尿液CMV-DNA载量比较无显著性差异(P>0.05),经过治疗后均明显低于治疗前,且观察组低于对照组,比较均有统计学意义(P<0.01);观察组患儿不良反应发生率(14.29%)高于对照组患儿(12.24%),但比较差异无统计学意义(χ2=0.09,P=0.76)。综上说明脾氨肽联合更昔洛韦治疗小儿巨细胞病毒感染的效果较好,能有效纠正T淋巴细胞亚群失衡、降低CMV-DNA载量,且使用安全,值得在临床推广使用。

脾氨肽对小儿巨细胞病毒感染的T淋巴细胞亚群及CMV-DNA载量的影响

目的:探讨脾氨肽对小儿巨细胞病毒感染的T淋巴细胞亚群及CMV-DNA载量的影响。方法:选择我院2015年6月到2016年12月期间收治的巨细胞病毒感染患儿86例,按照随机数字法将其分为对照组和观察组,每组43例。所有患儿均接受对症支持治疗,并给予等量更昔洛韦静脉滴注治疗,在此基础上,观察组患儿口服脾氨肽治疗。比较两组患儿的治疗总有效率、不良反应发生率及治疗前后的血清CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+水平和尿CMV-DNA载量。结果:治疗后,观察组的治疗总有效率(91.49%)明显高于对照组(70.21%)(P=0.01),血清CD4^+和CD4^+/CD8^+水平明显高于对照组(P<0.01),尿CMV-DNA载量和血清CD8^+水平均明显低于对照组(P<0.01)。两组患儿的不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脾氨肽治疗小儿巨细胞病毒感染的临床效果较好,能有效纠正T淋巴细胞亚群失衡、降低CMV-DNA载量,且安全性高。

黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的荧光定量PCR检测

目的:调查黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的情况。方法:采用荧光定量PCR方法对203例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测。结果:在所检测的203例婴儿中,HCMV-DNA阳性的有52例,感染率为25.62%。HCMV-DNA拷贝数与黄疸持续时间无相关性。结论:HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,荧光定量PCR检测婴儿尿液中的HCMV-DNA快速、方便,检出率高,可及时诊断出巨细胞病毒的感染,以便及时治疗,降低畸形儿发生率。

荧光定量PCR技术在小儿尿液巨细胞病毒检测中的应用

目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)方法检测尿液巨细胞病毒在儿童CMV感染诊断中的意义。方法分别应用FQ-PCR和ELISA法检测75例确诊或高度怀疑为CMV感染和25例对照儿童尿CMV-DNA和血清CMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果75例确诊或疑诊CMV活动性感染患儿中,检测到CMV-DNA 66例;检测到CMV-IgM 54例。两种方法阳性符合率为77%,FQ-PCR和ELISA法阳性检出率分别为88%和72%,有统计学差异(P<0.05)。结论FQ-PCR法检测尿CMV-DNA对诊断活动性CMV感染具有良好的应用价值。