COMP基因突变对超声引导下齿钩针刀治疗腕管综合征的临床疗效及对预后的影响

目的 分析COMP基因突变对超声引导下齿钩针刀治疗腕管综合征的临床疗效及对预后的影响。方法 选取2022年6月至2023年6月,于门诊收治的软骨寡聚基质蛋白基因突变(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因突变的腕管综合征患者35例作为对照组,另选同期接受治疗的COMP基因未突变腕管综合征患者40例为观察组。均以超声引导下齿钩针刀治疗。比较两组患者感觉异常评分、肌肉减退评分、腕横韧带厚度(transverse carpal ligament thickness,TTCL)、豆状骨横断面正中神经横截面积(pisiform cross section median nerve cross section area,CSA)、钩状骨横断面正中神经前后径(anterior and posterior diameter of median nerve in cross section of uncinate bone,D)、临床疗效及不良事件发生率。结果 治疗后,与观察组相比,对照组中感觉异常评分、手部功能满意度评分、TTCL、CSA、D均呈升高,而肌肉减退评分下降,差异有统计学意义(P <0.05);且在观察组中临床总效率升高明显,不良发生率降低,根据的手部功能满意度评估COMP基因突变的腕管综合征患者预后状况,显示与预后良好组相比,预后不良组手功能评分升高明显,差异有统计学意义(P <0.05);且治疗前,两组患者临床表现相比,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 应用超声引导下齿钩针刀治疗COMP基因突变的腕管综合征患者效果明显低于COMP基因未突变腕管综合征患者,表明COMP基因突变在腕管综合征的发生发展过程中发挥着重要作用。

COMP与糖尿病肾病自噬相关性分析及其功能验证

目的·通过研究高糖环境下肾小球足细胞中软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)与自噬的关系,进一步阐明在高糖环境下足细胞受损的可能机制。方法·从GENE EXPRESSION OMNIBUS(GEO)数据库下载基因表达数据集GSE104948,使用GEO2R筛选差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),并对筛选出来的DEG进行富集分析。将加权基因共表达网络分析(Weighted Gene Co-Expression Network Analysis,WGCNA)与STRING数据库构建DEG的蛋白互作网络(protein protein interaction network,PPI)获得的相关性最高的关键基因(hub gene)取交集,并再次进行富集分析。体外培养条件永生性小鼠足细胞株,待其分化完全后,采用高糖刺激,Western blotting检测足细胞COMP、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain3,LC3/MAP1LC3)等蛋白的表达。进一步通过抑制COMP的shRNA慢病毒载体感染足细胞以抑制COMP表达,并通过嘌呤霉素筛选稳定株,经Western blotting检测稳定株COMP、mTOR、LC3的表达,以观察COMP对自噬的影响。结果·共筛选出362个DEG进行后续分析。在这些DEG中,284个基因上调,78个基因下调。基因本体论(Gene Onotology,GO)术语分析结果显示,糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)数据集中的DEG主要富集于细胞表面受体信号通路、受体结合等。主要富集的京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路包括细胞因子-细胞因子受体相互作用、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)信号通路等。WGCNA和PPI两部分hub基因取交集,验证了64个hub基因,再次用KEGG注释hub基因,发现大部分hub基因富集在“细胞外基质(extracellular matrix,ECM)-受体相互作用”和“PI3K/AKT信号通路”。在64个hub基因中,COMP呈显著高表达(logFC>2),而PI3K/AKT/mTOR信号通路是经典的自噬通路,提示COMP可能通过该通路影响细胞自噬。Western blotting结果显示,与甘露醇对照组、低糖组比较,高糖刺激下足细胞COMP表达明显升高。与对照组相比,高糖组LC3-Ⅱ的水平明显降低,表明高糖环境下足细胞的自噬启动受到了抑制。与阴性对照相比,敲低COMP的小鼠肾足细胞LC3-Ⅱ水平明显升高,mTOR随着COMP水平的降低也有所下降,表明抑制COMP有助于足细胞的自噬恢复。结论·DN患者的COMP高表达,高度富集于ECM受体和PI3K/AKT信号通路。高糖环境下小鼠肾足细胞自噬受到抑制,高糖诱导的足细胞COMP高表达可能是自噬抑制的关键因素,抑制COMP有助于小鼠肾足细胞的自噬恢复。

大叶桉根、茎、叶转录组比较和AP 2/ERF基因家族分析

2021年对广西六峰山林场的大叶桉(Eucalyptus robusta)进行采样,采用Hiseq 2000对大叶桉根、茎、叶组织分别进行转录组测序。结果获得40786个Unigene;通过数据库比对,共注释了31662个Unigene。GO注释结果最多的条目为膜组成部分;KEGG注释结果表明,5654条序列参与129条代谢通路,参与基因最多的通路为核糖体。对比分析大叶桉根部和茎,以及根部和叶之间的转录差异,发现多条富集的通路,包括α-亚麻酸代谢和萜类骨架生物合成等。鉴定出AP 2/ERF家族基因84个,其中AP 2家族含有9个基因,RAV家族含有2个基因,ERF家族包含73个基因,各基因家族在根茎叶中的表达模式有所差异。

假性软骨发育不全、多发性骨骺发育不良的分子遗传学研究进展

假性软骨发育不全(pseudoachondroplasia,PSACH)和多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)均为骨发育不良性疾病的家族成员之一,它们的遗传方式和临床表型都具有异质性的特点,二者均由软骨低聚物基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因突变所致。COMP是血小板凝血酶敏感蛋白(thrombospondin,TSP)家族的成员之一,它在骨骼的发育过程中起着重要的作用,文章着重就COMP的结构与功能、COMP基因的突变类型、检测方法及其与两病的相关性的最新进展作一综述。

脂蛋白脂酶基因多态性与高甘油三酯血症的关系

为了解脂蛋白脂酶基因多态性与高甘油三酯血症的关系，比较了９５名正常人和５８名高甘油三酯血症患者脂蛋白脂酶ＰｖｕⅡ、ＨｉｎｄⅢ等位基因Ｐ＋、Ｐ－及Ｈ＋、Ｈ－的频率，结果显示，高甘油酯血症的患者Ｐ＋等位基因明显高于对照组。

一例假性软骨发育不全患者基因突变分析

目的对1例初步诊断为假性软骨发育不全(PSACH)患者及其父母进行软骨寡聚基质蛋白(COMP)基因突变筛查,以判定患者是否为PSACH。方法提取患者及父母外周血DNA,针对COMP外显子8-19序列设计引物,进行PCR扩增、纯化,并对扩增产物进行毛细管电泳测序。结果测序结果显示患者COMP基因第9号外显子925位点有一处新突变G>A,使其编码蛋白第309位氨基酸由甘氨酸(Gly)变为精氨酸(Arg),且该突变位点在国内尚未报道。结论通过基因测序,可确定该患者为PSACH。

hHGF-αcDNA的克隆及表达载体的构建

目的 定点突变法扩增制备完整hHGF αcDNA ,克隆并构建其原核表达载体。方法与结果 以含有人HGFcDNA全序列的质粒 pRC/CMV hHGF为模板 ,设计合成一对特异引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增hHGF αcDNA基因 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,结果显示扩增得到了 1 34kb长的目的基因产物。将扩增产物以限制性内切酶XhoⅠ酶将其切为 386bp、95 4bp两个片段 ,分别以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ与 pBSKS载体连接重组 ,对目的基因分段克隆后进行序列测定 ,结果表明除通过定点突变引入的起始密码ATG、终止密码子TAA、TGA及EcoRⅠ、BamHⅠ识别位点外 ,扩增得到的PCR产物序列与Nakamura等报道的HGFcDNA中不包括前体序列的α链部分完全相同。将以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ从pBSKS HGF α 386、pBSKS HGF α 95 4中切出的 386bp、95 4bp两个片段以EcoRⅠ /BamHⅠ与pBV2 2 0连接构建重组表达质粒 pBV2 2 0 HGF α ,限制性内切酶图谱分析显示HGF αcDNA插入到载体pBV2 2 0的EcoRⅠ /BamHⅠ位点 ,插入方向正确。温度诱导表达 ,SDS PAGE显示一分子量与单体hHGF α链吻合的蛋白带 ,证明表达质粒构建成功。结论 设计制备了hHGF α链cDNA ,克隆建立了hHGF α链原核表达质粒。

假性软骨发育不全一家系临床特征和COMP基因突变分析

假性软骨发育不全(pseudoachondroplasia,PSACH)是较罕见的常染色体显性遗传性脊柱骨骺发育不良疾病。该文分析总结一个5岁2月龄PSACH患儿及其父母的临床资料,对COMP基因的所有19个外显子及其侧翼序列进行PCR扩增和直接测序,并对外显子10进行分子克隆明确突变性质。患儿有手指粗短、弓形腿、短肢侏儒、长骨干骺端增宽和脊柱椎体前突等临床及影像学表现,其COMP基因外显子10检出突变c.1048_1116del(p.Asn350_Asp372del)。患儿父亲外显子10携带同样突变,但缺乏临床表现。结合临床和影像学特征,通过COMP突变分析明确了PSACH诊断。该文报道的COMP基因突变在PSACH中的不穿透现象属于首次报道。

儿童骨骼发育异常相关矮小——COMP基因变异所致儿童骨骼发育障碍

儿童骨骼发育异常相关矮小为原发性生长障碍,其特征为骨和(或)软骨异常,还可累及肌肉、韧带和肌腱,常表现为非匀称性矮小。随着分子检测技术的广泛应用,越来越多患者获得了病因诊断,同一骨病可以由不同基因变异引起,且同一基因的不同位点变异可以引起不同骨病。其中COMP基因变异所致的儿童骨骼发育异常常以矮小的主诉来诊,属于罕见病,易误诊漏诊。COMP基因变异可致假性软骨发育不全(pseudoachondroplasia,PSACH)及多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)两类疾病。骨龄片可以发现掌指骨和骨骺异常的迹象,但因表型差异大,临床认识不足,早期发现并诊断存在一定困难,该文主要针对COMP基因变异所致儿童骨骼发育异常相关矮小做论述,旨在加强对该病的认识。

假性软骨发育不全一家系COMP基因突变分析

目的对一假性软骨发育不全(PSACH)家系进行软骨寡聚基质蛋白(COMP)基因突变分析。方法2008年10月于北京协和医院儿科遗传门诊采集该家系中患者及正常人血样,提取DNA,用聚合酶链反应扩增COMP基因外显子8-19,并对扩增产物进行直接测序,确定突变位点。结果家系中患病父子都存在COMP基因外显子8中c.815T>C突变,为已知突变。结论该家系中患者发病是由COMP基因突变所致。

一例COMP基因杂合突变致假性软骨发育不全病例

目的 对假性软骨发育不全(PSACH)确诊患儿及其家系成员进行软骨寡聚基质蛋白(COMP)基因检测,并进行分析。方法 采集患儿及父母清晨空腹外周静脉血各5 mL,抽取基因组DNA,进行PCR扩增,采用高通量测序方式读出原始测序数据;同时,对于致病突变基因所在片段上下游设计引物,进行PCR扩增,对产物行Sanger测序。结果 患儿存在杂合突变c.1048_1116del(exon 10,NM_000095),导致氨基酸发生整码突变(p.N350_D372del)。患儿父母均未检测出COMP基因突变位点。结论 COMP基因第10外显子杂合突变c.1048_1116del(exon 10,NM_000095)为PSACH的致病突变,在国内外PSACH患者中属于首次发现。患儿父母外周血基因正常,提示其父母可能与该突变的生殖腺嵌合体有关。

假性软骨发育不全一家系临床表现及基因分析

对云南省第一人民医院儿科诊治的1例COMP基因突变致假性软骨发育不全家系临床表现及基因进行回顾分析。患儿,男,3岁3个月,身高增长缓慢1年。查体:身高:87.5 cm(<-3标准差,上部量55.0 cm,下部量32.5 cm,轻度O型腿。神经系统查体:双下肢肌力正常,肌张力低。基因检查发现COMP基因11号外显子杂合基因变异:chr19:18897437 A>G[hg19],NM_000095.2,c.1159T>C,p.Cys387Arg,即翻译产物蛋白中第1159位半胱氨酸变为精氨酸。基因检测是确诊假性软骨发育不全的重要依据,可避免误治,以免影响患儿的终身高。