COX-2反义寡核苷酸对胰腺癌PC-3细胞株COX-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨环氧合酶 (COX) 2反义寡核苷酸 (ODNs)对胰腺癌PC 3细胞株COX 2mRNA和蛋白表达的影响 ,并进一步阐明COX 2反义ODNs基因治疗胰腺癌的可行性。方法 设计和合成COX 2反义ODNs,体外转染胰腺癌PC 3细胞 ,然后通过荧光显微镜、RT PCR及Westernblotting证实转染效果。结果 转染COX 2反义ODNs后 ,PC 3细胞COX 2mRNA和蛋白表达均下降 ,且体现出一定的剂量和时间依赖性关系。结论 COX 2反义ODNs转染胰腺癌PC 3细胞株后 ,可下调细胞中COX 2mRNA和蛋白表达 ,COX 2反义ODNs有可能达到胰腺癌基因治疗的效果。

粗根荨麻水提取部分对AA大鼠腹腔巨噬细胞PGE_2水平及体外LPS诱导腹腔巨噬细胞COX-2 mRNA表达的影响

目的观察滇产粗根荨麻水提取部分Urtica macrorrhiza Hand-Mazz,Ur对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages,PMφ)分泌前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平及对体外LPS诱导PMφCOX-2 mRNA表达的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎可能的作用机制。方法建立AA大鼠模型,Ur水提取部分连续灌胃给药14 d或21 d后分次获取PMφ,LPS诱导PGE2的产生,用酶联免疫吸附法检测培养上清液中PGE2水平。体外培养PMφ,RT-PCR方法检测LPS诱导COX-2 mRNA表达。结果Ur水提取部分(400,200 mg/kg)对LPS诱导的AA PMφ分泌PGE2水平有明显抑制作用。Ur(200,100μg/ml)能显著抑制LPS诱导的COX-2 mRNA的表达。结论滇产粗根荨麻水提取部分对佐剂性关节炎的治疗作用可能与其抑制PMφ分泌PGE2及COX-2 mRNA表达有关。

邻苯二甲酸二乙基己酯对成年大鼠睾丸前列腺素E_2含量及COX-2 mRNA表达的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DE-HP)对成年大鼠睾丸前列腺素E2(PGE2)含量及环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:雄性SD成年大鼠40只,随机分成4组,每组10只,设3个染毒剂量组(10、100、500 mg.kg-1.d-1DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养4周后处死。用ELISA测定睾丸组织PGE2含量;应用免疫组化法检测40只雄性SD成年大鼠睾丸组织中COX-2的表达及其定位情况;RT-PCR法检测各组睾丸组织COX-2 mRNA表达及其定位情况。结果:实验组睾丸组织中PGE2含量和睾丸组织的COX-2mRNA表达均低于对照组,COX-2则主要表达于精原细胞。结论:DEHP能使成年大鼠睾丸生精细胞功能损伤,使睾丸组织PGE2合成降低,其机制可能与下调COX-2 mRNA表达有关。

COX-2 mRNA在膝骨关节炎病变过程中的作用研究

目的探讨COX-2 mRNA在膝骨关节炎(KOA)病变过程中的作用。方法 76例膝骨关节炎患者(研究组)根据病变进展分为初期、中期、晚期三组,选取15例非膝骨关节炎患者为对照组,比较各组的COX-2 m RNA以及COX-2蛋白表达水平。结果研究组、初期组、中期组、晚期组的成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA及蛋白表达灰度值显著高于对照组(P<0.05);初期组的成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA及蛋白表达灰度值显著高于中期组、晚期组(P <0.05)。结论 COX-2mRNA在膝骨关节炎患者病变初期表达水平较高,检测COX-2 m RNA表达水平有助于为膝骨关节炎患者的诊治及预后提供指导。

腹水COX-2 mRNA的表达及意义

【目的】通过检测腹水COX-2 m RNA的表达水平,探讨COX-2 m RNA对腹水鉴别诊断的价值和意义。【方法】收集2014年6月至2015年2月期间到我院就诊并明确诊断的恶性腹水34例,良性腹水15例。采用实时荧光定量PCR方法检测腹水中COX-2 m RNA的表达水平,比较COX-2 m RNA在良恶性腹水中表达的差异,及在不同原发疾病中的表达情况。【结果】34例恶性腹水及15例良性腹水均扩增出COX-2,良恶性腹水中COX-2 m RNA的相对表达水平与性别、年龄构成比无关系,差异无统计学意义(P>0.05)。恶性腹水和良性腹水COX-2 m RNA的表达水平分别为7.93(5.04,16.58)和0.95(0.57,1.79),即恶性腹水COX-2 m RNA的表达水平显著高于良性腹水,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性腹水COX-2m RNA的表达水平在不同原发疾病中差异无统计学意义(P>0.05),良性腹水COX-2 m RNA表达水平在肝硬化和结核性腹膜炎中分别为1.55(0.55,2.55)和0.87(0.61,1.38),差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】COX-2 m RNA在恶性腹水中的表达水平显著高于良性腹水,在鉴别诊断腹水性质中具有重要的参考价值。

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察胃安宁含药血清在体外对人胃癌MGC-803细胞株COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响。方法:分别采用低、中、高不同浓度梯度的胃安宁含药血清干预胃癌细胞MGC-803 48 h,通过RT-PCR法分析胃安宁含药血清对该细胞系COX-2 mRNA、VEGF mRNA的表达情况。结果:与空白血清对照组相比,胃安宁小、中剂量含药血清组中COX-2 mRNA表达量明显降低(P<0.05),具有统计学意义;而大剂量含药血清组则变化不明显(P>0.05);胃安宁含药血清干预MGC-803细胞48 h后,各剂量含药血清组中VEGF mRNA表达量与空白血清对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:胃安宁颗粒具有一定的抗胃癌转移作用,其机制可能与胃安宁颗粒能抑制COX-2 mRNA的表达相关。

RNA聚合酶II中的CTD结构在mRNA转录和加工偶联过程中的重要作用

RNA聚合酶II最大亚基末端的羧基端结构域(CTD)是由以七氨基酸($CTyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser-)为重复单位的高度保守的重复序列组成的。因其结构与功能上的特殊性,它在近年来受到学术界的广泛关注。诸多的实验表明,该结构可通过与mRNA加工因子的相互作用而对其加工过程产生直接或间接的影响,在mRNA的转录和加工的偶联过程中具有重要的作用。本文即是根据近年来的实验结果对其结构和功能做出的综述性介绍。

和胃反流康对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及COX-2mRNA表达的影响

目的利用分子生物学技术,通过体内实验,观察和胃反流康对实验性胆汁反流性胃炎模型大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA表达的影响。方法将60只SPF级大鼠随机分为6组,即空白组、模型组、和胃反流康高、中、低剂量组(54.6 g·kg^(-1),27.3 g·kg^(-1),13.7 g·kg^(-1))、阳性药物(吗丁啉)组,每组10只。配制反流液,除空白组外,其余各组均采用灌胃方式建立胆汁反流性胃炎大鼠模型。分别通过Western blot法及实时荧光定量PCR法,检测大鼠胃窦部胃黏膜组织中p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达,观察和胃反流康对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA表达水平的影响。结果和胃反流康可显著抑制大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达水平(P<0.01)。结论和胃反流康可显著抑制胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达,减轻反流液对胃黏膜的炎性损害,具有防止BRG模型大鼠胃黏膜肠上皮化生及不典型增生等癌前病变发生的作用。

合募配穴针刺对胃炎模型大鼠下丘脑、胃cox-2 mRNA表达的影响

目的:探讨环氧合酶m RNA(cox-2 m RNA)表达在合募配穴针刺防治急性胃炎中的效应机制。方法:将60只SD大鼠(180-220 g,雄性)按计算机随机生成的随机数字表法分为空白对照组、抓取组、模型组、中脘穴组、后三里穴组、合募配穴组(中脘穴+后三里穴组)6组,每组10只。采用烈性白酒灌胃法复制急性胃炎大鼠模型。针刺组大鼠依照分组要求取相应穴位,均采用捻转平补平泻法针刺(捻转幅度180°,频率60-80次/min),1次/d,每次20 min,造模前连续针刺6 d,造模后,连续针刺3 d。治疗结束后用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)技术检测胃和下丘脑组织cox-2 m RNA的表达变化。结果:与空白对照组相比,抓取组胃组织与下丘脑组织中cox-2m RNA表达水平显著升高(P<0.05);与抓取组相比,模型组胃组织与下丘脑组织中cox-2 m RNA表达水平有极显著性升高(P<0.01);与模型组相比,3个针刺组胃组织与下丘脑组织中cox-2 m RNA的表达均有极显著性下调(P<0.01);3个针刺组组间比较,胃组织中cox-2 m RNA的表达无显著性差异(P>0.05),合募配穴组下丘脑组织cox-2m RNA的表达量最低,与中脘穴组相比有极显著性差异(P<0.01),与后三里穴组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:针刺防治酒精性胃炎的机制可能与通过抑制胃、下丘脑组织cox-2 m RNA表达密切相关;在降低下丘脑cox-2m RNA表达水平方面,配穴(合募配穴)效果优于单穴(后三里穴或中脘穴)作用,具有一定特异性。

Peroxiredoxin II mRNA在小鼠卵泡发育中定位的研究

目的 观察PeroxiredoxinIImRNA在小鼠卵巢各级卵泡和MII卵中的分布 ,为了解PeroxiredoxinII在卵母细胞发育及成熟过程中的功能意义提供形态学依据。 方法 原位杂交方法。 结果 在小鼠卵巢内 ,原始卵泡的初级卵母细胞未检到PeroxiredoxinIImRNA的杂交信号 ,初级卵泡的初级卵母细胞可检到杂交信号 ,次级卵泡和近成熟卵泡中卵母细胞的信号明显增强。离开卵巢的GV卵也能检到较强的杂交信号 ,排到输卵管的次级卵母细胞 (MII卵 )杂交信号与GV卵相比明显减弱。从原始卵泡到近成熟卵泡周围的卵泡细胞均可检到杂交信号 ,其信号强度在卵泡发育成熟过程中未见有明显变化。卵母细胞和卵泡细胞的PeroxiredoxinIImRNA杂交信号均分布在胞质。 结论 提示PeroxiredoxinII可能参与了卵母细胞生长发育和卵母细胞成熟过程的调节。

益气养阴活血法对新诊断2型糖尿病亚临床动脉粥样硬化机体COX-2mRNA表达的影响

目的:观察具有益气养阴活血功效的丹蛭降糖胶囊(DJC)对新诊断2型糖尿病亚临床动脉粥样硬化机体COX-2mRNA表达的影响。方法:将60例新诊断2型糖尿病亚临床动脉粥样硬化气虚阴亏血瘀证患者按随机数字表随机分为治疗组和对照组,2组均常规给予西药口服降糖治疗,治疗组在口服降糖治疗的同时,加用丹蛭降糖胶囊,2组疗程均为3个月(12周)。分别计算治疗前后2组中医证候积分并检测FPG、2hPG、HbA1c、BMI、SBP、DBP、血脂以及COX-2mRNA表达的水平。结果:治疗12周后治疗组有效率为82.14%,对照组为55.17%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后中医证候积分与对照组相比,优于对照组(P<0.05),与同组治疗前相比有明显改善(P<0.01)。对照组、治疗组新诊断2型糖尿病亚临床动脉粥样硬化患者COX-2mRNA表达水平均明显高于健康对照组(P<0.05或0.01);对照组COX-2mRNA表达水平高于治疗组(P<0.05或0.01),且治疗组COX-2mRNA表达水平高于健康对照组组(P<0.01)。结论:益气养阴活血法可通过下调炎症介质COX-2mRNA的表达而改善新诊断2型糖尿病机体血管内皮细胞功能。

利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2 mRNA表达的影响

目的探讨利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2mRNA表达的影响。方法选取32只雄性新西兰大白兔,其中正常对照组8只(A组),24只硅橡胶圈兔颈动脉粥样斑块的动物模型。将模型兔随机分为颈动脉斑块无干预组(B组)、小剂量利舒康治疗组(50mg/kg,C组),大剂量利舒康治疗组(400mg/kg,D组),每组8只。治疗4周后取双侧颈动脉并分为平等2段,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测A、B、C、D组COX-2mRNA的相对表达量。结果与A组比较,B组颈动脉粥样硬化模型兔的斑块COX-2mRNA表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D组颈动脉斑块COX-2mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利舒康的干预下兔颈动脉粥样斑块的COX-2mRNA下调,有可能具有抗动脉粥样硬化的炎性反应作用。

早期糖尿病大鼠背根节COX-2 mRNA和血中PGE_2的变化

目的研究早期糖尿病背根节(DRG)中COX-2mRNA及血中PGE2的变化,进一步探讨糖尿病神经血管并发症的发病机制。方法大鼠单次注射链佐霉素60mg·kg-1制作糖尿病模型;用RTPCR技术半定量测定DRG中COX2mRNA;用放射免疫法检测血中PGE2的浓度。结果在早期糖尿病,DRG中COX2mRNA与βactinmRNA比值为0.44±0.02(1周),0.83±0.03(3周),其余对照组,4周和8周组未检出;血中PGE2的浓度分别为453.3±172.8(1周),2500±592.14(3周),380±112.3(4周)和740±173.2(8周)pg·ml-1,其中对照组未检出。结论糖尿病早期DRG中即有COX2mRNA及血中PGE2的改变,DRG中COX2mRNA的改变可能部分影响血中PGE2浓度。

不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2 mRNA表达的差异

背景:COX-2基因实际存在于关节成纤维样滑膜细胞里,影响骨关节炎症的发生、发展。阐明不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2基因表达量的差异对进一步深入了解骨关节炎的发生与发展,以及滑膜细胞在这一过程中的作用,具有重要的理论意义。目的:分析COX-2 mRNA在不同分期骨关节炎成纤维样滑膜细胞中表达的差异。方法:收集膝骨关节炎病变滑膜44例及正常滑膜12例,经原代细胞培养生长至4代的成纤维样滑膜细胞用于实验,应用实时荧光定量RT-PCR检测骨关节炎和正常成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA的表达情况,最后使用2-ΔΔCt方法进行相对定量分析。结果与结论:COX-2 mRNA在骨关节炎的成纤维样滑膜细胞中的表达明显高于正常成纤维样滑膜细胞(P<0.05),其中骨关节炎早期组表达最高,与骨关节炎中期组、晚期组比较差异有显著性意义(P<0.05),骨关节炎中期组与晚期组中表达量差异无显著性意义(P>0.05)。结果说明COX-2mRNA可能是骨关节炎症病变过程中的重要生物学指标,且主要起作用于骨关节炎病变早期。

尿Cox-2蛋白与CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值

目的:评价尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白、CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。方法:选择78例膀胱移行细胞癌和30例非膀胱肿瘤患者,同时行尿Cox-2蛋白、CK20 mRNA和尿脱落细胞学检查,比较各种方法的敏感性、特异性和Youden指数。结果:尿Cox-2蛋白、CK20mRNA和尿脱落细胞学的敏感性分别为89.7%,66.7%,26.9%;特异性分别为93.3%、86.7%和100%;Youden指数分别为83.1%、53.4%和26.9%。尿Cox-2蛋白和CK20 mRNA的敏感性和Youden指数均高于尿脱落细胞学(P<0.05),同时尿Cox-2蛋白的敏感性和Youden指数高于CK20 mRNA(P<0.05)。结论:尿Cox-2蛋白和CK20mRNA检测的高敏感性、高特异性为膀胱癌提供了一个简单无创的检测方法,非常适合于复发率很高的膀胱癌的诊断与随访。

不同灸量麦粒灸对CSR大鼠PGE2、COX-2mRNA及其蛋白表达的影响

目的：通过观察不同灸量麦粒灸对CSR大鼠PGE2、COX-2mRNA及其蛋白表达的影响,探讨麦粒灸干预CSR的量效关系。方法：（1）采用SPF级雌雄各半Wistar大鼠60只,随机平均分为：正常组、模型组、麦粒灸3壮组、麦粒灸6壮组、麦粒灸9壮组5组各12只;（2）造模成功后,选用直径约0. 5 cm,高约0. 5 cm的圆锥形艾炷分别对3、6、9壮组大鼠大椎穴进行施灸,1次/d,连续施灸7 d后处死大鼠;（3）取大鼠颈动脉血、脊髓及神经根组织,采用放射性免疫分析血浆PGE2含量,并采用荧光定量PCR法及免疫组化法分别检测大鼠脊髓及神经根组织COX-2mRNA及COX-2蛋白表达情况。结果：（1）模型组与正常组比较,大鼠压线处脊髓、神经根组织COX-2、COX-2mRNA表达及血浆PGE2浓度比较具有显著性差异（P 〈0. 01）;（2）干预后,麦粒灸组大鼠血浆PGE2浓度、组织COX-2mRNA及其蛋白表达与模型组比较（均P 〈0. 01）;（3）麦粒灸6壮组PGE2浓度、COX-2mRNA及其蛋白表达与3、9壮组比较具有显著性差异（P〈0. 01）。结论：不同灸量的麦粒灸对颈椎病神经根损伤后PGE2含量、COX-2mRNA及其蛋白表达具有调节作用,其中6壮组的调节作用优于3、9壮组。

乳腺癌患者COX-2 mRNA表达与雌激素受体水平的相关性研究

目的通过分析人乳腺癌COX-2mRNA表达与雌激素受体水平的相关性,以探讨COX-2在人乳腺癌发病机制中的作用。方法选择17例浸润性乳腺癌患者冰冻癌组织,采用定量RT-PCR方法癌组织中COX-2mRNA水平。用配体结合方法测定雌二醇受体(ER)及孕酮受体(PR)水平。结果COX-2mRNA表达与PR呈正相关(P<0.05)。结论人乳腺癌患者COX-2mRNA表达与PR水平呈正相关,PR和COX-2mRNA测定有助于选择治疗方案和判定预后。

尿Cox-2蛋白、Survivin mRNA和脱落细胞学检查对膀胱移行细胞癌的诊断价值

对60例膀胱移行细胞癌和30例非膀胱肿瘤患者尿液进行尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白、Survivin mR-NA和脱落细胞学检测。发现尿Cox-2蛋白检测的敏感性和Youden指数均高于尿Survivin mRNA,而尿Survivin mRNA检测的敏感性和Youden指数明显高于尿脱落细胞学。认为尿Cox-2蛋白和尿Survivin mRNA检测提高了膀胱移行细胞癌的早期诊断率。

湿疹Ⅰ号方对湿热蕴结型急性湿疹COX-2mRNA表达的影响

目的:观察湿疹Ⅰ号方对湿热蕴结型急性湿疹COX-2mRNA表达的影响。方法:选择116例湿热蕴结型急性湿疹患者随机分为对照组和治疗组,对照组采用常规西医治疗,治疗组采用湿疹Ⅰ号方治疗。结果:治疗后,两组患者COX-2mRNA表达均降低,其中治疗组差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组治疗后COX-2mRNA表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者EASI评分均降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后EASI评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:湿疹Ⅰ号方治疗湿热蕴结型急性湿疹有较好疗效,可抑制COX-2mRNA表达。

COX-2基因mRNA在非小细胞肺癌中的表达

目的检测非小细胞肺癌COX-2基因mRNA的表达水平并探讨其临床意义。方法运用两步法RT-PCR技术检测83例非小细胞肺癌组织和24例支良性非癌肺组织中COX-2基因mRNA的表达水平。结果 83例肺癌组织中检测出44例(53.01%)阳性,24例非癌肺组织中检测出2例(8.33%)阳性,其中在腺癌表达率67.31%显著高于鳞癌表达率35.48%,差异有统计学意义(P=0.005),淋巴结转移组中表达率(65.85%)显著高于无淋巴结转移组(42.86%)(P=0.036)。低分化组中表达率(85.00%)显著高于高、中分化组表达率(55.56%)(P=0.018)。结论 COX-2基因在肺癌组织与非癌肺组织中mRNA表达差异有统计学意义(P=0.000),COX-2表达与肺癌病理类型密切相关,揭示了COX-2可以作为判断病情和预后评价的指标。