粗根荨麻水提取部分对AA大鼠腹腔巨噬细胞PGE_2水平及体外LPS诱导腹腔巨噬细胞COX-2 mRNA表达的影响

目的观察滇产粗根荨麻水提取部分Urtica macrorrhiza Hand-Mazz,Ur对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages,PMφ)分泌前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平及对体外LPS诱导PMφCOX-2 mRNA表达的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎可能的作用机制。方法建立AA大鼠模型,Ur水提取部分连续灌胃给药14 d或21 d后分次获取PMφ,LPS诱导PGE2的产生,用酶联免疫吸附法检测培养上清液中PGE2水平。体外培养PMφ,RT-PCR方法检测LPS诱导COX-2 mRNA表达。结果Ur水提取部分(400,200 mg/kg)对LPS诱导的AA PMφ分泌PGE2水平有明显抑制作用。Ur(200,100μg/ml)能显著抑制LPS诱导的COX-2 mRNA的表达。结论滇产粗根荨麻水提取部分对佐剂性关节炎的治疗作用可能与其抑制PMφ分泌PGE2及COX-2 mRNA表达有关。

COX-2反义寡核苷酸对胰腺癌PC-3细胞株COX-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨环氧合酶 (COX) 2反义寡核苷酸 (ODNs)对胰腺癌PC 3细胞株COX 2mRNA和蛋白表达的影响 ,并进一步阐明COX 2反义ODNs基因治疗胰腺癌的可行性。方法 设计和合成COX 2反义ODNs,体外转染胰腺癌PC 3细胞 ,然后通过荧光显微镜、RT PCR及Westernblotting证实转染效果。结果 转染COX 2反义ODNs后 ,PC 3细胞COX 2mRNA和蛋白表达均下降 ,且体现出一定的剂量和时间依赖性关系。结论 COX 2反义ODNs转染胰腺癌PC 3细胞株后 ,可下调细胞中COX 2mRNA和蛋白表达 ,COX 2反义ODNs有可能达到胰腺癌基因治疗的效果。

邻苯二甲酸二乙基己酯对成年大鼠睾丸前列腺素E_2含量及COX-2 mRNA表达的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DE-HP)对成年大鼠睾丸前列腺素E2(PGE2)含量及环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:雄性SD成年大鼠40只,随机分成4组,每组10只,设3个染毒剂量组(10、100、500 mg.kg-1.d-1DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养4周后处死。用ELISA测定睾丸组织PGE2含量;应用免疫组化法检测40只雄性SD成年大鼠睾丸组织中COX-2的表达及其定位情况;RT-PCR法检测各组睾丸组织COX-2 mRNA表达及其定位情况。结果:实验组睾丸组织中PGE2含量和睾丸组织的COX-2mRNA表达均低于对照组,COX-2则主要表达于精原细胞。结论:DEHP能使成年大鼠睾丸生精细胞功能损伤,使睾丸组织PGE2合成降低,其机制可能与下调COX-2 mRNA表达有关。

电热针对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞COX-2 mRNA表达的影响

目的:探索电热针对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠踝关节滑膜细胞环氧化酶-2 mRNA(COX-2 mRNA)表达的影响。方法:随机将50只Wistar大鼠分为正常组、模型组、电热针高电量治疗组(高电组)、电热针低电量治疗组(低电组)、电热针无电量治疗组(无电组)。Ⅱ型胶原足底皮下注射造模;其中正常组足底假免疫时给予生理盐水。电热针组于致炎后第21 d开始治疗,取双侧“阳陵泉”穴,直刺8 mm,每次20 min,隔天1次,共治疗20次。其中高电组电流强度为40 mA,低电组电流强度为20 mA。治疗结束后,各组取左踝关节组织,以原位杂交法检测踝关节滑膜细胞COX-2 mRNA表达。结果:造模后,各造模动物的踝关节肿胀程度比正常组显著增加(P<0.01);电热针治疗后,各治疗组与模型组比较踝关节肿胀程度有显著减轻(P<0.01)。模型组踝关节滑膜COX-2 mRNA表达较正常组显著增高;与模型组相比,高电组踝关节滑膜COX-2 mRNA表达显著降低(P<0.05),低电组、无电组与模型组则无明显差异。结论:电热针具有抗炎作用,仅有高电量电热针治疗可以降低CIA大鼠踝关节滑膜细胞COX-2 mR-NA的表达。

腹水COX-2 mRNA的表达及意义

【目的】通过检测腹水COX-2 m RNA的表达水平,探讨COX-2 m RNA对腹水鉴别诊断的价值和意义。【方法】收集2014年6月至2015年2月期间到我院就诊并明确诊断的恶性腹水34例,良性腹水15例。采用实时荧光定量PCR方法检测腹水中COX-2 m RNA的表达水平,比较COX-2 m RNA在良恶性腹水中表达的差异,及在不同原发疾病中的表达情况。【结果】34例恶性腹水及15例良性腹水均扩增出COX-2,良恶性腹水中COX-2 m RNA的相对表达水平与性别、年龄构成比无关系,差异无统计学意义(P>0.05)。恶性腹水和良性腹水COX-2 m RNA的表达水平分别为7.93(5.04,16.58)和0.95(0.57,1.79),即恶性腹水COX-2 m RNA的表达水平显著高于良性腹水,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性腹水COX-2m RNA的表达水平在不同原发疾病中差异无统计学意义(P>0.05),良性腹水COX-2 m RNA表达水平在肝硬化和结核性腹膜炎中分别为1.55(0.55,2.55)和0.87(0.61,1.38),差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】COX-2 m RNA在恶性腹水中的表达水平显著高于良性腹水,在鉴别诊断腹水性质中具有重要的参考价值。

食管鳞癌中COX-2 mRNA的表达以及NSAID对其的影响

目的:检测人类食管鳞癌组织和细胞中COX-2 mRNA的表达及NSAID对其的影响,探讨COX-2与食管鳞癌发病机制之间可能存在的关系. 方法:用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测22例食管鳞癌患者液氮冻存的食管鳞癌组织和癌周正常食管鳞状上皮组织标本:COX-2 mRNA的表达.将人类食管鳞癌细胞株与阿司匹林或尼美舒利共同孵育后,用噻唑蓝法定量检测细胞增生情况,用RT-PCR法检测其COX-2 mRNA的表达情况. 结果:在22例食管鳞癌组织标本中有12例(54.5%)COX-2 mRNA表达阳性,但在癌周正常食管鳞状上皮组织标本均未检测到COX-2 mRNA表达.细胞培养结果表明,阿司匹林和尼美舒利对EC-9706细胞株的增生和COX-2 mRNA 表达均有影响;但对EC-109细胞株,仅阿司匹林对细胞的增生和COX-2 mRNA表达有影响. 结论:人类食管鳞癌常表达COX-2 mRNA,提示COX-2 有可能在食管鳞癌的发生机制中起重要作用,而且NSAID 很可能有助于预防和治疗此病.

COX-2 mRNA在膝骨关节炎病变过程中的作用研究

目的探讨COX-2 mRNA在膝骨关节炎(KOA)病变过程中的作用。方法 76例膝骨关节炎患者(研究组)根据病变进展分为初期、中期、晚期三组,选取15例非膝骨关节炎患者为对照组,比较各组的COX-2 m RNA以及COX-2蛋白表达水平。结果研究组、初期组、中期组、晚期组的成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA及蛋白表达灰度值显著高于对照组(P<0.05);初期组的成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA及蛋白表达灰度值显著高于中期组、晚期组(P <0.05)。结论 COX-2mRNA在膝骨关节炎患者病变初期表达水平较高,检测COX-2 m RNA表达水平有助于为膝骨关节炎患者的诊治及预后提供指导。

从虚郁毒瘀立法组方对萎缩性胃炎胃黏膜细胞COX-2 mRNA表达的影响

目的:观测从虚郁毒瘀立法组方对萎缩性胃炎鼠模型胃黏膜组织COX-2mRNA表达的影响。方法:采用乙醇+去氧胆酸钠+氨水+吲哚美辛+饥饱失常综合法复制萎缩性胃炎鼠模型,并用从虚郁毒瘀立法组方低、中、高剂量分别进行干预,观测其对萎缩性胃炎模型鼠胃黏膜组织COX-2mRNA表达的作用。结果:从虚郁毒瘀立法组方中剂量组可明显改善萎缩性鼠模型胃黏膜细胞COX-2mRNA表达。结论:从虚郁毒瘀立法组方可调节萎缩性胃炎黏膜组织COX-2 mRNA的表达。

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察胃安宁含药血清在体外对人胃癌MGC-803细胞株COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响。方法:分别采用低、中、高不同浓度梯度的胃安宁含药血清干预胃癌细胞MGC-803 48 h,通过RT-PCR法分析胃安宁含药血清对该细胞系COX-2 mRNA、VEGF mRNA的表达情况。结果:与空白血清对照组相比,胃安宁小、中剂量含药血清组中COX-2 mRNA表达量明显降低(P<0.05),具有统计学意义;而大剂量含药血清组则变化不明显(P>0.05);胃安宁含药血清干预MGC-803细胞48 h后,各剂量含药血清组中VEGF mRNA表达量与空白血清对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:胃安宁颗粒具有一定的抗胃癌转移作用,其机制可能与胃安宁颗粒能抑制COX-2 mRNA的表达相关。

江南卷柏总黄酮对HT-29细胞增殖及COX-2 mRNA表达的抑制作用

目的:研究江南卷柏总黄酮对环氧化酶-2(COX-2) mRNA的抑制作用。方法:以江南卷柏总黄酮作用于人结肠癌HT-29细胞,应用氮蓝四唑盐实验(MTT法)计算其不同浓度、不同作用时间对细胞生长的抑制率,分析其对细胞增殖的影响;药物设高中低剂量组和阴性对照组共4个组别处理细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增细胞中提取的COX-2 mRNA,用电泳凝胶成像自动分析系统检测各扩增带COX-2 mRNA水平。结果:江南卷柏总黄酮有一定的抗肿瘤作用,与阴性对照组比较,其可以在mRNA水平上抑制COX-2的表达,且呈量效关系。结论:江南卷柏总黄酮能在mRNA水平上抑制COX-2,进而抑制COX-2蛋白质表达,降低PGE2产量,可能是江南卷柏抗肿瘤作用的机制之一。

肺腺癌组织中COX-2 mRNA的表达

目的 :研究肺腺癌组织中环氧合酶 2 (COX 2 )的表达及其与转移的关系。方法 :应用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR) ,对 4 5例肺腺癌 (临床分期Ⅰ期 1 4例 ,Ⅱ期 2 0例 ,Ⅲa期 8例 ,Ⅲb期 3例 ,淋巴结转移者 2 0例 ,无淋巴结转移者 2 5例 )和 1 5例癌旁组织COX 2mRNA的表达进行半定量分析。结果 :COX 2mRNA在肺腺癌组织中的表达 (1 .81 3± 0 .0 6 3)高于癌旁肺组织 (0 .6 2 4± 0 .0 4 2 ) (P <0 .0 5 ) ;有淋巴结转移组肺腺癌组织COX 2mRNA的表达为 2 .98± 0 .0 1 ,高于无淋巴结转移组 1 .0 1± 0 .96 (P <0 .0 5 ) ;COX 2mRNA表达随肺腺癌的临床分期增高而增高。结论 :COX 2可作为肺腺癌的重要生物学指标 ,有助于对肺腺癌生物学行为的了解 。

小檗碱抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白的表达：c-JUN末端激酶信号转导途径

背景:当细胞受到各种细胞因子及环境刺激时,c-JUN末端激酶信号转导通路可以通过激活不同的受体,对细胞的发育、分化、凋亡、癌变、炎症和免疫反应起调节作用。目的:观察中药小檗碱是否通过c-JUN末端激酶信号转导途径抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白表达。方法:取人外周静脉血分离培养单核细胞,分为5组培养:空白对照组、脂多糖组、脂多糖+小檗碱25μmol/L组、脂多糖+小檗碱50μmol/L组、脂多糖+小檗碱100μmol/L组。分别在培养后30min,6h,12h,24h提取细胞,采用RT-PCR测定COX-2 mRNA水平,采用Western blot测定c-JUN末端激酶及COX-2蛋白水平。同时加入选择性c-JUN末端激酶抑制剂,测定COX-2 mRNA及蛋白水平。结果与结论:与空白对照组相比,脂多糖组COX-2 mRNA及蛋白表达明显增强(P<0.01)。加入不同浓度小檗碱后COX-2 mRNA及蛋白表达明显被抑制(P<0.05),且随着浓度增加,抑制作用更明显,给药后12h,抑制作用最强。但c-JUN末端激酶活性水平无明显变化(P>0.05),脂多糖+小檗碱100μmol/L组c-JUN末端激酶活性水平变化明显(P<0.05)。加入c-JUN末端激酶抑制剂后,COX-2 mRNA及蛋白水平降低明显(P<0.05)。证实小檗碱能抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白水平,并呈浓度依赖性,高浓度小檗碱对c-JUN末端激酶活性蛋白表达有明显抑制作用,其可能通过c-JUN末端激酶信号转导途径抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白表达。

大鼠动脉粥样硬化COX-2 mRNA表达及白黎芦醇干预的实验研究

目的观察白黎芦醇对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠主动脉粥样硬化段COX-2 mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠高脂饲料喂养,复制食饵性AS早期模型,用药组灌胃白藜芦醇。造模给药4w后,用RT-PCR方法观察对照组、模型组和用药组主动脉壁粥样硬化段COX-2 mRNA的表达。结果用药组降低AS早期主动脉硬化段COX-2表达,阻止AS的进程。结论白藜芦醇对大鼠AS具有保护作用,并能提高AS斑块稳定性。

合募配穴针刺对胃炎模型大鼠下丘脑、胃cox-2 mRNA表达的影响

目的:探讨环氧合酶m RNA(cox-2 m RNA)表达在合募配穴针刺防治急性胃炎中的效应机制。方法:将60只SD大鼠(180-220 g,雄性)按计算机随机生成的随机数字表法分为空白对照组、抓取组、模型组、中脘穴组、后三里穴组、合募配穴组(中脘穴+后三里穴组)6组,每组10只。采用烈性白酒灌胃法复制急性胃炎大鼠模型。针刺组大鼠依照分组要求取相应穴位,均采用捻转平补平泻法针刺(捻转幅度180°,频率60-80次/min),1次/d,每次20 min,造模前连续针刺6 d,造模后,连续针刺3 d。治疗结束后用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)技术检测胃和下丘脑组织cox-2 m RNA的表达变化。结果:与空白对照组相比,抓取组胃组织与下丘脑组织中cox-2m RNA表达水平显著升高(P<0.05);与抓取组相比,模型组胃组织与下丘脑组织中cox-2 m RNA表达水平有极显著性升高(P<0.01);与模型组相比,3个针刺组胃组织与下丘脑组织中cox-2 m RNA的表达均有极显著性下调(P<0.01);3个针刺组组间比较,胃组织中cox-2 m RNA的表达无显著性差异(P>0.05),合募配穴组下丘脑组织cox-2m RNA的表达量最低,与中脘穴组相比有极显著性差异(P<0.01),与后三里穴组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:针刺防治酒精性胃炎的机制可能与通过抑制胃、下丘脑组织cox-2 m RNA表达密切相关;在降低下丘脑cox-2m RNA表达水平方面,配穴(合募配穴)效果优于单穴(后三里穴或中脘穴)作用,具有一定特异性。

利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2 mRNA表达的影响

目的探讨利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2mRNA表达的影响。方法选取32只雄性新西兰大白兔,其中正常对照组8只(A组),24只硅橡胶圈兔颈动脉粥样斑块的动物模型。将模型兔随机分为颈动脉斑块无干预组(B组)、小剂量利舒康治疗组(50mg/kg,C组),大剂量利舒康治疗组(400mg/kg,D组),每组8只。治疗4周后取双侧颈动脉并分为平等2段,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测A、B、C、D组COX-2mRNA的相对表达量。结果与A组比较,B组颈动脉粥样硬化模型兔的斑块COX-2mRNA表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D组颈动脉斑块COX-2mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利舒康的干预下兔颈动脉粥样斑块的COX-2mRNA下调,有可能具有抗动脉粥样硬化的炎性反应作用。

早期糖尿病大鼠背根节COX-2 mRNA和血中PGE_2的变化

目的研究早期糖尿病背根节(DRG)中COX-2mRNA及血中PGE2的变化,进一步探讨糖尿病神经血管并发症的发病机制。方法大鼠单次注射链佐霉素60mg·kg-1制作糖尿病模型;用RTPCR技术半定量测定DRG中COX2mRNA;用放射免疫法检测血中PGE2的浓度。结果在早期糖尿病,DRG中COX2mRNA与βactinmRNA比值为0.44±0.02(1周),0.83±0.03(3周),其余对照组,4周和8周组未检出;血中PGE2的浓度分别为453.3±172.8(1周),2500±592.14(3周),380±112.3(4周)和740±173.2(8周)pg·ml-1,其中对照组未检出。结论糖尿病早期DRG中即有COX2mRNA及血中PGE2的改变,DRG中COX2mRNA的改变可能部分影响血中PGE2浓度。

不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2 mRNA表达的差异

背景:COX-2基因实际存在于关节成纤维样滑膜细胞里,影响骨关节炎症的发生、发展。阐明不同分期骨关节炎滑膜细胞中COX-2基因表达量的差异对进一步深入了解骨关节炎的发生与发展,以及滑膜细胞在这一过程中的作用,具有重要的理论意义。目的:分析COX-2 mRNA在不同分期骨关节炎成纤维样滑膜细胞中表达的差异。方法:收集膝骨关节炎病变滑膜44例及正常滑膜12例,经原代细胞培养生长至4代的成纤维样滑膜细胞用于实验,应用实时荧光定量RT-PCR检测骨关节炎和正常成纤维样滑膜细胞中COX-2 mRNA的表达情况,最后使用2-ΔΔCt方法进行相对定量分析。结果与结论:COX-2 mRNA在骨关节炎的成纤维样滑膜细胞中的表达明显高于正常成纤维样滑膜细胞(P<0.05),其中骨关节炎早期组表达最高,与骨关节炎中期组、晚期组比较差异有显著性意义(P<0.05),骨关节炎中期组与晚期组中表达量差异无显著性意义(P>0.05)。结果说明COX-2mRNA可能是骨关节炎症病变过程中的重要生物学指标,且主要起作用于骨关节炎病变早期。

铁筷子提取物对肿瘤细胞增殖及COX-2 mRNA表达的抑制作用

研究不同铁筷子提取物对肿瘤细胞增殖及COX-2mRNA表达的抑制作用。以铁筷子醇总提取物(TKZ1)、正丁醇萃取部位(TKZ2)、乙酸乙酯萃取部位(TKZ3)分别作用于DU145、PC3、HeLa、HT-29、HepG2等肿瘤细胞,应用噻唑蓝实验(MTT法)计算其对细胞增殖的抑制作用,应用荧光定量PCR技术检测TKZ1、TKZ2、TKZ3处理后的各肿瘤细胞中COX-2mRNA的表达情况。结果表明:TKZ1、TKZ2、TKZ3均能显著抑制多种肿瘤细胞的增殖,与阴性对照组比较,其可以在mRNA水平上抑制COX-2的表达,且呈明显的量效关系。说明铁筷子提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,其抗瘤机制可能与抑制肿瘤细胞中COX-2mRNA的表达有关。

宫颈癌及癌前病变组织中COX-2 mRNA的表达及临床意义

目的为寻找宫颈癌早期的基因诊断指标及基因治疗方法提供依据。方法应用半定量RT-PCR方法检测宫颈癌及宫颈癌前病变组织中的COX-2mRNA的表达水平。结果COX-2mRNA在宫颈癌中的表达率和相对含量高于宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织。其在宫颈CINⅢ及原位癌和慢性宫颈炎组织中的表达率及相对含量比较均无明显差异(P>0.05)。结论宫颈癌组织、宫颈CINⅢ及原位癌组织中存在COX-2的表达,COX-2mRNA的表达与癌早期的形成、分期、分化无明显关系(P>0.05),与淋巴结转移有显著性差异(P<0.05)。

乳腺癌患者COX-2 mRNA表达与雌激素受体水平的相关性研究

目的通过分析人乳腺癌COX-2mRNA表达与雌激素受体水平的相关性,以探讨COX-2在人乳腺癌发病机制中的作用。方法选择17例浸润性乳腺癌患者冰冻癌组织,采用定量RT-PCR方法癌组织中COX-2mRNA水平。用配体结合方法测定雌二醇受体(ER)及孕酮受体(PR)水平。结果COX-2mRNA表达与PR呈正相关(P<0.05)。结论人乳腺癌患者COX-2mRNA表达与PR水平呈正相关,PR和COX-2mRNA测定有助于选择治疗方案和判定预后。