近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR的表达及酶学性质研究

通过构建重组菌Escherichia coli BL21(DE3)/pACYC Duet-1-cpcr,表达带有His标签的近平滑假丝酵母Candida parapsilosis ATCC 7330羰基还原酶CpCR基因,并采用Ni-Agarose亲和层析对重组酶CpCR进行分离纯化和酶学性质研究。重组酶CpCR的基因序列全长1107 bp,含有368个氨基酸,分子质量在41 kDa左右,比酶活力为20 U/mg;该酶在4~33℃的温度范围稳定性较好,相对酶活力在80%以上,T 50值为37℃;该酶的pH适宜范围在6.2~7.5,在中性条件下稳定性最好;Cu^2+对该酶有强烈的抑制作用,在1 mmol/L条件下,相对酶活力下降30%,在5 mmol/L条件下,相对酶活下降50%;该酶对底物苯甲醛、正丁醛亲和能力强于4-氯-3-酮基-丁酸乙酯(4-chlor-3-keto-butyrate-ethyl ester,COBE),对苯甲醛或正丁醛的催化效率是对COBE的20倍左右;该酶是一种NADPH依赖型的羰基还原酶。本研究为羰基还原酶CpCR分子改造和催化应用提供了重要的基础数据。

用于心肺脑复苏(CPCR)的离心血泵的优化设计

提出了心肺脑复苏（Cardiopulmonarycerebralresuscitation，CPCR）机中重要部件──离心血泵的要求，对现有不同血系进行比较与分析，提出初步的优化方案，给出了心肺复苏用泵的优化结构，并在此基础上对自行设计研制的泵的性能进行了测试，初步实验结果表明该泵的性能良好，其水力学性能满足心肺脑复苏机的需要。

生脉注射液合用护心通对CPCR成功率的影响

目的 探讨中西药结合对于心肺复苏后，在延续生命支持阶段维护心脏和循环功能、提高心肺脑复苏成功率的疗效。方法 69例心搏骤停经心肺复苏心搏恢复的患者，随机分为试验组35例和对照组34例，两组均按“2000年国际心肺复苏与心血管急救指南”进行积极的心肺复苏，其抢救措施和急救药物常规应用；试验组在上述救治基础上，在心搏恢复后即刻或延续生命支持阶段早期联合应用生脉注射液+护心通静脉滴注，每日1次，一般应用3—7d。结果 ①两组病例≤5min开始心肺复苏者心肺脑复苏成功率最高，6～10min次之，11-15min仍有可能复苏成功，组间比较无显著差异性，P=0．05；②各种原因所致的心搏骤停中，试验组心肺脑复苏成功率为0．63(22／35)，对照组为0．32(11／34．)，P<0．01；③试验组和对照组在各个时间段的心肺脑复苏成功病例数进行比较差异性显著，P<0．05；④对于心率(HR)、mBP、O2max、心肌酶谱、血液生化、肝肾功能、血气分析与酸碱平衡、WBC与N比值等项指标达到稳定或者平衡的时间分析，两组相比差异性显著，P<0．05。结论 生脉注射液和护心通二药在延续生命支持阶段联合应用，确有维护心脏和循环功能、提高心肺脑复苏成功率的良好疗效。

构建基于荧光多重cPCR的小鼠基因拷贝数检测方法

目的建立基于竞争性聚合酶链式反应(competitive polymerase chain reaction,cPCR)小鼠基因拷贝数变异(copy number variations,CNVs)的检测方法,用于检测野生小家鼠来源一号染色体替换系群体(population of specific chromosome 1 substitution strains,PCSSs)的CNVs。方法选取小鼠一号染色体上11个CNVs位点,及7、9和X染色体上各1个内对照位点,分别构建克隆质粒为竞争性粒模板,应用cPCR技术,建立荧光通用引物多重cPCR检测方法。结果多重cPCR方案适用于小鼠一号染色体上11个CNV位点的拷贝数检测,且能准确检测X染色体的拷贝数。结论实现小鼠快速、高通量的CNVs检测,可准确检测小鼠1号染色体中11个CNV位点的拷贝数变异。

病案教学在CPCR实验教学中的实践与思考

CPCR(cardiopulmonary cerebral resuscitation心肺脑复苏)实验教学过程中,以模拟ICU病房为条件,采用分组教学,事先设计典型病例输入高级护理模型所配置的电脑,让学生结合所学医学知识,进行综合判断,采取不同的急救措施。2002级、2003级的教学实践证明,该教学方法逼真形象,同时又能培养学生的应变能力,协作能力及综合应用能力。

CPCR的现代概念

急性职业中毒抢救中最先遇到的棘手问题往往是心跳呼吸骤停。这一问题的处理不仅直接决定抢救能否成功．而且与病人预后有密切关系。以往多强调心肺功能的恢复，故称为“心肺复苏”(CPR)。近十余年的研究表明脑乃是复苏的关键，脑的基本功能得以维持．复苏的真正目的才能达到。故目前多改称为“心肺脑复苏”，(CPCR，cardiopuLmonary cerebral resuscitation)，其重点在于强调快速及时的现场急救及积极有效的脑复苏措施。现将此一问题的动态简要介绍如下。

心肺脑复苏装置(CPCR)控制与检测系统初探

为了与作者所承担的国家自然科学基金项目“以膜肺为基础的脑保护机制的研究”配套 ,作者设计了以80 31芯片为控制核心 ,用变频器控制特制的同步电机 ,以压力、压差、温度传感器检测心脑肺复苏装置的体外循环状况 ,并将信息反馈给控制系统。为适应人体内血液流动情况 ,设计了恒速与脉动两种模式来驱动血泵。对血泵的调速及控制的测试验证这两种调速模式均能有效地实现调速功能。压力、温度和流量测量的精度远大于八位 A/D转换器的精度。其中 ,压力测量误差 <0 .9mm Hg,温度测量误差 <0 .2℃ ,流量测量误差 <0 .134 L/min。本设计对系统软件的设计考虑了后续开发的需要 ,考虑到多种实际情况 ,采用不同的方式进行处理。

CPCR后继发感染的分析及防治

心搏呼吸骤停的原因多种多样,CPCR的结果亦相差悬殊,因此CPCR后的处理十分复杂,涉及各个方面,除预防和纠正各种心律失常,维护心肾功能,纠正水、电解质紊乱及酸碱平衡失调外,预防感染是巩固CPCR成功的一个相当重要的环节,在临床护理与配合治疗方面尤为重要.

微课在高职护理专业急危重症护理CPCR教学中的实践探索

针对急危重症患者的护理内容受人重视,属于高职院校开设的护理专业核心课程的相关内容,其中包括心肺脑复苏(CPCR)。分析得出,导致心搏骤停的因素很多,复苏患者的结果与抢救的时间长短有关,体现了“时间即生命”。在更新CPCR的前提下,目前教学中涉及的理论以及实训教学中主要参考2020年心肺复苏指南,本文研究微课的教学作用,希望可以将学生掌握CPCR的意识以及其能力进一步提升。方法:研究微课应用于高职护理专业的急危重症病例护理CPCR的教学中的实际步骤以及效果。结论:应用微课,价值高,可以发挥积极作用,尤其是针对高职护理专业护理急危重症患者时使用CPCR的教学方面,意义重要,有助于教学效果的提升,在CPCR教学中起到较好效果,值得推广。

以临床胜任力为导向护理专业学生CPCR能力培养的教学研究

心肺脑复苏(CPCR)是护理专业学生学习最重要的操作之一。心脏骤停原因多样,抢救时间与复苏结果联系紧密。真正意义上的时间就是生命。CPCR不断更新,目前在教学中主要参考2020年心肺复苏指南。教学主要包括理论教学与实训教学。方法:探索学生培养临床胜任力方法。:结论多种教学措施应用,提高学生CPCR临床胜任力。

转录因子cpcR同源基因cpcR-c1和cpcR-t的功能鉴定

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)LM1212菌株与典型的Bt菌株表型不同,可分化形成芽胞、形成细胞和晶体产生细胞。在LM1212菌株中,转录因子CpcR不仅参与了细胞分化过程,而且能够激活晶体蛋白基因cry35-like的启动子(P_(35))。【目的】筛选cpcR同源基因,验证其生物学功能。【方法】本研究克隆了2个cpcR同源基因,来源于蜡样芽胞杆菌的cpcR-c1和来源于东洋芽胞杆菌的cpcR-t,将cpcR及其同源基因分别构建在pHT304-P_(35)-gfp、pHT304-P_(35)-lacZ报告载体上,获得的重组质粒转入无cpcR基因且无晶体蛋白基因的Bt HD73–菌株中。利用激光共聚焦显微镜观察重组菌HD–(cpcR-c1-P_(35)-gfp)和HD–(cpcR-t-P_(35)-gfp)的细胞表型并进行芽胞计数实验。测定HD–(cpcR-c1-P_(35)-lacZ)和HD–(cpcR-t-P_(35)-lacZ)菌株的β-半乳糖苷酶活性。【结果】与对照菌株相比,HD–(cpcR-c1-P_(35)-gfp)菌株和HD–(cpcR-t-P_(35)-gfp)菌株的芽胞细胞数分别降低了80.79%和90.14%,晶体产生细胞比例分别提高了7倍和9倍,并且gfp基因在这2个菌株中均能表达。β-半乳糖苷酶活性检测结果显示,启动子P_(35)在HD–(cpcR-c1-P_(35)-lacZ)菌株和HD–(cpcR-t-P_(35)-lacZ)菌株中有较高的转录活性。【结论】cpcR同源基因cpcR-c1、cpcR-t也能够影响细胞分化,激活P_(35)的转录,且cpcR-c1对P_(35)的激活能力大于cpcR。

CPCR的抢救与护理配合

心肺脑复苏（CPCR）成功的关键，是在心脏骤停发生（4min）内进行有效地生命支持。在临床实际抢救工作中熟练掌握心肺脑复苏的急救与护理，是提高复苏率的关键。心肺脑复苏（CPCR）护理是对心搏、呼吸骤停患者采取的一项护理急救措施。成人的生存链体现在4个“早期”：即①早期识别、求救；②早期CPCR；③早期电除颤；④早期高级生命支持、（ACLS）。这四个环节环环相扣，任何一环的削弱或缺失都会带来生存机会的丧失。

不同气管插管时间对心肺脑复苏效果的影响

为探讨气管插管时间与心肺脑复苏（CPCR）疗效的关系,我们对本院2006年2月～2009年12月363例实施CPCR患者的资料进行了回顾性分析。临床资料：急诊行CPCR患者363例,男203例、女160例,年龄11～87（53.5±22.2）岁,心跳呼吸骤停时间为2～26（9.9±7.1）min。心跳呼吸骤停原因主要有心源性疾病、严重创伤、脑出血、药物过量、窒息、呼吸衰竭、急性中毒、溺水及电击等。方法 ：363例患者根据气管插管时间不同分为两组。

重症监护室综合治疗脑复苏的的护理

目的探讨重症监护室(ICU)心脏骤停行脑复苏患者临床治疗过程中的护理措施。方法在综合治疗过程中实施24 h监测包括重要生命体征、意识、脑功能监测、脑水肿情况等并落实相应的护理措施。结果78例患者中脑复苏成功者28例(35.9%);基本正常出院22例(28.2%),严重后遗症或植物状态25例(32.1%),放弃治疗及死亡31例(39.7%)(包括6例脑复苏成功者)。结论落实好亚低温治疗的护理、防止脑水肿护理、加强监护及使用药物的观察护理等措施亦是配合脑复苏成功的关键。

心脏手术后心搏骤停复苏11例临床特点及护理对策

作者介绍了1998年11例心脏手术后心搏骤停实施心肺脑复苏（CPCR）患者的病例资料，复苏成功与康复出院率为64％。作者通过对CPCR患者的病情、心脏骤停诱因、心脏手术后CPCR特点等进行总结分析，结合ICU特点，从提高护士争分夺秒的抢救意识、提高开胸心脏按压（OCC）意识、提高护士业务素质、突出护理重点等方面，提出心脏外科ICU中CPCR的护理对策。