ACC-β/CPT-1β基因多态性与有氧耐力的相关性研究

目的:探讨乙酰辅酶A羧化酶-β(ACC-β)和肉碱脂酰转移酶-1β(CPT-1β)基因多态性与有氧耐力的相关性,寻找与有氧耐力表型相关的遗传学分子标记。方法:应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱检测技术,对123名中国北方汉族优秀长跑运动员与127名中国北方汉族普通大学生ACC-β和CPT-1β基因区的5个SNP位点进行解析并比较分析。结果:运动员组5个SNP位点的基因型和等位基因频率与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。ACC-β基因的rs2300455和rs2268393位点(D'=0.95,r2=0.161)存在强连锁不平衡。CPT-1β基因的rs470117和rs131758位点(D'=0.98,r2=0.535)存在强连锁不平衡。构建单体型分析,未发现不同单体型频率与有氧耐力表型相关联。结论:ACC-β基因rs2075260、rs2300455和rs2268393多态位点及CPT-1β基因rs470117、rs131758多态位点与有氧耐力不相关,不能作为耐力表型的遗传标记。

不同训练方式对静息骨骼肌糖酵解能力及线粒体PDK4、CPT-1基因转录的影响

目的:比较耐力训练和间歇性速度训练对静息骨骼肌糖酵解能力及线粒体PDK4、CPT-1基因转录的影响;方法:30只大鼠随机分为3组:安静组(C,n=10)、耐力训练组(E,n=10)、间歇性速度训练组(S,n=10),训练8周。间歇性速度训练:每天9～10次10s极量强度(≥42m/min)的跑台运动,间歇时间30～60s;耐力训练:每天30～60min低强度(≤16.7m/min)的持续跑台运动;每周均训练6天。最后一次训练结束后的24～48h内切取腓肠肌,比色法检测丙酮酸、乳酸、HK、PK活性,Real-timePCR检测PDK4、CPT-1的mR-NA表达;结果:1)E组和S组丙酮酸均非常显著地高于C组(P<0.01),E组与S组无显著差异;乳酸浓度E组与C组无显著差异,但S组显著高于E组(P<0.05)和C组(P<0.01);2)E组(P<0.05)和S组(P<0.01)HK活性显著高于C组,但E组、S组PK活性与C组无显著差异;E组与S组的HK、PK活性均无显著差异;3)E组PDK4mRNA表达显著低于C组(P<0.05),S组CPT-1mRNA表达显著高于C组(P<0.05),E组与S组的PDK4、CPT-1mRNA表达均无显著差异;结论:1)耐力训练与间歇性速度训练都能提高静息骨骼肌的丙酮酸水平,但只有间歇性速度训练提高静息骨骼肌的乳酸水平,说明间歇性速度训练很可能使骨骼肌在静息时的无氧代谢已处于活跃状态。耐力训练使丙酮酸升高则可能是脂肪酸氧化能力提高所必需的匹配效应;2)耐力训练与间歇性速度训练都能提高HK活性,但对PK活性无影响。耐力训练与间歇性速度训练在糖脂代谢中有着许多类似效应。间歇性速度训练也能作为一种节省时间的方式提高有氧代谢能力,但在提高有氧代谢能力的同时也能促进静息骨骼肌丙酮酸向乳酸的转化;3)耐力训练使PDK4转录抑制,间歇性速度训练使CPT-1转录上调,这与各训练方式下静息骨骼肌的乳酸水平有着高度一致性。

有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌PPARα及CPT-1的影响

目的:研究8周有氧运动对高脂饮食小鼠血脂及骨骼肌中脂质代谢相关因子的影响,探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)与运动改善脂质代谢的关系。方法:雄性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常饮食安静(NC)及运动组(NE)、高脂饮食安静(HC)及运动组(HE)。其中,HC与HE组均喂以高脂饲料;NE和HE组进行为期8周的无负重游泳训练。实验结束后,采用酶法和比色法分别检测血脂和游离脂肪酸(FFA)水平,并采用NorthernBlot、WesternBlot检测各组小鼠骨骼肌中PPARα、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT-1)基因及蛋白表达。结果:高脂饮食条件下,运动组血清TG、TC、LDL及FFA比安静组显著降低,HDL显著升高;并且运动组骨骼肌PPARα及CPT-1的mRNA和蛋白表达均较安静组有所提高,尤其HE组表达量较HC组显著提高。结论:运动可有效促进脂肪酸的利用而改善血清脂质水平,并且可使骨骼肌PPARα、CPT-1表达量在转录和翻译水平上均有所提高,提示PPARα作为一个重要的脂质调节因子,在运动改善血脂中发挥着积极的作用。

耐力训练对AMPKα2基因敲除小鼠骨骼肌CPT-1表达的影响

目的:研究耐力训练对AMPKα2基因敲除小鼠骨骼肌CPT-1mRNA和蛋白表达的影响,探讨耐力训练中AMPKα2调节脂肪酸代谢的可能途径。研究方法:两月龄C57BL/6J野生(WT)和AMPKα2基因敲除(KO)小鼠各20只,各自随机分为安静对照组,耐力训练组,每组10只。两训练组进行4周,每天1 h,速度为12 m/min的跑台训练,测定股四头肌CPT-1 mRNA和蛋白表达以及血清FFA、TG水平。结果:4周耐力训练之后,WT鼠和KO鼠骨骼肌CPT-1 mRNA和蛋白表达,与安静对照组相比均显著升高,且两训练组之间无显著差异。结论:耐力训练中AMPKα2不是CPT-1的唯一上游调节因子,可能有其他途径参与CPT-1表达的调节。

电针对肥胖大鼠骨骼肌AMPK/ACC/CPT-1信号通路的影响

目的观察电针对肥胖大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路的影响,探讨电针治疗肥胖的机制。方法30只刚断乳(3周龄)的SPF级SD雄性大鼠,随机挑选6只普通饲料喂养并设为正常组,另24只高脂饲料喂养造模12周,将造模成功的12只随机分为模型组和电针组。测定各组大鼠体质量、脂肪质量、血脂等相关指标,qPCR检测各组大鼠骨骼肌中AMPKα1、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT-1)的mRNA表达变化,Western blot法检测骨骼肌AMPK、ACC磷酸化水平和CPT-1蛋白水平。结果与正常组比较,模型组体质量显著升高(P<0.01),显示肥胖大鼠造模成功。与模型组相比,电针组大鼠的体质量、内脏脂肪质量和血脂均显著降低(P<0.05~0.01);骨骼肌AMPKα1、ACC、CPT-1 mRNA的表达量显著上升(P<0.05~0.01)。电针使AMPK磷酸化水平显著提高(P<0.01),激活AMPK的活性;ACC磷酸化水平显著提高,抑制ACC活性;同时提高CPT-1蛋白水平。结论电针可以降低肥胖大鼠的体质量并改善其脂肪代谢的紊乱,其机制可能通过调节骨骼肌组织AMPK/ACC/CPT-1信号通路实现的。

补充L-肉碱结合运动对肥胖小鼠骨骼肌FAT/CD36及CPT-1的影响

目的:研究补充L-肉碱结合运动对营养型肥胖小鼠骨骼肌FAT/CD36以及CPT-1的影响。方法:49只C57BL/6雄性小鼠,随机选取9只喂养普通饲料(C组),另外40只建立肥胖模型(H组)。建模成功后将小鼠随机分为肥胖安静组(H)、肥胖肉碱组(HL)、肥胖运动组(HE)、肥胖肉碱结合运动组(HLE)。HE、HLE组进行为期5周的游泳训练,5天/周,1小时/天。HL、HLE组小鼠每天训练前1小时灌胃L-肉碱。实验期间监测小鼠体重变化,实验结束后取腓肠肌检测相关指标。结果:1HE、HLE组体重低于H组,且HLE组体重低于HL组;2HE、HL组和HLE组的FFA含量显著低于H组,而HE、HLE组的FFA含量也明显低于HL组;3HL、HE组和HLE组的CPT-1酶含量显著低于H组;4HE组的FAT/CD36表达量高于H组,HLE组则低于H组;5CPT-1酶含量和FAT/CD36表达量与体重均呈中度正相关。以上差异均具有统计学意义,P<0.05或P<0.01。结论:1与补充L-肉碱相比,运动和运动结合L-肉碱有更显著的控体重效果和促进脂肪酸氧化的作用。2单纯运动,补充L-肉碱以及运动结合L-肉碱均可降低骨骼肌内CPT-1酶的含量。3运动结合左旋肉碱可交互促进降低FAT/CD36的表达量。

贵州地方山羊CPT-1A基因在不同品种和组织中的表达差异

为揭示贵州地方山羊及南江黄羊CPT-1A mRNA水平的品种和组织差异,以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊以及南江黄羊为研究对象,采用实时荧光定量方法对肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中CPT-1A基因的mRNA表达水平进行检测。结果表明,从器官组织分布模式来看,黔北麻羊和南江黄羊CPT-1A mRNA水平都以肾中最高(0.0019和0.0019),贵州黑山羊以肝中最高(0.0074),贵州白山羊以背最长肌中最高(0.0011),黔东南小香羊各组织中无差异;从品种差异来看,心和肾中CPT-1A mRNA水平以南江黄羊最高(0.0018和0.0019),肝和肺中以贵州黑山羊最高(0.0074和0.0027),皮下脂肪中以黔东南小香羊(0.0007)最高,背最长肌和半膜肌中各品种无差异。结果提示,贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊以及南江黄羊CPT-1A基因的器官组织分布模式存在差异,肝、肾、心、肺和皮下脂肪中CPT-1A mRNA的表达存在品种间差异,此结果为研究该基因与贵州地方山羊脂肪沉积及肉质性状的关系提供了理论基础。

油橄榄叶提取物对非酒精性脂肪肝小鼠脂肪酸β氧化限速酶CPT-1表达的影响

探讨油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)干预非酒精性脂肪肝(NAFLD)的分子机制.将50只健康小鼠分正常组、模型组、OLE低剂量组、OLE中剂量组和OLE高剂量组.用高脂饮食9周建立小鼠NAFLD模型.造模第2周起用OLE(250mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg)进行灌胃治疗8周.利用定量PCR和免疫组化法检测肝组织脂肪酸β氧化限速酶肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)的表达水平.结果显示,与正常组相比,模型组小鼠肝组织CPT-1表达水平极显著降低(P<0.01).与模型组比较,OLE干预后,肝脏CPT-1表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01).OLE可通过提高CPT-1表达水平来调控肝细胞脂肪酸β氧化发挥作用,抑制NAFLD损伤的进展.

CPT-11或草酸铂联合5-氟脲嘧啶/亚叶酸钙治疗晚期结直肠癌的临床研究

目的比较CPT-11联合5-氟脲嘧啶/亚叶酸钙(FOLFIRI方案)和草酸铂联合5-氟脲嘧啶/亚叶酸钙(FOLFOX4方案)对晚期结直肠癌患者的疗效和安全性。方法经细胞学或病理学证实、并有客观病灶的晚期大肠癌患者随机分为两组,24例应用FOLFIRI方案治疗,23例应用FOLFOX4方案治疗。以上两种方案均2周重复,每4周为一完整周期,每个受试者均接受两个及以上周期的治疗。对两组近期疗效和不良反应进行对比观察。结果FOLFIRI组22例可评价疗效,有效率为40.9%;FOLFOX4组23例可评价疗效,有效率为47.8%;两组之间比较无统计学意义(p>0.05)。中位疾病进展时间:FOLFIRI组7.2个月,FOL-FOX4组8.9个月(p>0.05),FOLFIRI组的腹泻发生率(45.8%)比FOLFOX4组(17.4%)明显(p<0.05),FOLFOX4组的神经毒性发生率(52.2%)明显高于FOLFIRI组(8.3%)(p<0.01),其它副作用包括白细胞减少、贫血、血小板减少、肝功能损害、恶心呕吐、静脉炎等,两组的不良反应均以Ⅰ、Ⅱ度为主,两组之间差异无统计学意义。结论对于晚期结直肠癌,FOLFOX4和FOLFIRI方案获得相似的近期疗效,两种方案均有较好的耐受性。

运动对大鼠肝脏FFA、PPARα和CPT-1的影响

目的:探究不同方式运动对大鼠肝脏PPARα、CPT-1和FFA的影响。方法:将32只健康雄性SD大鼠随机分为4组:安静组(NC)、有氧运动组(NE)、一次性力竭运动组(NL)和有氧结合力竭运动组(NF)。进行6周的运动锻炼,每周训练6天,每天1h。采取蛋白质免疫印迹法(Western Blot技术)、酶联免疫吸附测定法(ELISA试剂盒)和比色法(FFA试剂盒和分光光度计)分别检测PPARα蛋白表达量、CPT-1活性和FFA含量的变化。结果:(1)与NC组相比,NE组大鼠肝脏FFA含量显著降低(P<0.05),NL组大鼠肝脏中FFA的含量显著升高(P<0.01),NF组大鼠肝脏中FFA的含量明显升高(P<0.05)。(2)与NC组相比,NE组大鼠肝脏中PPARα的蛋白表达量显著增加(P<0.01),NL组大鼠肝脏中PPARα的蛋白表达量显著降低(P<0.05),NF组大鼠肝脏中PPARα表达量明显降低(P<0.05)(3)与NC组相比,NE组大鼠肝脏中CPT-1活性显著增加(P<0.05),NL组大鼠肝脏中CPT-1活性显著降低(P<0.01),NF组大鼠肝脏中的CPT-1活性显著降低(P<0.01)。结论:(1)有氧运动可上调大鼠肝脏中PPARα的蛋白表达量,促使CPT-1活性增加,加速脂肪的水解,促进肝脏FFA的分解。(2)一次性力竭运动可导致大鼠肝脏细胞发生损伤,肝脏中PPARα表达量降低,引起肝脏能量代谢障碍,从而使CPT-1活性降低,下调脂肪酸氧化供能水平,FFA含量升高。

Toll样受体4基因敲除对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌AMPK-ACC-CPT-1B的影响

目的:探究Toll样受体4(TLR4)基因敲除对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌AMPK-ACC-CPT-1B的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠和TLR4基因敲除小鼠随机分为正常对照组(NC)、肥胖组(OB)、TLR4基因敲除组(TK)和TLR4基因敲除肥胖组(TO),分别给予普通饮食或高脂饮食。16周后检测各组小鼠空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、游离脂肪酸水平(FFA)及体质量。取小鼠左侧腓肠肌组织,Western blot检测TLR4、髓样分化因子(MyD88)、磷酸化核因子-κB p65(p-NF-κB p65)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、肉碱脂酰转移酶(CPT-1B)蛋白表达。取小鼠右侧腓肠肌组织,石蜡包埋,HE染色观察肌纤维形态,免疫组化染色观察各组p-AMPKα、p-ACC、CPT-1B表达。结果:与NC组相比,OB组TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、ACC蛋白表达上升,AMPKα、p-AMPKα、p-ACC、CPT-1B蛋白表达降低;与OB组相比,TO组TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、ACC蛋白表达下降,AMPKα、p-AMPKα、p-ACC、CPT-1B蛋白表达上升,与TK组相比,TO组小鼠骨骼肌组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、ACC表达上升,AMPKα、p-AMPKα、p-ACC、CPT-1B蛋白表达下降。AMPKα活性与FPG、FFA、TG、TC、LDL-C呈负相关,与HDL-C呈正相关。结论:敲除TLR4基因可减轻肥胖小鼠体质量,改善血脂代谢紊乱,提高AMPKα、p-AMPKα、p-ACC、CPT-1B蛋白表达,降低MyD88、p-NF-κBp65、ACC蛋白表达。

CPT-1基因在湘西黄牛不同组织中的发育性表达研究

[目的]为了比较分析肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT-1)基因在湘西黄牛不同组织中的发育性表达规律,以探讨CPT-1基因与肉牛脂肪代谢的关系。[方法]试验选取湖南德农牧业集团有限公司国家级保种场不同月龄(6月龄、18月龄和30月龄)湘西黄牛各4头,利用实时荧光定量PCR检测肝脏、背最长肌、皮下和腹腔脂肪组织CPT-1基因的相对表达量。[结果]结果表明,(1)CPT-1基因在湘西黄牛肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪的4个部位中的表达量随月龄增加依次极显著降低(P<0.01)。(2)在6月龄、30月龄时,CPT-1基因在湘西黄牛肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪的4个部位中的表达量无显著差异(P>0.05)。(3)在18月龄时,CPT-1基因在皮下脂肪中的表达量显著高于背最长肌(P<0.05),肝脏与腹腔脂肪中CPT-1基因的表达量与其他3个组织中CPT-1基因的表达量无显著差异(P>0.05)。[结论]说明CPT-1基因对湘西黄牛机体脂肪代谢具有重要作用,CPT-1基因在湘西黄牛主要脂肪代谢部位(肝脏、背最长肌、皮下脂肪和腹腔脂肪)均有表达,且CPT-1基因的表达量随月龄与部位的不同,存在月龄间差异性和组织间相似性与差异性。

饥饿—复投喂对虎龙斑FAS及CPT-1A表达的影响

目的:探究饥饿-复投喂对虎龙斑脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FAS)及肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(Carnitine Palmitoyltransferase 1A,CPT-1A)表达的影响,为进一步研究饥饿对虎龙斑脂肪代谢调控的分子机理奠定基础.方法:设计0d,10d,20d,30d,40d的饥饿区间,饥饿10d后复投喂10d,每隔10d取样,测定其体长、体重,并取肝组织.首先提取肝组织的总酶,用酶联免疫法(ELISA)测定不同饥饿程度和复投喂对FAS和CPT-1A含量的影响;其次通过异硫氰酸胍-酚法(Trizol法)提取肝组织总RNA,经逆转录得cDNA,用实时荧光定量PCR技术检测不同饥饿程度和复投喂对FAS和CPT-1A基因表达的影响.结果:(1)连续饥饿可使虎龙斑肝脏中的FAS含量显著下降(P<0.05),复投喂后肝脏中FAS的含量略为升高(P>0.05),但仍显著低于对照组的水平(P<0.05);饥饿组的FAS基因表达量均显著低于对照组(P<0.05),饥饿10d、20d后复投喂,FAS基因表达量显著上升(P<0.05).(2)连续饥饿使虎龙斑肝脏中的CPT-1A含量及CPT-1A基因的表达量显著上升(P<0.05),而复投喂则降低了CPT-1A含量和CPT-1A基因的表达水平(P<0.05).结论:饥饿可明显降低虎龙斑肝脏中FAS的表达,减少体脂的沉积;相反,饥饿可显著提高虎龙斑肝脏中CPT-1A的表达,用以分解肝脏脂肪,产生能量以维持正常的基础代谢活动.

耐力训练对高脂膳食大鼠骨骼肌线粒体脂肪氧化及PGC-1α基因表达的影响

目的:研究耐力训练对高脂膳食大鼠骨骼肌线粒体脂肪氧化相关酶活性及基因表达的影响。方法:40只SD大鼠,随机分成普通膳食对照组(C)与耐力训练组(E);高脂膳食对照组(H)与耐力训练组(R),每组10只。两耐力训练组大鼠进行8周跑台训练。结果:耐力训练使高脂膳食大鼠体重(P=0.000)I、R指数(P=0.021)显著降低并维持在正常水平,使骨骼肌线粒体β-HAD(P=0.011)、CS活性(P=0.047)、CPT-1βmRNA(P=0.037)及PGC-1α蛋白表达水平(P=0.007)显著增高。结论:耐力训练通过适度调节参与线粒体脂肪氧化关键酶β-HAD、CS活性及CPT-1β、PGC-1α基因表达,优化高脂膳食机体在线粒体水平的脂肪氧化能力。

UGT1A1基因多态性对进展期结直肠癌患者CPT－11治疗的疗效及毒副反应的影响

目的探讨尿苷二磷酸葡萄醛酸转移酶1A1（UGT1A1）基因多态性对进展期结直肠癌（CRC）患者伊立替康（CPT—11）治疗的疗效及毒副反应的影响。方法选取2015年10月至2017年1月诊治的进展期CRC患者149例为观察对象，采集各受试者外周静脉血并提取基因组DNA，采用聚合酶链式反应（PCR）扩增UGT1A1基因，测序分析UGT1A1基因型，并分析不同基因型与CPT－11治疗疗效及毒副反应之间的关系。结果UGT1A1＊28野生型纯合子TA6／6、突变型杂合子TA6／7、突变型纯合子TA7／7基因型比例分别为7114％、27．52％、1．34％；UGT1A1＊6位点检测到野生型纯合子GG和突变型杂合子GA两种基因型，基因型比例分别为81．21％、18．79％，未检测到突变型纯合予AA。UGT1A1＊28突变型患者3-4级腹泻和3-4级中性粒细胞减少发生率分别为30．23％和27．91％，均明显高于野生型患者（P〈0．05），UGT1A1＊6突变型患者3～4级中性粒细胞减少发生率为28．57％，明显高于野生型患者（P〈005）。Logistic回归分析显示，UGT1A1＊28基因突变是3-4级腹泻、3～4级中性粒细胞减少发生的危险因素（OR=2．18，95％CI为1．99—239；OR=318，95％CI为2．04—4．96）；UGT1A1＊6突变是3～4级中性粒细胞减少发生的危险因素（OR=1．68，95％CI为1.03—2．74）。UUGT1A1＊28和UUGT1A1＊6各基因型患者疗效和中位肿瘤无进展生存时间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论UGT1A1＊28／＊6位点多态性可有效预测进展期CRC患者CPT—11所致3级以上腹泻和3级以上中性粒细胞减少的发生率，而与CPT－11治疗疗效无关。

耐力训练对糖尿病糖脂代谢相关因子基因表达的影响

目的：探讨糖尿病（DM）对长期耐力训练产生运动适应的分子机制。方法2型糖尿病（T2DM）大鼠12只，随机分为安静组（ GKC）、耐力训练组（ GKE）。跑台训练6 w，末次训练后24～48 h内断颈处死，取腓肠肌，荧光定量PCR检测GLUT4、AMPKα2、PDK4和CPT-1β的基因转录。结果 GKE组AMPKα2 mRNA水平非常显著高于GKC组（P＜0.01），GLUT4 mRNA转录没有显著性差异（P＞0.05），PDK4 mRNA表达显著性降低（P＜0.05），CPT-1βmRNA转录没有显著性差异（P＞0.05）。结论（1）6 w耐力运动干预可能通过能量敏感性通路AMPK-GLUT4葡萄糖转运机制极大地促进了GK大鼠骨骼肌糖摄取能力，在一定程度上逆转了AMPK磷酸化受损状况，对改善DM进程有一定益处。（2）耐力训练显著降低了PDK4水平，对促进DM大鼠有氧呼吸能力有利，但对CPT-1β水平影响不显著，可能此时DM大鼠仍然以葡萄糖氧化为主供能。

高住高练对肥胖大鼠腓肠肌脂肪酸氧化的影响

目的：从肉碱棕榈酰转移酶I（CPT-1）、脂肪酸转位酶（FAT/CD36）以及脂肪与腓肠肌组织中脂蛋白酯酶（LPL）的比值等角度,研究高住高练对肥胖大鼠脂肪酸氧化的影响。方法：130只高脂饮食肥胖大鼠,经过适应性训练分成13组,0周组,低氧安静1、2、3、4周组,低住低练1、2、3、4周组,高住高练1、2、3、4周组。低氧安静组大鼠每天在低氧环境生活不训练;低住低练组在常氧环境生活训练,高住高练组在低氧环境生活训练;低氧环境氧浓度为13.6%,约相当于模拟海拔3500 m高度。水平动物跑台进行耐力训练,训练强度常氧25~26 m/min,低氧20~21 m/min,1 h/d,6 d/周,分别持续1、2、3、4周。实时荧光定量PCR测试腓肠肌CPT-1 mRNA、FAT/CD36 mRNA,ELISA测试脂肪LPL和腓肠肌LPL,计算两者的比值。结果：（1）高住高练组大鼠腓肠肌CPT-1 mRNA水平第1、2、3、4周与0周组比较,均无显著性差异。高住高练2周显著高于低氧安静组（P〈0.05）,高住高练4周显著高于低氧安静（P〈0.01）和低住低练（P〈0.05）。（2）高住高练组大鼠腓肠肌FAT/CD36 mRNA水平与0周组比较,第1、4周高度显著性升高（P〈0.01）,第2、3周显著性升高（P〈0.05）。高住高练3、4周显著高于低氧安静组（P〈0.05）,高住高练组第1、4周显著高于低住低练（P〈0.05）。（3）高住高练组大鼠脂肪LPL与腓肠肌LPL比值与0周组比较均无显著性差异。高住高练4周显著低于低住低练（P〈0.05）。结论：模拟海拔3500米高住高练4周较低住低练促进肥胖大鼠腓肠肌脂肪酸氧化。

低氧和低氧训练对AMPKα2转基因小鼠骨骼肌CPT-1表达的影响

目的:研究低氧和低氧训练对AMPKα2转基因小鼠骨骼肌CPT-1的mRNA和蛋白表达水平的影响,进而探讨低氧和低氧训练中AMPKα2调节脂肪酸氧化过程的可能机制。方法:健康两月龄C57BL/6J品系的野生小鼠和AMPKα2转基因小鼠,分别分为常氧安静组、低氧安静组和低氧训练组,共六组,每组10只。低氧组小鼠持续暴露于低氧房中(模拟海拔4000m高度,氧浓度12.3%),其中低氧训练组小鼠还要在此低氧房中进行跑台运动,12m/min,每天1h,持续2周。测定股四头肌AMPKα2蛋白水平以及CPT-1的mRNA和蛋白表达情况。结果:2周的低氧和低氧训练对AMPKα2的蛋白表达没有显著的影响;低氧和低氧训练均显著提高了CPT-1的mRNA表达(P<0.05);低氧对野生和AMPKα2转基因小鼠CPT-1的作用无差异;低氧训练组中,AMPKα2转基因小鼠的CPT-1 mRNA表达显著高于野生小鼠(P<0.05),与低氧安静组相比,低氧训练使转基因小鼠的CPT-1蛋白表达产生了显著增加(P<0.05),但是野生小鼠并无显著变化。结论:AMPKα2参与调节了低氧训练中骨骼肌CPT-1的表达水平,促进脂肪酸的氧化过程。

葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠PGC-1α和脂肪酸β氧化限速酶CPT-1表达的影响

目的探讨葱白提取物治疗高脂饮食诱导的非酒精性肝病大鼠可能的分子机制。方法采用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型,并应用小干扰RNA技术抑制转染组大鼠辅激活因子(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator`1α,PGC-1α)的表达,将48只Wistar大鼠随机分为6组,观察各组大鼠的一般情况,计算肝指数,油红染色法观察各组大鼠肝脏组织的病理形态学变化,并运用RT-PCR法和Western-blot法分别检测PGC-1α和脂肪酸β氧化限速酶肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)的表达水平。结果各组大鼠体重无明显差异,模型组精神较差,偶见腹泻便溏情况,活动度明显不及葱白治疗组。与正常对照组相比,模型组大鼠肝指数明显升高(P<0.05);与模型组比较,葱白组肝指数下降(P<0.05),转染葱白组与模型组肝指数差异不明显。从油红染色可见模型组大鼠肝细胞内较多橘红色脂滴聚集,细胞肿胀明细;葱白组胞内脂滴明显减少;转染葱白组胞内脂滴数量介于模型组和葱白治疗组之间。PGC-1α和CPT-1的表达情况:与空转组比,转染组PGC-1α的表达水平降低(P<0.05),CPT-1的表达水平也下降(P<0.05)。和正常组比,模型组PGC-1α与CPT-1的表达水平均降低(P<0.05);和模型组比,葱白组PGC-1α与CPT-1的表达水平均增加(P<0.05),转染葱白组两者的表达则与模型组无明显差异(P>0.05)。结论辛温通阳中药葱白提取物治疗NAFLD依赖PGC-1α的转录活化水平,从而调控肝细胞脂肪酸β氧化发挥作用。

GLP-1对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中FABP-4、CPT-1A水平的影响

目的探讨胰高糖素肽-1(GLP-1)对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中游离脂肪酸结合蛋白4(FABP-4)、肉碱脂酰转移酶1A(CPT-1A)表达水平的影响。方法采用传统"鸡尾酒"法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,并在分化过程中加入1×10-8mol/L GLP-1进行干预。在诱导分化的第6、8天,用油红O染色检测细胞内脂质聚集,RT-PCR及Western blotting法检测FABP-4、CPT-1A的mRNA及蛋白水平。结果①在诱导分化第6天,大约40%的细胞出现脂滴聚集,第8天时大约80%的细胞已分化成熟;②油红O染色结果显示,与对照组相比,GLP-1组脂质总量在分化第6天略有增加,在分化第8天轻度下降(P>0.05);③RT-PCR结果显示,GLP-1组FABP-4的mRNA水平在分化第6、8天都明显增加;CPT1-A的mRNA水平在分化第8天增加明显(P<0.05);④Western blotting结果显示,GLP-1显著增加了FABP-4的蛋白表达(P<0.05)。对照组CPT-1A的蛋白水平在分化第6、8天无显著变化;而GLP-1组CPT-1A蛋白水平显著增加,尤其在分化第8天,与对照组相比增加了3.57倍(P<0.01)。结论在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,GLP-1显著促进了FABP-4和CPT-1A的mRNA及蛋白水平,提示GLP-1同时促进脂肪细胞对游离脂肪酸的吸收及分解,能有效改善游离脂肪酸介导的胰岛素抵抗。