CRE-decoy ODN对SK-N-SH细胞中cAMP含量的影响

目的本实验以环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB)为靶点,观察CREB转录因子decoy(CRE-transcription factor decoy oligodeoxynucleotide,CRE-decoyODN)对慢性吗啡作用和纳络酮催促戒断的SK-N-SH细胞cAMP含量,为在分子水平上寻找阿片类依赖的干预靶点提供实验依据。方法放射免疫分析法(RIA)检测细胞cAMP含量。结果单纯吗啡组较生理盐水对照组细胞cAMP水平显著升高(P<0.05),纳络酮戒断组较单纯吗啡组轻度降低,与对照组比较差异显著(P<0.05);单纯CRE-decoy ODN组与生理盐水对照组差异无显著性,(P>0.05),但能明显抑制吗啡及纳络酮组的cAMP水平(P<0.05),mismatch ODN、nonsense ODN和DOTAP对吗啡及纳络酮引起的cAMP水平改变无明显影响(P>0.05)。结论CRE-decoy ODN可抑制慢性吗啡作用及纳络酮催促戒断引起SK-N-SH细胞cAMP的升高。

基于光虹膜技术构建数智化ODN网络研究

为了实现接入网哑资源数智化管理以及光路故障拓扑可视,完成故障精准定界定位,提高资源管理准确率,采用光虹膜技术对传统ODN光分配网进行数智化改造。通过超高精度的加工技术,在光纤中雕刻出光虹膜,使得传统ODN网络能够拥有唯一性标签,从而实现ODN网络的数智化转型。将ODN光分配网向数智化转型能有效提高巡检效率,减少用户弱光,从而提高用户满意度。数智化ODN网络速度快、质量高,让优质网络更快更好地接入用户。

基于光虹膜技术构建数智化ODN网络研究

为了实现接入网哑资源数智化管理以及光路故障拓扑可视,完成故障精准定界定位,提高资源管理准确率,采用光虹膜技术对传统ODN光分配网进行数智化改造。通过超高精度的加工技术,在光纤中雕刻出光虹膜,使得传统ODN网络能够拥有唯一性标签,从而实现ODN网络的数智化转型。将ODN光分配网向数智化转型能有效提高巡检效率,减少用户弱光,从而提高用户满意度。数智化ODN网络速度快、质量高,让优质网络更快更好地接入用户。

基于ODN的有线电视光纤入户方案

随着国家“三网融合”的全面推进,广电运营商要应对通信运营商交互式网络电视(Internet Protocol Television,IPTV)的激烈市场竞争,以及自身数字电视业务的高清和4K发展需要,适合全网际互连协议(Internet Protocol,IP)业务的光纤入户接入网一定是最优选择。对此,介绍广电网络主流的3种光纤入户方案,结合葛洲坝城区接入网现状,给出两种改造方案。

基于下一代ODN网络技术方案的研究

ODN网络作为光接入网的关键基础设施面临着光纤连接复杂、装机难度大、网络质量难保证、哑资源管理困难等顽疾。下一代ODN网络解决方案主要借助于预连接技术和数智化技术,在庞大的存量网络基础上,分场景、分类别、分时序的合理发展和演进,可实现ODN网络资源数字化、管理可视化和运维智能化,有效解决其哑资源属性带来的诸多难题,从而有效提升光接入网覆盖能力和承载质量,完善我国信息基础设施,支撑“数字中国”建设和发展。

互联通信背景下智能ODN光纤识别技术策略研究

智能ODN(Optical Distribution Network,光分配网)光纤识别技术作为通信基础设施的重要组成部分,其研究和应用受到了广泛的关注。智能ODN的核心是打破传统ODN的“哑资源”特性,改变传统的手工运维的低效率模式。本文介绍智能ODN光纤识别技术,并用波动理论来分析计算单模光纤的插入损耗。从两个方面分析影响光纤插入损耗的因素。设计软硬件对光配线架系统中光纤插入损耗进行监测,对插入损耗超标的光纤利用指示灯的显示状态标识出来,并且可将结果上传到终端PC,最后提出几种降低光纤插入损耗的具体办法并给出开发EPON光纤在线监测系统建议供参考。

不等比分光、预连接和级联技术在新型ODN网络中的应用探讨

ODN(Optical Distribution Network,光分配网)网络是FTTH(Fiber To The Home,光纤到户)建设中最重要的一环,对网络的组网方式、成本效益具有重要的影响。新型ODN具备高性能、高可靠性以及即插即用、易安装等特性,能够有效保证运营商的全光网长期支撑业务演进。为解决传统建设方式下ODN资源老化、光衰变大、ODN扩容代价大、农村覆盖困难等痛点,本文针对新型ODN的特性,对不等比分光、预连接和级联技术应用进行分析研究,以农村光网建设应用场景为例提供应用参考。

CRE-decoy ODN对慢性吗啡作用的SK-N-SH细胞中相关信号分子的影响

目的:以环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(Cyclic-AMP response-element-binding protein,CREB)为靶点,体外合成CRE转录因子诱骗寡核苷酸(CRE-transcription factor decoy oligodeoxynucleotide,CRE-decoy ODN),观察其对慢性吗啡作用和纳络酮催促戒断的人神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH)细胞cAMP含量、磷酸化CREB-1及CREB-1表达的影响,为在分子水平上寻找阿片类依赖的干预靶点提供实验依据。方法:体外合成CRE-decoy ODN,以DOTAP(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium propane)为转移介质,将CRE-decoy ODN与慢性吗啡作用和纳络酮催促戒断的SK-N-SH细胞共同孵育,电泳迁移率改变分析(EMSA)检测CRE-decoy ODN与转录因子CREB结合的序列特异性;采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影检测CRE-decoy ODN细胞摄取;放射免疫分析法(RIA)检测细胞cAMP含量;Western blot检测CREB-1及磷酸化CREB-1表达。结果:单纯吗啡组较生理氯化钠溶液对照组细胞cAMP水平显著升高(P<0.05),单纯CRE-decoy ODN组与生理氯化钠溶液对照组无明显差异(P>0.05),但能明显抑制吗啡及纳络酮组的cAMP水平(P<0.05);单纯吗啡组与生理氯化钠溶液对照组比较,磷酸化CREB-1表达明显增高(P<0.01),吗啡+纳络酮组较单纯吗啡组轻度降低,与对照组比较仍有显著差异(P<0.01);CRE-decoyODN可抑制单纯吗啡组及吗啡+纳络酮组磷酸化CREB-1表达明显增高(P均<0.05)。结论:CRE-decoyODN可抑制慢性吗啡作用及纳络酮催促戒断引起SK-N-SH细胞cAMP和磷酸化CREB表达的升高。

智能ODN在光纤通信中的价值

随着光纤通信技术的快速发展,智能光分配网络(Optical Distribution Network,ODN)作为一种新兴技术,对于提升光纤通信网络的可靠性、性能以及用户体验具有重要价值。介绍了传统ODN和智能ODN的基本概念,探讨智能ODN在光纤通信中的关键技术,并从提高网络可靠性和弹性、优化网络资源利用和性能以及提升服务质量和用户体验3个方面阐述智能ODN的价值和应用,最后总结了智能ODN在光纤通信中的重要性和未来发展方向。

ODN规划的探索与实践

在现代通信技术高速发展的背景下,无源光网络(Passive Optical Network,PON)技术具有简单、可靠和低成本的特点。在宽带网络工程建设中,做好光分配网(Optical Distribution Network,ODN)光网络建设规划至关重要。从ODN规划的目的、光网络光纤物理网结构、ODN光网络存在的问题以及相应解决措施进行论述,以供参考。

CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用

本次研究主要探讨CpG-ODN对重离子辐射所致脾脏损伤的救治作用。实验中C57BL/6L小鼠受到5 Gy12C6+离子全身照射,在照射后急性期计算小鼠脾脏指数,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色观察脾脏组织结构变化。另外,免疫组化法检测γ-H2AX蛋白含量以判断脾脏细胞DNA发生双链断裂(Double-strand break,DSB)情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediatedd UTPnickandlabeling,TUNEL)法检测脾脏细胞凋亡水平,荧光标记法检测外周血CD19+B细胞数量。结果显示,经12C6+离子照射后CpG-ODN处理,小鼠脾脏指数提高,脾脏红髓萎缩程度减轻,白髓面积增大,其内淋巴B细胞排列密度提高,发生DSB和凋亡的细胞数量减少,外周血CD19+B细胞数量增加。这些表明CpG-ODN能减轻12C6+离子照射后脾脏损伤,其原因可能与CpG-ODN抑制细胞发生DSB和凋亡有关。

CpG ODN对鸡新城疫LaSota活疫苗的免疫增强效应

将3种不同的未甲基化CpG ODN分别与新城疫LaSota活疫苗混合后,经滴鼻和点眼免疫鸡,通过检测鸡血清中HI抗体、外周血T淋巴细胞增殖活性、诱导巨噬细胞分泌NO含量,以及刺激外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-6与IL-1βmRNA量,分析各CpG ODN对新城疫LaSota活疫苗免疫效果的影响。结果表明,经2次免疫后,含GTCGTT核心基序的CpG ODN1组,鸡血清平均HI抗体效价最高达8.2log2、淋巴细胞刺激指数达9.836、NO分泌量达35.833μmol/L,分别比疫苗单独免疫组高出2个滴度(P<0.05)、4.4(P<0.01)、27.6μmol/L(P<0.01);含GACGTT核心基序的CpG ODN2组增强作用不明显,与疫苗单独免疫组无差异;而CpG ODN3的免疫刺激活性由于受其侧翼序列的影响,作用明显减弱甚至丧失。对细胞因子的影响,CpG ODN3组IFN-γmRNA表达量稍高于CpG ODN1组,而其余细胞因子均以CpG ODN1组表达水平最高(P<0.05)。由此证明CpG ODN1能显著增强鸡对新城疫LaSota活疫苗的体液和细胞免疫反应,可以作为高效的免疫增强剂。

CpG ODN对哮喘小鼠气道炎症及GATA-3的影响

目的观察CpGODN对支气管哮喘小鼠气道炎症及肺组织GATA-3mRNA表达的影响。方法将40只雌性BALB/C小鼠随机分为4组(每组10只):生理盐水对照组(A组);哮喘组(B组);CpGODN干预组(C组);GpCODN对照组(D组)。以鸡卵白蛋白(OVA)致敏小鼠建立哮喘模型,C组和D组在OVA激发前分别予CpGODN及对照GpCODN腹腔注射。在末次激发后24h收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液行白细胞计数及EOS分类计数,ELISA法检测各组小鼠BALF中IL-4、IL-5及IFN-γ水平,肺组织HE染色观察其病理变化以及用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织中GATA-3mRNA的表达。结果各组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比、IL-4、IL-5和IFN-γ浓度分别为:A组为(7.46±1.77)×105个/mL、(0.75±0.48)%、(26.9±4.6)pg/mL、(41.7±5.1)pg/mL和(110.4±12.1)pg/mL,B组为(21.68±4.40)×105个/mL、(9.50±1.13)%、(267.6±24.5)pg/mL、(218.2±15.2)pg/mL和(47.9±9.6)pg/mL,C组为(8.98±2.23)×105个/mL、(2.90±0.86)%、(85.9±8.1)pg/mL、(63.0±9.6)pg/mL和(221.0±29.9)pg/mL,D组为(20.41±3.47)×105个/mL、(9.60±1.30)%、(260.7±15.7)pg/mL、(205.1±15.8)pg/mL和(52.2±10.7)pg/mL。B组与A组比较差异有显著性(P<0.01),C组与B组比较差异有显著性(P<0.01),D组与B组比较差异无显著性(P>0.05)。C组小鼠肺组织GATA-3mRNA的表达较B组明显减低,差异有显著性(P<0.01),D组与B组比较差异无显著性(P>0.05)。结论CpGODN可以抑制哮喘小鼠Th2型细胞因子生成,抑制肺部GATA-3mRNA的表达,减轻哮喘气道炎症。

新型CpG ODN增强乙肝疫苗诱导IgG2a类抗体产生的实验研究

目的寻找能增强乙肝疫苗刺激IgG2a类抗体产生,使机体处于Th1样免疫环境的新型乙肝疫苗佐剂。方法选用自行设计的A、B、C型CpGODN,并以发表的A、B型CpGODN作为阳性对照,与重组乙肝疫苗混合后于第0、4周免疫BALB/c小鼠,用ELISA法检测免疫小鼠血清中HBsAb水平及种类。结果各型CpGODN都能增强乙肝疫苗刺激HBsAb的产生水平,CpGODN+乙肝疫苗免疫的小鼠血清中HBsAb类型为IgG2a>>IgG1,而单独应用商品化重组乙型肝炎疫苗的小鼠血清中HBsAb类型为IgG1>>IgG2a。结论各型CpGODN对重组乙型肝炎疫苗[含Al(OH)3佐剂]均具有增效作用,而且可以诱导机体产生倾向于Th1途径的免疫应答反应。

诃子抗CPG ODN组分的分离及活性评价

目的:从诃子中分离制备具有拮抗CPG ODN作用的活性组分。方法:应用水提、离子色谱技术等方法,从诃子中分离制备具有拮抗CPG ODN活性的组分;并应用生物传感器技术,对所得到的组分进行与CPG ODN结合活性的筛选;观察其对CPG ODN刺激的小鼠RAW 264.7细胞释放炎症介质的抑制作用。结果:应用生物传感器技术筛选出与CPGODN结合活性最高的诃子作为研究对象,应用离子色谱技术从诃子中分离出3组分,其中有3个组分均具有一定的与Lipid A的结合活性,以第3组分与Lipid A的结合活性最强;并对CPG ODN刺激的小鼠RAW 264.7细胞释放TNF-α具有显著的抑制作用;结论:从诃子中分离出的第3组分具有显著的拮抗CPG ODN活性。

CpG ODN对Treg细胞及Th17细胞分化的影响

目的研究免疫佐剂CpG ODN对小鼠脾细胞中Treg细胞、Th17细胞分化的影响,为进一步的临床免疫治疗应用奠定基础。方法体外分离小鼠脾细胞后,加入抗CD3单抗及抗CD28单抗培养,并相应加入诱导Treg细胞分化的细胞因子TGF-β、IL-2或诱导Th17细胞分化的细胞因子TGF-β、IL-6、IL-23,培养24h后加入CpG1982、CpG1826继续培养48h,培养结束后收集细胞进行细胞内染色流式细胞术检测Treg/Th17细胞,利用实时定量PCR检测Foxp3、RORγt、IL-10、IL-17mRNA的水平,Western blot检测Foxp3、RORγt蛋白表达,ELISA检测脾细胞培养上清IL-10、IL-17水平。结果在细胞因子TGF-β、IL-2的诱导下,CD4+Foxp3+Treg细胞数量明显增多,核转录因子Foxp3 mRNA和蛋白水平均增高,且细胞培养上清中IL-10的水平也升高,在细胞因子诱导的同时加入CpG1826培养后CD4+Foxp3+Treg细胞数量明显减少,Foxp3水平降低,培养上清中IL-10的水平降低,差异具有统计学意义(均P<0.05);单独加入CpG1826以及在培养液中加入细胞因子TGF-β、IL-6、IL-23后,Th17细胞数量均明显增加,核转录因子RORγt水平升高,细胞培养上清中IL-17水平增加,与对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05),CpG1826联合细胞因子组则对Th17细胞分化具有更加明显的刺激效应(P<0.05)。结论免疫佐剂CpG1826具有抑制小鼠脾细胞中Treg细胞分化、促进Th17细胞分化的作用,从而发挥对Treg/Th17系统的调节功能。

CpG ODN增强乙型肝炎表面抗原免疫小鼠的抗体产生

目的 :探讨合成含CpG基序的寡核苷酸 (CpGODN)对重组乙型肝炎表面抗原 (rHBsAg)及乙型肝炎疫苗增强小鼠特异性抗体产生的效应。方法 :采用非纯系 (Km)及纯系 (Balb c)小鼠作为免疫对象 ,经后腿胫骨前肌免疫 2次 ,ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗体 (抗 HBs)效价。结果 :加CpGODN组 ,其抗 HBs效价均较单独注射rHBsAg和疫苗组明显增高 ,持续时间长 ,且纯系鼠的抗体效价明显高于非纯系鼠。结论 :CpGODN对小鼠抗 HBs产生具有增强作用 ,且与疫苗中的铝佐剂有协同效应。

CpG-N ODN对CpG-S ODN诱导hPBMC释放TNF-α的抑制作用

目的明确抑制性CpG ODN 208(CpG-N ODN)对刺激性CpG ODN 1826(CpG-S ODN)诱导单核/巨噬细胞分泌TNF-α的影响,为通过拮抗细菌DNA达到防治脓毒症的目的提供实验依据。方法选用本室前期筛选出的对CpG-S ODN活化RAW 264.7细胞有抑制作用的CpG-N ODN,观察其对CpG-S ODN诱导hPBMC释放TNF-α的影响;应用流式细胞术观察CpG-NODN对CpG-S ODN与hPBMC表面结合和内化的影响。结果浓度比为1∶1的CpG-N ODN对刺激性CpG-S ODN诱导hPBMC分泌TNF-α具有抑制作用,并呈一定时效关系;CpG-N ODN对CpG-S ODN在hPBMC细胞表面的结合和内化具有抑制作用。结论CpG-N ODN对CpG-S ODN活化hPBMC具有抑制作用,这个作用可能与其影响hPBMC的表面结合和内化CpG-S ODN有关。

外泌体联合CpGODN免疫刺激佐剂诱导CTL抗白血病效应

为了探讨外泌体(exosomes)作为白血病治疗性疫苗的可行性,体外研究了外泌体联合CpG佐剂诱导CTL杀伤白血病细胞的作用。获取正常人外周血MNC-DC,并分为7组,其中3组分别加入K562细胞来源外泌体(Kexo)、K562细胞诱导分化树突状细胞来源外泌体(DCexo)及K562细胞冻融抗原冲击K562细胞诱导分化树突状细胞来源外泌体(FTexo)作为实验组(分别为Kexo、DCexo和FTexo);另外3组在加入Kexo、DCexo和FTexo的同时加入CpG ODN佐剂也作为实验组(Kexo+CpG、DCexo+CpG和FTexo+CpG);第7组作为空白对照组。所有7组DC再继续培养3天,然后加入同源正常人T淋巴细胞共同培养3天,诱导T淋巴细胞为效应细胞(CTL),K562细胞为靶细胞,用MTT法测CTL对K562细胞的杀伤活性。结果显示:各外泌体实验组刺激诱导的CTL的杀伤作用比对照组明显增强(p<0.05)。DCexo及FTexo诱导的CTL对K562靶细胞的杀伤作用比Kexo强(p<0.05),联合应用GPGODN佐剂可以进一步增强这种杀伤作用(p<0.05)。结论:外泌体能诱导有效的CTL对白血病靶细胞的杀伤作用,CPGODN佐剂能进一步增强这种杀伤作用,外泌体有望作为治疗性疫苗用于白血病的临床治疗。

微波消融联合CpG ODN治疗小鼠移植性结肠癌及对免疫状态的影响

目的研究微波消融联合CpGODN对小鼠移植性结肠癌的治疗作用及对免疫状态的影响。方法 Balb/c小鼠皮下接种结肠癌CT26细胞建立肿瘤模型,肿瘤分别给予瘤周注射PBS、微波消融、微波消融+瘤周注射CpGODN和瘤周注射CpGODN四种处理。定期测量肿瘤大小,利用流式细胞仪检测小鼠外周血中CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+细胞的比例;采用ELISA检测小鼠外周血中IL-2、IL-12和IFN-γ含量。给予微波消融组和微波消融联合CpGODN组治愈的小鼠再次接种CT26细胞,观察成瘤率。结果微波消融组和微波消融联合CpGODN组小鼠的肿瘤体积显著小于PBS组和CpGODN组。4组小鼠外周血中的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞比例无显著性差异,微波消融联合CpGODN组及微波消融组的CD3+CD4+T/CD3+CD8+T细胞比值分别为1.58±0.10和1.53±0.13,与PBS组和CpGODN组相比显著升高(P均<0.05)。微波消融联合CpGODN组小鼠外周血中IL-2浓度为(64.6±7.4)pg/ml,IL-12浓度为(314.1±26.9)pg/ml,IFN-γ浓度为(61.9±7.3)pg/ml,显著高于其他3组(P均<0.05)。肿瘤再次攻击实验中微波消融联合CpGODN组成瘤率为25.0%,显著低于微波消融组的75.0%(P<0.05)。结论 CpGODN增强了微波消融治疗小鼠的免疫功能,减少了肿瘤再次攻击的成瘤率。