CRF、UCN1和CRFR1在肠易激综合征大鼠结肠中变化的研究

目的探讨CRF、UCN1、CRFR1在IBS大鼠结肠中的表达变化及其在肠易激综合征发病机制中的作用。方法选用健康雄性成年Wistar大鼠,分为对照组、急性应激组(急性束缚1h)、慢性应激组(21d不可预知轻度应激)、慢急性联合应激组(在慢性应激的基础上给予急性束缚应激)。观测不同应激状态下大鼠的体重变化、排便颗粒、糖水消耗、敞箱实验的表现,对模型进行再评价。采用RT-PCR方法检测各组大鼠结肠中CRF、UCN1、CRFR1的表达水平的变化。结果各指标显示该造模的大鼠符合IBS的内脏敏感机制,可用于IBS发病机制的研究,经RT-PCR方法检测,CRF、UCN1、CRFR1在各应激组中的表达较对照组均升高(P<0.01)。结论 CRF、UCN1、CRFR1与应激引起的功能性肠道疾病中的结肠功能改变相关。

稳定表达CRFR1的HEK293细胞株建立与功能鉴定

目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果 Western blot、RT-PCR、免疫荧光结果表明,CRFR1受体在HEK293细胞系中成功表达。cAMP释放量效实验显示,CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的EC50为(5.64±0.05)×10-10mol·L-1。结论成功建立了稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并且cAMP含量评价体系构建成功,为研究CRFR1的生物学功能及筛选CRFR1受体靶向药物奠定了基础。

β-Arrestin1介导低氧诱导的大鼠皮层CRFR1内在化

目的:探讨β-Arrestin1在低氧后诱导大鼠皮层促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRFR1)内在化的机制。方法:利用低压低氧舱模拟高原低氧,将SD大鼠分别暴露于急性低氧7 km(8.2%O2,41.02 kPa)8 h和24 h,连续慢性低氧5 km(10.8%O2,54.02 kPa)5 d和15 d,采用实时定量PCR研究低氧对大鼠大脑前额叶皮层促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)、CRFR1、G蛋白偶联受体激酶(GRK3)和β-Arrestin1基因表达的影响。结果:急性低氧7 km 8 h上调CRF、GRK3基因表达,而7 km 24 h严重低氧抑制CRFR1和GRK3基因表达;慢性连续低氧促进β-Arrestin1 mRNA增加,下调CRFR1基因表达。结论:皮层CRF分泌和基因表达的减少以及β-Arrestin1 mRNA的增加可能使CRFR1脱敏,这可能是机体对慢性连续低氧反应性降低的机制之一。

温和灸对慢性内脏痛敏大鼠CRF-CRFR1信号途径的调节作用

目的:观察温和灸对慢性内脏痛敏大鼠外周(结肠)促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体1(CRFR1)表达的影响。方法:采用乳鼠结直肠扩张(CRD)刺激建立慢性内脏痛敏大鼠模型,选取双侧天枢、上巨虚穴进行温和灸干预。以腹部撤回反射(AWR)评分作为检测大鼠内脏痛敏的行为学指标;采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法分别观察CRF、CRFR1蛋白及其基因在大鼠结肠的表达及温和灸对其的影响。结果:在不同强度的CRD刺激下,与正常组相比,模型大鼠AWR评分升高(P<0.01)。温和灸组干预后,大鼠AWR评分下降(P<0.01)。模型组大鼠CRF、CRFR1蛋白及mRNA表达均高于正常组(P<0.01),温和灸干预后,CRF、CRFR1蛋白及mRNA表达均降低(P<0.01)。假灸组与模型组比较,差异无统计学意义。结论:温和灸降低大鼠内脏痛敏与其抑制外周(结肠)CRF-CRFR1信号途径有关。

促肾上腺皮质激素释放因子受体1对阿尔茨海默病的影响（英文）

越来越多的证据表明,应激后导致的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)以及促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)与阿尔茨海默病(AD)的发病和病情发展有着密切的联系。CRFR1主要功能为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)应激后变化的重要调节因子,并且CRFR1广泛分布于与情绪和认知相关的大脑区域,鉴于此CRF/CRFR1信号通路的其他功能被提出,其中包括对AD神经病理调控。尤其新近发现CRFR1拮抗剂可阻断CRFR1下游信号对β淀粉样蛋白堆积和tau蛋白磷酸化的促进作用。因此,CRFR1拮抗剂对AD可能具有潜在的预防和治疗作用。本综述主要基于当前文献和我们的研究对CRF/CRFR1信号与AD之间的关系进行讨论。